层粘连蛋白受体与胆管癌细胞不同转移性亚群的关系研究

探讨胆管癌细胞不同转移性亚群层粘连蛋白受体的表达差异。以腹膜浸润筛选模型筛选胆管癌细胞高、低转移性亚群 ,体外侵袭实验验证筛选结果 ,流式细胞仪比较两亚群间层粘连蛋白受体的表达差异。结果显示 ,本研究成功地以腹膜浸润筛选模型筛选出胆管癌细胞高、低转移性亚群 ,体外侵袭实验进一步验证了两亚群间存在着侵袭能力上的显著差异。高、低转移性亚群层粘连蛋白受体的阳性细胞百分数分别为 (36 36± 9 2 2 ) %和 (13 17±3 4 3) % ,两者间差异显著 (P <0 0 5 )。提示层粘连蛋白受体的表达与体外胆管癌细胞的不同转移倾向密切相关。     

层粘连蛋白受体研究进展

层粘连蛋白受体（LR），是重要的细胞外基质成分层粘连蛋白的受体。它是一个多功能蛋白，与肿瘤细胞的转移密切相关，能够介导病毒和朊蛋白与宿主细胞的相互作用，并且参与细胞的信号转导。本文就层粘连蛋白受体的生物学功能以及在疾病治疗方面的研究进展进行综述。     

湿润烧伤膏对糖尿病足创面组织中MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Bax水平的影响

【摘要】目的探讨湿润烧伤膏(MEBO)对糖尿病足创面组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平的影响。方法选取2020年5月至2022年5月郑州大学附属郑州中心医院收治的55例糖尿病足患者作为研究对象,按照不同治疗方法将其分为MEBO组(35例)和VSD组(20例),MEBO组患者局部创面采用MEBO治疗,VSD组患者局部创面采用负压封闭引流(VSD)治疗,对比观察两组患者创面面积,创面组织中MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Bax水平及临床疗效。结果治疗第7、21天,MEBO组患者创面面积均明显小于VSD组(t=2.719、5.268,P=0.009、P<0.001),创面组织中MMP-2、MMP-9、Bax水平均明显低于VSD组(MMP-2:t=2.138、2.202,P=0.037、0.032;MMP-9:t=2.129、2.476,P=0.038、0.017;Bax:t=3.623、3.038,P=0.001、0.004),Bcl-2水平均明显高于VSD组(t=2.040、3.054,P=0.046、0.004);治疗21d后,MEBO组患者中显效23例、有效10例、无效2例,明显优于VSD组患者的显效8例、有效7例、无效5例(Z=-2.126,P=0.033)。结论MEBO可通过降低糖尿病足创面组织中MMP-2、MMP-9、Bax水平以及提高Bcl-2水平促进创面愈合。     

