滋阴泻火中药对性早熟模型大鼠促性腺激素释放激素及其受体mRNA表达的影响

目的：观察滋阴泻火中药对达那唑诱导的性早熟模型大鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)和垂体GnRH受体mRNA表达的影响,探讨滋阴泻火中药的作用机制。方法：将动物分为正常组、模型组、生理盐水组和中药组。模型组、生理盐水组和中药组动物5日龄时皮下注射达那唑300μg;中药组在15日龄时开始喂饲滋阴泻火中药,生理盐水组同时给予等量的生理盐水。免疫组织化学ABC法观察大鼠下丘脑GnRH的表达;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)观察下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达。结果：和正常组比较,模型组和生理盐水组大鼠阴门开启和建立性周期的时间提前,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达升高,下丘脑GnRH免疫阳性神经元减少;中药组大鼠阴门开启和建立性周期的时间延缓,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达降低,下丘脑GnRH免疫阳性神经元增多。结论：滋阴泻火中药可能通过抑制下丘脑GnRH的合成和释放以及降低垂体对GnRH的反应性,抑制提前启动的下丘脑-垂体-性腺轴功能,这可能是滋阴泻火中药治疗性早熟的机理。     

滋阴泻火中药对大鼠中枢生长相关基因的影响

目的:研究滋阴泻火中药对青春期大鼠中枢生长相关基因的影响.方法:设立对照组,采用荧光定量PCR法,检测小、中、大3组不同剂量中药对于青春期大鼠下丘脑及垂体部分生长相关基因的影响.结果:与空白组比较,用药4周、8周和停药4周,3组中药治疗组下丘脑GHRH基因及垂体GHRH受体基因表达变化无显著统计学意义(P＞0.05);而对于下丘脑SRIH基因表达,中、大剂量治疗组显著增高(P＜0.05).结论:滋阴泻火中药可能通过上调SRIH基因表达调节生长激素分泌.     

中药天癸方对雄激素致不孕大鼠促性腺激素释放激素的影响

目的探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)及雄激素受体(AR)mRNA 的影响。方法新生9日龄 SD 雌性大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮,建立 ASR 模型,免疫组织化学法检测下丘脑视前区 GnRH 含量,RT-PCR 法测定下丘脑 AR mRNA 表达水平,并观察中药治疗前后上述两种物质的变化。结果 ASR 模型下丘脑视前区 GnRH 含量显著低于对照组(P<0.01),下丘脑 ARmRNA 表达水平显著升高(P<0.05),中药天癸方治疗后,下丘脑视前区 GnRH 含量上升至正常大鼠水平(P>0.05),AR mRNA 表达水平显著下降(P<0.001)。结论 ASR 模型下丘脑 AR mRNA 过度表达,视前区GnRH 含量降低,是引起该模型低促性腺激素和无排卵的原因之一,中药天癸方可使 AR mRNA 表达下降,改善低促性腺激素状态而产生促排卵作用。     

固本祛瘀方对多囊卵巢综合征模型大鼠垂体促性腺激素释放激素受体表达的影响

目的 探讨固本祛瘀方对多囊卵巢综合征(PCOS)垂体性腺激素的影响.方法 制作PCOS大鼠模型,分别给予固本祛瘀方和西药氟他胺,观察各组大鼠垂体GnRH-R的变化.结果 固本祛瘀方组GnRH-R阳性表达明显高于模型组(P<0.05),与西药组比较无显著差异(P>0.05).结论 固本祛瘀方能调节PCOS大鼠垂体GnRH-R的表达,其治疗作用可能是通过调节垂体细胞功能而起效.     

