1987—1990年奶牛胚胎分割研究

1987年10月—1990年10月在不同地区的6个奶牛(农)场进行奶牛胚胎分割研究。采用简单的分割方法和设备,以及培训农场技术人员,三年共分割奶牛胚胎277枚,移植半胚522个,移植受体288头,有125头受体妊娠(43.4％),半胚妊娠率29.7％,双胎率33.3％。随着分割技术的提高,到1990年受体妊娠率达到51.4％,和整胚移植的(50％)相同。半胚妊娠率达34.6％。分割一级胚胎可获得最好的结果。受体和半胚的妊娠率分别是53.5％和37.2％。半胚产犊率为35.3%,按未分割的整胚计算,产犊率达到70.4％,比整胚的(45.5％)提高25％。双胎率达到42.0％。结果表明,在我国牛(农)场比较简陋的设备条件下,依靠本身培训的技术力量,可以利用胚胎分割来提高奶牛的繁殖效率。本研究表明,用黄牛或奶牛作受体移植成对奶牛半胚,两者在受体妊娠率、半胚妊娠率和产犊率及双胎率上均无差异(P>0.1)。这对充分利用我国丰富的黄牛资源生产出更多优良的奶牛具有十分重要的意义。     

山羊鲜胚及冻胚移植

经超排处理获黑山羊3日龄新鲜胚胎12枚,分别移植到同期发情的6只白色受体羊,其中2只妊娠,产羔3只,受体妊娠率为33.3％(2/6),鲜胚移植成功率25.0％(3/12)。7日龄山羊冷冻胚胎35枚,分别移植到同期发情的18只浏阳黑山羊和白色马头山羊受体母羊,其中6只妊娠,受体妊娠率 为38.89％(7/18),产活羔10只,流产1只,冻胚移植成功率为31.43％(11/35)。     

绵羊鲜胚分割移植试验

本试验就胚胎发育阶段、胚胎质量和黄体等级对分割胚胎移植效果的影响进行了研究。试验结果表明,囊胚二分割移植受体妊娠率(56.5％,13/23)、半胚妊娠率(41.6％,20/42)、移二个半分胚妊娠受体双羔率54.6％、6/11)均高于桑椹胚和扩大囊胚。A级胚胎分割移植妊娠率高于B级(P<0.01)。桑椹胚分割移植妊娠的受体中A级黄体为68.8％,B级黄体31.3％。囊胚和扩大囊胚受体A、B级黄体间无明显差异。鲜胚四分胚移植20只受体,产6只羔羊,受胎率30％。     

牛胚胎玻璃体化冷冻实验研究

玻璃体化冷冻胚眙在国际上早有报道,但能够受孕、生出牛犊的报道不多,在中国只是首例。对小鼠和家兔的胚胎在实验室已经常规化的应用玻璃体化冷冻技术。近年来自1986年Scheffen等用10％甘油和25％1,2丙二醇作为防冻剂冷冻鼠胚,Massip et al(1986)冷冻牛胚之后,我们对牛胚胎的玻璃体化冷冻进行了部分研究。 本研究应用三种不同种和不同浓度的保护剂处理7天的桑椹胚和囊胚采用玻璃体化冷冰法进行冷冻。在液氮中保存一段时间后,解冻脱掉保护剂,移植给受体母牛,先后有3头受体牛妊娠,目前产犊1头。     

农畜胚胎移植实用化研究

鲜胚及分割胚移植,超排处理供体牛8头,采卵7头,获取胚胎29枚,其中可用胚21枚。 移植受体贵州黄牛16头,移植3个月后检胎,确定妊娠8头,妊娠率为50％,妊娠期放牧流产2头,产犊6胎,产出8头(2头双胎),出生重为25—30千克。 自70年代迄今,胚胎移植技术在乳牛及肉牛业生产中,对提高牛的品质、增加乳肉产量及扩大良种牛群等起到积极作用。倘若在农畜方面应用E.T技术,则可大大加快农畜的改良进程,因为现有的级进杂交改良需时12—16年之久,而采用E.T技术只需1—2年便可获得纯种乳牛或肉牛,如此便可显著地加速奶牛群和肉牛群的发展。 几年来,贵州省家畜胚胎移植研究中心曾进行少量的农畜胚胎移植的尝试并取得初步成果。     