MEBO对糖尿病溃疡大鼠创面组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2动态表达的影响

目的 探讨分析湿润烧伤膏（MEBO）对糖尿病溃疡大鼠创面组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）及基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）表达水平的影响。方法 从160只健康雄性SD大鼠中随机选取120只制备大鼠糖尿病模型,其余40只正常喂养;最终选取90只造模成功大鼠随机分为模型组、MEBO组与bFGF组,每组30只,与此同时随机选取未予特殊处理的30只大鼠作为空白组,所有大鼠均做全层皮肤缺损创面,空白组与模型组大鼠创面予以凡士林油纱换药处理、MEBO组大鼠创面予以MEBO药纱换药处理、bFGF组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb-bFGF）药纱换药处理,对比观察各组大鼠干预第4、6、12天时创面愈合率以及MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2与胶原蛋白水平变化情况。结果 （1）干预第4、6、12天,模型组大鼠创面愈合率均明显低于其他各组（P均＜0.05）,空白组大鼠创面愈合率均明显高于其他各组（P均＜0.05）,而MEBO组与bFGF组间无明显差异（P均＞0.05）。（2）干预第4、6、12天,模型组大鼠创面组织中MMP-9及MMP-2 mRNA表达水平均明显高于其他各组（P均＜0.05）,TIMP-1及TIMP-2 mRNA表达水平均明显低于其他各组（P均＜0.05）;除干预第6天MEBO组大鼠创面组织中TIMP-1 mRNA表达水平明显高于bFGF组（P＜0.05）外,其余各时间点MEBO组与bFGF组大鼠创面组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2 mRNA表达水平均无明显差异（P均＞0.05）。（3）干预第4、6、12天,模型组大鼠创面组织中胶原蛋白水平明显低于其他各组（P均＜0.05）;除干预第4天MEBO组大鼠创面组织中胶原蛋白水平明显高于bFGF组（P＜0.05）外,其余各时间点MEBO组与bFGF组大鼠创面组织中胶原蛋白水平均无明显差异（P均＞0.05）。结论 MEBO可通过调控糖尿病溃疡大鼠创面组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达水平改善胶原蛋白过度降解,维持细胞外基质代谢平衡,进而促进创面愈合,调节MMP-9/TIMP-1、MMP-2/TIMP-2的比例失衡可能是其促进糖尿病溃疡创面愈合的作用靶点。     

化疗栓塞对肝细胞癌MMP-2、TIMP-2表达的影响

目的 探讨MMP-2、TIMP-2在肝细胞癌(HCC)中表达的意义及化疗栓塞对其表达的影响.方法 47例经手术病理证实的原发性肝细胞痛,其中25例单纯手术切除,22例经导管动脉化疗栓塞(TACE)后行Ⅱ期切除,用免疫组化方法检测两组标本MMP-2、TIMP-2蛋白表达.结果 有、无转移或完整包膜的肝细胞癌MMP-2表达差异有统计学意义(χ2=6.518、6.038,P<0.05);与单纯手术组相比,TACE组肝细胞癌MMP-2表达明显降低(χ2=4.854,P<0.05)、TIMP-2表达明显增高(χ2=5.144,P<0.05);MMP-2与TIMP-2表达存在显著负相关(r=-0.392,P<0.05).结论 MMP-2、TIMP-2与HCC的侵袭转移潜能相关,化疗栓塞有助于抑制HCC侵袭与转移潜能.     

胃腺癌中MMP-14和MTA2的表达及意义

目的检测基质金属蛋白酶-14(MMP-14)、转移相关蛋白2(MTA2)在胃腺癌中的表达,探讨MMP-14和MTA2在胃腺癌病变中的作用。方法选择87例胃腺癌术后的新鲜标本作为观察组,60例正常组织作为对照组,应用流式细胞术检测二组中MMP-14和MTA2的表达,比较MMP-14和MTA2在不同临床病理特征中的表达差别,以及两者表达的相关性。结果观察组中MMP-14和MTA2的表达量明显高于对照组,观察组中MMP-14和MTA2的表达与肿瘤的临床分期、淋巴结转移、脉管浸润密切相关;观察组中MMP-14和MTA2的表达呈正相关。结论在胃腺癌中MMP-14和MTA2呈现高表达,两者具有协同作用,对病变的进展具有重要作用。     