滋阴泻火方对性发育提前女童生长发育的影响

以滋阴泻火方治疗性发育提前女童 6 0例 ,其中乳核 Tanner 期以上 2 0例随访满 6月 ,结果 ,治疗后第二性征明显消退 ,乳核 Tanner分期降低 (P<0 .0 1) ;B超检查 :子宫、卵巢容积未增加 (P>0 .0 5 ) ;Tanner骨龄与年龄比较 (△ BA/△ CA =1.0 2 ) ,表明治疗后骨龄相对于年龄未再提前 ,成年预测身高有增加趋势。     

滋阴泻火、清热燥湿中药对雌性大鼠肥胖和性发育相关指标的影响

目的观察滋阴泻火、清热燥湿中药对营养性肥胖大鼠的减重效果及性发育相关指标的影响。方法建立营养性肥胖动物模型，灌喂中药，观察其体重、耐疲劳能力、血清性激素水平及卵巢发育情况。结果灌喂中药后，可以使大鼠体重明显减轻，但不影响其身长和负重游泳时间，并可以使其血脂、肝脏脂肪变发生率降低；中药还可以使血中雌二醇水平、同期黄体出现率降低，下丘脑促性腺激素释放激素表达下降。结论滋阴泻火、清热燥湿中药对雌性大鼠有明显的减重作用，使肝脂肪变的发生率降低，来日J副作用，可能与该类中药调整其性腺轴、抑制肥胖时性成熟提前倾向有关。     

补肾中药对雌性青春期大鼠垂体GnRH受体mRNA及其受体蛋白表达的影响

目的：观察补肾中药对垂体促性腺激素释放激素（GnRH)受体及其基因表达的影响,探讨补肾中药调整下丘脑－垂体－性腺轴功能的作用环节及作用机理。方法：将青春期大鼠分为对照组、滋阴泻火组和益肾填精组,采用免疫组织化学方法检测GnRH受体的蛋白表达水平,采用原位杂交组织化学方法检测GnRH受体mRNA表达水平。结果：给予滋阴泻火中药合剂后,大鼠垂体GnRH受体mRNA表达水平显著下调,GnRH受体蛋白合成减少;而给予益肾填精中药合剂后,大鼠垂体GnRH受体mRNA表达水平显著上调,GnRH受体蛋白合成增多。结论：不同补肾中药可通过改变垂体GnRH受体及其mRNA表达水平,调节下丘脑－垂体－性腺轴的功能。     

大补阴颗粒对阴虚火旺证模型大鼠的滋阴泻火作用

目的：探讨大补阴颗粒对甲亢型阴虚火旺证模型大鼠的滋阴泻火作用。方法：用大剂量甲状腺素造阴虚火旺证动物模型,比较观察大补阴颗粒和大补阴丸对阴虚火旺证模型大鼠的影响。结果：阴虚火旺证模型大鼠血清T3、T4、cAMP含量,cAMP/cGMP比值,肝组织Na^ -K^ -ATPase活性以及子宫、卵巢组织重量指数明显增高,胸腺、肾上腺组织重量指数、cGMP含量则明显降低,大补阴颗粒和大补阴丸均能不同程度地改善阴虚火旺证大鼠上述各项指标的异常变化。结论：代谢调控异常、能量利用和性器官发育亢进,可以认为是阴虚火旺证大鼠的重要特征性变化;大补阴颗粒和大补阴丸能不同程度改善阴虚火旺证大鼠上述特征性变化。     