苏联牛胚胎移植技术研究现状

苏联牛胚胎移植起步较晚,直到1980年才通过手术移植的方法获得第一头冻胚犊牛,但近年来这项技术进展较快。据H CepreeB等(1983)报道,用手术法给183头青年母牛移植不同日龄胚胎,妊娠率为48.1％(88/183);118头母牛移入冷冻胚胎,妊娠率为44.1％(52/118)。苏联在超数排     

荷斯坦奶牛性控冷冻胚胎在牧区移植试验研究

在牧区夏季选用当地土牛和杂交褐牛作为移植受体进行了荷斯坦性控冷冻胚胎移植,共移植了126头受体牛.2个月后妊娠检查,妊娠58头,妊娠率46.0%,第二年通过调查,实际产母犊48头,产母犊率92.3%.结果表明在黄牛改良中采用性控胚胎移植不仅可使母犊繁殖率提高一倍,加速黄牛改良进程,而且使优良母畜的繁殖率得到更大的提高,从而给农牧民带来更大的收益.     

小鼠裸半胚冷冻试验

本试验研究了以含0.2M蔗糖的1.4M甘油20％FCS-PBS液和0.2M蔗糖PBS液一步法冷冻小鼠裸半胚,于-7℃植冰,以0.45℃/分速度降至-25℃或-30℃浸入液氮;以0.5M蔗糖PBS液为稀释液玻璃化冷冻小鼠裸半胚的效果。结果以一步法冷冻-25℃、-30℃浸入液氮和玻璃化冷冻组半胚培养存活率分别为73.3％(22/30)、85.7％(24/28)和45.2％(14/31)。以一步冷冻-30℃浸入液氮组半胚存活率最佳,与鲜半胚的培养存活率100％(19/19)差异不显著(P>0.05)。     

黑白花奶牛胚胎移植中国黄牛的配套技术研究

为利用胚胎移植技术让黄牛借腹怀胎生奶牛,以加快我国奶牛业的发展,从提高供体牛的超排效果、受体黄牛选择、提高移植妊娠率、胚胎冷冻、分割以及推广此项技术的方式六个方面进行了系统研究。提出了受体黄牛选择标准的依据;总结出超排、移植、胚胎冷冻、分割以及推广方式等一整套技术方法。 本研究在农村条件下胚胎移植黄牛247头,妊娠108头,移植妊娠率为43.7%,共产活奶牛犊101头。为奶牛胚胎移植黄牛在生产中应用提供了科学依据和工作经验。     

牛胚胎的冷冻保存和移植

本试验研究了牛胚胎在冶冻及解冻后的成活,以确定胚胎冶冻最适宜的发育阶段及成功的移植所需的受体与胚胎的同步条件。 发情后7或8天取出的有透明带的囊胚,其冷冻和解冻后的成活无显著差异。与胚龄同期或比胚龄早一天的受体,其妊娠率相同。总之,有52％的冶冻胚胎在体外能继续正常发育;当移植给受体后有40％妊娠。脱离透明带(已孵化)的8日龄胚胎冶冻后少数在体外能发育(25％),10个胚胎移植至受休后没有妊娠。     

牛半胚分割移植技术的应用

牛胚胎移植技术已趋于成熟,其鲜胚移植妊娠率可达60％—70％,冻胚也达到45％—50％。每年黑白花牛移植的受体牛超过400头,迄今获得胚胎移植的犊牛1500多头,目前正在稳步地向奶牛户普及和推广。 过去要求进行胚胎移植的奶牛户几乎都是自己拥有优秀的供体牛,但近来的发展趋势是联合购入优秀的供体牛,集中移植给青     

