淀粉样β蛋白对大鼠脑细胞内三磷酸肌醇的影响

目的:观察淀粉样β蛋白对大鼠脑肌醇1,4,5-三磷酸含量的影响,通过磷脂酰肌醇代谢的变化,进一步探讨淀粉样β蛋白的神经毒性机制,方法:实验于2004-04/09在中国医科大学药理学及生理学实验室进行,取Wistar成年雄性大鼠10只,随机分为模型组和生理盐水两组各5只。模型组双侧脑室各注射淀粉样β蛋白1～425μL(各30nmol);生理盐水组注射5μL的生理盐水。所有大鼠常规方法饲养1周后麻醉状态下处死取脑皮质,测定两组大鼠脑组织肌醇1,4,5-三磷酸含量基础值,并观察M受体激动剂卡巴胆碱(1mmol/L)及KCl(40mmol/L)对肌醇1,4,5-三磷酸生物合成的影响。结果:10只大鼠均进入进入结果分析。①模型组大鼠脑组织基础肌醇1,4,5-三磷酸含量显著低于生理盐水组(6.7±2.2),(12.0±1.4)nmol/g,P<0.01。②脑组织经1mmol/L卡巴胆碱作用后肌醇1,4,5-三磷酸的产生两组均增加,120s时达高峰,但模型组明显低于对照组(P=0.00788)。③40mmol/LKCl作用后两组大鼠脑组织肌醇1,4,5-三磷酸的产生均增加,30s时达高峰,但模型组明显低于对照组(P=0.000324)。结论:①淀粉样β蛋白降低基础肌醇1,4,5-三磷酸的含量,并能抑制卡巴胆碱及KCl诱发的肌醇1,4,5-三磷酸的生物合成。②淀粉样β蛋白抑制肌醇1,4,5-三磷酸的合成与损害G蛋白-磷脂酶C偶联和磷酯酰肌醇4,5-二磷酸敏感的磷脂酶C均有关。     

淀粉样β蛋白对大鼠学习记忆的损伤

目的：通过Morris水迷宫实验来观察淀粉样β蛋白1-40对大鼠学习记忆的影响。方法：实验于2005-08／11在河南科技大学医学院完成。选用SD成年健康雄性大鼠30只，随机分为3组：正常对照组、生理盐水注射组、淀粉样β蛋白1--0注射组。淀粉样β蛋白1-40注射组给予双侧海马CA1区定向注射凝聚态淀粉样β蛋白1-40.5μL（2g／L），生理盐水注射组给予等量生理盐水，正常对照组不施以任何处理。术后2周行Morris水迷宫测试。学习时每只大鼠按东、西、南和北4个人水点分别放入水池（头朝池壁轻轻地放人）。记录动物的入水时间。记录潜伏期（动物自入水到找到站台后四肢爬上站台时所需的时间）；同时记录动物入水后的游泳轨迹。动物爬上站台后，让动物在站台上站立20s。若动物在入水后60s以内未能找到水池中的站台或未能爬上站台，则以60s记，引导其上台。实验历时5d。结果：30只大鼠均进入结果分析。Morris水迷宫训练第1天正常对照组、生理盐水注射组和淀粉样β蛋白1-40注射组的潜伏期分别是：（59．21&;#177;1．31）s，（60．00&;#177;0．00）s，（60．00&;#177;0．00）s，3组比较差异无显著性意义（P〉0．05）。训练第2-5天，淀粉样β蛋白1-40注射组的潜伏期为（53．34&;#177;10．19）s，（38．15&;#177;10．77）s，（33．49&;#177;9．12）s，（28．52&;#177;9．87）s，均明显长于正常对照组和生理盐水注射组[正常对照组的潜伏期为（37．80&;#177;8．53）s，（23．50&;#177;6．54）s，（11．60&;#177;6．5）s，（7．71&;#177;3．56）s；生理盐水注射组的潜伏期为（38．13&;#177;9．83）s，（22．65&;#177;9．23）s，（13．05&;#177;8．67）s．（9．29&;#177;7．72）s]（P〈0．01）．正常对照组和生理盐水注射组的潜伏期差异无显著性意义（P〉0．05）。3组的游泳轨迹也显示正常对照组和生理盐水注射组从训练第5天起即由随机式转为直线式，而淀粉样β蛋白1-40注射组5d的游泳轨迹一直为随机式。结论：海马注射淀粉样β蛋白1-40可导致大鼠学习记忆功能明显受损。     

