树鼩感染丁型肝炎病毒的实验研究

作者以树为对象、建立丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）／乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）实验感染动物模型，为丁型肝炎发病机理和药物筛选提供研究基础。对人工饲养的２０只健康成年树　接种ＨＢＶＤＮＡ阳性血清后ＨＢｓＡｇ的转阳率为７５％（１５只）；分别以同时感染（１３只）和重叠感染（９只）两种方式接种ＨＢＶＤＮＡ和ＨＤＶＲＮＡ阳性血清后，各有８只和６只树　的血清乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、丁肝抗原（ＨＤＡｇ）和丁肝抗体（抗ＨＤ）相继转阳，部分血清或肝内检出ＨＤＶＲＮＡ，以ＨＤＶ／ＨＢＶ阳性树　血清在树　间进行传代感染，可见第二代４只中３只、第三代５只中４只树　的血清ＨＢｓＡｇ、ＨＤＡｇ和抗ＨＤＶ相继转阳，２只第三代感染树　血清中检出ＨＤＶＲＮＡ，肝内检出ＨＢｓＡｇ和ＨＤＡｇ阳性；连续观察１６～１９个月，经重叠感染成功的４只树　血清ＨＢｓＡｇ持续阳性，２只ＨＤＡｇ和抗ＨＤ交替出现，１只抗ＨＤ持续阳性，提示可发展成慢性ＨＤＶ感染；感染ＨＤＶ的树　血清ＡＴＬ升高，肝组织有类似肝炎样病理变化，与ＨＤＶ在黑猩猩体内感染结果类似，提示树　可作为ＨＤＶ感染的动物模型。     

HBsAg阳性肝病患者HCV感染率及其在血中的存在形式

目的：探讨ＨＢｓＡｇ阳性肝病患者合并ＨＣＶ感染后对肝脏病变的影响以及血清中ＨＣＶ存在的形式。方法：被测对象为１６８例ＨＢｓＡｇ阳性肝病患者（肝炎后肝硬化１０４例，原发性肝细胞癌６４例），采用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测血清中ＨＣＶＲＮＡ，采用免疫沉定法判断ＨＣＶ在血清中存在的形式。结果：ＨＢｓＡｇ阳性肝病患者合并ＨＣＶ感染者为２０．８％，与无ＨＢＶ感染人群ＨＣＶ感染率２．２％比较有显著性差异。ＨＣＶ在血清中的存在形式７７％呈游离状态，２３％既有游离状态，又有免疫复合物的形式。ＨＢｓＡｇ阳性脏病患者合并ＨＣＶ感染者肝功能损害明显加重，肝癌并发率为２６．６％。结论：ＨＢＶ与ＨＣＶ重叠感染对肝脏损伤以及并发肝癌可能有协同作用     

鸭乙型肝炎病毒在天然宿主中的特异性体液及细胞免疫应答

用灭活的鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）免疫健康成年鸭，观察鸭外周血淋巴细胞的增殖，同时用间接ＥＬＩＳＡ法检测免疫鸭血清中抗ＤＨＢｓ／ｐｒｅｓ和抗ＤＨＢｃ。结果发现，在２次免疫后，４只鸭均产生低滴度的抗ＤＨＢｓ／ｐｒｅｓ，抗ＤＨＢｃ仅在１只鸭中一过性地出现，４只鸭中３只于第三次免疫后出现对ＤＨＢｓ／ｐｒｅｓＡｇ的淋巴细胞增殖反应，２只出现对ＤＨＢｃＡｇ的增殖反应。表明鸭对ＤＨＢｓ／ｐｒｅｓＡｇ的免疫应答性校对ＤＨＢｃＡｇ强，动态观察细胞和体液免疫出现的时相，多数鸭先测及抗体，用抗ＤＨＢｓ／ｐｒｅｓ被动免疫幼鸭可部分阻断ＤＨＢＶ的实验感染。     

应用聚合酶链反应检测乙肝患者外周血单个核细胞HBV.DNA的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测６０例乙型肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及血清ＨＢＶ．ＤＮＡ阳性率分别为７６．７％和４５％，尤其在急性乙肝（ＡＨ）或抗ＨＢｅ阳性或抗ＨＢｓ阳性的患者中，ＨＢＶ．ＤＮＡ在ＰＢＭＣ中检出率显著高血清，提示ＨＢＶ．ＤＮＡ普遍存在乙肝患者甚至ＨＢｓＡｇ转阴的病人ＰＢＭＣ中，可能是肝脏病病变反复活动及病毒重复感染的来源。因此也导致既往有ＨＢＶ感染史的ＨＢｓＡｇ阴性献血员传     