滋阴疏肝方对雌性中枢性性早熟大鼠褪黑素和受体表达的影响

目的:研究滋阴疏肝方对雌性中枢性性性早熟(CPP)大鼠的治疗作用,并探讨其对褪黑素及受体表达的影响。方法:SD雌性大鼠32只出生后随机分为正常组、模型组、亮丙瑞林组、滋阴疏肝方组。除正常组外,其余各组大鼠5日龄皮下注射300μg达那唑建立中枢性性早熟模型。亮丙瑞林组、滋阴疏肝方组大鼠15日龄给予亮丙瑞林(100μg/kg)和滋阴疏肝方(48g/kg)进行干预。通过肉眼观察各组大鼠阴门开启情况;阴道涂片法观察第1个发情间期出现的时间;取卵巢、子宫称重计算脏器系数;制作常规组织病理切片观察子宫、卵巢的组织形态并计算子宫壁厚度和卵巢黄体个数;检测血清中的促黄体生成素(LH)和雌二醇(E2)水平;检测下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)mRNA的表达,对滋阴疏肝方对中枢性性早熟大鼠的治疗作用进行判定,并检测夜间血清褪黑素(MT),通过RT-PCR法检测下丘脑褪黑素受体MT1、MT2 mRNA的表达,探讨滋阴疏肝方对褪黑素及受体表达的影响。结果:滋阴疏肝方(48g/kg)能明显降低雌性中枢性性早熟大鼠的子宫系数,降低卵巢系数,减少阴道开口数,降低子宫壁厚度和黄体生成数,降低促黄体生成素和雌二醇,升高夜间血清褪黑素,且能下调下丘脑GnRH mRNA,上调褪黑素受体MT1 mRNA的表达。结论:滋阴疏肝方可能通过升高夜间血清褪黑素,上调下丘脑MT1 mRNA的表达,抑制下丘脑GnRH的合成和释放,从而抑制下丘脑-垂体-性腺轴的启动,达到治疗中枢性性早熟的目的。     

滋阴泻火方对环境内分泌干扰物染毒大鼠拟雌激素活性的拮抗作用

目的 观察滋阴泻火方对环境内分泌干扰物壬基酚(NP)及双酚A(BPA)的拟雌激素活性的拮抗作用.方法 30只3周龄雌性SD大鼠随机分为对照组(喂饲玉米油),染毒A组(喂饲NP100mg/kg),染毒B组(喂饲NP50mg/kg+BPA200mg/kg),治疗A组(喂饲NP100mg/kg+滋阴泻火方),治疗B组(喂饲NP50mg/kg+BPA200mg/kg+滋阴泻火方),疗程15天,检测子宫增重试验及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达.结果 染毒A、B组与对照组比较子宫湿重、子宫脏器系数、子宫内膜及平滑肌厚度、子宫内膜腺体及腺上皮高度显著增加(P＜0.05),子宫内膜及肌层的PCNA蛋白表达显著增高(P＜0.05).治疗A、B组分别与染毒A、B组相比,上述各指标均明显降低(P＜0.05).结论 壬基酚及双酚A具有显著的拟雌激素活性,滋肾阴泻相火中药对壬基酚及双酚A的拟雌激素活性具有显著的拮抗作用.     

祛风活血方对局灶性大脑中动脉栓塞模型大鼠炎症反应的影响

为探讨祛风活血方(主药：地龙、黄茂、川芎、红花)治疗缺血性脑损伤的机理。32只SD雄性大鼠均分为A(假手术组)、B(模型组)、C(中药组)、D(西药组)4组,除A组外,其余大鼠造成大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,造模前及再灌注后每12h1次,B组予生理盐水、C组予祛风活血方液0．15ml／kg(相当于临床成人用量的5．4倍)、D组予尼莫地平2ml／kg灌胃。再灌注24h后以Zausinger法评定神经功能缺损,TTC染色测定脑梗死体积,RT—PCR测定CINC的基因表达,MPO活性测定法观察PMN的浸润程度。结果：两用药组大鼠的上述指标均优于B组,且C组优于D组。提示：减轻脑缺血再灌注损伤、抑制CINC的基因表达和MPO活性,可能是祛风活血方治疗缺血性脑损伤的机理。     

不同折算剂量四逆汤对放血致低血压状态大鼠的升压作用

目的采用动物实验方法对《伤寒杂病论》中四逆汤进行习惯认为的“1两=3g”,和预期研究的目标折算标准、即推定的“1两=13.8g”,进行不同折算剂量的药效学比较研究。方法采用多导生理仪观察放血致低血压状态大鼠血压、心率改变及不同折算剂量四逆汤的影响,并与正常对照组比较。结果放、止血后模型组、各给药组大鼠血压下降;给药后2h,四逆汤给药组放血致低血压状态大鼠血压升高,大剂量组较小剂量组升压效果明显;放、止血后模型组、各给药组心率减慢;给药后2h,四逆汤大剂量对于放血致低血压状态大鼠有明显的加强心肌收缩,提高心率作用。结论与按照习惯认为的“1两=3g”折算的四逆汤小剂量组比较,按照“1两=13.8g”折算的四逆汤大剂量能够升高放血致低血压大鼠血压,提高心率,作用明显。     

