川芎嗪、葛根素、银杏黄酮及三七皂苷对鸡胚尿囊膜血管生长的影响

目的研究川芎嗪、葛根素、银杏黄酮及三七皂苷对鸡胚尿囊膜血管生长的影响。方法培养海兰种种蛋，观测局部用药对生长七日及五日鸡胚尿囊膜血管数目、血管面积的变化。结果葛根素及三七皂苷对鸡胚尿囊膜血管数目、血管面积影响不明显，川芎嗪、银杏黄酮减少鸡胚尿囊膜血管数目、血管面积，与对照组相比差异具显著性。结论川芎嗪、银杏黄酮可抑制鸡胚尿囊膜血管生长。     

骨髓液促进鸡胚绒毛尿囊膜血管的生成

背景:生长因子能促进侧支血管的发育,且多种因子协同效果更为明显,骨髓液中富含多种生长因子.目的:观察血管内膜损伤后的骨髓液对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的作用.方法:受精蛋70枚在(37.5±0.5) ℃条件下孵育,第7天开窗,第8天将存活鸡胚随机分为生理盐水组、正常血清组、正常骨髓液组、损伤血清组、损伤骨髓液组以及血管内皮...     

黄芪、脉络宁注射液载入修饰胶原对鸡胚尿囊膜血管新生的协同促进作用

背景:课题组先期研究发现黄芪载入修饰后胶原可以促进血管新生,与生长因子载入疗效相当,运用中医理论中具有协同作用的中药合用是否能进一步提高疗效尚不清楚。目的:探查黄芪、脉络宁载入修饰后胶原促鸡胚尿囊膜血管新生及长入胶原的疗效,并证明黄芪与脉络宁是否有协同作用。方法:实验分空白组、控制组(单纯胶原)、黄芪组(黄芪注射液1mL载入胶原)、脉络宁组(脉络宁注射液1mL载入胶原)、黄芪+脉络宁组(黄芪注射液及脉络宁注射液各0.5mL载入胶原),各组植入鸡胚尿囊膜孵化7d后取出,测定鸡胚尿囊膜内微血管数、各组胶原内微血管数、血红蛋白含量、rhVEGF165阳性细胞数。结果与结论:各实验组鸡胚尿囊膜内血管呈轮辐状生长及鸡胚尿囊膜包裹标本率高于空白组与控制组,鸡胚尿囊膜内微血管数、胶原内微血管数、血红蛋白含量、rhVEGF165阳性细胞数均高于控制组,差异有显著性意义(P0.01);其中黄芪+脉络宁组又高于黄芪组与脉络宁组,差异有显著性意义(P0.05)。提示黄芪、脉络宁载入胶原后可以促进鸡胚尿囊膜内血管新生并刺激血管长入胶原内,黄芪与脉络宁合用具有协同作用,机制之一为刺激血管内皮细胞血管内皮生长因子的表达。     

鸡胚尿囊绒毛膜法研究细胞间黏附分子-1在血管生成中的作用

目的　探讨细胞间黏附分子 1(intercellularadhesionmolecule 1,ICAM 1)在血管生成中的作用。　方法采用鸡胚尿囊绒毛膜 (chorioallantoicmembrane ,CAM)法进行在体血管生成实验。　结果　 1 10d鸡胚的尿囊绒毛膜经ICAM 1作用 3d后 ,明胶海绵周围放射状走行的微血管非常明显 ,似车辐 ,显微镜下明胶海绵内有垂直长入的微血管 ,明胶海绵周边CAM间充质内微血管数目显著多于对照组 (P <0 0 1)。 2 6d鸡胚的尿囊绒毛膜经Anti ICAM 1作用 3d后 ,明胶海绵周围放射状走行的微血管极不明显 ,显微镜下明胶海绵内几乎没有新生的微血管 ,明胶海绵周边CAM间充质内微血管数目显著少于对照组 (P <0 0 1)。　结论　结果提示 1 ICAM 1有诱导微血管生成的作用 ;2 ICAM 1参与胚胎的血管生成。     

