调节食欲-生殖的信号肽在雄激素致不孕大鼠中的表达及滋肾阴药的作用

目的探讨雄激素不孕大鼠(ASR)肥胖及无排卵的中枢机制及滋肾阴药的作用。方法给出生9日龄SD雌性大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮,建立ASR模型。用原位杂交、双标原位杂交的方法检测与肥胖发生有关的几种信号肽/激素如神经肽Y(NPY)、瘦素(leptin)受体长体(OB-Rb)、前阿黑皮素原(POMC)mRNA在ASR下丘脑弓状核(ARC)的表达含量和其关系,以及灌服滋肾阴药后上述指标的变化。结果ASR呈肥胖、无排卵状态。ASR的ARC中NPYmRNA神经元上有OB-RbmRNA表达,NPYmRNA神经元与POMCmRNA神经元有突触联系。NPY和POMC基因表达水平明显增加(P<0.01),OB-Rb基因表达水平明显降低(P<0.01)。中药治疗ASR后,大鼠出现减肥和排卵现象,ARC中NPY、POMC基因表达下降,OB-Rb基因表达上升至正常大鼠水平(P>0.05)。结论ASR肥胖及无排卵可能与NPY、POMC基因过表达、OB-RbmRNA数目减少有关,中药可能有调控这些信号肽的表达而发挥减肥及促排卵作用。     

雄激素致不孕大鼠卵巢血红素加氧酶蛋白的表达

目的:研究血红素加氧酶蛋白在雄激素致不孕模型大鼠卵巢的表达。方法:9日龄SD雌性大鼠颈背部皮下注射丙酸睾丸酮制造无排卵不孕模型,3~4月龄时选取动情前期断头处死,采用免疫组化法,观察并比较血红素加氧酶蛋白在ASR和正常大鼠卵巢的表达。结果:与正常组相比,HO-1和HO-2在ASR卵巢颗粒细胞表达减弱,在ASR泡膜细胞表达增强。结论:ASR无排卵的发生可能与血红素加氧酶两个亚型的表达异常有关。     

补肾助孕汤对雄激素致不孕大鼠的促排卵及卵巢IGF-1表达的影响

目的 探讨补肾助孕汤对雄激素致不孕大鼠(ASR)促排卵的作用机制.方法 选择9日龄SD龄雌性大鼠随机分为4组,正常对照组:皮下注射中性茶油;ASR模型组:皮下注射丙酸睾丸酮;中药组及西药组:ASR模型自81 d龄起,每天灌胃给药;连续28 d.采用阴道涂片测定大鼠动情周期及排卵率,采用ELISA法测定促卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)及孕酮(P)水平;采用免疫组织化学sp检测卵巢细胞胰岛素样生长因子(IGF-1)表达.结果 补肾助孕汤可明显增加大鼠卵巢组织各级卵泡及黄体数目,恢复排卵功能;提高血清中FSH、LH及P水平,并且降低卵巢细胞中IGF-1的表达.结论 补肾助孕汤可通过调节卵巢局部因子IGF-1及相应激素,促进卵泡生长发育及排出.     

促排卵汤对不孕大鼠卵巢局部基质金属蛋白酶mRNA表达的研究

目的观察促排卵汤对雄激素致不孕大鼠 (ASR)卵巢局部基质金属蛋白酶的作用。方法采用ASR大鼠模型及原位杂交技术 ,观察大鼠卵巢局部基质金属蛋白酶MMP— 9mRNA表达的变化。结果促排卵汤能促进不孕大鼠卵巢局部基质金属蛋白酶MMP—9mRNA表达 ,和模型组相比差异有显著性意义 (P <0 .0 1 )。结论促排卵汤具有促进不孕大鼠卵巢局部基质金属蛋白酶MMP—9mRNA表达的作用 ,是其促进卵巢排卵的可能机制。     

