聚合酶链反应检测结核杆菌DNA的临床研究

目的 研究荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测临床标本中结核分枝杆菌核酸DNA的应用价值.方法 应用荧光定量PCR技术对80例活动性肺结核患者痰、40例结核性胸膜炎患者的胸水进行结核杆菌DNA检测,同时涂片镜检与培养,并对3种方法检测的阳性率进行比较.结果 80例活动性肺结核患者痰、40例结核性胸膜炎患者的胸水荧光定量PCR阳性率分别为56.2％、27.5％;涂片镜检阳性率分别为16.2％、0.0％;结核培养法阳性率分别为37.5％、2.5％.结论 荧光定量PCR技术较传统方法具有较高的敏感性与特异性,尤其对涂片染色与结核培养阴性的结核病具有更大的诊断价值.     

实时荧光定量聚合酶链反应对结核性胸膜炎的诊断价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测胸腔积液结核分枝杆菌DNA对结核性胸膜炎的诊断价值。方法对88例结核性胸膜炎患者和32例恶性胸腔积液标本行实时荧光定量PCR检测结核分枝杆菌DNA。结果88例患者胸腔积液实时荧光定量PCR检测阳性36例(40.91%),32例恶性胸腔积液实时荧光定量PCR检测阳性1例(3.13%)。2组阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论胸腔积液实时荧光PCR检测对结核性胸膜炎早期诊断有重要仍价值。     

PCR-TB-DAN对结核性胸膜炎诊断价值的再评价

目的探讨胸腔积液中荧光定量聚合酶链反应技术在结核性胸膜炎的诊断价值。方法对173例经胸膜活检病理确诊为结核性胸膜炎（结核组）118例和非结核性胸膜炎（非结核组）55例,应用荧光定量PCR技术对抽取的胸水送检结核DAN检测,同时根据胸水的性质在结核组中又分为化脓性胸膜炎组（化脓组）26例和非化脓性胸膜炎组（非化脓组）92例,比较各组中荧光定量PCR-TB-DNA的阳性率。结果在118例结核性胸膜炎患者中胸水PCR-TB-DNA阳性率为27.1%,在55例非结核性胸膜炎患者中胸水PCR-TB-DNA阳性率为9.1%;在结核组中,化脓组26例和非化脓组胸水92例PCR-TB-DNA阳性率分别为61.5%、25.8%。结论荧光定量PCR-TB-DNA技术在结核性胸膜炎诊断中有较高的临床价值。     

生成素基因检测对癌性胸腔积液诊断的意义

目的 研究胸腔积液脱落细胞生存素基因表达及诊断价值.方法 收集肺癌胸水脱落细胞阳性、肺癌胸水脱落细胞阴性及结核性胸膜炎患者胸水,提取其总RNA,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测生存素基因mRNA表达.结果 42例肺癌患者胸水脱落细胞生存素mRNA阳性率80.95%(34/42),胸水脱落细胞阴性者阳性率52.38%(20/42),30例结核性胸膜炎均为阴性.结论 胸水脱落细胞生存素mRNA可以作为肺癌诊断新的敏感指标.     

胸水酶联免疫斑点检测在结核性胸膜炎中的诊断价值

目的：探讨胸水酶联免疫斑点检测（ ELISPOT）在结核性胸膜炎中的诊断价值。方法应用ELISPOT试验检测结核性胸膜炎60例和对照组39例胸腔积液中的γ干扰素水平,同时对试验标本进行涂片、培养、聚合酶链反应（ PCR）检测TB-DNA及腺苷脱氨酶（ ADA）。结果结核性胸膜炎患者胸水ELISPOT检测敏感性为915．7％特异性为84．6％,抗酸染色涂片、结核菌培养、TB-DNA和ADA的敏感性分别为18．3％,21．7％,36．7％和88．3％。结论ELISPOT方法检测胸腔积液γ干扰素可作为结核性胸膜炎的可靠指标,其敏感性高于临床常规检测方法。     

结核分支杆菌荧光定量聚合酶链反应及噬菌体生物扩增法对结核性渗出性胸膜炎的检测意义

目的 利用针对结核分支杆菌的荧光定量聚合酶链反应及噬菌体生物扩增法检测技术,提高结核性渗出性胸膜炎的诊断.方式诊断为结核性渗出性胸膜炎的患者行胸腔穿刺抽液,同时送检结核分支杆菌培养,涂片找抗酸杆菌,结核分支杆菌的荧光定量聚合酶链反应和噬菌体生物扩增法,比较各种检测的敏感性.结果 荧光定量聚合酶链反应和噬菌体生物扩增法的敏感性高(P＜0.05).结论 结核分支杆菌的荧光定量聚合酶链反应和噬菌体生物扩增法对结核性渗出性胸膜炎敏感性高、特异性高,有重要的诊断价值.     

