苦参和奥沙利铂抑制AOM联合DSS诱导的小鼠结直肠肿瘤生长

【目的】 结直肠癌占全国肿瘤死亡人数的第5位。奥沙利铂是治疗晚期结直肠癌的一线药物,但它有神经毒性,会诱发神经病理性疼痛,常常被迫终止化疗。因此,研究开发毒副作用小的中草药来预防和减缓结直肠癌的生长具有重要的意义。苦参常用于治疗消化道炎症,并且国内有苦参和奥沙利铂联合用药治疗结直肠癌的报道。但是还未见苦参对体内结直肠肿瘤生长影响的研究,其作用机理也不清楚。本研究利用氧化偶氮甲烷(AOM)联合葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结直肠肿瘤模型,探索中草药苦参对结直肠肿瘤发生的影响。 【方法】 0 周龄雌性C57Bl/6J 小鼠分为3组,即I组:苦参组;II组:奥沙利铂组;III组:对照组。每组10只。腹腔注射AOM(12 mg/kg),记为第1天,正常饮水5 d后,小鼠自由饮用含 2% DSS 的去离子水5 d,继而饮用正常水 10 d,这种方式再重复2 次,但在后2次DSS浓度改为3%,诱导结直肠肿瘤。苦参碾碎后按 100 g:1000 mL去离子水混匀,煮沸30 min。冷却后,减压蒸馏浓缩到生药1 g/mL。按每天每千克小鼠10 g生药量灌胃给药。苦参组自第31天起,每天灌胃苦参液1次;奥沙利铂组在第70天起按每次6 mg/kg腹腔注射奥沙利铂,每4 d注射一次。至第100天时处死所有小鼠,分离结直肠统计肿瘤数量,并进行相关机理研究。 【结果】 苦参组结直肠肿瘤总数为18.0±1.85,与对照组(24.63±1.73)差异显著(P<0.05);其中大肿瘤(直径> 3 mm)数为0,与对照组(3.75±0.90)相比差异极显著(P<0.01);大肿瘤发生率为0,与对照组90%相比,差异极显著(P<0.01)。奥沙利铂组肿瘤总数为14.4±2.31,与对照组(24.63±1.73)相比差异极显著(P<0.01);其中中等大小肿瘤(3 mm>直径>1 mm)数为8.2±1.33,与对照组(14.63±1.29)相比差异极显著(P<0.01)。 【结论】 苦参能抑制DSS诱导的小鼠结直肠肿瘤的生长,其效果与奥沙利铂接近。特别应该注意的是,苦参能完全抑制结直肠中大肿瘤的发生。苦参的这种作用机理及有效的化学成分还不清楚,我们正在进一步研究中。结果对人结直肠肿瘤的防治及中草药的开发利用具有重要意义     

白花蛇舌草防治结直肠息肉

肠道湿热及湿邪困脾是结直肠肠息肉病机的关键,而白花蛇舌草具有利湿、散结、清热之功效,对抑制结直肠息肉的癌变及复发具有良好的作用.白花蛇舌草主要通过发挥细胞毒性作用、激活机体免疫、促凋亡、抗炎、抑制淋巴管和血管生长等,阻滞结直肠肿瘤的进展.但目前研究欠缺预防大肠息肉复发的大样本、多中心的临床研究论证,防治息肉复发的中药及...     

白花蛇舌草联合化疗治疗晚期恶性肿瘤的疗效分析

目的：观察白花蛇舌草联合化疗治疗恶性肿瘤的疗效。方法：选择经细胞学或病理证实的晚期癌症患者54例,随机分两组,治疗组28例,采用白花蛇舌草联合化疗对照组26例,应用单纯化疗。结果：治疗组CR2例,PR14例。CR＋PR为57．1％（16／28）。对照组CR1例,PR8例。CR＋PR为34．6％（9／26）。治疗组消化道反应,骨髓抑制率均低于对照组,而且生活质量高于对照组。结论：白花蛇舌草配合化疗治疗恶性肿瘤疗效显著,安全可靠,值得临床使用。     

