补肾活血方对糖尿病小鼠学习记忆功能及中枢神经递质的影响

目的 观察补肾活血方对糖尿病小鼠学习记忆功能及中枢神经递质的影响.方法 40只ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、尼膜同组和中药组,每组10只.采用四氧嘧啶尾静脉注射复制糖尿病模型,造模4周后灌胃,中药组给予补肾活血方,尼膜同组给予尼膜同,其余两组给予等量蒸馏水,共8周.观察各组小鼠血糖的变化;Morris水迷宫法测定小鼠学习记忆功能;测定大脑皮质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量.结果 造模后小鼠血糖升高,与正常对照组比较有统计学差异(P<0.05或P<0.01);尼膜同组和中药组小鼠Morris潜伏期均较模型组明显缩短(P<0.01);中药组小鼠大脑皮质NE含量较模型组升高(P<0.01).结果 补肾活血方能够改善糖尿病小鼠学习记忆功能,其作用机制可能与大脑皮质NE含量变化有关.     

补肾祛痰活血方对衰老小鼠学习记忆功能的影响

目的：观察补肾祛痰活血方对自然衰老和Ｄ－半乳糖（Ｄ－ｇａ１）所致衰老模型小鼠的学习记忆功能的影响。方法：采用避暗法和Ｍｏｒｉｓ水迷官法，研究补肾祛痰活血方对自然衰老和Ｄ－ｇａｌ衰老模型小鼠被动回避反射和空间分辨学习记忆能力的影响。结果：补肾祛痰活血方能增加Ｄ－ｇａ１衰老模型小鼠避暗实验潜伏期（Ｐ＜０．０５），减少其错误次数（Ｐ＜０．０５），并缩短其Ｍｏｒｉｓ迷官四个检测组合的潜伏期，还可明显增加自然衰老小鼠Ｍｏｒｉｓ迷官的Ｐ象限时间、穿环次数和游泳时间比（Ｐ＜０．０５），并缩短其潜伏期。结论：补肾祛痰活血方不但可改善衰老模型小鼠学习记忆能力而且可以减缓自然衰老小鼠学习记忆能力的减退，是一个较好的益智抗衰药物。     

补肾活血方对糖尿病小鼠学习记忆功能的影响

目的本实验拟观察高血糖状态下实验小鼠脑组织中单胺类神经递质是否产生变化及其影响研究。方法采用四氧嘧啶静脉注射造模,时间8周。结果长期高血糖可引起小鼠脑组织中相关单胺类神经递质的变化,使其morris值升高,中药干预后,受试药组小鼠morris值显著下降。结论补肾活血方对改善高血糖状态小鼠学习记忆障碍有显著作用。     

活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的影响

目的:通过观察活血通督汤对脊髓缺血再灌注损伤脊髓神经细胞凋亡的影响,探讨活血通督汤改善脊髓缺血再灌注损伤的机制。方法:66只新西兰家兔随机分为假手术组、模型组、活血通督汤组。模型组、活血通督汤组采用夹闭腰动脉法制作脊髓缺血再灌注损伤模型。假手术组不夹闭腰动脉,其它步骤同模型组。采用TUNEL法检测神经细胞凋亡水平。结果:(1)苏木精-伊红染色显示:假手术组脊髓神经细胞形态基本正常;模型组和活血通督汤组各时间点可见脊髓神经细胞核固缩、深染、结构模糊,间质可见出血点;活血通督汤组各时间点脊髓神经细胞形态优于模型组。(2)TUNEL染色显示:假手术组神经细胞凋亡较少;模型组和活血通督汤组各时间点神经细胞凋亡较假手术组明显增高,再灌注24h神经细胞凋亡最多;活血通督汤组各时间点脊髓神经细胞凋亡少于模型组。结论:活血通督汤可通过减少脊髓缺血再灌注损伤中脊髓神经细胞的凋亡,从而减轻脊髓缺血再灌注损伤。     