隐丹参酮对鸡胚尿囊膜血管生成的抑制作用

目的评价隐丹参酮对鸡胚尿囊膜（CAM）新生血管生成的抑制作用。方法在六日龄CAM上植入含隐丹参酮的甲基纤维素膜片并孵化48h。解剖显微镜下计数加药组和对照组局部血管数，用抑制率反映药物对CAM新生血管形成的影响。结果隐丹参酮0．1μg／egg和0．2μg／egg剂量相关性减少CAM局部的血管数，抑制率分别达到65％和72％；与对照组相比用药组局部血管明显变细受损。结论隐丹参酮对CAM血管生成有显著的抑制作用。     

鸡胚绒毛尿囊膜模型在微血管实验研究中的应用

鸡胚的绒毛尿囊膜薄膜(CAM),作为胚胎的呼吸器官,在第4天和第5天的胚胎发展期间由被膜尿囊内脏中胚层和绒毛膜中胚层融合而成[1]。CAM是鸡胚孵化至第19天的(总期间21天)气体交换的呼吸器官,是具有丰富血管的薄膜。CAM微循环具有连续的微血管分叉状扩张[1],在生理状态下,承担适应发育中的胚胎氧需求。鸡胚CAM血管系统的发育既复杂又高度程序化。CAM血管生长于正常的鸡胚发育期间,经观察大体上经过早、中和晚三期:早期(从第5天到第7天)通过毛细血管以“出芽”方式生长;中期(从第8天到第12天)是普遍的吸收式微血管的生长,毛细血管内壁内…     

不同浓度生肌玉红胶原对鸡胚尿囊膜血管新生的影响

目的:观察不同浓度生肌玉红膏提取液载入修饰后胶原(生肌玉红胶原)促鸡胚尿囊膜(CAM)血管新生的作用。方法:实验分空白组、对照组(无药胶原)、实验组1、2、3(分别将生肌玉红膏提取液以0.8、1.6、3.2mg/ml载入胶原),各组胶原植入7日龄CAM,孵化7天后取出,观察鸡胚成活、血管生长、胶原降解情况,测定植入胶原周围CAM内微血管数和胶原内血红蛋白浓度以及胶原内组织总DNA含量。结果:各实验组CAM内血管围绕胶原呈轮辐状生长,胶原包裹率和降解率均以实验组2最高,实验组2植入胶原周围CAM微血管数和血红蛋白含量以及胶原内总DNA量均高于对照组及其它实验组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:生肌玉红胶原可以促进CAM血管新生,最佳浓度为1.6mg/ml。     

灵芝多糖抑制鸡胚尿囊膜模型中的血管生成及细胞黏附

目的 进一步了解灵芝多糖抗肿瘤的作用机制。方法 应用鸡胚尿囊膜（Chicken chorioallantoic membrane,CAM）血管生成模型观察灵芝多糖对血管生成的作用,及对高转移潜能的人前列腺癌PC-3M-1E8细胞黏附于基质成分层黏连蛋白（Laminin,LN）的影响。结果 灵芝多糖在一定剂量范围内（0．2～5μg/鸡胚）可明显抑制CAM的血管生成及抑制细胞黏附,在0．33～33g／L剂量范围内,呈现出量一效依赖关系。结论 灵芝多糖的抗肿瘤作用与其抑制血管生成及细胞黏附有关。     

