GSTM3 mRNA在重症肌无力患者胸腺组织中的表达

目的 探讨谷胱甘肽S-转移酶m3(GSTM3mRNA在重症肌无力患者及正常人胸腺组织中的表达情况.方法 利用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法定量分析GSTM3 mRNA在重症肌无力胸腺与正常胸腺组织中的表达水平.结果 GSTM3 mRNA在重症肌无力患者和正常人胸腺组织中的表达水平分别为0.67±0.10和0.58±0.05,两者比较差异有统计学意义(P<0.01.结论 GSTM3 mRNA在MG胸腺组织中高表达,可能与MG的发生、发展密切相关.     

增生型胸腺组织重症肌无力相关蛋白的鉴定研究

目的 筛选出增生型胸腺组织重症肌无力（myasthenia gravis．MG）相关蛋白．并对其作出鉴定。方法 分剐利用异体MG患者血清、正常人血清和自身免疫病患者血清为第一抗体。与电泳转移到硝酸纤维素膜上的蛋白点孵育。做Western Blotting试验;然后在利用双向电泳技术获得的参考凝胶上挖取MG组特异显色点所对应的蛋白质点。经胰蛋白酶胶内酶切,对所得多肽混合物进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS）分析,得到肽质量指纹图谱（peptide mass fingerprinting,PMF）数据。登陆http：／／prospector．ucsf．edu／ucs fhtm14．0／msfit．htm网站,用MS Fit程序在NCBInr．10．13．2004数据库检索,鉴定蛋白质。结果Western Blotting试验共获得5个MG特异显色点。编号为2、4、6、7、9;经质谱分析得到5个蛋白质PMF图谱,数据库检索这些蛋白分别为：2号蛋白点isopeptidase T、4号蛋白点importin beta subunit和6号蛋白点SOUL protein。7号和9号蛋白点未能得到确认,需要更换检索备件或进行蛋白质测序才能进一步认定。结论运用蛋白质组学和Western Blotting研究方法,共获得5个MG相关蛋白,得到鉴定的三个蛋白分剐为2号蛋白点isopeptidase T、4号蛋白点importin beta subunit和6号蛋白点SOUL protein。     

重症肌无力胸腺切除后胸腺增生复发

作者报告重症肌无力胸腺切除术后仅有部分症状改善或者根本无改善的24例,其中4例是经胸手术,另20例为经颈手术,平均年龄为31岁,女18,男6,按Osserman等的临床分类,2例是ⅡA型,13例是ⅡB型,9例是Ⅲ型.术后(时间是40±31月)所有病人都进行了纵隔气造影(除1例进行了CT检查外)以确定是否有残存的胸腺组织.在胸     

重症肌无力患者胸腺组织中SNX17 mRNA的表达

重症肌无力（myasthenia gravis，MG）的发病具有一定的遗传倾向性和易患性，与HIA表型、乙酰胆碱受体（AChR）仅亚单位基因、免疫球蛋白重链基因和T细胞受体基因有关。说明MG受多基因调控，揭示MG致病基因类型、结构、突变情况和表达产物等遗传基础对分析MG发病原因十分重要。由于胸腺与MG发病关系密切，我们利用差减杂交文库和基因芯片技术在MG胸腺中筛选出20余个异常表达基因（相关文章待发表），其中分拣微管连接蛋白17（sorting nexins17，SNX17）mRNA表达明显增高。     

胸腺瘤旁胸腺组织Fas及其配体表达在重症肌无力发病中的意义

目的　探讨Fas及其配体 (FasL)蛋白表达与胸腺瘤合并重症肌无力的关系。方法利用免疫组织化学染色方法,分析各期胸腺瘤伴有和不伴有重症肌无力患者胸腺组织内Fas及FasL蛋白表达程度,利用显微图像分析系统对结果进行量化统计分析。结果　各期胸腺瘤伴有重症肌无力者胸腺组织内Fas及FasL蛋白表达(Ⅳ期分别为 1 75% ±0 85%和 4 96% ±2 01% )明显低于不伴有重症肌无力者(Ⅳ期Fas及FasL分别为 25 80%±13 43%和 25 75%±13 13% ),差异有统计学意义(P<0 01)。结论　胸腺瘤伴有重症肌无力者,胸腺内T淋巴细胞凋亡能力下降,导致自身反应性T淋巴细胞克隆清除障碍从而引发重症肌无力等自身免疫性疾病。     