胸水和血清腺苷脱氨酶联合血清结核抗体检测对结核性胸膜炎的临床诊断价值

目的探讨胸水及血清腺苷脱氨酶(ADA)联合血清结核抗体(TB-AB)检测的阳性符合率对结核性胸膜炎的诊断价值。方法对37例结核性胸膜炎患者的胸水及血清ADA和血清TB-AB进行检测,以及23例非结核性胸膜炎患者的胸水及血清ADA和血清TB-AB进行检测。结果结核组中胸水ADA阳性率67.6%;血清ADA阳性率62.2%;血清TB-AB阳性率70.3%;以胸水ADA/血清ADA>1.00为临界值其阳性率81.1%;以上阳性率均显著高于非结核组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结核组中胸水ADA活性和胸水/血清ADA明显高于非结核组,差异有统计学意义(P<0.05);结核组血清ADA活性与非结核组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结核性胸膜炎诊断中胸水ADA、血清ADA、胸水/血清ADA及血清中TB-AB的敏感性分别为67.6%、62.2%、81.1%和70.3%,特异性分别为100.0%、87.0%、82.6%和91.3%。结论胸水及血清ADA水平和血清TB-AB的检测对结核性胸膜炎和非结核性胸膜炎具有诊断和鉴别诊断价值。     

实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析

目的分析实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测在人巨细胞病毒(HCMV)感染中的应用价值。方法选取363例疑似HCMV感染患儿及50例健康儿童,均采集血样进行实时荧光定量PCR检测。分析荧光定量PCR检测结果 ,并比较不同性别、不同年龄HCMV感染的阳性检出情况。结果实时荧光定量PCR检测显示, HCMV感染患儿中32例为阳性,阳性率为8.82%;健康儿童中1例为阳性,阳性率为2%。阳性患儿的HCMV载量在5.0×102~1.0×104 copies/ml。HCMV感染患儿阳性率高于健康儿童,差异具有统计学意义(P<0.05)。188例男性CMV感染患儿的阳性率为9.04%(17/188), 175例女性CMV感染患儿的阳性率为8.57%(15/175),不同性别HCMV感染患儿阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。152例年龄<1岁CMV感染患儿的阳性率最高,为14.5%;其次为1~3岁患儿,阳性率为6.9%;109例>3岁患儿的阳性率最低,为2.8%;不同年龄段CMV感染患儿的阳性率比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 <1岁儿童由于机体的免疫力和抵抗力较弱,容易出现HCMV感染的情况,因此需要借助实时荧光定量PCR技术进行筛查,从而尽早诊断和治疗,能够避免严重并发症的出现。     

结核PCR定量测定在结核病诊断中的应用

目的:评价荧光定量PCR技术在结核病诊断中的应用价值。方法:采用荧光定量PCR(FQ-PCR)、涂片法和培养法同时检测580例结核患者、疑似结核患者的痰、胸腹水、脑脊液标本,对检测结果进行比较。结果:荧光定量PCR检测阳性率要高于涂片法和培养法的阳性率,统计分析有显著性(P<0.01)。结论:应用荧光定量PCR方法检测结核杆菌,具有特异、灵敏、简便、快速的特点,可作为结核病诊断的常规方法。     

胸水腺苷脱氢酶检测联合PPD皮试与内科胸腔镜检查在结核性胸膜炎诊断的应用价值对比分析

目的研究胸水腺苷脱氢酶（ADA）检测联合PPD皮试及内科胸腔镜检查在诊断结核性胸膜炎的临床价值对比分析。方法回顾性研究225例临床确诊为结核性胸膜炎并最终行内科胸腔镜检查、腔镜下胸膜活检,胸膜活检组织标本送检病理检查确诊结核性胸膜炎患者,同时行PPD皮试、胸腔穿刺抽液,胸液送检ADA,比较两种检测方法的阳性率。结果内科胸腔镜检查阳性率91．2％,明显高于胸水腺苷脱氢酶（ADA）联合PPD皮试阳性率56％,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,内科胸腔镜检查明显优于胸水腺苷脱氢酶（ADA）检测联合PPD皮试。两种方法联合检出阳性率为97．2％。结论内科胸腔镜检查是目前对结核性胸膜炎阳性率较高的方法;联合胸水腺苷脱氢酶（ADA）检测、PPD皮试、胖铸下胸膜活榆可以提高对结核性胸膜炎的早期诊断。     