淀粉样β蛋白1-40对胚胎大鼠皮质神经前体细胞毒性损伤的c-Jun氨基端激酶信号转导的影响

背景：淀粉样β蛋白是阿尔茨海默病致病关键因素之一。近来的研究证明在成人中枢神经系统内存在能不断自我更新、多向分化潜能、终身神经修复的神经干细胞。但是在阿尔茨海默病脑内却未见到这些神经前体细胞的起到有效作用，其机制尚未清楚。淀粉样β蛋白1-40是否通过c-Jun氨基端激酶信号转导通路对胚胎大鼠皮质神经前体细胞造成神经毒性损害尚不清楚。 目的：体外实验淀粉样β蛋白1-40对胚胎中皮质神经前体细胞毒性作用中c-Jun氨基端激酶信号转导通路的可能作用机制，探讨c-Jun氨基端激酶抑制剂SP600125对淀粉样β蛋白1-40致胚胎中皮质神经前体细胞神经毒性作用的保护作用。 设计：以细胞为观察对象，随机对照实验。 单位：中国医科大学附属第一医院神经内科。 材料：实验于2005-05／10在中国医科大学中心实验室完成。选用10只孕14 d Wistar大鼠，取其胚胎以备实验。方法：取Wistar大鼠胚胎脑皮质组织神经前体细胞，体外培养、传代、鉴定。将生长状态良好的胚胎大鼠皮质神经前体细胞随机分为4组：淀粉样β蛋白1-40组（每孔加入10nmol／L β淀粉样蛋白1-40）；SP600125＋淀粉样β蛋白1-40组（每孔先加入10μmol／LSP600125培养30min后再加入10nmol／L淀粉样β蛋白1-40）；SP600125组（每孔加入10μmol／LSP600125培养）；生理盐水组（每孔加入等体积的生理盐水），每组分别培养0，2，4，6，12，24h，每个时间点设8个孔。采用α甲基偶氮唑蓝法测定细胞生存率。流式细胞分析术检测细胞凋亡率。免疫印迹法检测c-Jun氨基端激酶，p-c-Jun氨基端激酶，c-Jun，p-c-Jun表达。计量资料差异比较采用t检验。 主要观察指标：①Wistar大鼠胚胎皮质神经前体细胞细胞生存率。②胚胎中皮质神经前体细胞细胞凋亡率。③胚胎中皮质神经前体细胞c-Jun氨基端激酶，P-c-Jun氨基端激酶，c-Jun，p-c-Jun表达结果。 结果：①淀粉样β蛋白1-40组和SP600125＋淀粉样β蛋白1-40组细胞生存率随培养时间延长而下降，4h时下降最明显；培养0，2，4，6，12,24h时淀粉样β蛋白1-40组明显低于其他3组（P〈0.01），SP600125＋淀粉样β蛋白1-40组培养2，4，6，12，24h明显低于SP600125组和生理盐水组（P〈0．01）。SP600125组细胞生存率无时间依赖性，与生理盐水组相比，差异不明显（P〉0．05）。②淀粉样β蛋白1-40组和SP600125＋淀粉样β蛋白140组细胞凋亡率随培养时间延长而上升，4h时上升最明显；培养0，2，4，6，12，24h时淀粉样B蛋白1-40组明显高于其他3组（P〈0．01）SP600125＋淀粉样β蛋白1-40组培养2，4，6，12，24h明显高于SP600125组和生理盐水组（P〈0．01）。SP600125组细胞生存率无时间依赖性，与生理盐水组相比，差异不明显（P〉0．05）。③淀粉样β蛋白组：c-Jun氨基端激酶和c-Jun在培养0，2，4，6，12，24h均有表达，但无变化；p-c-Jun氨基端激酶和p-c-Jun在淀粉样β蛋白1-40作用0h时即有表达，逐渐增高，4h时达高峰，以后逐渐减少。 结论：淀粉样B蛋白1-40能明显抑制胚胎中皮质神经前体细胞细胞活性，降低细胞生存率，导致细胞凋亡，c-Jun氨基端激酶信号转导通路参与了此过程，这可能是阿尔茨海默病不能启动自我救活机制原因之一；使用SP600125，可抑制c-Jun氨基端激酶和c-Jun激活，明显减轻淀粉样β蛋白1-40对胚胎中皮质神经前体细胞的神经毒性作用。     

