变性高压液相色谱技术在检测结核分枝杆菌对链霉素耐药性中的应用

目的利用变性高压液相色谱（DHPLC）技术快速检测结核分枝杆菌rpsL基因的突变，从而对结核分枝杆菌是否耐受链霉素类药物做出初步判断。方法体外药物敏感性试验，确定122株结核分枝杆菌临床分离株对链霉素的敏感程度。提取试验菌株基因组DNA。扩增rpsL基因片段；分别与H37Rv标准株的相应PCR产物混合、杂交后，利用WAVE核苷酸片段分析系统对各杂交产物进行DHPLC检测；序列测定结果与相应的DHPLC检测结果进行比较以验证DHPLC检测的准确性。通过比较药物敏感性和DHPLC检测结果。建立两者之间的对应关系。此外我们还检测了32株对链酶素敏感的临床分离株进行了DHPLC法检测。以明确该检测方法的特异性。结果结核分枝杆菌临床分离株对链霉素耐药性经体外实验证明，rpsL基因43位氨基酸突变通常会引起较高程度的链霉素耐药性。88位氨基酸突变菌株对链霉素的耐药性较低。链霉素耐药菌中发生rpsL基因突变的菌株约占78．69％（96／122）。其中以43位氨基酸突变为主（75．41％）。利用DHPLC技术检测rpsL基因突变，虽然不能检出缺失突变形式，但与直接测序法相比检出率为98．95％（95／96）。对所有耐受链霉素的结核分枝杆菌临床分离株而言。利用DHPLC技术可以达到77．87％（95／122）的耐药菌检出率，与序列测定法的检出率相近（96／122）。并且根据DHPLC检测图谱能够很好地判断rpsL基因的碱基突变形式。32株链酶素株的DHPLC检测图谱都与H37Rv标准株相同。结论DHPLC法是快速检测出结核分枝杆菌rpsL基因碱基突变的好方法．具有很高的特异性和敏感性。对链霉素耐药菌而言，碱基突变与结核分枝杆菌耐受链霉素类抗生素存在高度的相关关系，因此DHPLC技术用于临床早期检测结核病人对链霉素的耐药性具有良好的应用前景。     

初发糖尿病大鼠肾小球山梨醇代谢异常──经高压气相色谱质谱联用仪的分析研究

通过高压气相色谱－质量分析的方法，对链脲菌素糖尿病发病４周后的大鼠肾小球内葡萄糖、山梨醇、果糖的含量进行了检测。其结果表明，糖尿病大鼠组已达到糖尿病诊断标准，在初发糖尿病阶段，肾小球内葡萄糖、山梨醇、果糖的含量明显增高。提示在糖尿病状态下，肾小球内整个山梨醇代谢途径处于代谢亢进状态。     

肺心病患者T3,T4,TSH,ART及动脉血气值变化的观察

作者用放免法测定了３９例肺心病患者治疗前后Ｔ３、Ｔ４、ＴＳＨ、ＡＲＴ并与正常对照组比较，Ｔ４、ＴＳＨ均无显著性差异，Ｔ３下降有显著性差异，治疗后Ｔ３值较治疗前明显回升（Ｐ＜０．０１），但仍较健康组为低。提示测定血Ｔ３值可综合判断肺心病患者病情程度及与预后的关系。     

高效液相色谱测定大鼠血浆儿茶酚胺的含量

目的 :改进高效液相色谱配电化学检测器检测血浆儿茶酚胺 （CA）类物质含量的技术。方法 :用不同的流动相条件 ,在体外用外标法对大鼠血浆 CA含量进行检测。结果 :色谱条件以流动相用双蒸水配制 ,脱气 3 0 min,p H 2 .8～ 3 .0 ,检测电压 0 .6V,流速 0 .6m l/ min外标法为理想检测条件。去甲肾上腺素 （NE）最小检测极限 1.0 0 3 ng/ ml,肾上腺素 （E）最小检测极限 1.2 1ng/ ml。结论 :本文方法简便、快速、可靠 ,可用于科研测定血浆 NE和 E     