补肾活血方对卵巢早衰小鼠颗粒细胞凋亡的影响

目的探讨补肾活血方抑制卵巢早衰(POF)小鼠卵泡颗粒细胞凋亡的作用机制。方法以小鼠透明带3为抗原,皮下多点注射免疫BALB/c雌性小鼠建立免疫性POF模型。取40只清洁级雌性小鼠,随机分为空白组、模型组、阳性药组、补肾活血方组。补肾活血方组给予补肾活血方药液灌胃,阳性药组给予戊酸雌二醇药液灌胃,模型组和空白组给予等量生理盐水灌胃,2次/d,连续15 d。取卵巢、子宫、胸腺进行称重,计算其脏器指数;HE染色观察颗粒细胞凋亡情况;采用放射免疫法检测雌二醇(E2)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)的水平;采用RT-PCR分析卵巢颗粒细胞中Fas、Fas-L m RNA表达情况。结果与空白组比较,模型组卵巢、胸腺、子宫质量和E2水平显著降低(P0.05,P0.01),FSH、LH水平和Fas、Fas-L m RNA表达显著升高(P0.01);与模型组比较,给药组颗粒细胞凋亡明显减少,卵巢指数、子宫指数、胸腺指数增加(P0.05),E2水平升高(P0.01),FSH、LH水平及Fas、Fas-L m RNA表达明显降低(P0.05,P0.01)。结论补肾活血方可调节下丘脑-垂体-卵巢轴的激素水平,通过降低Fas、Fas-L的m RNA表达抑制细胞凋亡。     

黄芪注射液预处理对大鼠脊髓缺血再灌注模型脊髓功能和神经细胞凋亡表达的影响

目的:研究中药黄芪注射剂预处理对大鼠脊髓缺血再灌注模型神经细胞凋亡表达的影响,探讨中药黄芪注射液对大鼠脊髓缺血再灌注模型神经细胞的作用效应及其作用机理。方法:采用大鼠肾动脉分支点下阻断腹主动脉的方法,建立大鼠脊髓缺血再灌注模型。90只SD大鼠采用单纯随机抽样方法分为假手术组(A组,n=30)、缺血再灌注组(B组,n=30)、黄芪注射液预处理组(C组,n=30)。其中假手术组开腹后只暴露腹主动脉不阻断腹主动脉,然后关闭腹腔;缺血再灌注组阻断腹主动脉30min后,放开腹主动脉进行缺血再灌注;黄芪注射液预处理组开腹前,经大鼠尾静脉注射黄芪注射液(10mL/kg),然后开腹阻断腹主动脉30min后,放开腹主动脉进行缺血再灌注。造模完成后,各组动物分别于缺血再灌注12h、1d、2d、3d、7d后用Tarlor法评价大鼠双后肢神经功能,然后取出L2-4段脊髓进行苏木精-伊红染色观察脊髓组织病理学变化,并用原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,计算凋亡指数。结果:黄芪注射液预处理可以减轻大鼠缺血再灌注模型双后肢神经功能损伤情况(P<0.05)、可以减少脊髓缺血再灌注后脊髓神经细胞中凋亡细胞数量(P<0.05)。     

补肾活血方对老龄大鼠脑缺血再灌注内皮素、降钙素基因相关肽代谢影响

从内皮素（ET）、降钙素基因相关肽（CGRP）代谢方面研究补肾活血方益元活血丹对老龄大鼠脑缺血再灌注损伤防护作用机制。制作血管闭塞全脑缺血模型,观察血浆与脑组织中ET、CGRP含量。结果显示,益元活血丹大小剂量组血浆中ET水平低于老龄模型组（P＜0．01）;血浆与脑组织中CGRP水平老龄模型低于老龄对照组（P＜0．05）,益元活血丹大、小剂量组高于老龄模型组（P＜0．05）。提示益活血丹能够调节ET与CGRP的代谢失衡,对脑缺血损伤起到保护作用。     

定心方对缺血再灌注心律失常大鼠心肌细胞凋亡的影响

定心方(Dingxin Recipe,DXR)是我校附属南方医院心律失常专科经验方,临床研究表明其对多种心律失常有显著疗效[1]。心肌缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury,IRI)后发生的严重心律失常是阻碍缺血心肌从再灌注疗法中获得最佳疗效的主要原因,心肌细胞的凋亡参与了心肌IRI     