雌激素对去卵巢大鼠不同脑区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达的影响

背景：脑中雌激素可调节淀粉样β蛋白前体蛋白的代谢与β淀粉样蛋白的产生。了解雌激素与淀粉样β蛋白前体蛋白代谢以及关键酶淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶的关系，对研究轻度认知障碍、阿尔茨海默病的发病原因具有重要作用。目的：利用大鼠卵巢切除模型观察内外源性雌激素缺乏及补充外源性雌激素对大鼠脑皮质区和海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达以及血清雌激素含量的影响。设计：完全随机对照实验。单位：青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所，青岛市市立医院病理科。材料：实验于2003—01／12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成。选择健康雌性Wistar大鼠21只，随机分为3组，每组7只。①卵巢切除组：制备大鼠双侧卵巢切除模型。②卵巢切除后补充外源性雌激素治疗组（雌激素组）：卵巢切除后给予苯甲酸雌二醇（1mg／kg），每7d皮下注射1次，共4次。③假手术对照组：手术过程与卵巢切除组相同，但不切除卵巢，不补充雌激素。方法：①第28天时，大鼠在麻醉状态下取脑组织备用，制备冠状切片，用于免疫荧光标记细胞化学染色观察。②激光共聚焦显微镜下观察皮质区、海马CA1区红色荧光标记细胞数量。③体内雌激素水平检测：大鼠眼动脉取血1．5mL，离心取上清备用，运用放射免疫法检测大鼠血清中雌激素含量。主要观察指标：①免疫荧光标记细胞化学法观察大鼠脑皮质区、海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶免疫荧光细胞数的变化。②放免法测量大鼠血清雌激素含量的变化。结果：21只大鼠均进入结果分析。①卵巢切除组大鼠皮质区、海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶阳性细胞数显著高于对照组和雌激素组[皮质区：（20．00&;#177;5．16），（5．7l&;#177;3．14），（4．00&;#177;4．61）个／视野；海马CA1区：（17．14&;#177;4．45），（6.85&;#177;1．95），（5．14&;#177;5．52）个／视野，P均〈0．011。②卵巢切除组血液雌激素含量显著低于对照组和雌激素组[（5．31&;#177;0．85），（22．94&;#177;9．48），（21．30&;#177;7．62）ng/L，P均〈0．01]。③雌激素组各观察部位淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达阳性细胞数和血液雌激素含量与对照组接近（P均〉0．05）。结论：采用双侧卵巢切除的方法，造成大鼠体内雌激素缺乏，引起大鼠脑内皮质区、海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达增多。给予卵巢切除大鼠补充外源性雌激素，其海马CA1区、皮质区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达显著减少，说明体内外雌激素含量的变化可影响大鼠皮质和海马区域淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达。     