肝细胞癌组织中丙肝病毒抗原及HBsAg的免疫组化检测

为了解丙肝病毒（ＨＣＶ）感染与我国肝细胞癌（ＨＣＣ）之间的关系，以及ＨＣＶ抗原成分（ＨＣＡｇ的）在ＨＣＣ组织中的分布状况，应用鼠抗ＨＣＶ单克隆抗体，采用免疫组化技术检测ＨＣＣ组织中ＨＣＡｇ的表达，同时检测了乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）。结果：４０只ＨＣＣ标本组织中ＨＣＡｇ，ＨＢｓＡｇ检出率分别为１７．５％（７／４０）和７０％（２８／４０），其中单一ＨＣＡｇ阳性者仅１例，ＨＣＡｇ和ＨＢｓＡｇ同时存     

HBV_2患者血清HBsAg的氨基酸组成分析

将２例ＨＢＶ＿２患者血清ＨＢｓＡｇ纯化，分析了ＨＢＶ＿２的ＨＢｓＡｇ氨基酸组成，并与分子量为６３０１９８道尔顿ＨＢＶ＿１的ＨＢｓＡｇ三种多肽氨基醚组成比较。实验发现，ＨＢＶ＿２与ＨＢＶ＿１的ＨＢｓＡｇ的氨基醚组成有较大区别，且区别指数均在１３以上。提示ＨＢＶ＿１和ＨＢＶ＿２的ＨＢｓＡｇ在一级结构上存在较大差异；ＨＢＶ＿２可能系一新的乙型肝炎病毒，也可能系由于ＨＢＶ＿１Ｓ区核苷酸突变所致的变异株。     

应用聚合酶链反应检测乙肝患者外周血单个核细胞HBV·DNA的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测６０例乙型肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及血清ＨＢＶ·ＤＮＡ，阳性率分别为７６．７％与４５％。尤其在急性乙肝（ＡＨ）或抗ＨＢｅ阳生或抗ＨＢｓ阳性的患者中，ＨＢＶ·ＤＮＡ在ＰＢＭＣ中检出率显著高于血清。提示ＨＢＶ·ＤＮＡ普遍存在于乙肝患者甚ＩＨＢｓＡｇ转阴的病人ＰＢＭＣ中，可能是肝脏病变反复活动及病毒重复感染的来源．因而也导致既往有ＨＢＶ感染史的ＨＢｓＡｇ阴性献血员传播ＨＢＶ的可能。     

慢性肝病HBVDNA,HDVRNA原位杂交及HBsAg,HBcAg研究

以特异性和敏感性较高的地高辛配基探针原位分子及免疫组化技术，对云南６８例病毒性肝炎ＣＰＨ，ＣＡＨ，肝细胞癌及癌周组织进行ＨＢＶＤＮＡ，ＨＤＶＲＮＡ，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ研究，结果表明：ＨＢｓＡｇ作为靶抗原诱发机体免疫反应，参与炎症过程；除浆膜型ＨＢｃＡｇ，弥漫型，膜型ＨＢｓＡｇ外，ＨＢＶＤＮＡ在肝组织中表达也与肝炎活动性有关；     

乙型和丙型肝炎重叠感染患者肝组织免疫组织化学双标记研究

探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）重叠感染患者肝组织中病毒的复制状况和相互关系。方法采用免疫组织化学双标记技术，以抗－ＨＣＶＮＳ３、抗－ＨＣＶＮＳ５单克隆抗体和抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｃ多克隆抗体，检测２５例尸检肝组织中ＨＣＶＡｇ和ＨＢＶＡｇ的分布和表达。结果ＨＢ－ｓＡｇ和ＨＣＶＮＳ３Ａｇ同时阳性１１例，ＨＢｓＡｇ和ＮＳ５Ａｇ阳性１２例，ＨＢｃＡｇ和ＨＣＶＮＳ３Ａｇ及ＨＣＶＮＳ５Ａｇ阳性各１０例。几乎所有单标记染色阳性切片，其双标记染色也阳性。感染ＨＣＶ或ＨＢＶ的肝细胞各呈灶性、散在或弥散混杂分布，在重叠感染肝组织中，与ＨＢＶ复制有关的表达类型，如ＨＢｓＡｇ膜、浆型和ＨＢｃＡｇ浆型以及ＨＣＶＮＳ３Ａｇ和ＨＣＶＮＳ５Ａｇ的检出例数，同单纯感染组相比差异无显著意义（χ２＝０．１５４及０．１９８，Ｐ＞０．０５）。结论乙型和丙型肝炎病毒在重叠感染时，两种病毒在肝组织内可能不存在互相干扰和抑制。     