补肾活血方对老龄大鼠脑缺血再灌注神经肽Y与神经降压素代谢的影响

研究补肾活血方益元活血丹对老龄大鼠脑缺血再灌注损伤神经肽 Y(NPY)和神经降压素 (NT)代谢的影响。将老龄大鼠随机分为老龄假手术组、老龄模型组、尼莫地平组、益元活血丹大剂量组、益元活血丹小剂量组 ,观察大鼠全脑缺血 30 min再灌注 6 0 min后血浆与脑组织中 NPY、NT含量。结果表明脑组织神经降压素水平益元活血丹大剂量组高于老龄模型组 (P<0 .0 5 )。老龄模型组脑组织神经肽 Y水平高于老龄假手术组 (P>0 .0 5 ) ,益元活血丹大剂量组明显高于老龄模型组 (P<0 .0 5 )。提示补肾活血方益元活血丹能够改善神经肽 Y和神经降压素含量的代谢失衡 ,从而对脑缺血损伤起到防护作用。     

补肾活血方对脑缺血小鼠智能及大脑皮层胆碱能系统的影响

目的:观察补肾活血方对脑缺血小鼠学习记忆能力及大脑皮层胆碱乙酰化转移酶(ChAT)、胆碱能 M 受体(MR)和 N 受体(NR)活性的影响。方法:用双侧颈总动脉结扎缺血再灌术,建立小鼠脑缺血智能障碍模型。分别灌胃生理盐水(假手术组、缺血模型组)、补肾活血方(防治组、治疗组)和尼莫地平(阳性对照组),观察了小鼠被动回避反应学习记忆能力、大脑皮层 ChAT、MR 和 NR 活性的变化。结果:与缺血模型组比较,补肾活血方能显著提高模型小鼠学习记忆能力(P<0.01),明显提高大脑皮层中的 ChAT、MR、NR 活性(P<0.05,P<0.01),与尼莫地平作用相近。结论:补肾活血方有改善脑缺血小鼠学习记忆能力、增加小鼠大脑皮层 ChAT、MR 和 NR 活性的作用,对脑缺血有保护作用。     

补肾活血方对SAMP8小鼠学习记忆及海马神经干细胞影响实验研究

目的观察补肾活血方对快速老化SAMP8小鼠行为学及海马内神经干细胞的影响,以期为补肾活血方治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的临床应用提供实验依据。方法7月龄的SAMP8雄性小鼠随机分为3组,分别为模型组、中药组和西药对照组,同月龄的SAMR1小鼠作为正常对照组。中药组按照6 g/kg补肾活血方灌胃给药,西药组给予3 mg/kg的盐酸多奈哌齐灌胃,正常组和模型组小鼠给予同体积的生理盐水灌胃。连续灌胃4周后采用水迷宫、免疫组织化学法和Western Blot法观察小鼠行为学、海马区NeuN和Nestin的表达。结果与正常老化SAMR1小鼠相比,模型组SAMP8小鼠学习记忆能力明显下降,海马组织Nestin和NeuN的表达减少(P<0.05);与模型组相比,给予补肾活血方和盐酸多奈哌齐西药干预后,SAMP8小鼠学习记忆能力有所改善,海马组织内Nestin和NeuN的表达增多(P<0.05);中药组和西药对照组SAMP8小鼠相比,学习记忆、海马组织Nestin和NeuN的表达无显著性差异(P>0.05)。结论补肾活血方通过上调SAMP8快速老化小鼠海马组织Nestin和NeuN的表达,促进神经干细胞的增殖和向神经元分化,从而改善SAMP8小鼠的学习认知记忆能力,对AD起治疗作用。     

补肾益气活血方对胎儿生长受限孕鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响

目的观察补肾益气活血方对胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)孕鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响,探讨该方治疗FGR的机制。方法采用被动吸烟法建立大鼠FGR模型,将32只孕鼠随机分为正常组、模型组、中药组(采用补肾益气活血方治疗)、西药组(采用精氨酸治疗)。运用HE染色观察各组胎盘的组织学变化,TUNNEL法检测胎盘滋养细胞的凋亡及RT-PCR、免疫组化检测胎盘滋养细胞Bcl-2、Bax的表达。结果模型组胎盘绒毛出现血液淤积及缺血,中药可明显改善FGR胎盘绒毛的微循环,而西药组则部分改善。正常组、模型组、中药组、西药组的绒毛两层合体细胞凋亡指数中位数依次为45%、75%、57%、70%,正常组和中药组的凋亡指数均低于模型组(P0.01),西药组与模型组比较差异无统计学意义。各组胎盘Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达比较,差异均无统计学意义。结论补肾益气活血方可改善FGR胎盘微循环,防止FGR胎盘滋养细胞的过度凋亡,但其并非通过经典的Bax/Bcl-2凋亡途径起作用,其作用途径仍待探讨。     