Tfh细胞在重症肌无力患者胸腺中的表达及作用机制

目的探讨Tfh细胞在重症肌无力(MG)患者胸腺中乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)产生中的作用及机制。方法收集28例MG患者、9例无胸腺异常的先天性心脏病患者和9例未合并MG的胸腺增生患者。采用流式细胞术检测胸腺中滤泡辅助T(Tfh)细胞和B细胞的比例,分别通过RT-PCR和Western-Blotting技术检测胸腺中Th1、Th2和Tfh细胞特异性转录因子T-bet、GATA-3、Bcl-6 mRNA水平和细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、IL-21表达;采用HE和多标免疫荧光染色观察胸腺中生发中心以及Tfh细胞和B细胞之间的组织结构关系;采用放射免疫沉淀技术(RIA)检测MG患者胸腺和血清中AChR-Ab滴度;免疫磁珠提取胸腺中Tfh细胞和B细胞共培养,检测培养上清中IL-21和AChR-Ab滴度水平。结果 MG患者胸腺中Tfh细胞和B细胞比例及Tfh细胞相关转录因子Bcl-6mRNA水平和细胞因子IL-21表达均较对照组增高(P0.01);MG患者胸腺中抗AChR-Ab滴度较对照组增高(P0.01);MG患者胸腺中存在异位生发中心,且在生发中心内Tfh细胞和B细胞存在共定位;MG患者胸腺Tfh和B细胞共培养上清中IL-21和AChR-Ab水平较对照组增多(P0.01),且AChR-Ab产生可以被IL-21中和抗体阻断。结论 Tfh细胞通过在MG患者胸腺中辅助B细胞形成异位生发中心及促进抗AChR-Ab产生参与MG的发生和发展。     

重症肌无力伴胸腺瘤患者胸腺组织蛋白4.1R mRNA的表达研究

目的探讨蛋白4.1R在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)伴胸腺瘤患者胸腺组织中的表达情况。方法运用半定量RT-PCR方法检测7例胸腺瘤MG与7例正常对照组胸腺组织中蛋白4.1R的表达。结果胸腺瘤MG组胸腺组织中蛋白4.1R mRNA的相对表达水平为0.84±0.46,与对照组0.43±3.69相比明显增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论蛋白4.1R在胸腺瘤MG患者胸腺组织中mRNA水平表达异常,可能干扰胸腺细胞的信号传导,从而影响胸腺细胞的增殖和活化,参与了MG的发生。     

重症肌无力差异片段P10在人肌肉和胸腺组织中的表达

目的 筛选并鉴定与重症肌无力（ＭＧ）相关的基因。方法 采用差别显示聚合酶链反应（ＤＤＰＣＲ）从非肌嘲笑 ＭＧ患者骨骼肌组织中筛选左异片段,并对其中１条片段进行鉴定和差异分析。结果 通过比较１例非肌病患者和１例ＭＧ合并胸腺瘤患者骨骼肌组织中ｍＲＮＡ表达发现２５条差异片段,其中有１２条来自ＭＧ患者,１３条来自非肌病患者。选择猹来自于ＭＧ患者的ｃＤＡ片段测序,并做源性分析发现：它是一个新基因片段,该基因     

胸腺瘤患者胸腺淋巴细胞Fas表达与重症肌无力的相关性

目的 探讨胸腺瘤患者发生重症肌无力(myasthenia gravis,MG)的机制及Fas基因在MG发病中的作用.方法 收集131例胸腺瘤患者,按是否合并MG分为合并MG组(70例)和不合并MG组(61例)两组.应用免疫组织化学、蛋白电泳、聚合酶链反应和酶联免疫吸附等方法检测两组患者胸腺淋巴细胞Fas蛋白表达和血清可溶性Fas(sFas)水平,应用DNA测序技术检测Fas基因结构变异.结果 胸腺瘤合并MG组患者胸腺淋巴细胞Fas表达水平明显低于胸腺瘤不合并MG组,sFas含量[(3879.06±706.51) pg/mL]明显高于胸腺瘤不合并MG组[(1868.18±391.46) pg/mL] (P＜0.01);胸腺瘤合并MG组胸腺淋巴细胞Fas基因第6外显子16和21位点T→G置换突变发生率分别为65％和75％,明显高于胸腺瘤不合并MG组(两位点均为5％)(P＜0.05).结论 胸腺淋巴细胞Fas基因外显子6某些位点发生突变,所编码的Fas蛋白跨膜区变异或缺乏跨膜区而导致Fas结构和功能的改变可能是MG发生的主要原因.     

