姜黄素对人QBC939细胞生长抑制与凋亡的影响

目的 :研究姜黄素 (Curcumin)对人胆管癌细胞系QBC939的生长抑制与促凋亡作用。方法 :采用MTT法检测姜黄素对胆管癌细胞的抑制作用 ;相差显微镜 ,电镜下观察细胞形态变化 ;琼脂糖凝胶电泳测定DNALadder ;流式细胞术分析DNA含量。结果 :1,2 ,4 ,8,和 16mg·L-1姜黄素均能抑制人胆管癌细胞QBC939的生长 ,且抑制率具有浓度和时间依赖性 ,IC50 为 5 6mg·L-1。 8mg·L-1姜黄素作用后 ,QBC939细胞出现典型的凋亡形态特征 ,DNALadder出现 ,并检测到亚二倍体凋亡峰。结论 :Curcumin能有效地抑制QBC939细胞生长并促进其凋亡。     

细胞外ATP对U87胶质瘤细胞生长和侵袭的作用

目的观察细胞外三磷酸腺苷(adenosine Triphosphate,ATP)对体外培养的U87人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法采用MTT法检测不同浓度细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖的影响;以相同条件下不加ATP作为对照组,以加入100μmol/L ATP作为处理组,采用Transwell细胞侵袭实验检测100μmol/L细胞外ATP对U87胶质瘤细胞侵袭能力的影响;用时间显微镜动态观察100μmol/L的ATP作用下U87胶质瘤细胞的迁移情况。结果高浓度(5 000μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖有显著抑制作用,较低浓度(50、100、500μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖无明显影响,5 000μmol/L ATP组与其他浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验中,处理组细胞跨膜细胞数为(163.83±17.81)明显多于对照组(89.83±13.27)(P<0.01);迁移实验中,处理组细胞运动速度为(163.83±17.81)μm/h,对照组细胞运动速度为(89.83±13.27)μm/h,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 100μmol/L的细胞外ATP对体外培养的U87胶质瘤细胞的侵袭和迁移具有明显促进作用。     

2－甲氧基雌二醇诱导胶质瘤细胞凋亡及机制的研究

目的探讨2－甲氧基雌二醇（2ME）对体外培养的U251胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法将不同浓度的2ME作用于U251不同时间,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测2ME对U251细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果2ME可抑制U251细胞的活性并诱导其凋亡,且在一定范围内呈剂量和时间依赖性,作用组与对照组之间的差异有统计学意义（P〈0．05）。细胞周期检测发现作用组Go／G1及S期细胞减少,G2／M期细胞增多,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论2ME可抑制U251胶质瘤细胞的增殖并诱导其凋亡。     

银杏提取物(GBE)对人胶质瘤U251细胞增殖凋亡的影响

目的观察利用银杏提取物对人脑胶质瘤U251细胞增殖与凋亡的影响。方法将传代的U251细胞随机分为四组,A组加培养液,B、C、D组分别加浓度为50mg/ml、100mg/ml、200mg/ml的银杏叶提取物;观察倒置显微镜下TrypanBlue染色后各组U251脑胶质瘤细胞形态,用MTT法测算U251细胞增殖率,用流式细胞仪检测U251细胞凋亡率。结果 B、C、D组细胞增殖指数逐渐下降,与A组比较,P均<0.05;A、B、C、D组细胞凋亡率分别为0.3%±0.3%、10.6%±1.7%、21.9%±4.3%、33.5%±2.1%。B、C、D组与A组比较,P均<0.05。结论银杏叶(GBE)可抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖,并诱导其凋亡。     