右归丸对雄激素致排卵障碍性不孕症大鼠的影响研究

目的：右归丸对雄激素致排卵障碍性不孕大鼠的影响,以进一步探讨右归丸治疗不孕症的作用机理。方法：将31只9日龄SD雌性大鼠随机分为空白对照组,模型组,右归丸组,于颈背下注射丙酸睾丸酮建立ASR大鼠模型,第80天开始灌服右归丸制剂,5周后取材,检测大鼠体重、卵巢和子宫指数;观察卵巢和子宫形态学,用放免法检测血中FSH、LH和E2水平。结果：右归丸可降低雄激素致排卵障碍性不孕大鼠的体重趋势,提高卵巢和子宫的指数（P〈0.01）;提高卵泡数和黄体数,减少病理性囊性卵泡,子宫腺体明显增多,（P〈0.01）;提高大鼠血清内FSH、LH以及E2水平（P〈0.05）。结论：右归丸可增加雄激素致排卵障碍性不孕症大鼠的卵巢、子宫的相对重量,促进卵泡的生长发育,增加FSH、LH以及E2水平,表明右归丸可通过调节下丘脑—垂体—卵巢轴,从而促进卵泡的生长发育及排出。     

调经助孕方对雄激素致不孕大鼠排卵作用的影响

目的:观察调经助孕方对雄激素致不孕大鼠排卵的促进作用。方法:采用9 d龄雌性大鼠注射丙酸睾丸酮建立雄激素致不孕大鼠模型,随机分为模型组及中药组,并另设正常对照组;自81 d龄起,中药组灌胃调经助孕方,模型组与正常组灌胃等量蒸馏水,连续30 d。采用阴道涂片测定大鼠动情周期及排卵率,采用ELISA法测定卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌激素(E2)、脱氢表雄酮(DHA)。结果:模型组大鼠表现为动情间期延长,且丧失正常性周期;中药组动情周期出现周期性变化,排卵恢复率为66.7%,两组差异有统计学意义(P0.05)。模型组大鼠FSH、LH和E2含量明显低于正常组(P0.05),DHA、T含量明显高于正常组(P0.05);与模型组比较,中药组大鼠FSH、LH和E2含量明显升高(P0.05),DHA、T含量明显降低(P0.05)。结论:调经助孕方能够明显提高雄激素致不孕大鼠的排卵率,改善大鼠生殖内分泌轴功能。     

雄激素和高脂饮食对雌性大鼠卵巢、垂体、肾上腺超微结构的影响

目的研究雄激素和高脂饮食对雌性SD大鼠卵巢、垂体和肾上腺超微结构的影响。方法 24只21日龄雌性SD大鼠随机分为对照组、雄激素注射组和雄激素注射+高脂饮食组。8周后,检测空腹血糖及血清胰岛素、睾酮、三酰甘油和胆固醇水平;透射电子显微镜观察卵巢、垂体、肾上腺组织超微结构。结果雄激素注射组、雄激素注射+高脂饮食组大鼠血糖、胰岛素、睾酮、三酰甘油、胆固醇水平均高于对照组;卵巢呈多囊性改变,垂体、肾上腺超微结构显示凋亡细胞增多。雄激素注射+高脂饮食组大鼠肾上腺上皮细胞的细胞质内脂滴增多。结论雄激素可诱导多囊卵巢的形成,同时可导致血糖升高;联合高脂饮食可构建较理想的大鼠多囊卵巢综合征模型。     

通脉大生片对肾虚排卵障碍不孕模型大鼠卵巢基质金属蛋白酶-9的影响

目的:探讨通脉大生片治疗对雄激素致不孕大鼠模型( ASR)卵巢基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响.方法:采用雄激素致不孕大鼠模型(ASR模型),以原位杂交方法观察分析卵巢MMP-9 mRNA信号表达的情况.结果:由于药物的干预,各个用药组MMP-9阳性细胞的表达浓度和表达总量均高于模型组,以通脉大生片高剂量组卵...     