重症肌无力增生型胸腺组织11KD差异蛋白带双向电泳图谱的建立

目的建立分辨率高和重复性好的重症肌无力(MG)增生型胸腺组织11KD差异(异常)蛋白带的二维凝胶电泳图谱。方法首先采用SDS-PAGE电泳筛选出含有11KD差异(异常)蛋白条带的MG增生型胸腺组织,然后富集11KD蛋白条带。以17cm pH3-10固相pH梯度胶条(immobilized pH gradient,IPG)做第一向等电聚焦(IEF),12%SDS聚丙烯酰胺凝胶为第二向进行双向电泳(2-DE),PD Quest 7.1软件分析电泳图谱。结果11KD差异(异常)蛋白条带的出现率为72.2%;通过双向电泳,建立分辨率高和重复性好的重症肌无力(MG)增生型胸腺组织11KD差异蛋白带的双向凝胶电泳图谱,进一步分离11KD差异(异常)蛋白带,共得到(30±6)个蛋白点。结论通过蛋白质组技术快速建立重症肌无力11KD差异(异常)蛋白表达图谱,为进一步研究差异表达蛋白的功能提供实验基础。     

重症肌无力患者胸腺细胞Bcl-2表达的研究

目的 探讨重症肌无力(myasthenia gravis,MG)的发病机制,为临床治疗提供一定的实验理论依据.方法 用机械分离法、淋巴细胞分离液获取19例MG患者和11例正常对照组胸腺细胞悬液,接种于培养板中,分别加入雌、孕激素作为特异性刺激组,未加内分泌激素作为空白对照组,培养72h后收获细胞.采用流式细胞术分别检测MG患者和正常对照组胸腺细胞及雌、孕激素培养前后胸腺细胞的Bcl-2表达.结果 MG患者胸腺细胞Bcl-2袁达率比正常对照组显著增高,2者相比有统计学意义(P＜0.01);雌、孕激素培养组MG患者胸腺细胞Bcl-2的表达率比空白对照组显著降低,分别比较差异有统计学意义(P＜0.05),雌激素培养组与孕激素培养组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MG患者胸腺细胞Bcl-2表达升高,可能参与调控胸腺细胞凋亡,其表达异常可能是MG发病的一个重要因素;雌、孕激素抑制MG患者胸腺细胞Bcl-2的表达,提示体内雌激素、孕激素水平变化与MG患者病情变化有一定联系.     

重症肌无力患者相关基因差异片段N9在肌肉和胸腺中的表达

目的　筛选并鉴定重症肌无力 (MG)的相关基因。方法　测定由差别显示PCR(DDPCR)获得的、来自于正常人骨骼肌的cDNA差异片段 (暂命名为N9)的序列并进行同源性分析。运用半定量RT PCR方法分析该片段在MG病人和正常人胸腺与骨骼肌中的表达差异。结果　N9片段与GeneBank中已知非小细胞肺癌和肝癌的抑癌基因同源性高达 99% ;半定量RT PCR揭示 ,该基因在正常人和MG伴胸腺增生病人的肌肉中表达上调 ,而在MG伴胸腺瘤病人的肌肉中表达下调 ;正常人和病人的胸腺中均有该基因表达 ,但在伴胸腺瘤MG患者中的表达高于伴胸腺增生MG患者和正常人。结论　N9可能是已知的基因片段 ,它可能在伴不同类型胸腺异常MG的发病或发展中起某种作用 ,其具体作用还有待于进一步研究     

胸腺与重症肌无力

重症肌无力(MG)作为一种典型的自身免疫性疾病,其发病与患者胸腺内发生的异常免疫反应密切相关,大约80%左右的MG患者胸腺异常,包括胸腺增生、胸腺瘤等。因此,探索MG的发生、发展及其与胸腺内发生的免疫反应之间的关系,可为MG的治疗提供实验依据和新的思路。现就胸腺细胞及其表达的分子与MG的相关性做一综述。     

胸腺切除术在重症肌无力治疗中的地位

目的 评估胸腺切除术治疗重症肌无力(MG)的疗效.探讨个体化中西医治疗方案.方法 21例患者均在手术前后口服强的松、溴化吡啶斯的明,中医中药控制无力症状,均行扩大胸腺切除术,术后继续行中西医的内科治疗,1年以后评定疗效.结果 总有效率83%,无效17%,术后早期发生肌无力危象3例,无手术死亡者.结论 胸腺切除术结合中西医内科治疗重症肌无力疗效满意.     