122例肝病患者肝内HDV,HBV感染的研究

本文对１２２例各型肝病患者用ＡＢＣ法同时检测肝内ＨＤＶ及ＨＢＶ抗原。结果显示，ＨＢｓＡｇ和／或ＨＢｃＡｇ检出率为２７．８７％（３４例），其中ＨＢｃＡｇ为１３．２２％（１６例），ＨＢｓＡｇ为１８．１８％（２２例），两者无显著性差异（Ｐ＞０．０５）．ＨＤＡｇ检出率为４．９２％（６例），这６例丁型肝炎血中均检出ＨＢｓＡｇ和抗一ＨＢｃ，为慢性肝炎．在重肝、肝硬化和肝癌患者的肝内未检出ＨＤＡｇ．说明我国肝炎病毒感染仍以ＨＢＶ为主，ＨＤＶ感染率明显低于欧美，ＨＤＶ感染与ＨＢＶ感染关系密切，ＨＢＶ感染合并ＨＤＶ感染时易使病程慢性化。     

乙肝病毒标志物阳性产妇母乳喂养的研究

目的：探讨乙型肝炎（ 乙肝） 病毒携带孕妇胎儿宫内感染率和乳汁中乙肝病毒（ Ｈ Ｂ Ｖ） 阳性率的相关性,分析研究乙肝血清学指标阳性产妇是否适于哺乳。方法：对５２ 例乙肝血清学指标阳性的产妇,应用酶联免疫吸附法和斑点杂交法分别检测脐血和初乳中的 Ｈ Ｂ Ｖ 标志物（ Ｈ Ｂ Ｖ Ｍ） 以及 Ｈ Ｂ Ｖ 脱氧核糖核酸（ Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ） ,并对比分析。结果：孕妇 Ｈ Ｂ Ｖ 阳性与相应的脐血和初乳中的 Ｈ Ｂ Ｖ Ｍ 阳性率以及 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 的检出率呈高度的一致性（ Ｐ ＞ ００５） 。５２ 例 Ｈ Ｂ Ｖ Ｍ 阳性的孕妇中,脐血和初乳中 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 的检出率均以乙肝表面抗原（ Ｈ Ｂｓ Ａｇ） 、乙肝ｅ 抗原（ Ｈ Ｂｅ Ａｇ） 及乙肝核心抗体（ Ａｎｔｉ Ｈ Ｂｃ）３ 项阳性者最高（８５７１ ％ 和９２８６ ％ ） , Ｈ Ｂｓ Ａｇ 、 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 双项阳性者次之（８０ ％ ） , Ｈ Ｂｓ Ａｇ 单项阳性者最低（２０ ％ ） 。结论： Ｈ Ｂ Ｖ 宫内传播以及初乳排毒率与母亲的 Ｈ Ｂｓ Ａｇ 和 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 状态密切相关。直接检测初乳中 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 为指导哺乳的最可靠方法。血中 Ｈ Ｂｓ Ａｇ 、 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 和 Ａｎｔｉ Ｈ Ｂｃ３ 项阳性以及 Ｈ Ｂｓ     

1827名供血者HBV五项指标检测分析

检测１８２７名供血者ＨＢＶ五项指标阳性率为３９．２４％，供血史长者的ＨＢＶ感染率高于短者。在ＨＢｓＡｇ阳性供血者中ＨＢｅ阳性率达１３．８５％，在ＨＢＶ高发区筛稀罕共血者时，除检测ＨＢｓＡｇ之外，应增加ＨＢｓＡｇ抗－ＨＢｅ的检测。     

白细胞内HBV DNA与HBV血清标志物的关系

对２５０例一般人群血清中ＨＢＶ标志物类型与白细胞内ＨＢＶ ＤＮＡ存在的关系进行了对比观察。结果显示：在ＨＢｓＡｇ及ＨＢｅＡｇ阳性９例中，４例白人ＨＢＶ ＤＮＡ阳性，抗－ＨＢｅ阳性的９例中仅１例白细胞内ＨＢＶ ＤＮＡ阳性。在ＨＢｓＡｇ消失 后产生抗－ＨＢｓ的９６例中有７例白细胞内ＨＢＶ ＤＮＡ阳性。     