血清甲状腺激素（T3,T4）的固相酶联免疫测定——方法学探…

本实验用β－半乳糖苷酶分别标记Ｔ３及Ｔ４，均获得具有良好酶活性及免疫原活性的酶－抗原结合物。以国产聚苯乙烯微孔板为固相载体，建立了血清Ｔ３及Ｔ４的固相酶联免疫测定法。方法学检测数据如下：最小检出量，Ｔ３为０．０２ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｔ４４．０ｎｍｏｌ／Ｌ；回收率，Ｔ２为１．０２，Ｔ４０．９８；批内变异系数，Ｔ３为７．２％，Ｔ４５．３％；批间变异系数，Ｔ３为８．２％，Ｔ４１０．５％；两种抗血清对相应抗原的     

游离T4/游离T3与老年急性冠状动脉综合征患者病情和院内预后的相关性分析

目的:探讨甲状腺激素与老年急性冠状动脉综合征患者病情严重程度和住院期间死亡风险的关系.方法:选取2019年1月1日至2020年8月31日阜外华中心血管病医院冠心病重症监护室(CCU)65岁以上急性冠状动脉综合征患者505例,在人数大致相等的情况下将患者根据游离T4/游离T3(FT4/FT3)四分位进行分组:组1(<4....     

滇桂艾纳香的高效液相色谱指纹图谱鉴别方法的研究

目的：建立滇桂艾纳香的高效液相色谱（ HPLC）指纹图谱鉴别方法。方法采用高效液相色谱法。色谱条件包括Phenomenex 溍Synergi 4 u Polar-RP 80A色谱柱（250 mm×4.6 mm,4μm）,甲醇-水（用冰乙酸调pH至2.8）流动相系统,梯度洗脱：0～17 min,10％～40％甲醇;18～37 min,40％～60％甲醇,检测波长256 nm,柱温25℃,体积流量1 ml／min。测定12批滇桂艾纳香的指纹图谱,并作相似度比较分析。结果12批药材依法检测得到256 cm的HPLC指纹图谱,确定了11个特征峰构成的滇桂艾纳香指纹图谱,其中2号峰为原儿茶酸,4号峰为绿原酸。12批的相似度＞0.99,说明12批药材性能良好。结论该方法提供滇桂艾纳香的鉴别方法,有助于推广滇桂艾纳香药材的应用以及为中成药的中间体质量控制打下良好的基础。     

地方性氟中毒病区儿童T3、T4及TSH含量的测定

对地方性氟中毒病区（水氟３．５２ｍｇ／Ｌ）８￣１２岁儿童的Ｔ３、Ｔ４、ＴＳＨ含量及尿氟,尿碘含量进行测定其结果为：血液中的Ｔ４含量显下降、Ｔ３、ＴＳＨ含量显升高,Ｔ３、Ｔ３／Ｔ４比值与尿氟含量呈正相关关系,表明地方性氟中毒病区儿童甲状腺功能受到了一定程度的抑制,这种抑制作用可能是病区儿童长期处于高氟环境所引起的。     

高效液相色谱-质谱联用法测定血浆中异烟肼及其代谢物浓度的研究

目的:建立高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)同时测定肺结核患者血浆中异烟肼及其代谢物乙酰肼和肼的浓度的方法。方法:收集首都医科大学附属北京胸科医院确诊的104例肺结核患者(均接受规范抗结核治疗,服用异烟肼的剂量为1次/d,每次300～500 mg,于服药后2 h采集静脉血)的血浆样本作为研究样本。血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以异烟肼-D4为内标,以对甲基苯甲醛作为衍生化试剂,对待测物进行衍生化处理,采用InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z色谱柱(100 mm×2.1 mm, 2.7μm)分离,二元洗脱系统(A相为含0.1%甲酸和5 mmol甲酸铵的水溶液;B相为乙腈)进行梯度洗脱,柱温30℃,流速0.4 ml/min;采用电喷雾电离正离子模式检测,多反应监测模式扫描,运行时间为8 min。结果:本测定方法不受血浆中内源性物质干扰,异烟肼、乙酰肼、肼分别在50～6000、25～3000、1～120 ng/ml范围内线性良好[决定系数(R²)均>0.99];日内和日间精密度<15%;准确度绝对值<15%;提取...     