清肝化痰活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠SREBP-1c基因表达的影响

目的观察清肝化痰活血方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型大鼠SREBP-1c基因表达的影响。方法采用高脂饲料复制NASH动物模型,干预组在造模的同时分别予清肝化痰活血方(治疗组)和胆宁片进行干预(对照组),造模12周后处死所有大鼠,留取肝组织标本,检测各组大鼠肝组织中三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)和固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)基因的表达;同时肝组织经HE染色,光镜下评估脂肪变性、炎症和坏死程度。结果治疗组与对照组NASH大鼠肝组织病理学变化较模型组均明显改善;治疗组肝组织中TG、FFA和SREBP-1c的含量与模型组比较明显下降(P<0.05,P<0.01),且与对照组比较亦显著降低(P<0.05)。结论清肝化痰活血方能抑制NASH模型大鼠SREBP-1c蛋白的表达,改善脂肪酸代谢,减少肝脏TG的合成,具有良好的抗脂肪变性和保护肝细胞的作用。     

电针对动情周期不同阶段大鼠生殖内分泌轴的调节作用

目的:探讨电针调节生殖内分泌相关激素的特异反应穴位、最佳治疗时机及作用途径。方法:①选用成熟雌性有正常动情周期的SD大鼠,根据阴道涂片确定动情周期所处阶段。设假电针组、关元组、内关组,每个组当中大鼠分别处于动情间期、动情前期、动情期和动情后期。分别在电针治疗前、电针30min后即刻、出针30min从髂外静脉采血,用放射免疫法检测血清促性腺激素释放激素(GnRH)和黄体生成素(LH)浓度。②设损毁组(损毁正中隆起)和假损毁组,观察电针“关元”穴对两组大鼠血中GnRH、LH和雌二醇(E2)的调节规律。结果:①从假电针组可以看出:动情周期不同阶段GnRH和LH水平是不同的,GnRH水平在动情期最高,LH水平在动情前期最高;GnRH和LH的含量变化是同步的;②针刺可以使血中GnRH和LH水平增加,以关元穴组效果明显,在动情间期和动情后期表现更明显;③针刺对GnRH和LH的调节作用表现出时间性,30min比60min明显;④损毁正中隆起后电针对血中GnRH水平仍有一定的调节作用,但对LH和E2水平的调节作用基本消失。结论:相同穴位在动情周期不同阶段对GnRH和LH的调节程度不同,以动情间期和动情后期表现更明显;不同穴位在动情周期相同阶段对GnRH和LH的调节作用不同。针刺对与生殖内分泌相关激素的调节作用主要是通过下丘脑-垂体-性腺轴实现的。     

不同配伍对麻杏石甘汤中石膏溶出量影响的研究

目的研究配伍对石膏溶出量的影响,探讨麻杏石甘汤的配伍规律。方法采用L(827)正交设计,用EDTA络合测定法测定硫酸钙的含量。结果麻黄、杏仁和甘草对方中石膏溶出量的影响差异不存在显著性,杏仁与甘草、杏仁与麻黄、甘草与麻黄对石膏溶出含量影响交互作用不显著。结论杏仁、麻黄增加了石膏的溶出量,甘草降低石膏的溶出量。     