奶牛胚胎移植引进技术的消化吸收

1986—1990年,本试验用FSH、PGF_2α等激素及非手术采卵或移植方法,对47头黑白花奶牛进行超排采卵,结果超排有效率为93.6％(44/47);头均获可用胚胎数5枚;可用胚胎收得率60％(218/361)。对234头黑白花奶牛进行鲜(冻)胚胎移植,经检胎220头受体牛的受胎结果,鲜胚移植受胎率51.7％(45/81);冻胚移植受胎率42.1％(56/133)。最终年度鲜胚移植受胎率66.7％(14/21),冻胚移植受胎率45.8％(22/48)。一次超排采卵并移植的个体最好水平——可用胚收得率89.5%(17/19),受胎率80％(4/5),繁殖率75％(6/8)。     

进口肉羊冷冻胚胎移植试验

该研究对从澳大利亚引进良种肉羊无角陶赛特、得克萨尔、萨福克冷冻胚胎进行移植。得到以下研究结果 :A级黄体受体羊移植成功率 5 5 .3% (99/179) ,B级黄体受体羊移植成功率 38.1% (8/2 1) ,统计差异极显著 (P <0 .0 1) ;移植 1枚胚胎的妊娠率 4 8.4 % (6 3/130 )显著低于 (P <0 .0 5 )移植 2枚胚胎的妊娠率 6 2 .9% (4 4 /70 ) ;移植速度 2～ 4min的妊娠率(5 8.2 % )极显著高于 (P <0 .0 1)操作困难 (10min以上 )的妊娠率 (2 8.6 % )。     

波尔山羊腹腔内窥镜鲜胚移植试验

2002年10-11月在山东省东营市蓝海集团绵野公司种羊场使用两种超排药物对40只经产波尔山羊进行超排处理．供体羊有两只未发情．超排有效率为95％(38／40)。共回收胚胎388枚．其中可用胚311枚．每只获胚胎10．21枚(388／38)，平均可用胚8．18枚(311／38)，可用胚率80．15％(311／388)。同期处理受体399只，有320只发情，同期率为80．20％．运用腹腔内窥镜技术移植受体267只．其中44只供体移植双胚。经试情150只受体未返情，受胎率为56．18％(150／267)。     

胚胎移植技术在肉用细毛羊纯繁扩群中的应用

为建立新疆巴州肉用细毛羊基地,2000-2004年在新疆巴州种畜场以胚胎移植技术为主要扩繁手段,用引进的纯种肉用细毛羊实施超排胚移6个批次,累计处理供体71只(次)获可用胚胎504枚,均只获可用胚胎7.1枚,移植受体489只,早检妊娠率56.0%,产羔母羊231只,产羔母羊占移植受体数47.2%。四年内通过超排胚移和人工授精配种繁殖方法,共生产了肉用细毛羊426只,其中胚胎移植生产羔羊241只。四年中淘汰不合格个体24只,对外出售种公羊66只,至2005年年末肉用细毛羊纯繁群的存栏量为260只,是初始数26只的10倍,其中通过胚胎移植手段获得的数量占总增长数量的56.75%。     

