葡萄籽提取物抑制小鼠移植性乳腺癌生长的实验研究

目的:观察葡萄籽提取物(GSE)对小鼠移植性乳腺癌的抑瘤作用.方法:MTT法检测GSE在体外对小鼠乳腺癌细胞株的生长抑制作用;皮下注射法建立小鼠荷瘤动物模型,灌胃给药,分组为空白对照组、模型组及GSE 50、100 mg/kg组,灌胃给药5次/周,共4周;肿瘤病理切片做HE染色,并做免疫组化检测增殖细胞核抗原的表达情况,TUNEL试剂盒检测肿瘤组织凋亡情况.结果:(1)GSE在体外能抑制小鼠肿瘤细胞的增殖,作用有剂量依赖性(P＜0.05).(2)与模型组相比,50 mg/ kg和100 mg/kg GSE组小鼠的肿瘤抑制率分别为34.78%和68.12%.(3)GSE对模型小鼠肝功能指标有一定改善作用.(4)免疫组化显示,GSE降低肿瘤组织中增殖核抗原PCNA的表达,同时TUNAL法检测肿瘤组织中凋亡细胞发现,GSE诱导肿瘤组织细胞发生凋亡.结论:葡萄籽提取物通过抑制肿瘤增殖和促进肿瘤组织的细胞凋亡而抑制小鼠乳腺癌细胞及荷瘤小鼠肿瘤的生长,且对荷瘤小鼠肝功能有一定的保护作用.     

加热对葡萄籽提取物抗氧化活性的影响

〔英〕/Kim S Y…∥Food Chem.-2006,97(3).-472～479评价了葡萄籽原状和粉末状材料分别在50、100、150、200℃加热后,对其乙醇提取物(GSE)清除自由基活性(RSA)和还原能力的影响。葡萄籽清洗后晒干,取部分加工成均化的微粒状粉末。将葡萄籽和葡萄籽粉分别在50、100、150、200℃     

淡豆豉提取物对乳腺癌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨淡豆豉提取物抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖及其相关的氧化应激机制。方法:用不同剂量(100,200,400,800μg.mL-1)淡豆豉提取物作用于乳腺癌细胞株MCF-7细胞,以MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的变化。结果:低剂量淡豆豉提取物抑制MCF-7细胞增殖,但无凋亡发生,伴随细胞内ROS降低。高浓度淡豆豉提取物作用后细胞增殖抑制率明显增加(P<0.01),细胞出现大量凋亡,并伴随细胞内ROS明显升高。结论:淡豆豉提取物具有剂量依赖的抑制癌细胞增殖作用,不同剂量的淡豆豉提取物通过对乳腺癌细胞内氧应激状态的调节参与了其抗肿瘤细胞增殖作用的机制。     

葡萄籽提取物的质量标准

概述了国际市场上葡萄籽提取物的几种质量标准,综合分析了中国葡萄籽提取物各生产厂家的质量标准情况。鉴于国内还没有葡萄籽提取物质量的国家标准或行业标准,笔者根据多年的葡萄籽提取物研究、生产、出口情况,结合相关文献,提出了建立2种规格质量标准的观点:多酚含量大于95%、单体含量大于10%作为高品质葡萄籽提取物的质量标准;原花青素值大于95、单体含量大于6%作为一般品质葡萄籽提取物的质量标准。     

葡萄籽提取物的质量评价

概述了葡萄籽提取物常规品质的各项指标,着重阐述了国内外对葡萄籽提取物中各成分指标的概念及其相应的含量测定方法。     

中药莪术提取物对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响

目的：观察莪术提取物对体外生长的人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响。方法：采用系统溶剂法初步提取分离莪术不同有效部位,运用CCK8法和生长曲线法观察不同浓度的莪术各提取物对体外培养的MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用,并以流式细胞仪检测其对MDA-MB-231细胞周期的影响。结果：莪术石油醚提取物、莪术乙酸乙酯萃取物和高浓度的莪术水提取对MDA-MB-231细胞生长均有明显抑制作用,莪术石油醚提取物抑制作用最强,其差异有统计学意义（P〈0.05）。经流式细胞仪分析,表阿霉素和莪术的石油醚、乙酸乙酯提取物均可提高体外生长MDA-MB-231细胞G1期细胞比率,降低S期和G2细胞数。结论：莪术石油醚萃取物和乙酸乙酯提取物对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖有明显的抑制作用。     

