免疫共刺激分子CD40在肿瘤临床治疗中的应用

共刺激分子CD40/TNFRSF5隶属肿瘤坏死因子受体超家族,在机体固有免疫应答及适应性免疫应答中均发挥关键作用.CD40生理性表达于专职性抗原提呈细胞、内皮细胞等细胞表面,是T细胞表面CD40L分子的天然糖蛋白受体.CD40-CD40L信号通路的激活参与T淋巴细胞活化、抗体类别转换、抗原提呈细胞激活等一系列免疫相关生物学过程.除免疫细胞等生理性表达外,CD40在血源性及上皮源性恶性肿瘤细胞表面亦存在表达,并通过直接影响肿瘤细胞或间接干预肿瘤微环境参与肿瘤的发生、发展.大量研究表明,CD40激动型抗体可能通过激活宿主抗肿瘤免疫应答或直接促进CD40肿瘤细胞凋亡等途径正向干预实体肿瘤进展,提示CD40可能作为有效的肿瘤免疫治疗靶点.现对CD40分子在肿瘤发生、发展中的生物学作用及CD40-CD40L通路在肿瘤免疫治疗中的应用进展及存在问题予以综述.     

CD40单克隆抗体的制备、筛选及功能鉴定

CD40是肿瘤坏死因子受体超家族成员之一,属于Ⅰ型跨膜糖蛋白,其自然配体是CD40L。CD40-CD40L信号通路在许多重要的生理和病理过程中都起到关键的调节作用。基于其在激活免疫应答中的重要作用,在肿瘤免疫治疗中,具有激活CD40-CD40L信号的CD40激动剂抗体可用于提高抗肿瘤免疫应答;在移植排斥和炎症反应中,CD40-CD40L信号也起重要作用,阻断CD40信号通路是目前治疗风湿性关节炎、肠炎、系统性红斑狼疮、多发性硬化和糖尿病的一个重要靶点。制备CD40阻断性抗体或激动剂抗体不仅可用于检测CD40分子表达,还可以开发用于炎症性疾病或肿瘤治疗的免疫疗法。本研究表达CD40胞外段蛋白,通过免疫制备14株CD40单克隆抗体,筛选发现全部可作为western blotting检测CD40蛋白表达的抗体,9株CD40抗体可作为一抗用于流式细胞术检测人CD40表达,1株CD40抗体能阻断人CD40L和CD40相互作用。有意义的是,8株CD40抗体能激活人CD40分子信号通路,另外有10株能激活小鼠脾脏细胞CD40下游基因的表达,7株能上调小鼠脾脏B细胞表面共刺激分子CD86的表达。本研究制备一系列CD40抗体,可用于CD40检测、CD40信号的阻断或激活。     

单核/巨噬细胞表达CD40和CD40L及其在疾病中的作用

单核/巨噬细胞具有重要的生物学功能,参与机体非特异性免疫防御、特异性免疫应答和免疫调节。单核细胞表达CD40和CD40L,其在单核/巨噬细胞的功能中发挥重要的作用。CD40系统是细胞间重要的信号传导途径,通过相互作用可以促进各种细胞因子、趋化因子、金属基质蛋白酶产生、一氧化氮分泌,促使细胞逃逸凋亡、促进单核细胞分化为树突细胞等。单核细胞上异常表达CD40/CD40L在肾脏疾病、自身免疫性疾病、败血症和心血管疾病等发生发展中起重要作用。     

CD137/CD137L在抗病毒免疫中作用的研究进展

病毒持续感染常导致抗原特异性T细胞功能损害,病毒则可逃避免疫监视以致不能被清除.CD137/CD137L是除CD28/B7以外另一对具有多种活性的T细胞共刺激分子,在抗病毒免疫中有重要调节功能,尤其对增强和维持CD8+T细胞应答起关键作用.近年研究表明,CD137/CD137L在抗病毒免疫治疗中具有潜在的临床应用价值.     