"更年春"方对大鼠成骨细胞增殖与分化及矿化的影响

目的观察中药复方“更年春”药物血清对新生大鼠成骨细胞增殖、分化和矿化的影响。方法用酶消化法分离培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞,加入含不同药物浓度的更年春药物血清条件培养液培养,生理盐水作为阴性对照组,尼尔雌醇作为阳性对照药物。MTT法测定细胞增殖率,对硝基苯酚法(PNPP)检测碱性磷酸酶(ALP)活性以观察成骨细胞活性,茜素红染色观察矿化结节个数。结果与生理盐水组相比,更年春组成骨细胞MTT值(OD570)及OD405值明显增加(P均<0.01),更年春高剂量组矿化结节数显著高于生理盐水组(P<0.01)。与雌激素组相比,中药高剂量组成骨细胞的OD570值(P<0.01)、OD405值(P<0.05)及矿化结节数均增高(P<0.05)。结论更年春在体外对成骨细胞的增殖、分化和矿化有明显促进作用,更年春高剂量明显优于雌激素,提示更年春防治骨质疏松的作用可能与其促进成骨细胞活性有关。     

点燃癫痫模型基因的差异表达及草果知母汤对其影响

目的 筛选与点燃癫痫模型发病及单果知母汤发挥疗效相关联的基因。方法 使用mRNA昼N差异显示技术（DDRT-PCR）,筛选差异基N务带,并使用Northern印记杂交排除假阳性。结果 正常对照组、模型组、中药组存在110条差异条带,其中11务基因表达有明显差异的片段在正常对照组不存在,但出现在模型组,又在治疗组消失,说明这11条基因是与癫痫发病和治疗密切关联的基因。经NCBI美国国家基因库检索,这11条基因中的7条为同源基因,有4条基因片段为功能未知的新基因,其中3条新基因经Northern印记杂交排除了假阳性的可能,已经在GeneBank进行了注册,注册号分别CK325391、CK325392、CK325393、CK325394。结论 草果知母汤可能通过影响海马组织部分基因片段的表达而起到治疗癫痫模型的作用。     

甘麦大枣汤及其不同加味对小鼠镇静催眠作用的比较

为研究甘麦大枣汤及加味不同药物的镇静催眠作用,112只小鼠随机分为7组,即生理盐水对照组(A),西药对照组(B,安定),方l组(C,甘麦大枣汤原方)、方2组(D,原方加枣仁、夜交藤)、方3组(E,原方加远志、菖蒲)、方4组(F,原方加枳实、竹茹),方5组(G,在上述4方的基础上,加丹参),每组小鼠16只,分别观察上述各方对小鼠自发活动、戊巴比妥钠阈剂量、阈下剂量小鼠睡眠及对硝酸士的宁诱发的惊厥的影响。结果：各用药组均能延长戊巴比妥钠诱导小鼠的睡眠时间,E、F组均能增加入睡动物数;F组能降低硝酸士的宁诱发的小鼠惊厥次数。结论：甘麦大枣汤加枳实、竹茹的配伍在延长小鼠睡眠时间、入睡率、降低惊厥数方面,优于其他配伍。     

朱砂安神丸水煎剂对失眠大鼠睡眠时相的影响

目的探讨朱砂安神丸水煎剂对失眠大鼠睡眠时相的影响。方法在恒温、恒湿、自动光控及电磁屏蔽条件下,采用电刺激所致大鼠失眠模型和慢性电极埋植技术,描记其自由活动情况下皮层脑电图。给予实验动物不同剂量的朱砂安神丸水煎剂,分析给药前后失眠大鼠脑电图的变化,探讨朱砂安神丸水煎剂对失眠大鼠睡眠时相的影响。结果中、高剂量的朱砂安神丸水煎剂可明显减少失眠大鼠的觉醒耐间,延长失眠大鼠总睡眠时间。并且中剂量对失眠大鼠睡眠周期中的慢波睡眠1期(SWS_1期),高剂量对慢波睡眠2期(SWS_2期)有明显的延长作用。低剂量虽不能减少失眠大鼠的觉醒时间,但对SWS_2期有延长作用。结论朱砂安神丸水煎剂对失眠大鼠的睡眠有明显改善作用。