β淀粉样前体蛋白17肽对糖尿病大鼠海马神经细胞线粒体膜电位和凋亡的干预

背景：糖尿病大鼠存在学习和记忆障碍，β淀粉样前体蛋白17肽具有改善这一行为的作用。糖尿病是否通过影响海马区神经细胞的膜电位及凋亡导致学习和记忆障碍以及β淀粉样前体蛋白17肽的相关作用机制尚不清楚。目的：观察糖尿病大鼠海马区神经细胞的线粒体膜电位和凋亡以及β淀粉样肽前体蛋白干预对其影响。设计：完全随机分组设计，对照实验。单位：首都医科大学宣武医院北京脑老化研究实验室和河北保定市第一中心医院内分泌科。材料：实验中指标测定部分于2002—05／2002—08在解放军总医院仪器测试中心完成。动物造模及干预阶段在首都医科大学附属宣武医院动物室完成。选用Wistar雄性大鼠18只。将大鼠按随机抽签法分为3组，正常对照组，糖尿病模型组，β淀粉样前体蛋白17肽治疗组，每组6只。方法：①糖尿病模型组和β淀粉样前体蛋白17肽治疗组大鼠禁食12h后用pH值4．4链脲佐菌素按60mg／kg腹腔注射诱发糖尿病模型。3d后测尾静脉血糖〉15mmol／L为造模成功。正常对照组大鼠不造模。β淀粉样前体蛋白17肽治疗组于背部皮下注射β淀粉样前体蛋白17肽，3．4μg／只，每周3次，共10周。正常对照组及糖尿病组给予等量的生理盐水相同部位注射，每周3次，共10周。②满10周时，将大鼠麻醉，断头取脑后冰浴下取海马组织制备单细胞悬液，采用线粒体膜电位特异性荧光探针JC-1标记线粒体及Annexin-V-FITC＆PI双染色技术，进行流式细胞仪上机检测线粒体膜电位和凋亡发生率。③数据间差异比较采用单因素方差分析。主要观察指标：各组大鼠海马神经细胞线粒体膜电位和海马单细胞凋亡率比较结果。结果：进入结果分析大鼠18只，每组6只。①海马神经细胞线粒体膜电位：糖尿病模型组明显低于正常对照组[（551．91&;#177;53．36），（809．88&;#177;82．41）道，P〈0．01]，β淀粉样前体蛋白17肽治疗组高于糖尿病模型组[（705．99&;#177;89．92）道，P〈0.05]，与正常对照组相近（P=0．146）。②海马单细胞凋亡率：糖尿病模型组明显高于正常对照组和β淀粉样前体蛋白17肽治疗组[（5．32&;#177;1．37）％，（1．03&;#177;0．55）％，（2．80&;#177;0．92）％，P〈0．01，0．05]。结论：海马线粒体膜电位下降和细胞的凋亡可能参与糖尿病脑病的发生发展；β淀粉样前体蛋白17肽具有改善这一病理过程的作用。     