卵泡抑素、抑制素对雄激素致不孕大鼠卵巢、垂体、下丘脑、肾上腺的作用

目的　 (1)建立雄激素致不孕大鼠 (ASR)模型 ,观察体质量、空腹血糖、胰岛素、血清总睾酮水平的变化 ;比较 ASR卵巢、肾上腺病理学改变 ,评价 ASR与人多囊卵巢综合征(PCOS)特征的异同。 (2 )测定 ASR卵巢、垂体、下丘脑、肾上腺中卵泡抑素、抑制素 α亚单位基因表达的变化 ,探讨它们在ASR不排卵、雄激素增高的发病机制中的作用。　方法　 9日龄雌性 SD大鼠 30只 ,随机分为两组 ,一组颈背部皮下注射丙酸睾酮 1.2 5 mg,另一组颈背部皮下注射等量中性茶油。 10 0日龄测定体质量、空腹血糖及胰岛素、血清总睾酮。一侧卵巢、肾上腺进行肉眼及光学显微镜下形态学比较。应用半定量RT- PCR方法 ,以 β- actin为内参照 ,比较卵巢、垂体、下丘脑、肾上腺中卵泡抑素、抑制素 α亚单位 m RNA的相对量。结果　 (1) ASR组体质量、空腹血糖及胰岛素、血清总睾酮较正常对照组明显增加 (ASR组体质量 2 0 8± 17.4 g,正常组 136±2 6 .1g;ASR组空腹血糖 11.79± 0 .6 1m mol/ L,正常组 4 .82± 0 .31m mol/ L ;ASR组空腹胰岛素 5 9.3± 7.1m IU/ L ,正常组 17± 3.6 m IU/ L;ASR组总睾酮 4 .5 0± 1.75 μg/ L,正常组1.77± 0 .6 0 μg/ L) ;两组相比 P<0 .0 1。 (2 ) ASR组卵巢呈多囊样改变 ,卵泡囊性扩张 ,卵细胞消失 ,     

补肾调经方对雄激素致无排卵大鼠卵巢转化生长因子β1及其受体表达的影响

目的：观察补肾调经方对雄激素致无排卵大鼠卵巢转化生长因子β1／转化生长因子pI型受体（TGF-β1／TGF—βRⅠ）表达的影响，探讨其治疗无排卵性疾病的作用机制。方法：建立雄激素致无排卵大鼠模型，设乌鸡白风口服液为阳性对照药，分为正常组、模型组、阳性药对照组和中药治疗组，采用HE染色观察卵巢组织形态学变化，采用免疫组化法检测卵巢颗粒细胞、间质细胞TGF—β1／TGF—βRⅠ的表达强度。结果：补肾调经方可改善病理状态下模型大鼠卵巢的形态结构，使模型大鼠卵巢颗粒细胞高表达的TGF-β1、间质细胞高表达的TGF-β1／TGF-βRⅠ恢复接近正常。结论：补肾中药可通过对卵巢TGF-β1及其受体TGF—βRⅠ表达的影响，促进卵泡发育。     

补肾中药对糖皮质激素性骨质疏松大鼠脂类代谢异常的调节作用

目的：探索糖皮质激素性骨质疏松症的分子机理之一可能由于脂类代谢异常所致,研究补肾中药对糖皮质激素性骨质疏松症的防治作用。方法：采用肌肉注射地塞米松（2.5mg/kg）和喂食低钙饲料的方法建立大鼠骨质疏松模型。将清洁级WISTAR大鼠（143只,雌雄各半）随机分成6组,分别是：A组：正常组;B组：模型空白对照组;C组：补肾中药组;D组：补中益气颗粒对照组;E组：血府逐瘀胶囊对照组;F组：骨疏康颗粒对照组。连续给药9周后,双能X线骨密度仪测定其股骨骨密度;Western blotting测定骨组织脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白（A-FABP）表达;自动生化分析仪测定各组血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量。结果：①与正常组比较,模空组大鼠股骨骨密度显著降低（P〈0.01）,股骨A-FABP表达显著增强（P〈0.01）,血清HDL-C含量显著降低（P〈0.01）;②与模空组比较,补肾中药组股骨骨密度显著增加（P〈0.01）,股骨A-FABP表达显著降低（P〈0.01）,血清HDL-C含量显著升高（P〈0.01）。结论：糖皮质激素性骨质疏松症病机与A-FABP升高、HDL-C降低有关,提示具有脂类代谢异常。采用补肾填精益髓的治法（鹿茸、牡蛎、淫羊藿3味中药组方）可以有效地防治糖皮质激素性骨质疏松,其疗效机制与调整脂类代谢有关。     

补肾中药对雄激素致不孕大鼠卵巢核仁组成区蛋白的影响

观察补肾中药对雄激素致不孕大鼠卵巢核仁组成区蛋白的影响。用ＳＤ雌性大鼠幼仔，出生９ｄ龄注射丙酸睾丸酮，制成雄激素致不孕大鼠（ＡＳＲ）模型。８０ｄ龄灌服补肾中药水溶液两周。１００ｄ龄心脏灌注处死。以核仁组成区蛋白嗜银染色（ＡｇＮＯＲ）和增殖细胞核杭原（ＰｃＮＡ）为指标，观察卵巢颗粒细胞、间质腺细胞的形态学变化。结果：补肾中药能够使ＡＳＲ卵巢颗粒细胞增殖、卵泡发育。治疗组的ＡｇＮＯＲ和ＰｃＮＡ计数明显高于模型组，而与对照组之间无显著差异。结论：补肾中药的这种作用可能是通过调节了下丘脑－垂体－卵巢性腺功能的结果，从而促使卵巢颗粒细胞发育、卵泡成熟。     