CD40和CD40L与肿瘤关系的研究进展

CD40和CD40L在组织中的表达水平以及CD40与CD40L间的结合反应对启动体液和细胞免疫应答起着重要作用；CD40的持续表达和CD40L的表达缺失可能与肿瘤的发生以及肿瘤的免疫逃逸相关；将CD40L基因转染肿瘤细胞可使表达CD40肿瘤细胞的抗原提呈功能增强，使机体产生肿瘤细胞特异性CTL反应，达到治疗肿瘤的目的。本文对CD40和CD40L在肿瘤发生发展机制和治疗方面的研究进展作一综述。     

单核／巨噬细胞表达CD40和CD40L及其在疾病中的作用

单核，巨噬细胞具有重要的生物学功能，参与机体非特异性免疫防御、特异性免疫应答和免疫调节。单核细胞表达CD40和CD40L，其在单核，巨噬细胞的功能中发挥重要的作用。CD40系统是细胞间重要的信号传导途径，通过相互作用可以促进各种细胞因子、趋化因子、金属基质蛋白酶产生、一氧化氮分泌，促使细胞逃逸凋亡、促进单核细胞分化为树突细胞等。单核细胞上异常表达CD40，CD40L在肾脏疾病、自身免疫性疾病、败血症和心血管疾病等发生发展中起重要作用。     

TRAFs与CD40分子的信号转导

CD4 0与其相应配体CD4 0L的相互作用在机体的B细胞免疫、T细胞免疫、肿瘤免疫以及移植免疫中发挥极其重要的作用 ,但其作用机制至今尚未阐明。CD4 0mAb和CD4 0L可分别使CD4 0膜分子产生交联和配基化 ,进而使CD4 0分子多聚化 ,CD4 0分子多聚化是CD4 0信号转导的结构基础和始动因素。新近发现的肿瘤坏死因子受体相关因子 (tumornecrosisfactorreceptor associatedfactors,TRAFs)家族是一组连接CD4 0胞浆结构域与下游信号转导分子的接头蛋白 (adaptors) ,TRAFs分子可以与CD4 0胞浆段不同的结构域结合 ,分别或共同活化相同或不同的下游分子从而介导CD4 0分子的不同信号通路 ,产生广泛而复杂的生物效应。如核转录因子KappaB(NF κB)、丝裂原激活的蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinases MAPK)家族JNK ,ERK和P38的激活等 ;故TRAFs是介导CD4 0分子信号转导的中心分子     

大鼠移植慢性排斥组织中CD40和CD40L表达研究

目的：观察大鼠移植肾慢性排斥肾组织中CD40／40L的原位表达特点。以期阐明CD40／CD40L共刺激通路在移植肾脏慢性排斥反应中的作用。方法：共分3个实验组：即同种异体移植不用药对照组、用品系移植组、同种异体移植CSA治疗组。用SP免疫组织化学方法对移植肾脏组织CD40／CD40L表达进行观察，并结合肾间质中浸润的炎性细胞CD3^ 和CD68^ 细胞数进行分析。结果：慢性排斥肾组织中CD40／CD40L表达分布不同，间质淋巴细胞以表达CD40为主，CD40L表达肾实质细胞表达为主。慢性排斥移植肾组织间质CD40^ 细胞数与CD3^ 、CD68^ 细胞数密切相关；CD40L^ 细胞数与CD3^ 细胞数呈正相关，与CD68^ 细胞数无相关性.结论：CD40／CD40L共刺激通路可能在移植肾慢性排斥的发生、发展过程中起重要作用。     

CD154-CD40的相互作用对寄生虫免疫应答的调节

CD40是一个完整的I型膜糖蛋白, 属TNF受体超家族的成员, 主要表达于抗原提呈细胞 (APC)上。CD154是CD40的配体, 为二型跨膜糖蛋白, 属TNF超家族成员, 主要表达于活化的CD4 T细胞。CD154 CD40的相互作用可以调节Th1 /Th2型免疫应答。最近的研究显示CD40 CD154的相互作用在调节宿主对寄生虫感染免疫中起着重要的作用。尤其是CD40缺陷和CD154缺陷小鼠以及拮抗性抗体的应用为研究CD40 /CD154在各种疾病中的作用提供了可能。揭示了机体对不同病原体产生合适免疫应答的过程中CD40 /CD154的重要作用。本文主要是概述CD154 C…     