中药当归主要活性成分阿魏酸钠抑制淀粉样β蛋白激活炎症因子的量剂反应

目的：观察中药当归提取的主要活性成分阿魏酸钠对淀粉样β蛋白激活的小鼠腹腔巨噬细胞α肿瘤坏死因子、诱导型一氧化氮合酶和一氧化氮水平的影响。方法：实验于2004-03／10在锦州医学院药理实验室和解剖实验室完成。选择8～10周龄的小鼠36只，随机分为6组，每组6只。正常对照组：巨噬细胞接种24h后用培养基继续培养。淀粉样β蛋白组：巨噬细胞接种24h后在培养基中加入经老化处理的终浓度为10μmol/L的淀粉样β蛋白。淀粉样β蛋白＋10，100，500μmol／L，1mmol／L阿魏酸钠组：在加入淀粉样β蛋白的同时加入10，100，500μmol/L，lmmol／L的阿魏酸钠共同孵育。培养48h后采用酶联免疫吸附法、免疫组织化学方法和Griess反应分别检测肿瘤坏死因子α分泌量、诱导型一氧化氮合酶表达和一氧化氮的生成量。结果：36只小鼠均进入结果分析。①巨噬细胞的肿瘤坏死因子α分泌量：淀粉样β蛋白组明显高于正常对照组[（28154&;#177;14．85），（1755&;#177;4．84）ng／L，（P〈0．01）]。淀粉样β蛋白＋10，100，500μmol／L，1mmol／L阿魏酸钠组可以不同程度地减少由淀粉样β蛋白诱导产生的肿瘤坏死因子α的分泌量[（238．05&;#177;6．21）．（186．90&;#177;7．44），（117．55&;#177;8.08），（71．77&;#177;10．50）ng/L，P〈0．011，且有明显剂量依赖关系（P〈0．05）。②巨噬细胞的一氧化氮生成量：淀粉样口蛋白组明显高于正常对照组[（85.04&;#177;6．16），（26．10&;#177;3．25）μmol／L，（P〈0．01）]，淀粉样β蛋白＋10，100，500μmol／L，1mmol/L阿魏酸钠组可以不同程度地减少由淀粉样β蛋白诱导产生的一氧化氮的量[（69.80&;#177;4.96），（54.52&;#177;345），（43.88&;#177;4.04），（33．83&;#177;3．13）μmol／L，P〈0．011，且有明显剂量依赖关系（P〈0．05）。⑧诱导型一氧化氮合酶的表达：正常对照组只有零星细胞染色阳性；而淀粉样β蛋白组多数细胞胞浆被染成黄褐色。各剂量组的阿魏酸钠可以不同程度地抑制由淀粉样β蛋白激活巨噬细胞造成的诱导型一氧化氮合酶的表达，该抑制作用呈明显剂量依赖性。结论：①淀粉样β蛋白能激活巨噬细胞，使其分泌大量的肿瘤细胞坏死因子α和一氧化氮，诱导型一氧化氮合酶表达也相应增加。②阿魏酸钠通过其抗炎作用呈明显剂量依赖性抑制淀粉样β蛋白对巨噬细胞的激活作用，从而使巨噬细胞生成肿瘤细胞坏死因子α、诱导型一氧化氮合酶、一氧化氮水平降低。     

国人血清淀粉样β蛋白1-28的生理参考值

目的：确认国内成人血清淀粉样β蛋白1-28生理参考值范围，为研究淀粉样β蛋白1-28与老年性痴呆的关系奠定基础。 方法：选择2001-06／2003-06解放军总医院健康献血者、查体者、门诊和住院智能正常成人人群335例，采用平衡饱和竞争放射免疫分析法，检测智能正常成人中血清淀粉样β蛋白1～28含量，其中青年组（年龄20-35岁）100例、中年组（年龄36-59岁）100例、老年组（年龄60-79岁）100例与高龄老年组（年龄80-94岁）35例，所有数据均经SPSS8．0软件进行统计学处理，首先对实验所得4组数据进行，检验。后对4组间数据两两进行了t检验，同时又对4组实验所得数据淀粉样β蛋白1～28含量与年龄进行了相关与回归分析。 结果：实验设计要求的青年组100例、中年组100例、老年组100例与高龄老年组35例共335例受试者全部进入结果分析，没有脱落。（1）国内成人血清淀粉样β蛋白1-28生理参考值范围为0．30～1．12μg／L。（2）老年人群中血清淀粉样β蛋白1-28生理参考值范围为0．25～1．11μg/L。（3）血清淀粉样β蛋白1-28含量与年龄无相关性（r=-0．0154，P〉0．05）。 结论：血清淀粉样β蛋白1～28含量与年龄无直接关系，淀粉样β蛋白1-28可作为老年性痴呆研究中的参考指标。     