HPLC测定葡萄籽提取物中原花青素B2的含量

目的:测定不同来源的葡萄籽提取物中原花青素B2的含量。方法:采用高效液相色谱法,ZORBAX SB-C18柱,流动相为乙腈-2%冰醋酸,梯度洗脱,检测波长280nm。结果:原花青素B2在1~30μg/mL范围内,线性关系良好。平均加样回收率为99.29%(n=5),RSD=1.64%。结论:该方法简便、准备、重复性好,可用于测定原花青素B2的含量。     

中药蛇六谷提取物对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响

目的:观察蛇六谷提取物对体外生长的人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响,寻找蛇六谷抗肿瘤的有效部位。方法:采用系统溶剂法初步提取分离蛇六谷不同有效部位,运用CCK8法和生长曲线法观察不同浓度的蛇六谷各提取物对体外培养的MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用,并以流式细胞仪检测其对MDA-MB-231细胞周期的影响。结果:蛇六谷石油醚萃取物、高浓度蛇六谷乙酸乙酯萃取物对MDA-MB-231细胞生长有明显抑制作用,其中蛇六谷石油醚萃取物抑制作用最为明显(P<0.05);经流式细胞仪分析蛇六谷石油醚提取物则将MDA-MB-231细胞阻滞在S期,使得细胞无法完成DNA复制进入G2期。结论:蛇六谷石油醚萃取物可能是该药抗肿瘤的有效部位之一。     

银杏叶及葡萄籽提取物体外抑制蛋白糖化终末产物生成作用的研究

 目的 应用体外蛋白糖化反应系统,确定银杏叶及葡萄籽提取物抑制蛋白糖化终末产物生成的作用。方法 对照组将葡萄糖与牛血清白蛋白分别在STUOX；条件下共同孵育，实验组则加入不同剂量的银杏叶及葡萄籽提取物或氨基胍。利用荧光分光光度计对不同温度和时间培养条件下的样品测定，根据荧光强度确定蛋白糖化终末产物的生成量。结果 在本体外系统中，蛋白糖化终末产物的生成与孵育温度及时间呈正相关。银杏叶提取物及葡萄籽提取物在1.0~2.0 g.L_-1剂量范围内均可有效抑制蛋白糖化终末产物的生成，当药物浓度达2.0 g·L_-1时其抑制作用相当于同剂量的氨基胍。结论 具有明确 抗氧化作用的银杏叶提取物及葡萄籽提取物在体外可有效抑制蛋白糖化终末产物的生成。     

银杏叶提取物对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖及Survivin, TIP30基因表达的影响

探讨银杏叶提取物(EGB)对泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞增殖、凋亡的影响, 并从基因和蛋白水平上分析EGB对Survivin和TIP30基因表达的影响。不同浓度EGB处理体外培养的人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞, 应用MTT法检测细胞增殖;Annexin V/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;RT-PCR和Western blotting分析Survivin, TIP30基因和蛋白的表达。结果发现EGB对ACC-2细胞的体外增殖具有抑制作用, 量效关系显著, 与对照组比较有统计学差异(P <0.01), 半数抑制浓度(IC₅₀)为88 mg·L。经流式细胞仪检测表明, EGB能使ACC-2细胞G₀/G₁期逐渐增加, G₂/M期和S期逐渐减少, 并且随着剂量的增加, ACC-2细胞凋亡率明显增加(P <0.05或P <0.01)。RT-PCR与Western杂交结果一致表明随着EGB浓度的升高, Survivin基因表达明显减少(P <0.01), 而TIP30基因表达则显著提高(P <0.01)。因此, EGB能有效抑制人泪腺腺样囊性癌ACC-2细胞Survivin基因表达, 并促进TIP30的表达, 诱导ACC-2细胞凋亡, 从而抑制肿瘤细胞增殖。该研究为中药成分在肿瘤治疗中的应用提供了一定的理论和实验依据。     

大蒜素逆转人乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药性的研究

[目的]探索大蒜素对人乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药性的逆转作用及调控机制.[方法]以对数生长期人乳腺癌耐顺铂MCF-7/DDP细胞为受试细胞,设空白对照组(DMSO)、大蒜素(20μg/mL)单药组、顺铂(6μg/mL)单药组、联合组(大蒜素20μg/mL+顺铂6μg/mL).药物干预48 h后,噻唑蓝(MTT)染色法...     