白花蛇舌草总黄酮的抗肿瘤作用

目的 研究白花蛇舌草总黄酮(FOD)的体内外抗肿瘤作用.方法 建立了小鼠肉瘤S180、EAC腹水型、肝癌HepA实体型移植肿瘤模型,观察FOD (0.5、1.0、5.0、10.0mg/kg)的体内抗肿瘤作用;采用体外试验观察FOD的体外抗肿瘤作用.结果 FOD (5.0、10.0 mg/kg)对S180小鼠肿瘤有明显的抑制作用,FOD (1.0、5.0、10.0 mg/kg)对小鼠HepA实体瘤有明显的抑制作用,FOD对腹水型EAC小鼠无保护作用.FOD半数抑制浓度(IC50)均值分别为MCF-7细胞92.8μg/ml; BEL-7407细胞147.7 μg/ml;SMMC-7721细胞147.9μg/ml;BGC-823细胞241.3 μg/ml; COLO-205细胞247.1 μg/ml;Hep-2细胞284.8 μg/ml;A549细胞323.4 μg/ml;Hela细胞575.5 μg/ml.结论 FOD具有一定的体内外抗肿瘤作用.     

白花蛇舌草-半枝莲药对提取物抗氧化及清除自由基活性研究

目的研究白花蛇舌草-半枝莲3种常见配比(2∶1、1∶1、1∶2) 药对提取物抗氧化及清除自由基活性。方法采用紫外分光光度法测定提取物总黄酮的量,HPLC法分析提取物组成;采用还原能力、螯合能力、清除 DPPH、?OH自由基能力及保护 DNA 免受?OH损伤能力等5种化学及生物学模型,研究并比较药对3种配比提取物抗氧化及清除自由基活性的差异。结果不同配比组方对药对提取浸膏总黄酮的量、组成、清除 DPPH 能力、清除?OH能力及螯合Fe2+离子能力均有较大影响。而还原能力及保护 DNA 免受?OH损失作用与药对中各单药材所占比重相关性不大。结论药对提取浸膏提取率、总黄酮的量、组成及抗氧化活性均受配比的影响,其中1∶2配比药对的活性较强。     

白花蛇舌草与半枝莲复合提取物对膀胱癌YTS-1细胞系抑制作用的研究

目的探讨白花蛇舌草与半枝莲复合提取物对膀胱癌YTS-1细胞系的作用。方法常规方法培养膀胱癌YTS-1细胞株,取对数生长期细胞进行实验。采用MTT法观察不同浓度药物（0.25、0.5、1、2、4和8mg／ml）对细胞的生长抑制率;流式细胞技术观察2mg／ml药物作用24、48、72h后细胞周期的改变;克隆形成实验检测不同浓度药物（0.25、0.5、1.0、2.0、4.0mg／m1）处理后细胞克隆形成率的变化。结果（1）不同浓度白花蛇舌草与半枝莲复合提取物作用于YTS-1细胞系24、48、72h后,在0.25-2mg／ml范围内随着药物浓度的增加和作用时间的延长,其对YTS-1细胞的生长抑制率也相应升高,抑制作用表现出良好的量效和时效依赖关系（P〈0.05）。（2）实验组2mg／ml白花蛇舌草与半枝莲复合提取物作用48h后,G2／M期细胞明显减少（P〈0.05）;作用72h后G2／M期细胞显著减少（P〈0.01）。在sub-G1区域出现了一个细胞峰,表明YTS-1出现了细胞凋亡迹象。（3）空白对照及025、0.5、1.0、20、40mg／ml的白花蛇舌草和半支莲复合提取物作用YTS-1细胞后克隆数分别为216.6±18.50、156.7±16.29、81.33±6.66、43.00±6.56、37.67±14.22、43.00±12.12,克隆形成率分别为10.8％、0.78％、0.41％、0.21％、0.18％、0.22％,除0.25mg／ml浓度处理组与空白对照组克隆形成率无明显差异外（P〉0.05）,其余各浓度处理组克隆形成率均显著低于空白对照组（P〈0.01）。结论白花蛇舌草和半支莲复合提取物可以抑制膀胱癌YTS-1细胞集落的形成,诱导细胞凋亡,具有明显的肿瘤抑制作用。     

基于分子网络的半枝莲-白花蛇舌草治疗胃癌的多尺度作用机制研究*

目的 探讨半枝莲-白花蛇舌草治疗胃癌的作用机制。方法 通过化学信息学获得化学组分并构建成分数据集;基于OB和DL参数筛选活性成分;利用支持向量机与随机森林算法筛选作用靶点;分子对接法验证靶点;基于挖掘的数据构建有效成分-靶点、有效成分-靶点-功能网络。结果 研究筛选出35个有效成分和64个靶点。其中重要靶点为AR、ESR1、CA2、PTPN1、PIM1和CDK2。功能分析显示关键靶点主要作用在钙信号、cGMP-PKG、雌激素和cAMP 4条信号通路上。结论 半枝莲-白花蛇舌草的有效成分与其作用靶点形成互作网络,并调控关键信号通路来治疗胃癌。该研究体现了中药治疗肿瘤的多成分、多靶点与多尺度机制,有一定临床参考价值。     