重症肌无力患者胸腺细胞及外周血淋巴细胞Fas表达研究

目的 探讨重症肌无力(MG)的发病机制。方法 采用流式细胞术(FCM)分别检测MG患者胸腺细胞、外周血淋巴细胞(PBL)及地塞米松培养胸腺细胞的Fas表达。结果 MG患者PBL CD4、CD8细胞Fas表达率(分别为49％，34％；39％，34％)与对照组(分别为58％，25％；49％,24％)相比差异无显著性；MG患者胸腺细胞Fas表达率(11．20％，6．13％)较对照组(6．15％，1．84％)明显增高；地塞米松培养组Fas表达率MG组、正常人组分别为11．54％、8．62％和7．08％、3．13％，与空白对照组(MG组、正常人组分别为11．36％、6．87％和7．22％、2．86％)相比差异无显著性。结论 MG患者PBI，CD4、CD8细胞Fas表达率无明显增高，可能与自身反应淋巴细胞Fas和PBL FasL结合，发生程序化死亡有关。MG患者胸腺细胞Fas表达增高，可能参与MG发病初制。     

重症肌无力患者胸腺乙酰胆碱受体亚单位基因的表达

重症肌无力(myastheniagravis,MG)患者50%～70%有胸腺增生,10%有胸腺瘤,且胸腺切除后部分患者临床症状改善,使人们有理由相信MG与胸腺异常有关。我们对11例MG患者胸腺乙酰胆碱受体(acetylcholinereceptor,AChR)亚单位基因的表达进行研究,旨在探讨胸腺是否系患者自身致敏的起始部位。资料和方法1.研究对象:对于2002年1月至12月期间到首都医科大学附属北京同仁医院神经内科就诊的肌无力患者进行神经系统检查、新斯的明试验、疲劳试验,必要时加做冰试验、睡眠试验;结合血清AChR抗体、电生理、胸腺CT,必要时结合头部CT、头部磁共振成像(M…     

重症肌无力患者胸腺组织核胞浆转运蛋白α-5的表达研究

目的 探讨核胞浆转运蛋白α-5(karyopherin alpha-5,KPNA 5)在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者胸腺组织中的表达情况.方法 分别利用荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)和免疫组化染色方法,检测MG组20例患者与对照组10名受试者胸腺组织中KPNA 5 mRNA和蛋白分子的表达.结果 MG组和对照组胸腺组织中,KPNA 5 mRNA的表达水平分别为(0.71±0.08)和(0.57±0.02),两者之问的差异有统计学意义(P＜0.05);KPNA 5蛋白阳性细胞均数分别为(8.99±0.49)和(5.88±0.69),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 KPNA 5分子在MG胸腺组织中表达增高,可能参与了MG的发生,是MG相关基因.     

重症肌无力合并胸腺结核1例报道

<正>1病例报告患者,女,58岁。因"双眼睑下垂伴复视20d"于2014—02入院。患者于本次入院前20d,无明显诱因出现双眼睑下垂,以左侧为重,晨轻暮重,伴复视。入院后检查:T 36.5℃,P 76次/min,R 19次/min,Bp 138/95mmHg,神志清,精神差,言语清晰,双眼睑下垂,双眼球活动受限,四肢肌力Ⅳ级。既往史:"高血压"病史7a余,口服酒石酸美托洛尔6.25     

树突状细胞及相关细胞因子在重症肌无力患者胸腺中的变化

目的探讨胸腺树突状细胞及相关细胞因子在重症肌无力(MG)发病中的作用。方法采用免疫荧光双标法对11例胸腺瘤伴MG患者、6例单纯胸腺瘤、5例正常胸腺组织中S100(+)、HLADR(+)的树突状细胞进行检测,同时用组织匀浆、ELISA法检测胸腺组织中IL2、IL12含量。结果(1)树突状细胞主要分布在胸腺皮质、皮髓交界处,在胸腺瘤伴MG患者胸腺髓质也有一定分布。(2)S100(+)、HLADR(+)树突状细胞数量在胸腺瘤伴MG患者与单纯胸腺瘤患者间、单纯胸腺瘤患者与正常胸腺之间差异有显著性(P<005)。(3)IL2、IL12含量在胸腺瘤伴MG患者与正常胸腺之间差异有显著性(P<005);IL12含量在胸腺瘤伴MG患者与单纯胸腺瘤患者间亦有显著性差异(P<005)。结论胸腺树突状细胞以多种形式参与MG发病。