rhIL—1β及TGF—β对髁状突软骨细胞增殖影响的研究

目的：探讨rhIL-1β及TGF－β对髁状突软骨细胞增殖的影响。方法：以酶消化法获得兔髁状突软骨细胞。用MTT法及PCNA免疫组化染色检测不同浓度rhIL-1β及TGF－β对体外培养的兔髁状突软骨细胞增殖的影响。结果：MTT检测，rhIL-1β（10，20ng/ml）处理软骨细胞48h后，可明显抑制软骨细胞增殖，经统计学检验，处理3－6d有显著性差异（P＜0．01,t检验）；加入TGF－β（10，20ng/ml)可明显拮抗rhIL-1β对软骨细胞增殖的抑制作用，并且浓度愈高对rhIL-1β的抑制作用愈强。PCNA检测，rhIL-1β处理软骨细胞后PCNA阳性细胞率降低，随rhIL-1β的刺激浓度增加，阳性率明显降低；加入外源性TGF－β可以使PCNA的阳性率提高。结论：rhIL-1β对髁状突软骨细胞增殖具有报制作用，外源性TGF－β对该作用具有明显的拮抗效应。     

rhIL-1α/rhTGF-β1诱导下大鼠髁突软骨细胞PRG4的表达

目的:观察rhTGF-β1对rhIL-1α作用下大鼠髁突软骨细胞蛋白多糖4(PRG4)表达的影响.方法:酶消化法获取髁突软骨细胞,甲苯胺蓝染色鉴定.细胞上清液中加入10 ng/ml的rhIL-1α,48 h后加入10 ng/ml的rhTGF-β1.不同时间点应用RT-PCR检测PRG4 mRNA的表达情况,ELISA法检测PRG4蛋白的分泌变化.结果:加入rhIL-1α 24、48、72 h组的PRG4表达量与对照组均有统计学差异(P<0.05),且逐渐降低.48 h组再加入rh TGF-β1 24h后PRG4表达量与对照组无统计学差异(P>0.05),而48 h后与各组均有统计学差异(P<0.05),且最高.结论:rhTGF-β1可以上调髁突软骨细胞PRG4的表达,且可逆转IL-1α的下调作用.     

rhTGF-β1对大鼠髁突软骨细胞SZP表达的影响

目的:观察rhTGF-β1对大鼠髁突软骨细胞SZP表达的影响.方法:酶消化法获取大鼠髁突软骨细胞,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原染色鉴定.细胞培养液中分别加入10 μg/L、20μg/L rhTGF-β1后,不同时间点应用RT-PCR和ELISA法检测SZP mRNA和蛋白的表达.结果:加入10μg/L、20μg/L rhTGF-...     

渐进性咬合紊乱对髁突软骨TGF-β1表达的影响

目的:探讨渐进性咬合紊乱对髁突软骨TGF-β1表达的影响及意义。方法:27只雄性新西兰大白兔被随机分为实验组、操作对照组和正常组,每组9只,用结扎丝固定橡皮圈单颌牵拉第一前磨牙向近中倾斜移动,造成渐进性咬合紊乱。只结扎钢丝不牵拉的兔子做为操作对照组。1、2和3个月分批取颞下颌关节髁突,用免疫组织化学方法检测髁突软骨TGF-β1表达变化,并做图像分析和统计学处理。结果:与对照组相比,实验组大多数部位TGF-β1表达持续增强。表达分布发生变化,纤维层和增殖层,由对照组的前内强、后外弱变为实验组的前内弱、后外强;肥大层,由对照组的内后最强变为实验组的外后最强。结论:渐进性咬合紊乱可导致髁突软骨中TGF-β1表达明显增强,TGF-β1可能参与了关节软骨的修复活动。     

静张应力与TGF-β_1对大鼠髁突软骨细胞增殖效应调节初步研究

目的：探讨转化生长因子-β(TGF-β1)在静张应力环境下对髁突软骨细胞增殖效应的影响。方法：（1）将传代培养至第4代大鼠下颌髁突软骨细胞在12孔培养板上培养，采用流式细胞仪测定加入不同浓度TGF-β1（0.1、1、10ng/ml）0.6、12、18、24h后，对髁突软骨细胞增殖活性（PI值）的影响。（2）将第4代大鼠下颌髁突软骨细胞增殖活性（PI值）的影响。结果：不同浓度TGF-β1（0.1、1、10ng/ml）在模拟生理环境下以剂量依赖型的方式整体促进了髁突软骨细胞增殖效应，对髁突软骨细胞的增殖活性调节作用主要在12、18h段，增殖峰值在18h左右；在5kPa静张应力联合TGF-β1刺激下培养较TGF-β1的单独效应具有更强的促髁突软骨细胞增殖作用。结论：静张应力联合TGF-β1可以调节髁突软骨细胞的增殖活性。     

bFGF、IGF-Ⅰ及TGF-β1对人髁突软骨细胞增殖的影响

目的 研究胰岛素样生长因子（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ Ⅰ,ＩＧＦ－Ⅰ）,碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｂＦＧＦ）,转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ β１,ＴＧＦ－β１）单独及联合应用,对人髁突软骨细胞增殖的剂量－效应及时间－效应。方法 采用体外细胞培养技术及噻唑蓝比色法,对３种生长因子对软骨     