丙型病毒性肝炎重叠感染分布特点

本文以１９９２．６－１９９３．７期间６６例抗－ＨＣＶ阳性患者为观察对象，分析丙型病毒性肝炎临床型分布、重叠感染分布等特点。结果：ＨＣＶ／ＨＡＶ重叠感染发病率６．０６％，ＨＣＶ／ＨＢＶ重叠感染发病率４８．４８％。丙型肝炎中抗－ＨＣＶ与ＨＢｓＡｇ阳性的病例４．５％，抗－ＨＣＶ与ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性占１９．７％，抗－ＨＣＶ与ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗ＨＢｃ阳性占７．６％，抗ＨＣＶ与ＨＢｓＡｇ，Ｈｂ     

孕妇HBsAg及HBeAg血清学调查分析

对七台河市４９６名孕妇ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ进行了调查。结果表明，孕妇ＨＢｓＡｇ阳性率７．０６％（３５例），ＨＢｓＡｇ阳性者中ＨＢｅＡｇ阳性率为３３．３３％（１０例）。在６１名配偶中进行ＨＢｓＡｇ检测的孕妇中，配偶ＨＢｓＡｇ阳性孕妇的ＨＢｓＡｇ阳性率３５．７１％，配偶ＨＢｓＡＧ阴性孕妇的ＨＢｓＡｇ阳性率３．７０％，前者为后者９．６５倍。可见，ＨＢｓＡｇ阳性的配偶主要通过性传播和生活密切接触传播的机制，使孕妇感染ＨＢＶ的危险性明显显增高。因此在乙型肝炎预防上，除了对ＨＢｓＡｇ和／或ＨＢｅＡｇ阳性孕妇要高度重视之外，还要对ＨＢｓＡｇ阳性的父亲给予充分重视。     

聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义

用ＰＣＲ法检测１６６例乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果显示：ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性，ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＥｂＡｇ阳性组，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为９６．２％、２８．６％、９３．５％、ＨＢｓＡｇ单项阳性者中，检出ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性７８例（孕妇占１９．２％），阳性率８１．３％。另外，在２０例血清标志物全部阴性对照组中发现ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１例，阳性率５．     

唾液腺组织中HBsAg和HBcAg分布的探讨

应用多克隆抗体和卵白素—生物素—辣根过氧化物酶复合物法（ＡＢＣ法）对１３例乙型肝炎患者手术摘除的唾液腺组织中ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ进行检测。结果ＨＢｓＡｓ阳性４例，ＨｂｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ阳性１例。对照组６例，，测得ＨＢｓＡｇ阳性１例。本实验结果首次为乙型肝炎患者唾液腺组织内ＨＢＢＶ的分布提供了形态学依据，表明乙型肝炎患者唾液中的ＨＢＶ源于受感染的唾液腺组织。     

非放射性分子杂交法检测HBV感染

用非放射性标记的ＨＢＶ－ＤＮＡ探针检测３７１份至少有一项ＨＢＶ免疫学标志阳性血清和５１０份对照血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果表明：５１０份对照血清和７９份仅抗－ＨＢｓ阳性血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ均为阴性，８２份ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阳性血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率为１００％，１０３份ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性血清的检出率为７９．６％，７６份ＨＢｓＡｇ阳性。ＨＢｅＡｇ阴性、但抗－ＨＢｅ阳性血清的检出率为８０．３％，２９２份ＨＢＶ不同感染阶段血清总检出率为７５％。非放射性分子杂交法可直接检测出ＨＢＶ的复制，由于该法亦可定量，故还可用于判断血清传染程度和血清病毒的含量。     

1343例孕妇乙肝病毒感染情况分析

对１３４３例孕妇进行乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）标志物检测。结果显示，ＨＢｓＡｇ阳性者１８０例，占１３．４０％，其中来自农村的孕妇ＨＢｓＡｇ阳性率（１５．９９％）明显高于城市（１１．３９％）的孕妇（Ｐ＜０．０５）。而在ＨＢｓＡｇ阳性的１８０例孕妇中，有３５例伴有ＨＢｅＡｇ阳性，表明本地区孕妇ＨＢＶ感染率是相当高的。因此，对孕妇常规进行产前ＨＢＶ检测有助于阻断ＨＢＶ的母婴传播。     

PCR检测HBV—DNA对HBsAg无症状携带者传染性的监测

用多聚酶链反应和斑点杂交技术检测了５０例ＨＢｓＡｇ无症状携带者血清中ＨＢＶＤＮＡ，检出率分别为５０％和５８％。抗－ＨＢｃ、抗－ＨＢｅ和ＨＢｅＡｇ阳性者ＨＢＶＤＮＡ的检出率高于阴性者．单项ＨＢｓＡｇ阳性无症携带者ＨＢＶＤＮＡ在血中呈不同程度地波动，其排毒情况无明显规律可循。