龙葵碱对乳腺癌MCF-7细胞微管系统的影响

目的研究龙葵碱对乳腺癌MCF-7细胞微管系统的影响。方法 MTT法检测龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪分析龙葵碱对MCF-7细胞周期的影响以及细胞内α-微管蛋白及微管相关蛋白(MAP-2)的变化。结果龙葵碱对MCF-7细胞的IC50为22.08μg/mL,能够将MCF-7细胞阻滞于S期;能够增加MCF-7细胞内α-微管蛋白和MAP-2的量。结论龙葵碱通过升高MCF-7细胞内的微管蛋白及MAP-2的表达,将MCF-7细胞阻滞于S期,从而抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长。     

Survivin和Ki-67在三阴乳腺癌中的表达及临床意义

目的检测三阴乳腺癌组织（TNBC）中抗凋亡蛋白Survivin和增殖细胞核抗原Ki-67表达情况并探讨其意义。方法采用免疫组化sP法检测56例ER、PR和HER-2均为阴性的TNBC组织和30例癌旁正常乳腺组织Survivin和Ki-67的表迭情况。结果TN-BC组织中Survivin和Ki-67表达定位于细胞核,其表达率分别为62％（34／56）和70％（39／56）,明显高于癌旁正常组织（P〈0．05）;56例TNBC组织中,Survivin和Ki-67蛋白在cTNM分级中Ⅲ级表达率高于Ⅰ＋Ⅱ级（P〈0．05）,Survivin和Ki-67在病理分期Ⅲ＋Ⅳ期的表达率高于Ⅰ～Ⅱ期（P〈0．05）,表达率与腋窝淋巴结转移呈正相关（P〈0．05）,而与年龄无关（P〉0．05）。结论Survivin和Ki-67在TNBC中呈明显高表达,与TNBC的发生、发展和转移密切相关。     

姜黄素抑制乳腺癌细胞株Survivin表达及其增殖的影响

目的:探讨姜黄素对乳腺癌细胞株MCF-7中Survivin表达及其增殖的影响。方法:采用CCK-8法检测姜黄素对MCF-7细胞增殖的影响;real-time PCR、Western blot检测姜黄素作用于MCF-7细胞前后,Survivin在m RNA和蛋白水平的表达。结果:姜黄素可显著抑制乳腺癌细胞株MCF-7的增殖,并呈浓度依赖性,姜黄素处理48小时的IC50值为6.4μM。同时Survivine在基因及蛋白的水平表达均显著降低(P0.05),20μM组较10μM组下降明显(P0.05)。结论:姜黄素可以抑制乳腺癌细胞株MCF-7的增殖,其机制可能与下调Survivin表达相关。     

蓝萼甲素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及细胞周期的影响

目的研究蓝萼甲素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及细胞周期的影响及其作用机制。方法采用MTT法检测蓝萼甲素对MDA-MB-231细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期;Western blotting法检测细胞中cyclin B1、cyclin D1、细胞周期素依赖激酶2(CDK2)、CDK4、p53、p21、p27、组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)、组蛋白H3第4位赖氨酸二甲基化(H3K4me2)、组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化(H3K9me2)蛋白表达水平。结果蓝萼甲素能显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;提高G2/M期细胞比例;上调p53、p21、p27、H3K4me2、H3K9me2蛋白表达水平,下调cyclin B1、cyclin D1、CDK2、CDK4、LSD1蛋白表达水平。结论蓝萼甲素抑制MDA-MB-231细胞增殖,阻滞MDA-MB-231细胞周期于G2/M期,其机制可能与激活p53的表达及调控组蛋白的甲基化作用有关。     

补骨脂酚诱导人乳腺癌MCF-7细胞S期周期阻滞及机制研究

目的研究补骨脂酚对人乳腺癌MCF-7细胞生长抑制作用及其机制。方法采用噻唑蓝法(MTT法)考察补骨脂酚对MCF-7细胞生长的影响;采用流式细胞术检测补骨脂酚处理后细胞周期分布情况及活性氧(ROS)的产生;利用荧光显微镜观察补骨脂酚对MCF-7细胞核的影响;采用蛋白免疫印迹法检测补骨脂酚作用下MCF-7细胞凋亡、周期相关蛋白和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族蛋白的表达;引入ROS清除剂及MAPK家族蛋白抑制剂考察其在补骨脂酚作用下对MCF-7细胞生长抑制率和细胞周期相关蛋白表达的影响。结果补骨脂酚可以呈时间、剂量依赖性抑制MCF-7细胞生长,其抑制作用明显强于阳性药5-氟尿嘧啶。补骨脂酚可诱导MCF-7细胞产生ROS,同时上调p-p53及p21蛋白表达水平,下调细胞周期相关蛋白CDK2和CyclinA2表达水平,进而引起细胞发生S期阻滞。而上述影响可被ROS清除剂Tiron逆转,表明ROS参与补骨脂酚诱导的S期阻滞。加入p38MAPK抑制剂SB203580后,细胞产生的ROS水平降低,表明ROS的产生依赖于p38MAPK途径。结论补骨脂酚抑制MCF-7细胞增殖的作用与其引起细胞发生S期阻滞有关,ROS参与S期阻滞过程。     