内标实时荧光定量PCR技术在HCVRNA定量检测中的应用分析

目的比较内标实时荧光定量PCR技术及国产实时荧光定量PCR法检测HCV RNA载量的检测结果,研究两种检测方法的灵敏度。方法采集丙肝患者抗病毒治疗前28例、治疗4周29例及治疗结束时29例患者外周血标本,分别用内标实时荧光定量PCR技术(COMBAS Taqman全自动分析系统)及国产实时荧光定量PCR法检测同一血清其HCVRNA定量值。结果内标实时荧光定量PCR技术最低检出下限是15IU/mL,抗病毒治疗前28例患者两种方法检测结果差异无统计学意义(P>0.05);抗病毒治疗4周时29例患者病毒载量经内标实时荧光定量PCR技术检测产生RVR的百分比是24.14%,而国产实时荧光定量PCR法产生RVR的百分比是检测79.31%,差异有统计学意义(χ2=16.39,P<0.01);抗病毒治疗结束时29例患者HCVRNA载量经内标实时荧光PCR法检测阳性率为20.69%,而国产实时荧光定量PCR法检测阳性率为3.45%。结论内标实时荧光定量PCR技术较国产实时荧光定量PCR法检测HCVRNA载量灵敏,能够提供更精确的数据。     

淋球菌检测三种方法比较

传统检测淋病奈瑟菌以培养法和涂片法为主，本用PCR法（聚合酶链反应）对136例临床标本进行检测，瓶 培养法及涂片法比较。结果PCR法检测淋球阳性率45.6%(62/136)，培养法为33.1%(45/136)，涂片法为27.1%(38/136)。为了及时诊治和预防监控淋病，PCR法可作为首选的检测手段。     

实时荧光定量PCR在肺结核诊断中的临床应用

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应法(FQ-PCR荧光定量)对肺结核诊断的临床应用价值。方法用直接涂片检测抗酸菌法和FQ-PCR法对我院临床诊断为肺结核和疑似肺结核病人的168例痰和57例支刷物中的结核分枝杆菌菌体和基因分别同时检测,对两方法检出率进行统计学比较分析。结果痰直接涂片法阳性率为16.7%,FQ-PCR荧光法阳性率为30.4%,二者比较有显著性差异(P<0.01);支刷物涂片阳性率15.8%,TB-PCR荧光量阳性率31.6%,二者比较有差异(P<0.05)。结论FQ-PCR荧光定量法的检出率显著高于涂片法,提示FQ-PCR荧光定量法特异较强、敏感性较高,可提高诊断的阳性率,在结核的诊治中具有较好的应用价值。     

淋球菌检测三种方法比较

传统检测淋病奈瑟菌以培养法和涂片法为主.本文用PCR法(聚合酶链反应)对136例临床标本进行检测,并与培养法及涂片法比较,结果PCR法检测淋球阳性率456%(62/136),培养法为331%(45/136),涂片法为271%(38/136).为了及时诊治和预防监控淋病,PCR法可作为首选的检测手段.     

PhaB和FQ-PCR两种快速检测结核分枝杆菌方法的比较

目的比较裂解型分枝杆菌噬菌体检测技术(Phage amplified biologically assay,PhaB)和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)快速检测临床标本中结核分枝杆菌的优缺点及临床应用价值。方法对142例肺结核患者的痰标本和41份非结核性痰标本应用PhaB法和FQ-PCR进行检测和结果比较。结果PhaB法阳性76例,阳性率53.5%;FQ-PCR法阳性84例,阳性率59.1%。PhaB法和FQ-PCR法相比,有统计学差异(P<0.05)。2种方法检测41份非结核性痰标本均为阴性。结论两种方法能快速、简便、灵敏、特异检测结核分枝杆菌,同时又有不同的特点。     