白藜芦醇抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖及诱导其凋亡的实验研究

目的研究白藜芦醇对人脑胶质瘤细胞U251细胞生长抑制及诱导细胞凋亡的作用。方法采用MTT法检测白藜芦醇对U251细胞的增殖活性的影响,采用流式细胞仪检测白藜芦醇对U251细胞早期、晚期凋亡率的影响,用倒置显微镜观察不同浓度的白藜芦醇作用后U251细胞的形态学改变。结果白藜芦醇对U251脑胶质瘤生长有抑制作用,且具时间及剂量依赖性;白藜芦醇能诱导U251细胞早、晚期凋亡,且具时间及剂量依赖性。结论白藜芦醇能抑制U251脑胶质瘤的增殖并能诱导细胞凋亡。     

姜黄素纳米微粒对体外胃癌MGC803细胞凋亡机制的影响

目的观察姜黄素纳米微粒对人胃癌MGC803细胞凋亡机制的影响。方法 MTT法建立细胞剂量效应曲线,光镜和电镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪分析MGC803细胞周期改变,免疫组化法检测凋亡相关Bcl-2蛋白表达。结果 MTT法显示,姜黄素纳米微粒抑制胃癌MGC803细胞增殖,呈现剂量-时间依赖性;光镜观察姜黄素纳米微粒组细胞损伤较轻,电镜下核周隙清晰,突触小泡较多;流式细胞仪法显示,姜黄素纳米微粒使胃癌MGC803细胞阻滞于G2/M期;免疫组织化学法显示,姜黄素纳米微粒使凋亡相关Bcl-2蛋白表达下调。结论姜黄素纳米微粒诱导人胃癌细胞MGC803凋亡并且延长药物对胃癌MGC803细胞作用时间。     

姜黄素对人肝星状细胞形态学的影响

目的:观察姜黄素对人肝星状细胞LX-2形态学的影响.方法:通过HE染色及丫啶橙荧光染色观察LX-2细胞经0(对照)、10、20、30、40及50/umol/L的姜黄素作用12 h后的形态学变化.结果:①倒置显微镜下可见对照组细胞呈成纤维细胞样表型,而姜黄素组细胞数变少,细胞变小,形态向椭圆形或圆形改变,胞质浓缩,且随姜黄素浓度的增加变化更加明显.②HE染色光镜下观察显示,姜黄素组凋亡细胞增加,表现为胞体缩小、变圆,胞核固缩、碎裂,染色体被染成蓝黑色.③丫啶橙染色激光共聚焦显微镜下可见明显的凋亡细胞的多种形态改变,凋亡小体清晰可见.结论:经姜黄素作用人肝星状细胞可出现明显的增殖受抑、细胞凋亡的形态学改变.     

姜黄素对人膀胱癌T24细胞凋亡的影响

日的探讨姜黄素对人膀胱癌T24细胞凋亡的影响。方法培养人膀胱癌T24细胞,施加不同浓度姜黄素,观察对细胞凋亡的影响;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率（碘化丙啶染色）。结果姜黄素各组较对照组凋亡率升高,存在剂量-效应关系。结论姜黄素促进人膀胱癌T24细胞凋亡。     

细胞表面ATP合酶的研究进展

在细胞能量转变过程中,线粒体ATP合酶是一个关键酶.一般认为ATP合酶严格定位于线粒体膜上.但迄今已发现,该酶还在新生血管内皮细胞膜、某些类型的肿瘤细胞膜和脂肪细胞等细胞的膜上分布,而在正常细胞上却没有.利用细胞膜上存在ATP合酶的这个特性,已进行了许多血管形成、肿瘤抑制和脂类代谢等方面的功能研究,对该现象的机制也进行了初步地阐释.该文将对现有的研究结果作一综述.     