白花蛇舌草对小鼠骨髓细胞增殖和IL-2生成的影响

目的:从免疫学方面探讨白花蛇舌草对小鼠骨髓细胞增殖反应和IL-2生成的影响.方法:用100%白花蛇舌草水煎液定期给小鼠连续灌胃15 d,1次/天,检测小鼠骨髓细胞增殖反应和IL-2的产生.结果:白花蛇舌草对以上两项免疫学指标均有明显增强作用,与对照组相比均有极显著性差异(P＜0.01).结论:白花蛇舌草可促进小鼠骨髓细胞增殖反应和IL-2的分泌.     

白花蛇舌草对宫颈癌细胞钙信号的影响

为探讨白花蛇舌草对宫颈癌细胞胞内游离钙浓度的影响及其抗癌作用机理。利用荧光染料Fura-2在细胞内能与游离钙结合，在一定波长光的激发下可发出荧光的特性，根据荧光的强度来检测游离钙的变化。结果显示：白花蛇舌草通过促进细胞内储藏钙的释放和胞外钙离子的内流，显著提高宫颈癌细胞内游离钙的浓度。     

白花蛇舌草连作对土壤微生物数量的影响

目的 以未栽培白花蛇舌草、栽培一茬白花蛇舌草和栽培二茬白花蛇舌草大田土壤为研究对象,分析白花蛇舌草的连作对土壤养分和微生物数量的影响。方法 用营养琼脂培养基、孟加拉红琼脂培养基和高氏一号琼脂培养基分别测定土壤中细菌、真菌、放线菌的数量。结果 白花蛇舌草种植后土壤酸度增强;有机质含量无显著变化;土壤中微生物总数增加,其中白花蛇舌草根际处的增加更为明显,表现出根际效应;连作导致土壤中细菌、放线菌数量减少,真菌数量增加。结论 白花蛇舌草连作对土壤养分含量无显著影响,但对土壤酸度和微生物群落结构有较显著影响。     

白花蛇舌草不同提取工艺对抗肿瘤活性的影响

目的 为研制低毒高效的抗癌制剂，确定不同的白花蛇舌草提取物（汤剂，亲脂提取物，粗多糖）的抗肿瘤作用。方法 采用水提取法，醇提取法，脱脂水提醇沉法分别制备了白花蛇舌草汤剂，亲脂提取物和粗多糖，用S-180细胞植入小鼠作为模型。进行了抑制肿瘤的试验。结果 白花蛇舌草的水提液（汤剂）对S-180肿瘤细胞没有明显的抑制作用。白花蛇舌草水溶性的多糖和亲脂提取物对S-180肿瘤细胞具有显著的抑制作用；在抑瘤的同时，多糖部分具有对化学损伤的保护作用；水溶性的多糖和亲脂提取物合并给药并未显示协同抗肿瘤活性。结论 白花蛇舌草的脂溶性部位和多糖具有良好的抗肿瘤应用前景。分别提取比简单的水提取效果好。     

白花蛇舌草提取物抗小鼠结直肠癌血管生成的实验研究

目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物对小鼠结直肠癌血管生成的抑制作用.方法构建32只BALB/c小鼠皮下CT26结肠癌动物模型,随机分为4组,每组8只小鼠,分别为Ⅰ组:对照组生理盐水0.1 mL/(10 g.d),Ⅱ组:白花蛇舌草乙醇提取物90 mg/(kg.d),Ⅲ组:白花蛇舌草乙醇提取物180 mg/(kg.d),Ⅳ组:白花蛇舌草乙醇提取物360 mg/(kg.d).各组小鼠在接种CT-26结肠癌细胞后的第10天开始测量肿瘤的长径(mm)和短径(mm);接种后第12天开始采用灌胃给药法给药,连续给药10 d后停止给药,继续喂养观察至第32 d后处死小鼠,取肿瘤组织用免疫组化法检测微血管密度.结果Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组小鼠的肿瘤体积明显小于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组的肿瘤组织微血管密度分别为(7.83±2.87)、(5.32±1.27)、(1.77±0.70)、(1.87±0.68);Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组肿瘤组织血管数量明显少于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05).结论在一定剂量范围内,白花蛇舌草乙醇提取物对小鼠CT-26结肠癌有明显的抑瘤作用,其机理可能是通过抑制小鼠结肠癌血管生成而起到抗肿瘤的作用.     