雾化吸入布地奈德对肺纤维化大鼠肺组织MMP-2、TIMP-2表达的影响

目的探讨布地奈德雾化吸入对博莱霉素（BLM）致肺纤维化大鼠肺组织基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）表达的影响。方法Wistar大鼠45只,随机分成博莱霉素模型组（BLM组）、生理盐水空白对照组（NS组）和布地奈德干预组（Bud组）各15只,BLM组和Bud组气管内灌注博莱霉素诱导肺纤维化,NS组在相同条件下灌注生理盐水。气管内灌注药物后,第0~6天Bud组给予布地奈德雾化吸入,其余组在相同条件下给予生理盐水雾化吸入。各组分别于第7、142、8天随机处死5只,收集肺组织作切片、行HE及Masson染色,判断肺组织肺泡炎及肺纤维化程度;行免疫组化染色,检测MMP-2和TIMP-2在肺组织的表达水平。结果与NS组相比,Bud组第7、14、28天肺组织的肺泡炎和肺纤维化程度明显加重（P〈0.5）;与BLM组相比,Bud组第7、14天肺组织的肺泡炎程度明显减轻（P〈0.05）,第7、14、28天肺纤维化程度明显减轻（P〈0.05）;与NS组相比,BLM组第7、14、28天MMP-2和TIMP-2表达明显增加（P〈0.5）;与BLM组相比,Bud组第7、142、8天MMP-2和TIMP-2表达明显降低（P〈0.05）。结论布地奈德雾化吸入可减轻BLM致肺纤维化大鼠的肺泡炎和肺纤维化程度,其干预机制可能为降低肺组织内MMP-2及TIMP-2的表达,并在一定程度上调整MMP-2/TIMP2的比值。     

阿托伐他汀对心脏成纤维细胞MMP-9/TIMP-1表达的影响

目的：观察阿托伐他汀（atorvastatin）对心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶-9/组织型基质金属蛋白酶抑制因子-1（MMP-9/TIMP-1）表达的影响。方法：体外培养乳鼠心脏成纤维细胞（CF）,做细胞形态观察和心脏成纤维细胞标志性波形蛋白免疫荧光组化检测,明胶酶谱法测定MMP-9的活性,RT-PCR检测MMP-9和TIMP-1mRNA的表达。结果：AngⅡ增加MMP-9的活性及mRNA的表达（P〈0.05）,同时TIMP-1的mRNA表达减少（P〈0.05）,阿托伐他汀在某种程度上可逆转上述变化（P〈0.05）。结论：Aorvastatin通过对MMP-9/TIMP-1表达的影响作为预防和治疗房颤的重要机制之一。     

雌激素受体阴性乳腺癌中神经胶质瘤致病因子1、基质金属蛋白酶-9的表达及其临床意义

 目的 探讨雌激素受体(estrogen receptor ,ER)阴性乳腺癌中的神经胶质瘤致病因子1(glioma-associated oncogene homolog 1,Gli1)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的表达及临床意义。方法 用免疫组化Envision法检测ER阴性乳腺癌组织中Gli1、MMP-9、 CD34的表达情况, 分析Gli1、MMP-9表达与CD34、肿瘤大小、淋巴转移、临床TNM分期、HER-2表达的关系。结果 ER阴性乳腺癌组织中,Gli1阴性(-)、低表达(+)、中表达(++)及高表达(+++)组的CD34分别为48.83±7.53、60.69±10.02、64.68±12.92和75.91±11.30; MMP-9分别为48.15±8.44、61.69±10.71、67.76±14.03、73.11±12.78,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。ER阴性乳腺癌组织中Gli1、MMP-9表达与肿瘤大小、临床TNM分期呈正相关(P<0.05)。ER阴性乳腺癌组织中Gli1与MMP-9表达存在一定正相关性(r=0.462,P<0.01)。结论 Gli1与MMP-9表达呈正相关性,推测Gli1是ER阴性乳腺癌增殖途径中重要的调控节点之一。     

肺癌H460细胞与单个核细胞相互作用对MMP-1、-2、-9表达的影响

目的：研究单个核细胞和肺癌H460细胞三维立体混合培养对MMP-1、MMP-2和MMP-9表达的影响,并观察MMPs对胶原的降解作用。方法：活性胶原立体培养分为空白对照组（CG）、H460细胞组（HG）、单个核细胞组（MG）、混合组（HMG）共4组,观察癌细胞的生长状况。用明胶酶谱法测定不同时间点各组MMP-2和MMP-9表达,用Western blotting法测定MMP-1。结果：各组细胞在立体胶原内生长良好。MG未明显分泌MMP-1、MMP-2和MMP-9,HG和HMG均分泌MMP-1、MMP-2和MMP-9,但HMG分泌量明显多于HG。结论：炎症细胞和癌细胞混合培养后,细胞间相互作用促进MMPs分泌增多。基质金属蛋白酶可降解细胞外基质,进而促进肺癌的侵袭和转移。     