CD40分子在树突状细胞中的信号转导通路

树突状细胞 (DC )作为体内功能最强的抗原提呈细胞 (APC ) ,是启动机体免疫应答的中心环节[1] 。未成熟DC定居在外周组织 ,具有极强的捕获抗原能力 ,通过多种方式捕获入侵的病原体、损伤或恶变的组织后迁移至淋巴结 ,将加工过的抗原以MHC 抗原肽的形式提呈给T细胞启动机体免疫应答。在此过程中 ,DC逐渐发育成熟 ,伴随着膜表面黏附分子表达的变化以及MHCII类分子和共刺激分子如CD4 0、OX4 0L、CD80、CD86表达的上调。然而 ,DC抗原提呈功能的完全成熟需要T细胞提供的共刺激信号 ,其中CD4 0相关的信号通路在此过程中发挥了重要作用     

CD95/CD95L信号分子介导的细胞凋亡和非凋亡研究进展

CD95/CD95L系统是诱导细胞凋亡的重要途径,在人体自身耐受机制、诱导活化细胞凋亡、控制免疫应答和参与免疫豁免中均起重要的作用。然而近年来新的研究发现CD95/CD95L不仅能够诱导细胞凋亡还可促发多重信号通路抑制细胞凋亡,其表     

CD40/CD40L交联在CD4+T细胞诱导肿瘤细胞凋亡中的机制研究

目的探讨CD40/CD40L交联在CIK细胞中CD4 T细胞(CD4 CIK)诱导肿瘤细胞凋亡中的作用机制.方法体外扩增CIK细胞并纯化CD4 T细胞亚群,AnnexinV染色法观察CD4 CIK诱导肿瘤细胞凋亡的作用;半定量PCR、流式细胞法及ELISA法比较CD4 CIK激活前后CD40L的表达变化;将转染质粒pIRES2-EGFP-sCD40L的CHO细胞(CHO-sCD40L)与乳腺癌细胞T47D共孵育,监测24小时后其表面分子Fas的表达变化及对Fas介导凋亡的敏感性.结果CD4 CIK细胞可诱导肿瘤细胞凋亡,凋亡率随孵育时间和效靶比的升高而增加,且肿瘤细胞表面分子Fas水平升高,可从1.98%±0.23%升高到31.62%±7.07%;CD4 CIK细胞被激活后,CD40L表达水平均较激活前明显增加;成功转染的CHO-sCD40L细胞与T47D共培养后,T47D表面分子Fas可被诱导升高,加入CH-11 24小时后可观察到明显T47D细胞的凋亡.结论CD4 CIK可能通过CD40/CD40L交联提升肿瘤细胞表面功能性Fas表达来诱导其凋亡.     

树突状细胞在HCV感染中的作用研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)感染慢性化的机制还不十分清楚,其中T细胞抗病毒免疫应答减弱和多种负性调节因子(受体)的作用增强,以及抗原提呈细胞的功能障碍可能是抗病毒免疫应答下调的基础,而树突状细胞(DC)作为最有效的抗原提呈细胞,其功能障碍可能在HCV特异性T细胞应答和病毒持续感染中扮演了重要角色。本文中对DC的功能及其在HCV感染者中的作用予以综述。     

CD14参与固有免疫应答抵御感染的研究进展

CD14是一种糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白,作为细胞表面和内体中Toll样受体(TLR)的辅受体,在细菌、病毒、真菌等感染过程中具有关键作用。CD14主要通过髓样分化因子88(My D88)依赖型信号通路、β干扰素诱导的含TIR结构域接头蛋白(TRIF)依赖型信号通路、Ca2+/活化T细胞核因子(NFAT)信号通路参与机体固有免疫应答。CD14与多种疾病相关,在宿主抵御感染中具有双重作用。如在实验性脓毒症中,抑制CD14具有保护作用,但在肠道感染模型中,抑制CD14增加组织损伤。本文主要围绕CD14表达调控及其参与机体固有免疫应答抵御感染中的信号转导机制进行综述。     

CD1限制性T细胞

在检测感染递呈抗原的细胞浆质时,CD1分子能与外来的脂类抗原结合。与T细胞识别CD1限制性外来脂质不同,CD1限制性T细胞具有自身抗原反应功能,作为自身效应器它可快速被激活,在CD1表达的递呈抗原细胞之间起到辅助和效应器功能。CD1限制性T细胞亚群及其通路之间功能上的差异表现在这些细胞既能影响树突状细胞(DC)的功能和耐受作用,同时还能激活自然杀伤(NK)细胞和其它淋巴细胞,从而揭示了CD1限制性T细胞如何调节抗微生物应答、抗肿瘤免疫和平衡免疫耐受、自身免疫。     

