滋阴泻火中药对雌性性早熟模型大鼠下丘脑生长激素释放肽及其受体GHSR1-α表达的影响

目的观察滋阴泻火中药对达那唑诱导的雌性性早熟模型大鼠青春期启动时下丘脑生长激素释放肽(Ghrelin)及其受体(growth hormone secretion peptide receptor 1α,GHSR1-α)表达的影响。方法将40只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、生理盐水干预组及中药干预组,每组10只。模型组、生理盐水干预组及中药干预组于大鼠5日龄时一次性皮下注射达那唑300μg制备性早熟大鼠模型。15日龄起中药干预组、生理盐水干预组分别予滋阴泻火中药及生理盐水灌胃,给药干预7~10天,正常组不予处理。记录阴门开启情况,计算卵巢及子宫指数,检测外周血雌二醇(E2)、卵泡雌激素(FSH)、黄体生成素(LH)、下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)含量、下丘脑Ghrelin及其受体GHSR1-α基因表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠阴门开启时间提前,外周血E2、LH水平、子宫指数、下丘脑GnRH含量升高,外周血FSH、下丘脑Ghrelin及GHSR1-αmRNA水平降低(P0.05,P0.01);与模型组及生理盐水干预组比较,中药干预组大鼠阴门开启时间未提前,外周血E2、LH水平、子宫指数及下丘脑GnRH含量明显降低(P0.05,P0.01),而下丘脑Ghrelin及GHSR1-αmRNA水平升高(均P0.01);4组间下丘脑Ghrelin及受体个数及活性比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论在基因转录水平上滋阴泻火中药对性早熟大鼠下丘脑Ghrelin及其受体有一定的调节作用。     

滋阴疏肝方对雌性中枢性性早熟大鼠褪黑素和受体表达的影响

目的:研究滋阴疏肝方对雌性中枢性性性早熟(CPP)大鼠的治疗作用,并探讨其对褪黑素及受体表达的影响。方法:SD雌性大鼠32只出生后随机分为正常组、模型组、亮丙瑞林组、滋阴疏肝方组。除正常组外,其余各组大鼠5日龄皮下注射300μg达那唑建立中枢性性早熟模型。亮丙瑞林组、滋阴疏肝方组大鼠15日龄给予亮丙瑞林(100μg/kg)和滋阴疏肝方(48g/kg)进行干预。通过肉眼观察各组大鼠阴门开启情况;阴道涂片法观察第1个发情间期出现的时间;取卵巢、子宫称重计算脏器系数;制作常规组织病理切片观察子宫、卵巢的组织形态并计算子宫壁厚度和卵巢黄体个数;检测血清中的促黄体生成素(LH)和雌二醇(E2)水平;检测下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)mRNA的表达,对滋阴疏肝方对中枢性性早熟大鼠的治疗作用进行判定,并检测夜间血清褪黑素(MT),通过RT-PCR法检测下丘脑褪黑素受体MT1、MT2 mRNA的表达,探讨滋阴疏肝方对褪黑素及受体表达的影响。结果:滋阴疏肝方(48g/kg)能明显降低雌性中枢性性早熟大鼠的子宫系数,降低卵巢系数,减少阴道开口数,降低子宫壁厚度和黄体生成数,降低促黄体生成素和雌二醇,升高夜间血清褪黑素,且能下调下丘脑GnRH mRNA,上调褪黑素受体MT1 mRNA的表达。结论:滋阴疏肝方可能通过升高夜间血清褪黑素,上调下丘脑MT1 mRNA的表达,抑制下丘脑GnRH的合成和释放,从而抑制下丘脑-垂体-性腺轴的启动,达到治疗中枢性性早熟的目的。     

滋阴泻火中药对性早熟模型大鼠促性腺激素释放激素及其受体mRNA表达的影响

目的：观察滋阴泻火中药对达那唑诱导的性早熟模型大鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)和垂体GnRH受体mRNA表达的影响,探讨滋阴泻火中药的作用机制。方法：将动物分为正常组、模型组、生理盐水组和中药组。模型组、生理盐水组和中药组动物5日龄时皮下注射达那唑300μg;中药组在15日龄时开始喂饲滋阴泻火中药,生理盐水组同时给予等量的生理盐水。免疫组织化学ABC法观察大鼠下丘脑GnRH的表达;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)观察下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达。结果：和正常组比较,模型组和生理盐水组大鼠阴门开启和建立性周期的时间提前,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达升高,下丘脑GnRH免疫阳性神经元减少;中药组大鼠阴门开启和建立性周期的时间延缓,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达降低,下丘脑GnRH免疫阳性神经元增多。结论：滋阴泻火中药可能通过抑制下丘脑GnRH的合成和释放以及降低垂体对GnRH的反应性,抑制提前启动的下丘脑-垂体-性腺轴功能,这可能是滋阴泻火中药治疗性早熟的机理。     

疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠性腺、雌激素和下丘脑GnRH、垂体GnRH-R表达的影响

目的:观察疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠性腺、雌激素和下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、垂体促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)表达的作用。方法:取SD雌性大鼠60只,随机分为正常对照组、性早熟模型组、亮丙瑞林100μg/kg组、疏肝泻火方8.5g/kg、4.25g/kg、2.13g/kg组共6组,采用NMA建立性早熟模型,予不同剂量的疏肝泻火方和亮丙瑞林干预,观察性腺发育情况;测定血FSH、LH水平和下丘脑GnRH、垂体GnRH-R的mRNA表达。结果:性早熟模型组大鼠阴道口开放和出现第一个动情间期的时间分别为32.10±1.56天、35.24±1.46天,均较正常对照组提前,性早熟模型组第一只大鼠出现阴道口开放和第一个动情间期时,疏肝泻火方2.125g/kg组出现一只,其余各组均未见。各组子宫指数和卵巢指数均较模型组显著降低、血清FSH和LH分泌量显著降低,下丘脑GnRH mRNA、垂体GnRH-R mRNA的表达量显著降低,疏肝泻火方8.5g/kg组与亮丙瑞林100μg/kg组疗效相当,疏肝泻火方2.13g/kg、4.25g/kg、8.5g/kg组的作用呈现依次递增的趋势。结论:疏肝泻火方可以降低下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH-R mRNA的表达水平,降低雌激素水平,抑制性腺的发育,延缓HPG轴的启动。     

补肾中药对雌性青春期大鼠垂体GnRH受体mRNA及其受体蛋白表达的影响

目的：观察补肾中药对垂体促性腺激素释放激素（GnRH)受体及其基因表达的影响,探讨补肾中药调整下丘脑－垂体－性腺轴功能的作用环节及作用机理。方法：将青春期大鼠分为对照组、滋阴泻火组和益肾填精组,采用免疫组织化学方法检测GnRH受体的蛋白表达水平,采用原位杂交组织化学方法检测GnRH受体mRNA表达水平。结果：给予滋阴泻火中药合剂后,大鼠垂体GnRH受体mRNA表达水平显著下调,GnRH受体蛋白合成减少;而给予益肾填精中药合剂后,大鼠垂体GnRH受体mRNA表达水平显著上调,GnRH受体蛋白合成增多。结论：不同补肾中药可通过改变垂体GnRH受体及其mRNA表达水平,调节下丘脑－垂体－性腺轴的功能。     

滋阴泻火中药对大鼠中枢生长相关基因的影响

目的:研究滋阴泻火中药对青春期大鼠中枢生长相关基因的影响.方法:设立对照组,采用荧光定量PCR法,检测小、中、大3组不同剂量中药对于青春期大鼠下丘脑及垂体部分生长相关基因的影响.结果:与空白组比较,用药4周、8周和停药4周,3组中药治疗组下丘脑GHRH基因及垂体GHRH受体基因表达变化无显著统计学意义(P＞0.05);而对于下丘脑SRIH基因表达,中、大剂量治疗组显著增高(P＜0.05).结论:滋阴泻火中药可能通过上调SRIH基因表达调节生长激素分泌.     

二精丸对去卵巢+D-半乳糖联合Aβ1-40 致肾阴虚AD 大鼠海马多巴胺神经功能的影响

目的探讨二精丸对去卵巢+D-半乳糖联合 β-淀粉样蛋白 1-4（0 Aβ1-40）致肾阴虚阿尔茨海默病（AD）大鼠 海马多巴胺神经功能的影响。方法将56 只雌性SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、二精丸高剂量组 （9.0 g·kg-1）、二精丸中剂量组（4.5 g·kg-1）、二精丸低剂量组（2.25 g·kg-1）。造模大鼠在卵巢摘除手术1 周后, 腹腔注射D-半乳糖（100 mg·kg-1）,每日1 次,持续7 周;卵巢摘除手术4 周后,双侧海马注射Aβ1-40 建立肾阴 虚AD 大鼠模型。卵巢摘除手术5 周后,各组按照相应剂量开始灌胃给药,模型组与假手术组灌胃等量生理盐 水,给药容量为10 mL·kg-1,每日1 次,连续30 d。末次给药1 h 后断头取海马组织,采用ELISA 法检测大鼠 海马组织多巴胺（DA）水平,采用免疫组化法检测大鼠海马CA1 区多巴胺D1 受体、酪氨酸羟化酶（TH）的表达 情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠的海马组织DA 水平显著降低（P＜0.01）,海马CA1 区多巴胺D1 受体及TH 表达明显下调（P＜0.01）。与模型组比较,二精丸高剂量组大鼠的海马组织DA 水平明显升高（P＜ 0.01）;二精丸各剂量组大鼠海马CA1 区的D1 受体表达明显上调（P＜0.05,P＜0.01）;二精丸高、中剂量组大 鼠海马CA1 区的TH 表达明显上调（P＜0.05,P＜0.01）。结论二精丸能够提高海马组织的DA 水平,上调海马 组织的多巴胺D1 受体及TH 表达,促进去卵巢+D-半乳糖联合Aβ1-40致肾阴虚AD 大鼠的海马多巴胺神经功能。     