青蒿琥酯对人骨髓瘤细胞抗血管生成的作用

目的:研究青蒿琥酯对人RPMI-8226细胞诱导血管新生的抑制作用。方法:采用MTT法检测青蒿琥酯对RPMI-8226细胞增殖抑制作用;通过鸡胚绒毛尿囊膜体内血管生长实验,观察青蒿琥酯对RPMI-8226细胞诱导体内血管生成的影响;免疫蛋白印迹检测鸡胚绒毛尿囊膜内血管内皮生长因子(VEGF)和血管紧张素1(Ang-1)含量的表达变化。结果:青蒿琥酯以时间、剂量依赖方式抑制RPMI-8226细胞增殖;24h和48h后,其IC50值分别为(36.33±2.65)μmol/L和(14.31±3.28)μmol/L。在鸡胚绒毛尿囊膜体内血管生长实验中,经3、6、12μmol/L青蒿琥酯处理后,与单纯RPMI-8226细胞组比较,新生血管数目分别减少21.9%、38.2%和76.9%,差异有统计学意义;同时鸡胚绒毛尿囊膜内VEGF含量分别显著下降22.2%、34.2%和52.6%;Ang-1蛋白表达量分别显著下降15.6%、24.2%和39.6%。结论:青蒿琥酯具有抑制RPMI-8226细胞诱导血管新生的作用,其作用机制与下调RPMI-8226细胞的VEGF和Ang-1表达有关。     

不同鼻咽癌细胞株对鸡胚尿囊膜模型血管生成影响的比较研究

目的比较不同鼻咽癌细胞株在鸡胚尿囊膜模型上促进血管生成能力的差异。方法选用6日龄鸡胚,开窗后分别种植5-8F、6-10B及CNE-2三种鼻咽癌细胞株,三种细胞株细胞数为2×106/鸡胚者各一组,细胞数为5×105/鸡胚者各一组,另一组为对照组（PBS）,每组10个鸡胚。孵育6日后,统计分析新生血管数及血管面积/鸡胚面积比。结果种植细胞数为5×105/鸡胚时,5-8F、6-10B细胞部分鸡胚有移植瘤形成,CNE-2细胞鸡胚均未见成瘤。种植细胞数为2×106/鸡胚时,三种鼻咽癌细胞株均可100%成瘤,其新生血管数依次递减,分别为（38.7±2.50）、（33.5±4.43）、（29.7±2.71）,差异有统计学意义（P〈0.05）;血管面积/鸡胚面积比分别为（22.2±2.18）%、（18.7±2.45）%、（16.9±2.62）%,均高于对照组的（9.5±1.86）%,差异有统计学意义（P〈0.05）,且5-8F面积比高于其他两种细胞株（P〈0.05）。结论鼻咽癌5-8F、6-10B及CNE-2三种细胞株在鸡胚尿囊膜模型上血管生成能力依次减弱,实验研究可根据实际情况选用。     

黄芪、党参提取物增强紫杉醇抑制肿瘤血管生成和转移的实验研究

目的:观察黄芪、党参提取物对紫杉醇抑制Lewis肺癌血管生成和肿瘤转移的增强作用,为中医药抗肿瘤应用提供实验依据.方法:C57BL/6小鼠右肋处皮下接种Lewis肺癌,6 h后随机分为实验组、紫杉醇组和对照组.实验组接受紫杉醇联合参芪注射液治疗,紫杉醇组接受同等剂量的紫杉醇治疗,对照组用等体积的生理盐水代替.观察指标:移植瘤体积,肿瘤组织内微血管度和肺脏转移瘤数量,小鼠存活时间.结果:与紫杉醇治疗相比,紫杉醇联合参芪可以明显减少移植瘤内的微血管密度(10.1±4.4 vs 16.8±7.3,P＜0.05)和肺脏转移瘤个数(13.4±4.3 vs 18.4±3.9,P＜0.05),明显延长小鼠的存活时间(43.3±8.4 d vs 36.3±6.6 d,P＜0.05). 结论:黄芪、党参提取物对紫杉醇抑制肿瘤血管生成和移植肿瘤转移有一定的增强作用.     