变性高效液相色谱检测法在基因突变分析中的应用

基因存在于染色体上,是遗传的基本结构和功能单位.基因突变在生物进化及遗传某些疾病的发病中起着重要作用.     

高效液相色谱法测定砖茶中儿茶素和生物碱含量的研究

目的 建立测定砖茶中儿茶素和生物碱的色谱分析方法,同时寻找出砖茶中儿茶素和生物碱的较优提取条件.方法 采用高效液相色谱法分离检测砖茶中儿茶素和生物碱,并进行回收率、精密度、稳定性实验.分别采用水、乙醇作为提取溶剂对砖茶中儿茶素和生物碱提取情况进行正交实验,再比较水和醇的提取效果,以获得提取砖茶中儿茶素和生物碱的较优提取条件.结果 高效液相色谱法可同时分离并检测出砖茶中儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯6种儿茶素以及咖啡碱、可可碱2种生物碱.各组分的峰面积和浓度之间具有良好的线性关系,决定系数(R2)范围为0.9990 ～ 0.9999;加标回收率范围为83.78％～ 106.35％.精密度较好[峰面积相对标准偏差(RSD)范围为0.50％～1.51％].砖茶中儿茶素和生物碱较优提取条件为:乙醇浓度80％、料液比1∶10、温度80℃、时间30 min.结论 乙醇作为提取剂的高效液相色谱法的较优提取条件,对砖茶中6种儿茶素和2种生物碱分离度较好,定性准确,快速灵敏.     

不同血糖水平对甲状腺功能的影响研究

目的探讨不同血糖水平对甲状腺功能及甲状腺抗体的影响。方法按照排除及纳入标准,选取2018年2月至2019年12月辽宁省人民医院门诊及住院的患者985例。记录入选对象的家族史、疾病史等基本信息,检测空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、血清游离甲状腺激素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、血尿酸(UA)及2 h血糖(PPG),记录甲状腺彩超结果。根据HbA1c分成3组:Ⅰ组(HbA1c<6.5%)、Ⅱ组(6.5%≤HbA1c<9%)、Ⅲ组(HbA1c≥9%)。统计不同的HbA1c对甲状腺相关指标的影响及可能的相关因素。结果 (1)糖化血红蛋白越高,FT3越低,FT4越高。Ⅲ组TSH高于Ⅱ组。所有入选对象中甲状腺功能异常者共73例,占总体的7.41%,其中发生率最高的为亚临床甲减。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间的甲状腺功能异常发生率差异有统计学意义(P=0.000);(2)在线性回归模型中,血清FT3与HbA1c呈负相关(β=-0.150,P=0.006);(3)按照病程长短分为无D...     

高效液相色谱——蒸发光散射检测法测定人肠黏膜通透性的方法学研究

目的 建立采用高效液相色谱蒸发光散射检测分析法(HPLC-ELSD)测定尿液中的乳果糖和甘露醇的排泄率,进而间接反映人肠黏膜通透性变化的方法.方法 采用高效液相色谱蒸发光散射器分别检测30例正常人和30例慢性乙型肝炎(重度)患者口服乳果糖和甘露醇混合液后6 h内尿中乳果糖和甘露醇排泄率的变化,以尿乳果糖、甘露醇排泄率的比值(L/M)反映上述2组人群肠黏膜通透性的变化,并加以比较.结果 采用该方法甘露醇和乳果糖能得到很好的分离,乳果糖的线性范围为0.65～13.0 μg/L(相关系数r=0.9980),甘露醇的线性范围为0.74～14.7 μg/L(相关系数r=0.9980).乳果糖和甘露醇日内精密度(RSD)分别为1.56%、0.65%(n=6),日间精密度(BSD)分别为1.77%、0.99%(n=6).乳果糖的加样回收率为98.68%～100.4%,平均值为99.51%;甘露醇的加样回心率为99.52%～100.5%,平均值为99.94%.乳果糖在尿中的最低检测浓度为94.2 μg/L,甘露醇在尿中的最低检测浓度为29.9 μg/L.正常人的L/M比值为0.0315±0.0134,慢性乙型肝炎(重度)患者的L/M比值为0.0430±0.0198.两者相比有显著性差异(P=0.011).结论 高效液相色谱蒸发光散射法检测肠道通透性的准确度高,重复性好,方法简便,是目前临床评价肠黏膜通透性变化的实用方法.与正常人相比,慢性乙型肝炎(重度)患者肠黏膜通透性明显增高.     