姜黄素对肺缺血/再灌注损伤小鼠Caspase-12及细胞凋亡的影响

目的研究姜黄素（curcumin,CUR）对肺缺血/再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）损伤小鼠天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12（cysteinyl aspartate specific proteinase-12,Caspase-12）及细胞凋亡的干预作用。方法采用C57BL/6J小鼠制作在体单侧肺原位I/R损伤模型。采用随机数字表法将60只小鼠分为6组,每组10只。假手术组（简称Sham组）、I/R组、I/R加二甲基亚砜（简称I/R加DMSO）组,I/R分别加100、150、200 mg/kg CUR（简称I/R加CUR-100、I/R加CUR-150、I/R加CUR-200）组。实验结束留取左肺,测定肺湿/干重比（W/D）和总肺水含量（TLW）,光镜观察肺组织形态学改变,进行肺组织损伤定量评估（IQA）,电镜观察肺组织超微结构改变,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测Caspase-12和葡萄糖调节蛋白78（GRP78）mRNA及蛋白表达水平,原位末端标记（TUNEL）法检测肺组织细胞凋亡指数（AI）。结果与Sham组比较,I/R组Caspase-12和GRP78 mRNA及蛋白表达水平均升高（P〈0.05）,W/D、TLW、IQA和AI均增加（P〈0.05,P〈0.01）,肺组织形态结构均发生明显损伤;与I/R加DMSO组比较,I/R加CUR-1 00组、I/R加CUR-1 50组、I/R加CUR-200组GRP78 mRNA及蛋白表达水平均升高（P〈0.05）,而Caspase-12 mRNA及蛋白表达水平均降低（P〈0.05）,W/D、TLW、IQA和AI亦均下降（P〈0.05,P〈0.01）,肺组织形态学异常改变趋近于正常。结论姜黄素对I/R损伤发生的小鼠肺脏具有较好的保护作用,其机制可能与其对抗过度的未折叠蛋白反应（unfolded protein response,UPR）中Caspase-12引起的细胞凋亡有关。     

补肾活血方对大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化的影响

目的观察中药补肾活血方对体外培养SD大鼠成骨细胞增殖、分化及矿化的影响。方法取新生的SD大鼠的颅骨,胶原酶法培养成骨细胞：应用MTT法,对硝基苯磷酸盐法（PNPP）及茜素红染色方法观察不同浓度补肾活血方对体外培养成骨细胞在24、48、72h不同时段的增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性及矿化结节形成的影响。结果不同浓度的补肾活血方均可促进成骨细胞增殖率提高,以中、高浓度组的作用较为明显（P〈0．01）;不同浓度补肾活血方可使ALP活性增强（P〈0．01）;中、高浓度组补肾活血方矿化结节数量,显著多于对照组（P〈0．01）。结论补肾活血方具有促进成骨细胞的增殖、分化及矿化的作用。     

葛根素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨葛根素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法:建立大鼠缺血/再灌注模型,并给予葛根素药物干预,观察各组心肌细胞凋亡的情况,以了解细胞凋亡及葛根素在再灌注损伤中所起的作用。结果:假手术组及单纯缺血组凋亡细胞无明显增多,而缺血/再灌注组凋亡细胞明显增多(P<0.01);在再灌注前给予葛根素治疗可减少因再灌注引起的细胞凋亡(P<0.05)。结论:缺血/再灌注后可见心肌细胞凋亡发生,再灌注可加速细胞凋亡的发生;葛根素可抑制心肌细胞凋亡。     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的:研究芪棱汤对脑缺血再灌注后,"缺血半暗带"神经元细胞凋亡的影响.方法:采用线栓加环扎法模型,运用TUNEL法,在脑缺血再灌注后不同时间点检测凋亡细胞数目的变化.结果:在再灌注各时间段,补阳还五汤及芪棱汤均能减少缺血半暗带神经元细胞的凋亡(P＜0.05),而芪棱汤的效果优于补阳还五汤(P＜0.05).结论:芪棱汤可以减少脑缺血再灌注损伤后细胞的凋亡,从而达到脑保护的作用.     