淋巴细胞表面CD40分子的表达和作用

CD40和CD40L(CD40 ligand,CD154)都属于肿瘤超家族成员。CD40-CD40L(CD40 ligand,CD154)的相互作用一直是与APC和T细胞的活化相关联,并且在肿瘤免疫、自身免疫性疾病、炎症反应等中起重要的作用。目前,有研究发现,CD40不仅表达在APC、内皮细胞以及某些肿瘤细胞上,也会在T细胞中有表达。CD40+CD8T细胞的研究主要集中在细胞信号通路和过继免疫治疗方面,CD40+CD4T细胞主要集中在自身免疫性疾病的研究。本文将对CD40在T细胞表面的表达及其作用做一综述。     

CD1限制性T细胞

在检测感染递呈抗原的细胞浆质时，CD1分子能与外来的脂类抗原结合。与T细胞识别CD1限制性外来脂质不同，CD1限制性T细胞具有自身抗原反应功能，作为自身效应器它可快速被激活，在CD1表达的递呈抗原细胞之间起到辅助和效应器功能。CD1l限制性T细胞亚群及其通路之间功能上的差异表现在这些细胞既能影响树突状细胞(DC)的功能和耐受作用，同时还能激活自然杀伤(NK)细胞和其它淋巴细胞，从而揭示了CD1限制性T细胞如何调节抗微生物应答、抗肿瘤免疫和平衡免疫耐受、自身免疫。     

CD40 RNA干扰小鼠树突状细胞抑制异系T淋巴细胞增殖的研究

目的 构建针对小鼠CD40基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,制备低表达CD40的树突状细胞(dendritic cells,DC),探讨其阻断CD40/CD40L共刺激通路诱导异系T淋巴细胞无反应的作用机制.方法 采用培养基选择法体外培养小鼠骨髓源DC,构建针对小鼠CD40 RNAi慢病毒载体,体外感染小鼠骨髓源DC.荧光实时定量PCR及流式细胞术检测感染前后CD40 mRNA及DC表面抗原CD40表达.混合淋巴细胞培养观察CD40 RNAi慢病毒感染DC对异系T淋巴细胞增殖能力的影响.结果 体外培养可获得成熟的小鼠骨髓源DC.成功构建小鼠CD40RNAi慢病毒载体,检测滴度为8×10~9 TU/ml.慢病毒感染DC后与感染前相比,明显抑制CD40mRNA的表达(P<0.05),CD40蛋白表达也明显减少(P<0.05).混合淋巴细胞培养结果显示,CD40RNAi慢病毒感染DC组(1.381±0.442)与未感染组(2.444±0.485)及空慢病毒感染DC组(2.294±0.367)相比,淋巴细胞刺激指数(SI)明显下降(P<0.01).结论 培养基选择法可收获大量骨髓源DC,所获骨髓源DC能激活初始型T细胞免疫应答.CD40 RNAi慢病毒感染小鼠骨髓源DC,可以使DC低表达CD40蛋白.CD40 RNAi慢病毒感染的DC体外刺激异系T淋巴细胞增殖的能力下降.为研究CD40 RNAi在同种器官移植诱导免疫耐受奠定基础.     

病毒诱导的细胞microRNA在先天免疫反应中的作用

细胞通过模式识别受体(pathogen-recognition receptors,PRRs)识别病原相关分子模式(pathogen associated molecularpatterns,PAMPs)后,立即启动一系列炎症信号通路,发生先天免疫应答。在这个过程中宿主细胞不仅产生大量microRNAs调节TLRs和RLRs介导的信号通路,防止过度免疫反应对宿主造成伤害,而且病毒还诱导产生了大量microRNAs来下调免疫应答,降低宿主对其清除作用。本文重点就病毒刺激宿主产生的microRNA调节免疫信号的研究做简要介绍。     

CD95/CD95L信号分子介导的细胞凋亡和非凋亡研究进展1

CD95/CD95L系统是诱导细胞凋亡的重要途径,在人体自身耐受机制、诱导活化细胞凋亡、控制免疫应答和参与免疫豁免中均起重要的作用.然而近年来新的研究发现CD95/CD95L不仅能够诱导细胞凋亡还可促发多重信号通路抑制细胞凋亡,其表达异常与肿瘤以及某些自身免疫性疾病的发生、发展有着密切联系.