TGF-β及HSP70在rhIL-1β介导的TMJ髁状突软骨炎症损伤中的作用

目的 探讨TGF－β及HSP70在人重组白细胞介素－1（rhIL-1β）介导颞颌关节炎症损伤中的作用。方法 SD大鼠颞下颌关节腔内反复多次注射rhIL-1β，建立颞凳关节炎症损伤模型，利用免疫组织化学检测髁状突软骨炎症损伤过程中TGF－β及HSP70的表达变化。结果 注射后1－3d，实验侧髁状突软骨全层均可见TGF－β阳性软骨细胞，以增殖层阳性表达最明显，7d除髁状突软骨增殖层表达仍较强，前肥厚层TGF－β表达开始减弱，30d髁状突软骨全层TGF－β表达与对照侧相近。HSP70的表达与TGF－β具有相似的特点，注射后1－3d，实验侧髁状突软骨浅层HSP70的表达明显增强，7d后表达逐渐减弱，15d后HSP70表达与对照侧相近。结论 在rhIL-1β介导的髁状突软骨关节炎症损伤中，早期TGF－β与HSP70的表达增强，提示TGF－β及HSP70可能参与了软骨炎症损伤的修复过程。     

TGF-β1对MDPC-23细胞增殖和细胞周期的影响

目的：研究转化生长因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)对成牙本质细胞系MDPC—23增殖和细胞周期的影响。方法：细胞培养，MTT比色测定法和流式细胞仪(flow cytometry，FCM)分析技术。结果：TGF-β1能明显抑制MDPC—23细胞增殖，无剂量依赖性，但呈时间依赖性；FCM结果显示，TGF-β1作用后，MDPC—23细胞G1％升高，而S％显著降低，反映细胞增殖活性的增殖指数Prl值(S G2M)％增高。结论：TGF-β1抑制成牙本质细胞系MDPC—23细胞增殖和DNA合成。     

TGF-β_1在不同发育阶段胎儿髁突软骨中的表达

目的 :研究β转化生长因子 - 1(TGF - β1)在胎儿髁突软骨中表达 ,探讨该因子在软骨发育中的作用。方法 :30例 13～ 33周胎儿分为A、B、C和D四组 ,应用HE染色和免疫组化S -P法观察髁突软骨TGF - β1的表达。结果 :TGF - β1在所观察各组髁突软骨各层中均有表达 ,成软骨细胞层表达最强 ,主要在胞浆。TGF - β1积分光密度在上、中、下三层之间存在差异 (P <0 .0 5 )。平均灰度和平均光密度在不同胎龄组间存在差异 (P <0 .0 5 )。A组与B组、A组与C组、B组与D组、C组与D组之间有显著性差异。结论 :在髁突软骨不同发育时间、不同分化阶段TGF - β1的表达水平不同。     

紊乱对猴髁突软骨中TGF-β1分布的影响

目的 :探讨渐进性咬合紊乱所致猴颞下颌关节退形性变中 ,髁突软骨TGF β1的分布变化特点及其意义。方法 :2只青年恒河猴分成实验组和对照组。采用拔牙和固定矫治技术造成实验组后牙渐进性咬合紊乱。 8月后 ,对髁突进行HE染色和TGF β1免疫组化定量分析。 结果 :①实验组髁突前内侧出现明显的退性形变 ,与对照猴相比 ,其髁突各部位软骨厚度均变薄 (P <0 .0 1) ,其中变化程度最大者为前部内份 ,其次是髁突前部中份和中部内份。②与对照猴相比 ,实验组髁突软骨各部位TGF β1表达均升高 (P <0 .0 1)。结论 :渐进性咬合紊乱可导致髁突退性形变 ,髁突软骨中TGF β1表达明显增强 ,TGF β1可能参与了关节软骨的修复活动。     