直流电场对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成作用的研究

目的：探讨直流电场（electric fields．EF）对血管生成的影响及作用机制。方法：于发育第8天的鸡胚绒毛尿囊膜（chick embryo chorioallantoic membrane，CAM）上植入明胶海绵载体，其中加载不同强度EF，计数长入载体的血管和载体内的微血管密度（microvascular densily．MVD）。结果：150mV／mm、200mV／mm组在CAM上长入载体边缘的血管数和MVD与对照组间的有显著差别（p〈0．01）。结论：强度为150mV／mm、200mV／mm的直流电场能促进CAM的血管生成。     

丹参促进小鼠冻融卵巢移植早期血管内皮生长因子的表达

目的探讨丹参对小鼠冻融卵巢同种异体移植后的血管化作用及可能机制。方法收集C57BL/6j雌鼠和BALB/c雄鼠杂交的F1代4周龄小鼠卵巢,慢速冻融后移植至B6C2F1代8～12周龄雄鼠的肾被膜下,移植后小鼠按给药不同分为生理盐水组和丹参组,分别于移植后1d(24h)、2d(48h)和7d回收移植物,将冻融以及移植后不同时间段的卵巢组织进行HE染色全卵巢卵泡计数,免疫组织化学及RT-PCR方法检测血管相关蛋白及基因的表达。结果移植卵巢组织各时间段全卵巢卵泡计数及卵泡存活率丹参组均高于生理盐水对照组(P0.05);移植后小鼠血管内皮生长因子(VEGF)的表达有上升趋势,第7天达最高峰,两组之间无显著性差异(P0.05);移植卵巢组织各时间段细胞凋亡指数,丹参组均低于生理盐水对照组(P0.05);移植后48h丹参组VEGF188mRNA和VEGF164mRNA的表达量较对照组高,两组之间有显著性差异(P0.05)。结论小鼠卵巢组织移植后早期阶段丹参能促进卵泡发育,减少卵泡凋亡,可能与提高移植卵巢组织内血管相关基因VEGF(主要是VEGF164mRNA和VEGF188mRNA)的表达而促进移植后早期血管化有关。     

中西医结合治疗急性痛风性关节炎疗效观察

目的:观察中西医结合治疗急性痛风性关节炎的临床疗效。方法:60例急性痛风性关节炎患者,按随机数字表法分为两组,每组各30例。对照组在一般性治疗的同时用碳酸氢纳片、依托考昔片口服治疗;观察组在对照组基础上,外敷金黄膏、口服加味四妙汤治疗。观察2个疗程(14天)后两组临床疗效、疼痛缓解时间以及药物不良反应,采用常规生化方法测定治疗前后两组血尿酸(UA)和C反应蛋白(CRP)水平变化;随访治疗有效患者半年内复发情况。结果:2个疗程结束后,观察组总有效率(93.33%)优于对照组(70.00%)(P0.05);疼痛缓解时间短于对照组(P0.01);两组治疗后血UA、CRP与治疗前比较,均有显著下降(P0.01),且观察组较对照组降低更明显(P0.05);观察组复发率低于对照组(P0.05);两组均未见严重不良反应。结论:中西医结合治疗急性痛风性关节炎能提高疗效,降低复发率。     

Vascular endothelial growth factor receptor-2 inhibitor cediranib causes regression of endometriotic lesions in a rat model

Vascular endothelial growth factor (VEGF) receptor-2 plays an essential role in angiogenesis, and it also expressed in the glandular epithelium and stromal cells of ectopic endometrium. Cediranib is a protein tyrosine kinase inhibitor that potently inhibits VEGF receptor-2, but there is no study about its effects on the endometriosis. We induced endometriosis on both sides of the abdominal wall in 20 female Sprague-Dawley rats and randomly divided them into 2 groups. They were administered: cediranib 4 mg/kg/day (group 1), equal saline (group 2) for 12 days. Then, the lesion volumes were calculated, and Masson trichrome was used to detect fibrosis. Angiogenesis was evaluated by CD-31 immunohistochemistry and serum VEGF levels. Proliferation was indicated by proliferating cell nuclear antigen immunohistochemistry. Apoptosis was measured by a TUNEL assay and cleaved caspase-3 immunohistochemistry. In the treatment group, the lesion volumes were smaller (P < 0.05), and the degree of fibrosis was greater. The microvessel density was lower (P < 0.05) than control, however, serum VEGF was up-regulated by a negative feedback mechanism (P < 0.01). In addition, proliferation was significantly suppressed (P < 0.01), and apoptosis in the lesions was more obvious in the treatment group. These data indicated that cediranib can inhibit development of endometriotic lesions in rats.     