益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织TGF-β1mRNA表达的影响

目的:观察益骨胶囊预防和治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织TGF-β1mRNA基因表达的影响,在分子水平上阐明益骨胶囊防治骨质疏松症的可能作用机制.方法:从72只10月龄SD雌性大鼠中随机抽取24只为假手术A和B组,余48只待手术造模后随机分为4组:模型A组、模型B组、预防组、治疗组,每组12只;以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型;预防各组均在手术后3天即开始灌胃,假A组、模A组灌胃NS 3 ml、预防组灌胃益骨胶囊水溶液3 ml,每天1次,共24周;治疗各组均在手术后第13周即开始灌胃,假B组、模B组灌胃NS 3 ml、治疗组灌胃益骨胶囊水溶液3 ml,每天1次,共12周.FQ-PCR方法检测骨组织TGF-β1mRNA基因表达.结果:大鼠造模24周时,益骨胶囊预防组和治疗组骨组织TGF-β1mRNA基因表达均明显高于模型组,与假手术组相近.结论:益骨胶囊能促进骨组织TGF-β1mRNA基因表达.     

益气活血壮骨方对去势大鼠骨形态学的影响

目的：探讨益气活血壮骨方对去势大鼠骨形态学的影响。方法：将45只6月龄雌性SD大鼠随机分为5组：假手术组（A组）、模型组（B组）、益气活血壮骨方组（C组）、乐力胶囊组（D组）和骨松宝组（E组）,每组9只。假手术组仅开腹缝合,其余4组做卵巢切除术。术后4周,A、B组大鼠以生理盐水灌胃（10 mL·kg-1）,C组大鼠以益气活血壮骨方灌胃（9.6 g·kg-1）,D组大鼠以乐力胶囊灌胃（0.15 g·kg-1）,E组大鼠以骨松宝灌胃（8 g.kg-1）,每天1次,连续给药12周。12周后处死大鼠,观察各组大鼠骨小梁平均宽度、相对骨体积、单位面积骨小梁骨细胞数、平均骨皮质厚度及股骨头平均灰度。结果：①A、C、D、E组大鼠的骨小梁平均宽度、相对骨体积、单位面积骨小梁骨细胞数、平均骨皮质厚度及股骨头平均灰度均高于B组,差异有统计学意义（P〈0.05）;②A、C组各项实验指标均高于D、E组,差异有统计学意义（P〈0.05）;③A、C组各项指标差异无统计学意义（P〉0.05）,D、E组各项指标差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：益气活血壮骨方能提高去势大鼠骨小梁平均宽度、相对骨体积、单位面积骨小梁骨细胞数、平均骨皮质厚度及股骨头平均灰度,并能使其接近正常水平,疗效优于乐力胶囊和骨松宝。     

知母总皂苷对雌性性早熟SD大鼠性激素水平的影响及对HPGA轴的作用研究

[目的]探讨知母总皂苷对雌性性早熟SD大鼠性激素水平的影响及对下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)的作用。[方法]建造雌性性早熟SD大鼠模型,随机分为模型组、知母总皂苷低剂量组(知低组)、知母总皂苷高剂量组(知高组)、阳性对照组,另设正常组。经相应干预后,记录各组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间;取大鼠性器官,计算子宫、卵巢指数;HE染色观察大鼠卵巢形态学变化;ELISA检测大鼠血清性激素卵泡生成激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)水平;qPCR和Western blot检测大鼠下丘脑肿瘤转移抑制基因亲吻素-1(KISS-1)、G蛋白偶联受体54(GPR54)、促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体(GnRHR)mRNA与蛋白表达。[结果]与正常组比较,模型组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较短,子宫、卵巢指数较高,黄体数量较多,血清FSH、LH、E2水平较高,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较高(P<0.05);与模型组比较,知低组、知高组、阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05);与知低组比较,知高组、阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05);与知高组比较,阳性对照组大鼠阴门开启时间与首个动情间期时间较长,子宫、卵巢指数较低,黄体数量较少,血清FSH、LH、E2水平较低,下丘脑KISS-1、GPR54、GnRH、GnRHR mRNA与蛋白表达量较低(P<0.05)。[结论]知母总皂苷可调节雌性性早熟SD大鼠性激素水平,对HPGA轴有抑制作用。     