地塞米松诱发先天性腭裂对TGF-β1、TGF-β2表达的影响

目的：探讨TGF-β1、TGF—β2在先天性腭裂发病过程中的作用。方法：在GDl2^12以磷酸地塞米松注射液(50mg／kg)经母鼠腹腔注射，对照组则以等量生理盐水代替。分别于GDl3^12、GDl4^12、GDl5^12取出胎鼠头部标本，作冠状位切片。采用免疫组化方法检测TGF-β1、TGF-β2的表达。结果：地塞米松在GDl2^12作用于孕鼠可以诱发小鼠先天性腭裂，并使胚胎腭中TGF-β1表达较同期正常组高，TGF-β2表达较正常组高，腭突上抬后的降低被抑制。结论：地塞米松诱发先天性腭裂与TGF-β1．TGF-β2的表达异常改变有关。     

白细胞介素－1β、转化生长因子－β对人牙周膜成纤维细胞DNA合成的影响

目的：观察白细胞介素－１β（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１β，ＩＬ－１β）和转化生长因子－β（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－β，ＴＧＦ－β）单独作用、组合后对人牙周膜成纤维细胞（ｈｕｍａｎｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌｌｉｇａｍｅｎｔｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ，ＨＰＬＦ）的ＤＮＡ合成量的影响。方法：用３Ｈ胸腺嘧啶脱氧核苷细胞内掺入法。结果：ＤＮＡ合成量显著增多。浓度为０．０１ｎｇ／ｍｌ的ＴＧＦ－β与浓度为１０ｕ／ｍｌ的ＩＬ－１β组合后对ＨＰＬＦ的ＤＮＡ合成量与单纯ＩＬ－１β组间无显著差异（Ｐ＞０．０５），而０．１ｎｇ／ｍｌ、１．０ｎｇ／ｍｌ的ＴＧＦ－β与三种浓度ＩＬ－１β组合后，ＨＰＬＦ的ＤＮＡ合成量显著高于单纯的ＩＬ－１β组。结论：ＩＬ－１β、ＴＧＦ－β对ＨＰＬＦ的ＤＮＡ合成有促进作用，这两种细胞因子组合并非各个细胞因子作用的简单相加     

静压力对髁突软骨转化生长因子β1表达影响的体外研究

目的:观察静压力对体外培养髁突软骨细胞表达TGF-β1的影响。方法:解剖、培养SD大鼠髁突软骨,应用静压力加载装置对实验组软骨加载强度为10kPa的持续静压力1h。对照组除软骨不加力外,其它培养条件与实验组相同,加力完成后2组同时收集样本。用免疫组化技术检测2-实验组和对照组髁突软骨TGF-β1的含量和分布,用彩色病理图像分析仪检测髁突软骨各层TGF-β1表达的强度。结果:实验组的髁突软骨各层细胞TGF-β1表达均增强,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。其中成软骨细胞层改变最明显(P<0.01)。结论:静压力促进髁突软骨各层细胞TGF-β1表达增强,其中成软骨细胞层表达增强最为明显。     

静张应力与TGF-β_1对大鼠髁突软骨细胞增殖效应调节初步研究

目的　探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在静张应力环境下对髁突软骨细胞增殖效应的影响。方法　(1) 将传代培养至第4代大鼠下颌髁突软骨细胞在12孔培养板上培养,采用流式细胞仪测定加入不同浓度TGF-β1(0·1、1 、10 ng/ml) 0、6、12、18、24 h后,对髁突软骨细胞增殖活性(PI值)的影响。(2)将第4代大鼠下颌髁突软骨细胞在细胞膜式张应力施加装置上培养,检测不同浓度TGF-β1及5 kPa静张应力联合应用0、6、12 h后,对髁突软骨细胞增殖活性 (PI值)的影响。结果　不同浓度TGF-β1(0·1、1、10 ng/ml)在模拟生理环境下以剂量依赖型的方式整体促进了髁突软骨细胞增殖效应,对髁突软骨细胞的增殖活性调节作用主要在12~18 h段,增殖峰值在18 h左右;在5 kPa静张应力联合TGF-β1刺激下培养较TGF-β1的单独效应具有更强的促髁突软骨细胞增殖作用。结论　静张应力联合TGF-β1可以调节髁突软骨细胞的增殖活性。     

功能矫形前伸大鼠下颌后髁突软骨β转化生长因子-1(TGF-β_1)表达变化的研究

目的：检测快速生长期大鼠髁突软骨在功能矫形前伸下颌后β转化生长因子－１（ＴＧＦ－β１）分布的变化，探讨髁突软骨生长代谢的生长因子控制机理。方法：实验组戴模拟临床功能矫治器，引导大鼠下颌前伸，并在实验后不同时期处死大鼠，取下髁突，应用免疫组织化学方法探测ＴＧＦ－β１在髁突中的含量及分布。结果：髁突各层软骨细胞均有ＴＧＦ－β１的分布，以成熟层阳性强度最高；功能矫形前伸下颌后，髁突软骨细胞各层ＴＧＦ－β１的表达均增强。结论：ＴＧＦ－β１介导了功能矫形的机械刺激作用，使软骨细胞增生，分化功能增强，髁突软骨增生     