MMP-2-PEX原核表达纯化及其对黑色素瘤细胞与内皮细胞黏附的影响

目的探讨原核表达的人源基质金属蛋白酶2的C端结构域（MMP-2-PEX）对黑色素瘤细胞A375与内皮细胞黏附的影响。方法利用RT-PCR方法从人成纤维肉瘤细胞HT1080中克隆MMP-2 C端结构域,构建原核表达载体pET-His-PEX;转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达;盐酸胍裂解包涵体,经镍琼脂糖凝胶柱纯化,透析复性后获得MMP-2-PEX蛋白,随后对其进行Western印迹和质谱鉴定。采用明胶酶谱法检测MMP-2-PEX的活性;采用平行板流动小室系统检测在流动状态下MMP-2-PEX对A375细胞与脐静脉内皮细胞HUVEC黏附的影响,通过小鼠实验性肺转移模型检测MMP-2-PEX对A375细胞在小鼠肺内癌栓形成的影响。结果 Western印迹和质谱鉴定原核表达的MMP-2-PEX蛋白正确,明胶酶谱检测MMP-2-PEX能够明显抑制MMP-2的活性。表达的MMP-2-PEX蛋白能够在流动状态下抑制A375细胞与HUVEC细胞的黏附,其黏附抑制率与MMP-2-PEX蛋白浓度增加成正相关,MMP-2-PEX浓度为12.5,25和50μg/ml时抑制率分别为32.5%,41.4%和53.9%。用MMP-2-PEX处理后,A375细胞在小鼠肺内癌栓的形成与对照组相比降低了26.4%。结论原核表达的人MMP-2-PEX在体外流动状态下可抑制A375细胞与内皮细胞的黏附,并抑制A375细胞在小鼠肺内癌栓的形成。     

TACE对肝癌MMP-2和MMP-9表达及患者预后的影响研究

目的探讨经导管动脉化疗栓塞术(TACE)对肝癌(HCC)基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因的表达以及对HCC患者预后的影响。资料与方法72例可切除HCC患者分为两组,一组行术前TACE然后行手术切除(A组,n=36),另一组直接行手术切除(B组,n=36)。对手术切除的标本行常规病理、免疫组织化学检查,比较两组切除标本中癌组织、癌旁组织中MMP-2和MMP-9基因的表达和分布。比较两组生存期,同时行Cox回归模型分析影响预后的因素。结果A组MMP-2表达呈强、弱和无表达分别为6例、12例和18例,而B组MMP-2表达呈强、弱和无表达分别为18例、3例和15例,两组比较有显著差异(χ2=11.67,P=0.03)。A组MMP-9表达呈强、弱和无表达分别为10例、15例和11例,而B组表达呈强、弱和无表达分别为18例、15例和3例,两组比较有显著差异(χ2=6.857,P=0.03)。A、B两组中位生存期分别为37.0个月和26.0个月,A组12、24、36个月生存率分别为94.4%、69.4%、50.9%,B组分别为88.6%%、60.0%、25.7%。两组差异有统计学意义(...     