复方白花蛇舌草对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨复方白花蛇舌抑制肝癌细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用。方法体外培养人肝癌细胞Bel-7402和SK-Hep-1,用不同浓度的HDWF干预,采用MTT法检测肝癌细胞的活力,计算HDWF对细胞增殖的抑制率。采用倒置显微镜观察肝癌细胞形态,细胞计数仪计算肝癌细胞数,集落形成实验观察肝癌细胞的集落形成能力,Annexin-V/PI染色实验检测肝癌细胞凋亡情况。结果 MTT法检测结果显示HDWF对抑制肝癌细胞增殖有显著抑制作,形态观察和细胞计数显示HDWF可减少肝癌细胞的密度及细胞数量,HDWF可显著抑制肝癌细胞的集落形成及促进肝癌细胞凋。结论 HDWF具有抑制肝癌细胞增殖和诱导肝癌细胞凋亡的作用。     

白花蛇舌草-半枝莲药对治疗非小细胞肺癌的网络药理学研究

目的:利用网络药理学方法,研究白花蛇舌草-半枝莲药对治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的分子机制.方法:检索中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP),筛选并预测白花蛇舌草-半枝莲药对的有效活性成分与作用靶点.检索人类基因数据库(GeneCards)获取与NSCLC相关的基因.结合网络构建与分析等相关方法,筛选白花蛇舌草...     

白花蛇舌草对人骨肉瘤MG-63细胞Bax基因表达的影响

目的：探讨白花蛇舌草对人骨肉瘤M G‐63细胞Bax基因表达的影响。方法采用M T T法检测一定浓度白花蛇舌草注射液对MG‐63细胞作用6、12、24、48 h后的细胞增殖抑制率,实时荧光PCR（RT‐PCR）检测细胞内Bax基因的表达情况。结果白花蛇舌草注射液能明显抑制MG‐63细胞增殖,浓度为100μL／mL时,随着作用时间的延长,Bax基因表达明显升高（P＜0．05）。结论白花蛇舌草注射液可能通过上调Bax基因表达诱导人骨肉瘤M G‐63细胞凋亡。     

基于网络药理学探讨白花蛇舌草-半枝莲抗肝细胞癌的作用机制

[目的]基于网络药理学探讨白花蛇舌草-半枝莲药对治疗肝细胞癌的潜在靶点及作用机制。[方法]利用中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)检索白花蛇舌草和半枝莲活性成分,导入Drugbank数据库进行蛋白靶点匹配,使用GeneCards数据库、人类在线孟德尔遗传(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)数据库、治疗目标数据库(Therapeutic Target Database,TTD)、Drugbank、肝细胞癌肿瘤数据库(Oncogenomic Database of Hepatocellular Carcinoma,OncoDB.HCC)和Liverome数据库等获取肝细胞癌相关靶点,运用Cytoscape构建“药物-活性成分-靶点”网络,String数据库构建蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,并通过网络拓扑分析筛选关键成分及核心靶点,最后利用R语言及Cluego对预测得到的核心靶点进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。[结果]白花蛇舌草-半枝莲药治疗肝细胞癌的潜在靶点 89个,通过网络拓扑分析筛选得到6个核心靶点、5种关键成分。GO功能富集分析显示,白花蛇舌草-半枝莲药对主要参与细胞增殖、细胞凋亡、炎症反应和血管生成等生物学途径。KEGG通路富集分析显示,p53抑癌基因通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B,PI3K-Akt)通路、缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)通路、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)通路等是其关键信号通路。[结论]白花蛇舌草-半枝莲药对中有效成分主要是槲皮素、木犀草素、β-谷甾醇等,通过调节p53、PI3K-Akt、HIF-1、NF-κB和VEGF等信号通路抑制肝癌细胞增殖,并促进细胞凋亡,减少炎症反应,抑制血管生成,从而实现对肝细胞癌的治疗作用。     