Kir 4.1基因沉默对U-251细胞周期的影响

目的:针对人内向整流性钾离子通道(inwardly rectifying potassium channel protein,Kir)4.1基因构建si RNA干扰载体,探讨其对U-251细胞增殖、生长的影响,为临床治疗及开发新的抗肿瘤药物提供实验依据。方法:采用细胞培养、质粒转染、流式分选、RT-PCR、Western blot及流式细胞仪对构建的质粒进行鉴定并观察对照组和干扰组细胞周期的变化。结果:对DH5α中抽提的重组载体测序验证结果和插入序列一致;成功筛选出一个有效质粒;质粒转染U-251细胞后,细胞周期中的G2期细胞数量由19.39%降至1.5%,明显减少(P=0.018),S期细胞数量由36.32%升至51.22%,明显增多(P=0.027)。结论:成功构建针对人Kir 4.1基因的si RNA干扰载体;Kir 4.1干扰载体可能是通过抑制U-251细胞周期中的G2期,使U-251细胞的生长停滞在S期,从而达到干扰U-251细胞的增殖能力。     

姜黄素诱导肝星状细胞凋亡的初步研究

目的　观察姜黄素对体外培养肝星状细胞凋亡的影响。方法　体外培养肝星状细胞株HSC -T6 ,流式细胞仪、透射电镜和琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡的改变。结果　在 2 0 ,4 0 ,6 0 μmol/L 姜黄素培养 2 4h后 ,①流式细胞术检测到明显的亚G1峰 ,各组的凋亡指数 (% )分别是 15 3± 1 88,2 6 7± 2 79,37 6± 4 38,与对照组(1 9± 0 6 4 )相比 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;②透射电镜观察到细胞皱缩、核染色质浓缩沿核膜排列和凋亡小体形成等细胞凋亡特征性的改变 ;③琼脂糖凝胶电泳可以见到明显的DNA梯度带形成。以 4 0 μmol/L 姜黄素作用 12 ,2 4 ,36 ,4 8h ,流式细胞仪检测各组的凋亡指数 (% )分别是 12 0± 2 35 ,2 6 7± 3 4 7,33 8± 1 78和 4 9 3± 1 5 6 ,与对照组相比差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　姜黄素可以诱导HSC凋亡 ,其作用具有剂量和时间依赖性     

姜黄素对Jurkat细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对Jurkat细胞增殖及凋亡的影响。方法:体外培养条件下,用姜黄素处理Jurkat细胞12h后,MTT法检测细胞的生存率和IC50值;Hoechst33342染色观察细胞凋亡的形态变化;流式细胞学检测细胞凋亡率。结果:体外培养条件下,姜黄素对Jurkat细胞的增殖有明显抑制作用,呈剂量依赖性,IC50值为31μmol/L。激光共聚焦扫描显微镜观察,随着姜黄素浓度的增加,Jurkat细胞凋亡增多。流式细胞学分析表明,低浓度姜黄素使Jurkat细胞发生早期凋亡,高浓度姜黄素使Jurkat细胞出现晚期凋亡。结论:姜黄素明显抑制Jurkat细胞增殖,同时诱导Jurkat细胞发生凋亡。     

姜黄素对宫颈癌Caski细胞中Pleiotrophin蛋白表达的影响

目的:研究姜黄素(Curcumin)对宫颈癌Caski细胞的增殖及原癌基因(Pleiotrophin,PTN)表达的影响.方法:MTT法检测不同浓度的姜黄素对Caski细胞增殖的影响;免疫细胞化学染色观察经姜黄素处理组和未处理组细胞中PTN表达的差别;免疫印迹Western blotting技术检测不同浓度的姜黄素对Caski细胞中PTN表达的影响.结果:姜黄素能抑制Caski细胞的增殖,并且这种抑制作用呈剂量依赖性.免疫细胞化学结果显示PTN在实验组中的表达显著低于对照组.Western blotting检测结果显示姜黄素抑制PTN的表达,并且对PTN表达的抑制程度依赖于姜黄素的浓度.结论:姜黄素能抑制宫颈癌Caski细胞的增殖及PTN表达,这种对PTN表达的抑制可能是其抗肿瘤作用机制之一.     