补肾中药抗衰老作用的实验研究

研究补肾中药对大鼠肝匀浆过氧化脂质生成的影响.结果表明,各补肾中药组大鼠肝匀浆过氧化脂质生成量显著低于生理盐水对照组(P<0.01),说明补肾中药具有抑制大鼠肝匀浆过氧化脂质生成的作用,提示补肾中药含有抗氧化成分.由此推测,补肾中药抗衰老作用的机理之一,可能是抑制了自由基引起的脂质过氧化损伤作用.     

Experimental Study on Effect of Tonifying Kidney Herbs on Pituitary, Ovary, and Adrenal Gland in Androgen Sterilized Rats

Besidesthefunctionaldisturbanceofsexglandaxis,theabnormalfunctionofadrenalglandalsohasitseffectinthepathogenesisofhyperandrogenanovulatoryemmeniopathy.Inthisstudy,lightmicroscopy,electronmicroscopy,cellculture,argyrophilicnucleolarorganizerregion(AgNOR),andproliferativecellneucleolarantigen(PCNA)measurementwereusedtoobservesynchronouslythemorphologicandendocrinechangesofpituitarygland,ovaryandadrenalglandinandrogensterilizedrats(ASR)beforeandafteradministrationoftonifyingKidneyherbs(TKH),…     

补肾中药对糖皮质激素性骨质疏松大鼠脂类代谢异常的调节作用

目的:探索糖皮质激素性骨质疏松症的分子机理之一可能由于脂类代谢异常所致,研究补肾中药对糖皮质激素性骨质疏松症的防治作用。方法:采用肌肉注射地塞米松(2.5mg/kg)和喂食低钙饲料的方法建立大鼠骨质疏松模型。将清洁级WISTAR大鼠(143只,雌雄各半)随机分成6组,分别是:A组:正常组;B组:模型空白对照组;C组:补肾中药组;D组:补中益气颗粒对照组;E组:血府逐瘀胶囊对照组;F组:骨疏康颗粒对照组。连续给药9周后,双能X线骨密度仪测定其股骨骨密度;Western blotting测定骨组织脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)表达;自动生化分析仪测定各组血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量。结果:①与正常组比较,模空组大鼠股骨骨密度显著降低(P<0.01),股骨A-FABP表达显著增强(P<0.01),血清HDL-C含量显著降低(P<0.01);②与模空组比较,补肾中药组股骨骨密度显著增加(P<0.01),股骨A-FABP表达显著降低(P<0.01),血清HDL-C含量显著升高(P<0.01)。结论:糖皮质激素性骨质疏松症病机与A-FABP升高、HDL-C降低有关,提示具有脂类代谢异常。采用补肾填精益髓的治法(鹿茸、牡蛎、淫羊藿3味中药组方)可以有效地防治糖皮质激素性骨质疏松,其疗效机制与调整脂类代谢有关。     