人参皂苷Rg1．对淀粉样β蛋白诱导大鼠海马神经元损伤的保护

目的：观察人参皂苷Rg1对淀粉样β蛋白25-35诱导的海马神经元细胞损伤是否具有保护作用，并分析其作用机制。 方法：实验于2004-03／2005-03在广州中医药大学临床药理研究所DME中心完成。①取新生24h清洁级SD大鼠，无菌环境下取出海马组织进行贴壁培养并以B27无血清培养基添加剂抑制非神经元细胞的生长。②海马神经元形态及细胞活力观察：细胞培养7d至分化成熟状态，然后被随机分为3组：人参皂苷Rg1预处理组（分为1，2,4，8，16μmol／L5个浓度组）。首先每加入各浓度的Rg1（中国药品生物制品检定所提供，批号：0703—200221）预作用24h后，再加入40μmoL／L淀粉样β蛋白25～35共孵育24h；模型组：每孔加入40μmol／L淀粉样β蛋白25-35作用24h；空白组：正常细胞培养用液；每组均为8孔。运用倒置显微镜进行海马神经元形态学观察，四甲基偶氮唑盐比色法法检澍细胞活力。即吸光度（A值），该值越高说明细胞活力越强。⑨检测核因子κB活性：调整细胞悬液密度为2&;#215;10^8L^-1，接种于6孔板（内置已用多聚赖氨酸包被的盖玻片），1mL／孔。随机分为5组（3孔／组）：正常组，模型组，2，4，8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组。细胞培养7d后，2，4，8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组加终浓度为2，4，8μmol／L的人参皂甙Rg1预作用24h后，与模型组一起加40μmol／L淀粉样β蛋白，作用24h。激光共聚焦显微镜检测核因子κB在细胞内的激活程度，以图像分析仪计算核区荧光与胞浆区荧光比值，比值越高说明核因子κB活性越高。④计量结果差异比较采用单因素方差分析。 结果：①神经元细胞形态：相差显微镜下可见人参皂甙Rg1预处理组细胞损伤相对较模型组轻，但较正常组严重。②海马神经元细胞活力：正常组和2，4μmol／L人参皂甙Rg1预处理组明显高于模型组（P〈0．05），以4μmol／L人参皂甙Rg1预处理组最高；1，8，16μmol／L人参皂甙Rg1预处理组虽然也高于模型组，但差异不明显（P〉0．05）。⑧神经元细胞核因子κB活性：正常组和2，4，8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组明显高于模型组（P〈0．01），以4μmol/L人参皂甙Rg1预处理组最高；4,8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组明显高于正常组（P〈0.01）。 结论：人参皂甙Rg1对淀粉样β蛋白25-35诱导的大鼠海马神经元损伤具有保护作用，尤以4μmol／L人参皂甙Rg1作用效果最明显。核因子κB信号通路可能是人参皂甙Rg1对抗淀粉样β蛋白25～35细胞毒性作用的重要途径之一。     

依达拉奉对淀粉样β蛋白25～35致PC12细胞氧化损伤的神经保护作用

目的：观察特异性清除羟自由基的神经保护剂依达拉奉对淀粉样β蛋白25-35诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法：实验于2005-03／07在吉林大学中日联谊医院神经内科进行。将培养的PC12细胞分为3组：①正常对照组：加入含体积分数0．25的胎牛血清的DMEM维持液培养。②依达拉奉预处理组：加入依达拉奉20μmol／L预处理12h，然后加入淀粉样β蛋白25～35 30μmol／L继续孵育24h。③淀粉样B蛋白25～35干预组：淀粉样β蛋白25～35 30μmol／L孵育24h。采用MTT法测定细胞生存率；采用ELISA法测定羰基蛋白和晚期糖基化终产物的含量；硫代巴比妥酸法测定丙二醛的浓度。结果：①3组细胞生存率比较：正常对照组为（100．0&;#177;5.7）％，依达拉奉预处理组显著高于淀粉样β蛋白25～35干预组[（86．4&;#177;17．7炀，（42．5&;#177;9．4）％，P〈0．001]。②3组细胞内羰基蛋白含量比较：正常对照组为（0．35&;#177;0．09）μmol／g，依达拉奉预处理组显著低于淀粉样β蛋白25～35干预组[（0．41&;#177;0．12），（0．81&;#177;0．17）μmol／g，P〈0.01]。③3组晚期糖基化终产物水平比较：正常对照组为（12．21&;#177;3．26）mg／L，依达拉奉预处理组显著低于淀粉样β蛋白25-35干预组[（14.65&;#177;4．25），（26．57&;#177;5，18）mg／L，P〈0．01]。④丙二醛浓度：正常对照组为（4．11&;#177;0．98）μmol／L，依达拉奉预处理组显著低于淀粉样β蛋白25～35干预组[（4．92&;#177;1．30），（7.58&;#177;1．01）μmol／L，P〈0.01]。结论：依达拉奉能够减少淀粉样β蛋白25～35对PC12细胞内蛋白质氧化产物、晚期糖基化终产物及脂氧化终末产物的生成，具有神经保护作用。     