尼莫地平对胶质瘤U251 MG细胞生长的影响

目的:研究钙通道阻滞剂尼莫地平(ND)对人脑多形性胶质母细胞瘤U251MG细胞生长的影响.方法:将U251MG细胞配成1×105ml-1的细胞悬液,接种孵育24 h,细胞贴壁后吸除原培养基,分别加入含不同浓度rhT-GF-α(12.5 pg/L、25.0 pg/L、50.0 pg/L)、不同浓度ND(1.0×106mol/L、1.0×10-5mol/L、1.0×10-4mol/L)加rhTGF-α(12.5 pg/L)的无血清DMEM继续孵育3 d.然后MTT法测定各组细胞的生长情况.以体积分数10%小牛血清为对照.结果:rhTGF-α对U251MG细胞有促生长增殖作用,且该作用呈一定的量-效依赖关系.不同浓度ND加12.5 pg/L rhTGF-α联合作用后,细胞生长受抑,且抑制作用随ND浓度的增加而增强.结论:尼莫地平可能通过抑制细胞钙离子的内流与释放,阻断rhTGF-α对肿瘤细胞的生长刺激效应,从而抑制了肿瘤细胞生长增殖.     

姜黄素对乳腺癌细胞顺铂敏感性的影响

目的 探讨姜黄素(curcumin)对乳腺癌细胞中顺铂(Cisplatin,CDDP)治疗敏感性的影响及其可能机制.方法 CCK-8检测、Hoechst染色观察CDDP、姜黄素单独及联合用药48 h对MCF7细胞增殖抑制和细胞凋亡的影响;Western blot分析MCF7细胞在CDDP(0、1.25、2.5、5、10、20 μg/mL)、姜黄素(0、1、5、20、30、50、100 μmol/L)单独及联合处理后FEN1(flap endonuclease 1)表达水平的变化;CCK-8检测沉默FEN1对MCF7细胞中CDDP敏感性的影响.结果 CDDP、姜黄素均可以剂量依赖方式抑制MCF7细胞增殖,其IC50分别为5、30 μmol/L;与单独2μg/mLCDDP处理组比较,2μg/mL CDDP联合20-μmol/L姜黄素、30 μmol/L姜黄素处理组对细胞增殖的抑制效应明显增强[分别为(84.1±0.8)％、(51.1±0.5)％、(29.4±0.3)％,P＜0.05];与单独20μmol/L姜黄素处理组比较,20 μmol/L姜黄素联合2μg/mL CDDP、5μg/mL CDDP处理组对细胞增殖的抑制效应也明显增强[分别为(76.9±0.7)％、(42.4±0.3)％、(31.6±0.4)％,P＜0.05];2μg/mL CDDP联合20 μmol/L姜黄素组的细胞凋亡明显增强(P＜0.05);与Control siRNA组比较,FEN1 siRNA+CDDP组可显著增强CDDP抑制MCF7细胞增殖的敏感性[(25.4±0.3)％vs(18.7±0.2)％,P＜0.05];CDDP增殖抑制无效浓度或低浓度时,FEN1蛋白的表达随CDDP的处理剂量依赖性上调,而姜黄素可剂量依赖性下调FEN1蛋白表达;与单独CDDP和姜黄素处理组比较,2μg/mL CDDP联合20 μmol/L姜黄素组可显著降低FEN1蛋白表达(P＜0.05).结论 姜黄素可增强CDDP对乳腺癌细胞的敏感性,其机制与降低细胞FEN1的表达有关.     

姜黄素对膀胱肿瘤细胞组织蛋白酶D表达的影响

目的探讨中药姜黄素对膀胱肿瘤细胞(T24细胞株)细胞凋亡发生及组织蛋白酶D表达的影响。方法以体外培养T24细胞为研究对象,姜黄素组加入终浓度为1、10、100μmol/L的姜黄素,对照组不加姜黄素,MTT法、TUNEL染色、逆转录-PCR、免疫印迹及图像分析技术检测12、24、48h后各组细胞活性、凋亡发生、组织蛋白酶D转录水平及蛋白表达变化。结果姜黄素组T24细胞生长抑制率随姜黄素浓度增加显著上升,细胞凋亡发生显著升高,组织蛋白酶D蛋白活性及转录水平显著降低。结论姜黄素能抑制T24细胞组织蛋白酶D的转录和蛋白活性。     