胚胎工程新技术在家畜中的应用

分子生物学和基因工程的最新进展为探索其将来在家畜中的应用提供了条件。人工授精和胚眙移植的发展也为育种工作中选育优良遗传性状的扩大提供了新的机会。近几年来,发展了分割单个后期牛胚胎生产遗传特性相同的双胎后代的技术。现在,应用这项新技术,胚胎收集、胚胎分割和二分胚移植给受体母本只在1小时内即可完成。除牛之外,还进行了猪、绵羊、山羊和马的二分胚移植工作。不同种类的二分胚的受胎率(40%—70%)一般与其相同供体收集的完整同胞胚胎的受胎率无大差别。该显微外科技术简单、效率高、容易学。这一技术提供了使有价值的供体母本的移植后代数量成陪增加的可能性。目前正在进行研究力争改进冷冻和保存二分胚的方法,以便在合适的出生季节生产双胞胎后代。近几年来,牛、绵羊、山羊、猪和马体外交配和卵母细胞的体外受精有了相当发展。这项技术使冷冻精液和从屠宰场获得的卵巢在实验室中产生大量的胚胎成为可能。最近已有用精子注射卵母细胞获得存活后代的成功报道。这方面的研究发展很快。今天,体细胞共育系统(如输卵管细胞和卵丘细胞)已用于将IVF来源的胚胎培养至桑椹期和胚泡,以便进行受体移植或冷冻保存。应用Y特异的DNA探计在移植前可以进行胚胎(如牛)的性别鉴定,以单个胚胎的分裂球(分裂胚     

马胚胎移植技术的研究进展

在过去的10年中,马胚胎移植技术的应用有所增加。马胚胎的采集和移植已经规范化。一般来说,从正常的健康母马回收胚胎,其回收率为50％—60％,将这些回收的胚胎移植给受体马,用非外科手术进行胚移,其妊娠率为50％。用外科手术进行胚移,在胚移后50天时,妊娠率为65％。 本文就马的胚胎培养、运输期间的短期保存、胚胎冷冻、切除卵巢的马作为受体马使用以及马的超数排卵、胚胎的二切割法及体外受精方面的最新进展作以综述。由于一匹母马一年只产一个马驹,因此,马胚胎移植的推广应用受到了很大限制。超数排卵技术的改进以及体外受精技术的推广应用对马胚胎移植有很大的推动作用。     

牛胚胎分割技术的现状与今后展望

胚胎分割的发展史 分割胚胎的实验最早是在1968年Mular等在小动物上进行的,当时将兔胚胎(2—8细胞期)分割为2个半胚,移植给受体兔获得成功。随后,1974年Troson最早报道了分割绵羊胚胎并成功得到同卵双生羔羊的事例。     

在牛育种和生产中胎胚的应用

胚胎的生产和移植 (一)胚胎移植 自Rowson等(1969)最先建立的一般麻醉和中腹剖腹术方法以来,胚胎移植的方法有了很大的变化。首先,Newcomb(1979)改脊椎和肋部麻醉的手术移植为最近的非手术移植。专业人员用任何一种移植方法都可获得约66％的胚胎妊娠率。显然,受胎率的提高取决于经验的积累和反复操作的实践,而子宫内的细心操作也是极为重要的。 除经验外,许多因素如胚胎发育阶段和胚胎质量、供体和受体间的“同步化”、冷冻和解冻等都影响着胚胎移殖的成功率。未经冷冻的高质量胚胎在专门的中心实验室     

奶牛胚胎移植引进技术的消化吸收总结报告(1986—1990)

1986—1990年利用FSH对136头黑白花奶牛进行超数排卵处理328次,有效率77.7％,采卵成功率91.4％,共获卵1791枚,其中可用胚胎1127枚,可用率为62.9％,平均每次采卵得可用胚4.84±4.66枚。 冷冻保存胚胎1015枚,解冻后胚胎可用率平均为84.6%。1990年将奶牛冷冻胚胎移植给黄牛和杂种牛205头,妊娠85头,妊娠率为41.6％。通过试验,肯定了国产激素的适宜剂量及其可与进口激素相比的超排效果,但同种FSH不同批号间存在差异。对29头供体母牛重复超排处理129次,各次处理间各项指标差异均不显著,获可用胚≥5枚的供体牛比率,在2—3次重复处理中均显著高于首次,指出由于供体对激素反应的个体效应,筛选对激素反应敏感的供体重复超排是可行的。同时探讨了胚胎品质、发育阶段以及黄体等级与移植妊娠率的关系。