结核性渗出性胸膜炎86例临床分析

目的进一步探讨结核性渗出性胸膜炎的临床特点以及与肺实质结核的关系。方法回顾性分析2006年1月～2008年12月收治的86例结核性渗出性胸膜炎住院患者的临床特点、治疗及转归。结果结核性胸膜炎好发于青少年及老年人,最常见症状为发热、胸痛及咳嗽,以单侧淋巴细胞为主型渗出性胸膜炎为主。86例患者中经CT检查观察到合并肺实质损害的有69例,占80.2%,其中42例表现为活动性肺结核影像学特点,占48.8%;最常见为渗出及增殖性病灶,病灶位于上叶者42例,占60.9%。肺内病灶与胸水在同一侧59例,双侧都有病灶8例,二者之和远高于肺内病灶在胸水对侧的2.9%(2/69)(P<0.05)。经统计学处理对比继发性结核性胸膜炎组与单纯性结核性胸膜炎组发病年龄、PPD阳性率、血清结核抗体阳性率、胸水蛋白含量、胸水细胞数及淋巴细胞数比例无显著性差异(P>0.05),两组胸水PCR-TB-DNA检出阳性率分别为81.3%和16.7%,经统计学处理对比差异具有显著性(P<0.05)。本组病例89.5%采用短程化疗方案2HRZE/4HR、2HRE/4HR抗结核治疗,近期疗效显著。继发性结核性胸膜炎组与单纯性结核性胸膜炎组疗效无明显差异。结论结核性胸膜炎与肺结核关系密切,将其与肺结核一并列入结核病归口管理对象,对控制结核病疫情具有重要意义。     

荧光定量聚合酶链反应在小儿巨细胞病毒感染检测中的应用

目的　探讨荧光定量聚合酶链反应 (FQ- PCR)法检测小儿巨细胞病毒感染效果及临床意义。方法　应用 FQ- PCR法检测患儿血标本 HCMV- DNA。结果　 77例患儿血标本 FQ - PCR检测 HCMV - DNA阳性 19例 ,阳性率 2 4 .7% ,阳性标本的平均拷贝数为 1.16× 10 4 。结论　 FQ- PCR法对于 HCMV感染的早期诊断和疗效判断 ,具有重要意义。     

痰液中MPB64蛋白检测在肺结核诊断中的临床应用及其常见菌对检测影响的研究

目的 探讨痰液MPB64蛋白检测在临床诊断肺结核的价值及常见菌对MPB64检测的影响.方法 以11例涂片抗酸染色阳性且胸片出现肺部阴影的患者的痰标本为实验组,以11例涂片抗酸染色阴性且胸片无肺部阴影的患者的痰标本为对照组,分别进行免疫胶体金法检测MPB64蛋白、荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测结核杆菌DNA和涂片抗酸染色,对3种检测方法的检测结果进行比较、分析;对临床送检痰标本中分离的65株常见菌,用蛋白胨水增菌24 h,采用免疫胶体金法检测MPB64.结果 实验组中,免疫胶体金法检测MPB64蛋白、荧光定量PCR检测结核杆菌DNA的敏感度分别为72.72％、45.45％,免疫胶体金法显著高于荧光定量PCR法,但其特异度(45.45％)和准确度(59.09％)则低于荧光定量PCR(100.00％、72.73％);MPB64蛋白检测与涂片染色、荧光定量PCR检测结果的符合率分别为50.00％、59.09％; 25株金黄色葡萄球菌增菌液中MPB64检测试验阳性,阳性率100％,其余菌株增菌液阴性.结论 痰液中MPB64蛋白检测快速、简便、敏感性高,但特异性低;金黄色葡萄球菌菌株的存在可能造成对痰液MPB64检测的假阳性.     

聚合酶链反应（PCR）对诊断结核性胸腔积液的价值

应用聚合酶链反应技术直接检测４６例胸水标本中结核杆菌，并与涂片镜检查方法对比。结果显示ＰＣＲ检测胸液结核杆菌阳性率达４５．７％，明显优于胸液涂片镜检，具有良好的敏感性和特异性，可为临床提供早期病原学诊断依据，是快速检测液结核杆的好方法。     

尿液结核分枝杆菌检测对肾结核的诊断价值

目的：探讨尿液结核分枝杆菌检测在肾结核诊断中的应用价值。方法对108例已确诊为肾结核的患者尿液标本分别采取抗酸菌涂片染色、改良罗氏培养、荧光定量PCR三种方法进行检测,其结果进行分析。结果抗酸菌涂片染色、改良罗氏培养、荧光定量PCR检测尿液中结核分枝杆菌的阳性率分别为25.9%、51.9%、72.2%。结论尿液结核分枝杆菌检测属病原学检测,特异性好、操作简便,对肾结核的诊断有着重要的应用价值。