DADS对人骨肉瘤细胞U-20S生物学活性的影响

目的：探讨二烯丙基二硫(DADS)对人骨肉瘤细胞U-20S生物学活性的影响。方法将人骨肉瘤U-20S细胞随机分为DADS处理组与空白组,DADS处理组又分为15 mg/L、30 mg/L、60 mg/L、120 mg/L 4个不同浓度小组,每组分别作用于U-20S细胞24 h、48 h、72 h后进行相关检测,每组实验重复3次。采用MTT比色法测量不同的吸光值以检测DADS对人骨肉瘤细胞U-20S的抑制作用;Annexin V-FITC/PI染色法及流式细胞术检测骨肉瘤细胞凋亡率及细胞周期变化情况;Transwell侵袭实验通过计量同一视野下细胞数量以检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果 MTT比色法结果显示,浓度为60 mg/L DADS处理组作用于U-20S细胞24 h后其吸光值比对照组低(P<0.05)。随着浓度的增加,DADS对骨肉瘤细胞抑制作用无明显增强,表明DADS对骨肉瘤细胞有抑制作用,但并不呈剂量-效应依赖关系;染色法及流式细胞术结果显示,60 mg/L DADS作用于U-20S细胞24 h凋亡率为15.89%,高于空白组细胞的8.65%;60 mg/L DADS作用于U-20S细胞24 h,G2/M期的细胞为10.44%,高于空白组G2/M期的细胞8.18%(P<0.05);侵袭试验结果显示,DADS处理组细胞计数为(63±2)个,较空白组细胞计数(104±3)个显著减少(P<0.05),表明DADS处理组能抑制细胞侵袭能力;细胞划痕试验结果显示,60 mg/L DADS处理组细胞划痕之间的距离大于空白组,以作用48 h抑制作用最为显著(P<0.05),表明DADS (浓度为60 mg/L)能抑制U-20S细胞的迁移,并且随着时间的增加,48 h抑制作用更加显著。结论 DADS能抑制骨肉瘤细胞株U-20S增殖,诱导细胞凋亡,抑制细胞的侵袭和转移。     

姜黄素改变端粒酶活性对肝癌细胞体外增殖的影响

目的 观察姜黄素对人肝癌细胞株HepG2体外增殖和端粒酶活性的影响，为彰明其抗肝癌机制提供依据。方法 四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验检测细胞生长抑制率；流式细胞法检测细胞周期的分布；端粒片断重复扩增-酶联免疫吸附法（TRAP-ELISA）测定细胞端粒活性的变化；并用RT—PCR法检测细胞端粒酶hTERT—mRNA的表达。结果 姜黄素对HepG2细胞生长有显著的抑制作用，并呈明显的量效依赖性；不同浓度的姜黄素使G2／M期细胞比例明显增加，G1期／细胞比例明显降低；随姜黄素浓度的增加，HepG2细胞端粒酶活性依次下降；不同浓度提取物对HepG2细胞的hTERT—mRNA表达均有明显抑制作用，具有显著的量效关系。结论 姜黄素对HepG2细胞有明显的生长抑制作用，可能作用机制为诱导细胞周期G2／M期阻滞并抑制HepG2细胞端粒酶hTERT-mILNA的转录，从而降低端粒酶的活性。     

抑制Pygo2表达对U251细胞增殖的影响

目的 构建RNA干扰(RNAi)重组体抑制Pygo2的表达,并探讨其对脑胶质瘤U251细胞增殖的影响.方法 针对Pygo2 cDNA序列设计并合成一对特异性的含有"短发卡"的寡核苷酸序列及其随机对照序列,经退火后插入pSuper中构建重组体.经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定和DNA测序后,用脂质体2000将其转染脑胶...