肥大细胞在小鼠佐剂性关节炎疼痛中的作用及其机制研究

目的:探讨肥大细胞在完全弗氏佐剂(CFA)诱导的小鼠佐剂性关节炎(AA)疼痛中的作用。方法:实验分为4组:正常对照组(control组)、AA模型组(model组)、AA模型+色甘酸钠(CS)组(CS组)和AA模型+肥大细胞缺失组(W-4Bao组)。每组6只小鼠,前3组均为健康雌性C57BL/6小鼠,W-4Bao组为肥大细胞缺乏的KitW-4Bao小鼠。除control组注射生理盐水外,其他各组小鼠右后足底皮下注射CFA构建慢性AA疼痛模型;CS组于致炎1 d后开始腹腔注射CS(20 mg/kg),其它各组给予等体积生理盐水,每日1次,连续给药14 d。分别于致炎第0、1、3、7、10和14天测量小鼠足掌厚度、机械刺激缩爪反应阈值(PWT)和热刺激缩爪反应潜伏期(PWL)。14 d后获取各组小鼠踝关节组织,组织切片进行HE和甲苯胺蓝染色,ELISA法检测踝关节组织中组胺(histamine)、类胰蛋白酶(tryptase)、P物质(SP)和降钙素基因相关肽(CGRP)的浓度。结果:小鼠致炎1 d后,与control组相比,model组小鼠右后足炎症表现明显,PWT和PWL显著降低(P<0.05),踝关节组织中肥大细胞和脱颗粒肥大细胞数量以及histamine、tryptase、SP和CGRP的浓度显著增加(P<0.05);与model组相比,CS组和W-4Bao组小鼠痛觉过敏减轻,细胞因子与神经肽的释放显著减少(P<0.05)。结论:肥大细胞的活化促进小鼠AA疼痛发生,其机制可能与促进神经肽和相关炎症因子的释放有关。     

重组人内皮抑素腺病毒抗肿瘤实验研究

目的肿瘤生长具有血管依赖性。内皮抑素为胶原X羧基末端裂解片段,是重要的内源性血管抑制因子。实验中利用重组人内皮抑素腺病毒(recombinanthumanendostatinadenorirus,Ad-hEndo)在肿瘤局部给药以探索其抗血管基因治疗的可行性。方法以Ad-hEndo感染体外培养肿瘤细胞,观察重组蛋白表达及其对培养的血管内皮细胞的抑制效应;在裸鼠A549肺癌模型中瘤内注射重组病毒,观察肿瘤抑制效应、剂量依从效应和毒副反应。结果不同感染复数的Ad-hEndo感染肿瘤细胞均表达重组内皮抑素蛋白,并能抑制血管内皮细胞的生长。动物实验中Ad-hEndo治疗组肿瘤体积及肺转移结节数明显低于对照组,且转移数与治疗剂量负相关。结论以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基因治疗能抑制肿瘤新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移,其效应具有剂量依从性。     

羟基红花黄色素A抑制H22小鼠肝癌移植瘤血管生成及减少MMP-3的表达

目的研究红花组分羟基红花黄色素A(HSYA)对H22小鼠肝癌移植瘤组织新血管生成的抑制作用及对基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的影响。方法建立H22小鼠肝癌移植瘤模型,第2天将小鼠随机分为对照组、索拉非尼组及HSYA组(1.125和2.25 mg/kg),HE观察肝癌移植瘤组织病理;用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CD34的表达,计数微血管密度(MVD);免疫组化和Western blot分别检测瘤组织中MMP-3的表达。结果与对照组相比,HSYA组(1.125和2.25 mg/kg)的MVD显著降低(P0.01),MMP-3蛋白在移植瘤组织中的表达明显减少(P0.01),以HSYA组(2.25 mg/kg)效果最为显著,但不及索拉非尼组。结论 HSYA在一定浓度范围内抑制H22小鼠肝癌移植瘤血管生成,其作用可能与降低基质金属蛋白酶-3的蛋白表达有关。