白花蛇舌草对人前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察白花蛇舌草提取物对人前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:不同浓度(0.25 g·L-1、0.5 g·L-1、1 g·L-1)白花蛇舌草提取物作用人前列腺癌DU145细胞24 h、48 h、72 h后,使用CCK-8法检测白花蛇舌草提取物对DU145细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡的改变;实时定量PCR检测COX-2 m RNA和PCNA m RNA的表达;Western bloting法检测Bcl-2、Bax、Caspase3、Cyclin D1蛋白表达。结果:随着作用时间的延长和剂量的增加,白花蛇舌草提取物对DU145细胞增殖抑制率明显提高,呈时效和量效依赖效应。白花蛇舌草提取物作用48 h后,可明显提高细胞凋亡率,下调DU145细胞COX-2 m RNA、PCNA m RNA及Bcl-2、Cyclin D1蛋白表达,上调Bax、Caspase3蛋白表达,呈量效依赖效应。结论:白花蛇舌草提取物能降低人前列腺癌DU145细胞增殖能力,并诱导其凋亡,其机制可能与改变细胞周期和影响凋亡相关基因表达有关。     

白花蛇舌草对肿瘤作用及其成份研究

白花蛇舌草^[1]（Hedyotis diflusa wild）为茜草科植物。本品见于《广西中药志》一书,别名蛇舌草、蛇刺草、羊须草等,在我国主要分布于广东、广西、福建等地。白花蛇舌草的带根全草有清热、利湿、解毒之功效,治疗肺热喘咳、扁桃体炎、咽喉炎、阑尾炎、痢疾、黄疸、盆腔炎、附件炎、瘤肿疗疮、毒蛇咬伤等为常用中草药。药理研究121表明白花蛇舌草具有抗肿瘤、抗菌、消炎等活性。     

白花蛇舌草对人B淋巴细胞瘤Ramos细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨白花蛇舌草对Ramos细胞增殖和凋亡的影响。方法使用0、10、20、40 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h后收获细胞;采用细胞增殖检测试剂盒检测白花蛇舌草对Ramos细胞增殖的影响,并检测Ramos细胞线粒体膜电位的变化;流式细胞术检测白花蛇舌草对Ramos细胞凋亡的影响,并检测Ramos细胞中caspase-3、caspase-9活性的变化;Western blot法检测Ramos细胞Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果细胞增殖实验结果证明白花蛇舌草处理的Ramos细胞增殖受到明显抑制;20、40 m L·L-1白花蛇舌草干预Ramos细胞24 h后,Ramos细胞线粒体膜电位低于0 m L·L-1(P<0.05,P<0.01);流式细胞术检测结果表明细胞凋亡增加;与0 m L·L-1白花蛇舌草比较,20 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h,caspase-3和caspase-9活性增加了96%和37%(P<0.05),40 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h,caspase-3和caspase-9活性增加了148%和115%(P<0.01)。Western blot法证实Bax蛋白表达量增强,而Bcl-2蛋白表达量减弱,且呈现一定程度的剂量依赖性。结论白花蛇舌草可通过活化调控胱天蛋白依赖的线粒体途径,诱导Ramos细胞凋亡。     

白花蛇舌草激发肿瘤细胞产生超氧化物和激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶诱导肿瘤细胞凋亡

背景与目的:白花蛇舌草是常用于抗肿瘤的中药之一。实验研究和临床使用表明该药有明显的抗肿瘤作用,但是该药抗癌作用的原理尚不清楚。本文研究了白花蛇舌草的乙醇和水的提取物对人急性髓样白血病细胞HL60生存和死亡的影响及其机制。方法:我们用白花蛇舌草的提取物处理细胞,在处理后2h开始测量细胞内的超氧化物及各种半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)的水平,并于24h测量细胞的生存及凋亡情况。结果:我们发现乙醇和水的提取物对HL60细胞的生存有较强的抑制作用。对乙醇提取物的进一步研究则表明该提取物能有效地激活caspase-2和caspase-3并诱发癌细胞凋亡。乙醇提取物在较短的时间(2h)内诱导细胞产生超氧化物。结论:白花蛇舌草乙醇提取物能有效地激发肿瘤细胞产生超氧化物并诱导肿瘤细胞凋亡。由于细胞内产生超氧化物能诱导细胞凋亡,我们认为白花蛇舌草的抗癌机制是通过激发肿瘤细胞产生大量超氧化物,致使癌细胞内氧爆破,最终激活凋亡信号网络而使癌细胞凋亡。