补肾活血方对肾小球硬化大鼠细胞外基质状态的影响

目的 探讨补肾活血方对肾小球硬化大鼠细胞外基质状态的影响及作用机制。 方法 采用单侧肾切除加注射阿霉素造模法,将实验动物随机分为正常组、模型组、中药补肾活血方组（中药组）、西药福辛普利钠对照组（西药组）,每组11只。分别灌胃给药及生理盐水8周后,观察大鼠24 h尿蛋白及肾功能,采用免疫组化法检测肾组织中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、组织蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的表达,ELISA检测血浆和肾组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）的含量。 结果 与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白明显增多,肾功能下降;肾组织中TIMP-1表达增加,MMP-1表达下降,半定量结果显示模型组与正常组比较差异有统计学意义（P <0.05）;中药组和西药组均能降低肾组织TIMP-1含量,提高MMP-1含量,与模型组比较,差异有统计学意义（P <0.05）。与正常组比较,模型组大鼠血和肾组织的TGF-β1含量明显升高（P <0.01）,中药组血和肾组织的TGF-β1含量较模型组低,但差异无统计学意义     

活血复方对大鼠脑缺血再灌注模型神经行为学和大脑海马神经细胞凋亡的影响

目的观察活血复方对大鼠缺血再灌注模型神经行为学和大脑皮质及海马神经细胞凋亡的影响。方法采用右侧颈总动脉夹闭缺血再灌注手术,建立大鼠脑缺血再灌注及神经细胞凋亡模型,并观察大鼠神经行为学改变,HE染色光镜观察大脑皮质及海马病理形态改变,在缺血再灌注不同灌注时相TUNEL法检测神经凋亡细胞,并定量分析凋亡相关基因bcl-2及bax的变化,以及活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响。结果缺血再灌注组神经行为学计分较假手术组为高;皮质及海马神经细胞出现退化、变性、坏死等病理变化;术后6h皮质及海马细胞神经细胞凋亡百分比升高。活血复方能有效改善大鼠神经行为症状,降低皮质及海马神经细胞凋亡百分比,增加bcl-2表达,减少bax表达,与模型组相比具有显著差异。结论活血复方可以减缓缺血再灌注后皮质及海马神经细胞凋亡的影响,较好地改善大鼠脑缺血再灌注模型的神经行为症状。     

补肾活血方对帕金森病模型小鼠TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨补肾活血方对帕金森病(PD)模型小鼠神经炎症的抑制效应及其机制。方法将36只雄性C57/BL小鼠随机分为3组(正常组、模型组、中药组),每组12只。模型组和中药组小鼠采用腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)法建立PD模型,造模成功后中药组予补肾活血方灌胃治疗14天(0.3 mL/d),同时正常组和模型组予等量生理盐水灌胃。选择爬杆试验和Morris水迷宫试验评估小鼠行为学变化。采用Western Blot法检测各组小鼠黑质致密部Toll样受体4(TLR4)、NF-κB p65、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和Caspase-3蛋白表达,并用免疫组化法测定各组小鼠脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)的阳性表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠在爬杆实验中转向时间和爬下时间均增加(均P<0.01),在水迷宫实验中逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越平台次数减少(P<0.01);与模型组比较,中药组小鼠爬下时间减少(P<0.01),逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越平台次数增加(P<0.01)。与正常组比较,模型组小鼠TH阳性神经元数目减少(P<0.01),信号通路蛋白TLR4、NF-κB p65、炎症因子IL-6、TNF-α及凋亡蛋白Caspase-3的表达水平均升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,中药组小鼠TH阳性神经元数目增加(P<0.05),TLR4、NF-κB p65、IL-6、TNF-α及Caspase-3的表达均下调(P<0.05)。结论补肾活血方能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,进而降低炎性因子和Caspase-3蛋白表达,减轻炎症反应,抑制细胞凋亡,减少DA能神经元损伤。补肾活血方对PD模型小鼠具有神经保护作用,并能够改善PD小鼠运动协调及学习记忆能力。