液相色谱-串联质谱法测定高血压患者血浆中标记物的质量浓度

目的 探讨液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)法测定原发性高血压(高血压)患者血浆中标记物质量浓度的可行性.方法 选择2018年2月到2019年5月在湖北医药学院附属东风医院进行诊治的高血压患者78例(高血压组)与进行体检的...     

甲状腺激素对心力衰竭伴低T3综合征患者心功能影响的Meta分析

目的：系统评价甲状腺激素替代治疗心力衰竭伴低T3综合征患者的疗效。方法计算机检索数据库包括Pubmed、Web of Science、COCHRANE LIBRARY、中国生物医学数据库、万方数据库和维普数据库,检索时限从建库至2013年6月,同时追索纳入文章的参考文献。严格按照纳入标准筛选文献、提取资料和评价质量后,应用Review Man-ager 5.2软件对所纳入的研究结果进行Meta分析。结果共纳入11篇RCT文献资料,包括662例心力衰竭伴低T3综合征患者。Meta分析结果显示：与常规治疗组相比,甲状腺素组（甲状腺激素加常规治疗）的左心室射血分数（LVEF）和心输出量（CO ）明显增加（MD＝5.16,95％ CI＝3.11-7.21,P＜0.01;MD＝0.55,95％ CI＝0.33-0.77,P＜0.01）,评价心室舒缩功能的E/A值升高和左心室舒张末内径（LVDD ）降低（MD＝0.22,95％ CI＝0.09-0.34,P＜0.01;MD＝-4.14,95％ CI＝-6.66--1.61,P＜0.01）。结论心力衰竭伴低T3综合征患者在常规治疗基础上加用甲状腺激素可明显提高患者的心脏射血功能及改善心室的舒缩功能。     

氢同位素氘对大鼠体重和血清T3T4影响的研究

氢同位素氘对大鼠体重和血清Ｔ３、Ｔ４影响的研究结果表明，ＩＤＤ病区对照组大鼠在饲养至第三个月时，出现了活动迟缓、体重下降，至第四个月时，血甭Ｔ３、Ｔ４具有上降趋势等甲状腺功能低下现象，而饮水氘试验组与非病区对照组大鼠在饲养期间均正常，说明提高磺缺乏病区饮水氘含是在机体吸碘不足的情况下，能抑制机体机能活性，使代谢减缓，需碘量相对减少，从而使大鼠保持了正常的甲状腺功能。     

全自动免疫发光分析仪对检测hTSH、FT3、FT4的分析与临床应用

目的观察免疫化学发光法检测血清超灵敏促甲状腺素？hTSH？,游离三碘甲状腺原氨酸？FT3？,游离甲状腺素？FT4？之间相关性,并探讨其应用价值。方法对384例临床标本采用微粒子酶免分析法？MEIA法？测定hTSH、FT3和FT4三项技术指标做统计学分析。结果不同甲状腺功能状态下血清三项指标比较甲亢和甲低患者hT-SH、FT3、FT4与正常对照组比较检测结果有显著差异P（0.05。且正常组与病例组之间临床诊断符合率hTSH对甲亢、甲低诊断的灵敏度优于FT3、FT4,其hTSH对正常组符合率为95.0%、甲亢组为90.1%、甲低组为98.8%。结论不同甲状腺功能状态下,三项指标联合测定,对临床提高诊断及分类甲状腺疾病有重要意义。     

高效液相色谱电化学法测定血间甲肾上腺素类物质方法的建立及临床应用

嗜铬细胞瘤是以儿茶酚胺大量分泌为特征的肿瘤。研究发现 ,与儿茶酚胺等测定指标相比较 ,间甲肾上腺素类物质 (MNs)具有更高的敏感性和特异性。本研究用高效液相色谱电化学分析法建立了血MNs的测定方法 ,并对 40名健康人及 2 6名经病理证实的嗜铬细胞瘤患者进行了血MNs的测定 ,MNs水平在嗜铬细胞瘤患者中与临床、病理符合率为 10 0 %。