经导管肝动脉化疗栓塞对肝癌细胞nm23、金属蛋白酶组织抑制剂-2表达及肝外转移的影响

目的 探讨经导管肝动脉化疗栓塞术(TACE)对肝癌(HCC)nm23-H1、金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)基因的表达水平以及癌细胞转移潜能的影响.方法 搜集72例可切除HCC患者手术切除标本,其中36例患者术前行TACE(A组),另外36例直接行手术切除(B组).对手术切除的标本行常规病理、免疫组织化学检查,比较2组切除标本中癌组织、距癌组织2 cm的旁组织nm23-H1、TIMP-2基因的表达水平和分布.所有患者术后均随访24个月,比较2组患者肝外转移的发生率.nm23-H1、TIMP-2表达水平的比较及生存期比较均采用X~2检验.结果 A组患者 nm23-H1表达强阳性24例、弱阳性6例、无表达6例;而B组 nm23-H1表达强阳性9例、弱阳性6例、无表达21例;2组比较差异有统计学意义(X~2=15.52,P<0.01).A组TIMP-2表达强阳性21例、弱阳性3例、无表达12例;B组TIMP-2表达强阳性、弱阳性均为9例,无表达18例;2组比较差异有统计学意义(X~2=9.00,P<0.05).通过24个月随访,A、B 2组出现癌细胞肝外转移的例数分别为13和15例,2组差异没有统计学意义(X~2=0.23,P>0.05).结论 TACE可以提高肝癌组织 nm23-H1、TIMP-2的表达,提示TACE可能抑制肝癌细胞转移潜能.     

KAI1基因外源性过表达对胆管癌细胞层黏素受体的影响

目的研究KAI1基因外源性过表达对胆管癌细胞层黏素受体(LNR)表达的影响。方法体外培养人胆管癌QBC939细胞,分为两组:转染空载体pIRES2-EGFP对照组和转染重组真核载体pIRES2-EGFP-KAI1实验组。采用脂质体转染法分别将空载体和重组真核载体转染到QBC939细胞,经G418筛选,得到阳性克隆细胞株。通过RT-PCR、Western blotting和细胞免疫组化法,分别检测KAI1、LNR的mRNA及蛋白表达水平。结果实验组的KAI1 mRNA、蛋白表达量(分别为0.49±0.071、.06±0.05)均显著高于对照组(分别为0.22±0.02、0.59±0.02,P<0.01);实验组的LNR mRNA、蛋白表达量(分别为0.38±0.04、0.29±0.03)均显著低于对照组(分别为0.73±0.05、0.68±0.02,P<0.05)。与对照组比较,实验组KAI1蛋白在胞质的着色明显增强、LNR着色减弱。结论体外胆管癌QBC939细胞过表达KAI1可导致LNR mRNA和蛋白表达下调。     

土荆皮酸对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移及基质金属蛋白酶表达的影响

目的 研究土荆皮酸(PAB)对宫颈癌Hela细胞侵袭转移及基质金属蛋白酶表达的影响,探讨其作用机制.方法 将人宫颈癌HeLa细胞分为空白对照组、DDP(3.125μg/ml)组、PAB 20tμmol/L、PAB 10μgmol/L、PAB 5μmol/L组.采用Transwell侵袭系统观察PAB对宫颈癌细胞侵袭转移的影响,RT-PCR、Western blot法检测PAB对宫颈癌细胞MMP22、MMP29 mRNA及蛋白表达的影响.结果 PAB 20/μmol/L组和PAB 10μmol/L组穿过滤膜的细胞数分别为15.60±2.45、20.14±2.48,显著低于空白对照组(46.50±4.70)和PAB 5μmol/L组(42.44±5.80,P<0.05),但与DDP组(18.31±2.93)比较差异无统计学意义.MMP22 mRNA、蛋白表达量PAB 20μmol/L组(分别为0.58±0.07、0.75±0.04)和PAB 10μmol/L组(分别为0.71±0.07、1.26±0.04)均显著低于空白对照组(分别为0.88±0.06、1.88±0.12,P<0.05),但与DDP组(分别为0.60±0.05、0.73±0.04)比较差异无统计学意义.MMP29mRNA、蛋白表达量PAB 20μmol/L组(分别为0.28±0.02、0.56±0.03)和PAB 10μmol/L组(分别为0.35±0.02、0.97±0.003)均显著低于空白对照组(分别为0.64±0.02、1.56±0.03,P<0.05),但与DDP组(分别为0.22±0.02、0.52±0.03)比较差异无统计学意义.结论 PAB能有效抑制宫颈癌的侵袭和转移,这可能与降低宫颈癌细胞运动能力,抑制MMP22、MMP29的表达有关.     