Atractylenolide-1 affects glycolysis/gluconeogenesis by downregulating the expression of TPI1 and GPI to inhibit the proliferation and invasion of human triple-negative breast cancer cells

Atractylenolide-1 (AT-1) is a major octanol alkaloid isolated from Atractylodes Rhizoma and is widely used to treat various diseases. However, few reports have addressed the anticancer potential of AT-1, and the underlying molecular mechanisms of its anticancer effects are unclear. This study aimed to assess the effect of AT-1 on triple-negative breast cancer (TNBC) cell proliferation and migration and explore its potential molecular mechanisms. Cell invasion assays confirmed that the number of migrating cells decreased after AT-1 treatment. Colony formation assays showed that AT-1 treatment impaired the ability of MDA-MB-231 cells to form colonies. AT-1 inhibited the expression of p-p38, p-ERK, and p-AKT in MDA-MB-231 cells, significantly downregulated the proliferation of anti-apoptosis-related proteins CDK1, CCND1, and Bcl2, and up-regulated pro-apoptotic proteins Bak, caspase 3, and caspase 9. The gas chromatography–mass spectroscopy results showed that AT-1 downregulated the metabolism-related genes TPI1 and GPI through the glycolysis/gluconeogenesis pathway and inhibited tumor growth in vivo. AT-1 affected glycolysis/gluconeogenesis by downregulating the expression of TPI1 and GPI, inhibiting the proliferation, migration, and invasion of (TNBC) MDA-MB-231 cells and suppressing tumor growth in vivo.     

雷公藤内酯醇单独及与华蟾素联合对人乳腺癌MCF-7细胞生长影响的实验研究

目的观察雷公藤内酯醇和华蟾素对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响。方法利用台盼蓝计数以及MTT法检测该药物对肿瘤细胞的抑制作用。结果雷公藤内酯醇在75~150 mg/L的剂量下可以对MCF-7细胞的生长产生明显的抑制作用;华蟾素在0.4 g/mL0、.2 g/mL的剂量下可对MCF-7细胞的生长产生明显的抑制作用;雷公藤内酯醇(75 mg/L)和华蟾素(0.2 g/mL)联合作用也可以对MCF-7细胞的生长产生明显的抑制作用;两者均有明显的时间依耐性。结论雷公藤内酯醇和华蟾素单独应用或者联合作用均可对乳腺癌细胞MCF-7的增殖产生抑制作用。     

益气活血方对乳腺癌MCF-7细胞系增殖侵袭能力及miR-100表达水平影响的研究

目的:探讨益气活血方对乳腺癌MCF-7细胞系增殖侵袭能力及microRNA-100(miR-100)表达水平的影响。方法:取对数生长期的MCF-7乳腺癌细胞,将益气活血方以培养液稀释调整为20、40、80 mg/L培养细胞,设置高、中和低浓度组,并以不含药物的相同培养液培养细胞为对照组。分别采用qRT-PCR检测miR-100的表达水平; MTT法检测细胞增殖; Transwell小室法检测细胞侵袭; 并采用Western blot法检测细胞增殖相关蛋白特异性周期蛋白D1(Cyclin D1)和侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平。结果:与对照组相比,实验组miR-100表达水平升高; 且与较低浓度组相比,较高浓度组miR-100表达水平亦呈上升趋势(均P<0.05)。与对照组相比,实验组细胞增殖抑制率和侵袭抑制率明显升高,且与较低浓度组相比,较高浓度组各抑制率均亦呈上升趋势(均P<0.05)。同时,与对照组相比,实验组Cyclin D1和MMP-9蛋白表达水平明显降低,且与较低浓度组相比,较高浓度组Cyclin D1和MMP-9蛋白表达水平亦呈下降趋势(均P<0.05)。结论:益气活血方可抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭。其机制可能与益气活血方可提高miR-100表达水平、降低Cyclin D1和MMP-9表达水平相关。