淀粉样β蛋A对小胶质细胞活化作用的体外观察

目的：观察淀粉样β蛋白对小胶质细胞活性、形态学以及分泌炎性细胞因子的作用，为阿尔茨海默病的炎性反应机制及抗炎治疗提供体外依据。方法：实验于2003—03／2004—03在解放军总医院老年医学研究所进行。应用BV-2胞作为体外小胶质细胞模型，加入不同浓度淀粉样β蛋白25-35或1-42（5，10，20，40，60μmol／L）及20μmol／L不同孵育状态（37℃孵育3，6，12，24h、3，5和7d）的淀粉样β蛋白25～35或1-42分别培养2—24h。四唑盐法检测淀粉样β蛋白对细胞活性的影响，倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变，并应用放射免疫法测定加入淀粉样β蛋白后BV-2胞上清白细胞介素1β及白细胞介素6水平。结果：①细胞活性：淀粉样β蛋白对BV-2胞的生存活性没有影响（P均〉0．05）。②细胞形态学改变：在较低浓度时（5—10μmol／L）淀粉样β蛋白1-42就可以使BV-2胞出现明显的形态学改变（多数细胞聚集成团，有的胞体变得肥大，胞核大而圆，核仁明显；有的胞体变为梭形，由胞体伸出一个或多个较长的枝状突起），与淀粉样β蛋白1-42孵育状态有关（37℃孵育5-7d时最为明显），而淀粉样β蛋白25—35无此作用。⑨白细胞介素1β平：淀粉样β蛋白1β水平：淀粉样β蛋白1-42与25～35均可以刺激BV-2胞分泌，二者作用类似。20μmol／L淀粉样β蛋白作用6h后其水平升高，至12h达到高峰，约为对照组的3倍，此后逐渐下降（P〈0．01）。当不同浓度淀粉样β蛋白作用12h时，淀粉样β蛋白为20μmol／L时在上清中可以检测到白细胞介素1β显增加，此后随着浓度的增加其分泌也逐渐增加，至60μmol／L时为对照组的5倍（P〈0．01）。④白细胞介素6水平：各淀粉样β蛋白处理组细胞上清液均不能检测到其水平有明显变化。结论：淀粉样β蛋白对BV-2胞的生存活性没有影响，淀粉样β蛋白可以激活BV-2胞发生形态学改变并释放炎性细胞因子，但二者的作用途径不同，形态学改变与淀粉样β蛋白片段及聚集状态均有关；而分泌白细胞介素1β淀粉样β蛋白片段及聚集状态均无关，并且这种刺激作用具有时间以及浓度依赖性。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

星状神经节阻滞治疗失眠疗效观察

失眠症又称不寐，指入睡困难，或维持睡眠障碍（易醒、早醒和再入睡困难）导致睡眠时间减少或睡眠质量下降，不能满足身体生理需要，明显影响日间社会功能和生活质量。现将星状神经节阻滞治疗失眠疗效观察总结如下。