MMP-2 mRNA在内毒素致兔急性肺损伤中的作用及美洛昔康的影响

目的观察内毒素（ET）致兔急性肺损伤（ALI）时肺组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）mRNA的表达变化及美洛昔康对兔急性肺损伤干预的机制。方法将24只大耳白兔随机分为生理盐水对照组（A组）、内毒素致伤组（B组）、内毒素致伤及美洛昔康干预组（C组），每组8只。B组用ET（700μg／kg）一次性静脉注射方法复制兔ALI模型，C组在B组的基础上用美洛昔康（2．5mg／kg）进行干预，观测兔动脉血气、肺组织湿重／干重比（W／D）、肺水含量、肺组织病理学改变、肺组织中MMP-2 mRNA的表达变化。结果与A组比较，B组氧合指数明显降低，肺组织出现水肿、出血、炎性细胞浸润，W／D比值、肺水含量及肺组织MMP-2 mRNA表达明显增加；C组氧合指数未见明显下降，W／D比值、肺水含量、肺组织中MMP-2 mRNA表达较B组减少，病理改变亦较B组轻。结论在ALI时，MMP-2 mRNA表达上调，美洛昔康可抑制MMP-2 mRNA的表达，在一定程度上对内毒素性ALI产生保护作用。     

参茸益精片对高原脑水肿血清IL-1β、TNF-α、MMP-9 水平的影响

 目的 观察参茸益精片对高原脑水肿患者血清中白介素-1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法 高原脑水肿患者给予高压氧、降颅压、维持水电解质平衡、吸氧等基础治疗。随机分组:31例同时服用参茸益精片(观察组),30例不加用参茸益精片(对照组),两组治疗14 d后,通过ELISA及免疫荧光干式定量法测定各组患者血清中IL-1β、MMP-9、TNF-α含量水平。于治疗14 d后根据Glasgow评分进行临床疗效评定。结果 参茸益精片治疗前,两组血清中IL-1β、MMP-9、TNF-α水平差异无统计学意义,参茸益精片治疗14 d后,上述因子水平均显著降低 (P<0.01)。结论 参茸益精片可以降低高原脑水肿患者血清中IL-1β、MMP-9、TNF-α含量,可减轻缺氧损伤,提高临床疗效。     

全氟化碳汽化吸入对急性肺损伤兔肺外脏器MMP-9表达的影响

 目的 探讨全氟化碳(perfluorocarbon,PFC)汽化吸入对急性肺损伤动物肺外脏器(小肠、肝、肾)MMP-9表达的影响.方法 将30只新西兰兔随机分为常规通气组(CMV组)、呼气末正压组(PEEP组)、PFC汽化吸入组(PFC组)、PFC汽化吸入+呼气末正压组(PEEP+PFC组)、对照组(C组).将兔气管切开,插管连接呼吸机进行机械通气,通过人工海水气管内注入制作ALI模型后,前4组动物按照不同的实验分组进行相应的通气治疗2 h,调整为常规机械通气4 h后处死,对照组撤除呼吸机.实验结束后取各组动物的小肠、肝、肾组织,应用免疫组织化学技术从蛋白水平观察MMP-9在肺外脏器(小肠、肝、肾)的表达.结果 肺外脏器免疫组织化学评分比较显示,PEEP组和PFC+PEEP组肾组织中MMP-9蛋白的表达水平较CMV组下降(P＜0.05),CMV组和PFC组肾组织中MMP-9蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).CMV组、PEEP组、PFC组和PFC+PEEP组小肠组织和肝组织中MMP-9蛋白的表达水平差异无统计学意义.结论 本实验无法证实汽化吸入PFC能够通过减少MMP-9蛋白在肺外脏器(小肠、肝、肾)中的表达,从而减轻MMP-9对肺外脏器的损伤.