脂蛋白脂肪酶基因Ser447stop多态性对高糖低脂膳食诱导的健康青年血脂比值变化的影响

目的 探讨脂蛋白脂肪酶基因(LPL)Ser447stop位点多态性对健康青年血脂比值的影响及在高糖低脂(HC/LF)膳食诱导的血脂比值变化中的作用.方法 四川大学在校健康青年志愿者56名[(22.89±1.80)岁],于7 d平衡膳食后给予6 d HC/LF膳食.平衡膳食蛋白质、脂肪和碳水化合物含量分别为总热量的15%、31%和54%,HC/LF膳食分别为15%、15%和70%.于第1 d、8 d及第14 d早上采取12 h空腹血,测定血脂,计算甘油三酯/高密度脂蛋白-胆固醇(TG/HDL-C)、log(TG/HDL-C)、总胆固醇(TC)/HDL-C和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)/HDL-C值.聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)分析LPL Ser447stop位点多态性.结果 血脂比值的基础值、HC/LF膳食前和HC/LF膳食后在LPL Ser447stop野生型(S447S)和变异携带者(447XC)之间差异没有统计学意义.配对t检验发现,与HC/LF膳食前相比,HC/LF膳食后LDL-C/HDL-C 和 TC/HDL-C在S447S和447XC受试者均降低(P<0.05),TG/HDL-C无明显变化,log(TG/HDL-C)在S447S受试者升高(P<0.05),在447XC无明显变化.性别分组分析发现,在HC/LF膳食后,男性TG/HDL-C和log(TG/HDL-C)较HC/LF膳食前无明显变化,LDL-C/HDL-C和TC/HDL-C降低(P<0.001),且与LPL Ser447stop多态性无关.女性S447S受试者HC/LF膳食后TG/HDL-C和log(TG/HDL-C)较HC/LF膳食前升高(P<0.05),LDL-C/HDL-C和TC/HDL-C降低(P<0.05);447XC受试者4个比值在HC/LF膳食前后无明显变化.结论 LPL Ser447Stop C到G功能性突变可以削弱HC/LF诱导的log(TG/HDL-C)升高,进一步证实了其携带者的抗心血管疾病(CVD)保护作用.HC/LF膳食与LPL Ser447Stop多态性的相互作用对血脂比值的影响具有性别差异,不含LPL Ser447Stop功能性有益突变的女性,其血脂比值更易受HC/LF膳食的影响.     

健脾、补肾与健脾补肾三法对慢性乙型肝炎患者外周血T细胞功能的影响

目的比较健脾法、补肾法和健脾补肾法对慢性乙型肝炎患者外周血T细胞功能的影响。方法收集24例慢性乙型肝炎患者和10例健康人的抗凝外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),进一步分离提取培养T细胞,采用大鼠健脾、补肾和健脾补肾药物血浆进行干预。检测T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+及CD28+分子的表达。结果3组药物血浆干预后CD4+分子表达率升高(P<0.05),CD8+分子表达率降低(P<0.05),补肾组药物血浆干预后CD3+表达率升高(P<0.05),补肾组和健脾补肾组药物血浆干预后CD28+分子表达率升高(P<0.05)。结论健脾法、补肾法和健脾补肾法均能调节慢性乙型肝炎患者T细胞免疫功能,补肾法对慢乙肝患者T细胞功能的影响更为显著。     

MS合并OSAS时血脂的变化和意义

目的：：探讨代谢综合征(MS)合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAS)时血脂的改变和意义。方法：以就诊于承德医学院附属医院的MS患者为研究对象,均行睡眠监测,其中单纯MS患者200例,MS合并OSAS患者265例。分别检测两组患者的体重指数(BMI)、颈围、腰围、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和Epworth睡眠评价量表(ESS)评分。结果：MS+OSAS组患者的BMI、颈围、腰围、TG、TC、LDL-C明显高于MS组,HDL-C明显低于MS组(P＜0.05)。MS+OSAS组患者,随着阻塞程度的加重,ESS评分逐渐升高(P＜0.05)。结论：MS合并OSAS时可进一步加重血脂的改变;ESS评分可反映OSAS严重程度,积极治疗OSAS亦是预防心血管疾病的重要环节。     

补肾活血化痰汤对多囊卵巢综合征患者不孕疗效和内分泌代谢的影响

[目的]探讨补肾活血化痰汤对多囊卵巢综合征(PCOS)患者不孕疗效和内分泌代谢指标的影响。[方法]选取2014年1月—2015年11月期间治疗的PCOS不孕患者82例,随机分为观察组与对照组,对照组予口服二甲双胍治疗(每次500 mg,每日3次),观察组在此基础上联合应用自拟补肾活血化痰汤治疗,比较两组患者治疗前后性激素水平及代谢指标的变化,并比较排卵率及妊娠率。[结果]两组患者黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、睾酮(T)治疗后均明显降低,雌二醇(E_2)明显增高,且组间比较差异有统计学意义(P0.05)。两组患者体质量指数(BMI)均较治疗前明显下降(P0.05),但组间比较差异无统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后甘油三酯(TG)、血清胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均较治疗前显著降低,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。观察组排卵率及妊娠率均明显高于对照组(P0.05)。[结论]补肾活血化痰法治疗PCOS可调节患者性激素水平,改善糖、脂代谢及胰岛素抵抗,提高排卵及妊娠率。