慢性睡眠剥夺对大鼠髁突软骨的影响

目的： 建立大鼠慢性睡眠剥夺模型,观察大鼠颞下颌关节髁突软骨形态变化和软骨中IL-1β、TNF-α、IGF-1和VEGF的表达变化。方法： 将60只大鼠随机分为实验组、对照组和恢复组。利用改良多平台法（modified multiple platform method,MMPM）对实验组和恢复组大鼠进行1、2、3、4周的慢性睡眠剥夺。恢复组大鼠睡眠剥夺后正常笼养1周。利用H-E染色观察颞下颌关节髁突的组织结构变化,免疫组织化学法检测IL-1β、TNF-α、IGF-1和VEGF在髁突软骨内的表达水平。采用SPSS 23.0软件包对数据进行统计学分析。结果： 改良水平台法可以成功建立大鼠慢性睡眠剥夺模型。H-E染色观察到实验组髁突软骨出现纤维带分裂、细胞界限模糊,恢复组纤维裂隙减小或被纤维样组织占据。免疫组织化学结果显示,IL-1β、TNF-α在实验组中的阳性表达显著高于对照组（P<0.05）,恢复组表达显著低于实验组（P<0.05）。IGF-1和VEGF在实验组中的表达显著高于对照组（P<0.05）,恢复组1、2、3周IGF-1和VEGF的阳性表达显著下降（P<0.05）。结论： 慢性睡眠剥夺可引起髁突软骨内IL-1β、TNF-α、VEGF的表达增加,加重炎症表现。慢性睡眠剥夺可导致髁突软骨内IGF-1表达增加,发挥保护和促进软骨改建的作用。慢性睡眠剥夺停止1周后,各因子表达有所下降,髁突进行恢复性改建。     

TGF-β1在不同发育阶段胎儿髁突软骨中的表达

目的研究β转化生长因子-1(TGF-β1)在胎儿髁突软骨中表达,探讨该因子在软骨发育中的作用.方法30例13～33周胎儿分为A、B、C和D四组,应用HE染色和免疫组化S-P法观察髁突软骨TGF-β1的表达.结果TGF-β1在所观察各组髁突软骨各层中均有表达,成软骨细胞层表达最强,主要在胞浆.TGF-β1积分光密度在上、中、下三层之间存在差异(P<0.05).平均灰度和平均光密度在不同胎龄组间存在差异(P<0.05).A组与B组、A组与C组、B组与D组、C组与D组之间有显著性差异.结论在髁突软骨不同发育时间、不同分化阶段TGF-β1的表达水平不同.     

17β-雌二醇对髁突软骨细胞增殖的影响机制

研究17β-雌二醇（E2）对髁突软骨细胞增殖调节的影响,并初步探讨磷酸化雷帕霉素哺乳动物靶标（p-mTOR）在该调节过程中发挥的作用。     

转化生长因子-β1和碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的观察转化生长因子．晶和碱性成纤维细胞生长因子单独或联合应用对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响。方法采用组织块培养技术进行人牙周膜成纤维细胞的体外培养，对照组采用含小牛血清的DMEM培养液，实验组分别在培养液中加入不同浓度的转化生长因子-β1或碱性成纤维细胞生长因子或两者联合加入，通过四唑盐比色法观察细胞增殖情况。结果转化生长因子-β1或碱性成纤维细胞生长因子单独作用后，人牙周膜成纤维细胞较对照组有显著的增殖，而两者联合作用后的增殖较各自单独作用时明显（P〈0．05）。结论转化生长因子-β1和碱性成纤维细胞生长因子两者联合具有促进人牙周膜成纤维细胞增殖的作用。     

转化生长因子β对白细胞介素1β诱导髁突软骨细胞凋亡的调控作用

关节软骨进行性破坏是骨关节炎 (ｏｓｔｅｏａｒｔｈｏｒｉｔｉｓ,ＯＡ)的主要病理改变之一。近来发现ＯＡ关节软骨有异常的软骨细胞凋亡 ,这可能与ＯＡ关节软骨的破坏有关。我们就ＴＧＦ β在人重组白细胞介素 1β(ｒｈＩＬ 1β)诱导髁突软骨细胞凋亡中的作用进行了研究。1 材料和方法 :( 1)ｒｈＩＬ 1β诱导软骨细胞凋亡 :将髁突软骨细胞接种于培养瓶中 ,密度为 3× 10 4/ｍｌ,培养至对数生长期 ,实验组分别加入含有ｒｈＩＬ 1β( 1、10、2 0ｎｇ/ｍｌ)及二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ ,15μｌ/ｍｌ)的ＤＭＥＭ培养液 ,处理 8、16、2 4ｈ后收集细…