电针“石门”穴对小鼠着床期下丘脑GnRH影响的实验研究

[目的]通过观察电针"石门"穴对下丘脑GnRH的影响,探讨电针小鼠"石门"穴有影响下丘脑-垂体-卵巢轴的作用。[方法]清洁级昆明雌、雄性小鼠各30只,阴道检查发现阴栓为妊娠第1天。按体重随机分为空白组、电针组、西药组,每组10只。电针组:妊娠第1～5天早9时电针;西药组:妊娠第4天早9时皮下注射米非司酮;空白组:在相同时间抓取固定,但不予针刺;取下丘脑,用放射免疫法测定GnRH的水平。[结果]电针组GnRH比空白组低,与米非司酮组的激素水平接近。[结论]电针"石门"穴能对下丘脑GnRH产生影响,进而说明电针"石门"穴能够影响下丘脑-垂体-卵巢轴。     

大鼠模拟经前期综合征肝气逆证不同脑区E2受体、P受体基因表达mRNA水平变化

目的：探讨肝主疏泄与雌二醇受体（ER）、孕酮受体（PR）基因表达的关系。方法：以肝失疏泄所导致的始发证侯肝气逆证为切入点,运用RT-PCR方法,对肝失疏泄产生肝气逆证时的主要改变指标ER、PR的基因表达在中枢不同脑区（下丘脑、边缘叶）mRNA水平上的变化进行探讨。结果：在肝失疏泄产生肝气逆证时ER、PR的活性皆明显下降,且在下丘脑中以PR的活性下降为主,在边缘叶中以ER的活性下降为主。结论：中枢神经系统下丘脑中PR的活性下降和边缘叶中ER的活性下降,可做为诊断肝气逆证的微观指标之一。     

大鼠口服虎杖后大黄素血药浓度及肝脏分布的研究

目的:建立大黄素体内含量测定方法,对虎杖主要药效成分大黄素在大鼠体内的药代动力学及在肝脏分布的经时变化进行研究,以反映虎杖药材在大鼠体内的作用规律.方法:采用HPLC方法检测生物样品中的大黄素含量,绘制血药浓度-时间曲线、肝脏药物浓度-时间曲线.结果:大黄素在大鼠体内药代动力学模型符合二房室模型,血药浓度给药后9 min达到峰值,实测的Cmax=3.973±0.535 μg/mL.半衰期约为11小时,肝脏药物浓度时间曲线显示,肝脏中药物浓度给药后10 min达到峰值,实测的Cmax=9.654±1.41 μg/g.给药24小时,血浆及肝脏中药物浓度均显著降低.结论:虎杖中大黄素在大鼠体内吸收入血迅速,并快速分布至肝脏.该研究可能对与大黄素结构相似的蒽醌类成分体内代谢的研究具有参考价值,有助于阐明虎杖药理作用的物质基础.     

大鼠模拟经前期综合征肝气逆证不同脑区E2受体、P受体基因表达mRNA水平变化

目的：探讨肝主疏泄与雌二醇受体（ER）、孕酮受体（PR）基因表达的关系。方法：以肝失疏泄所导致的始发证侯肝气逆证为切入点,运用RT-PCR方法,对肝失疏泄产生肝气逆证时的主要改变指标ER、PR的基因表达在中枢不同脑区（下丘脑、边缘叶）mRNA水平上的变化进行探讨。结果：在肝失疏泄产生肝气逆证时ER、PR的活性皆明显下降,且在下丘脑中以PR的活性下降为主,在边缘叶中以ER的活性下降为主。结论：中枢神经系统下丘脑中PR的活性下降和边缘叶中ER的活性下降,可做为诊断肝气逆证的微观指标之一。     

电针对类风湿关节炎大鼠糖皮质激素及受体的影响

目的 :探讨电针对类风湿性关节炎 (RA)大鼠糖皮质激素 (CS)及受体 (GCR)的影响。方法 :采用佐剂性关节炎大鼠 (AA)作为RA动物模型 ,电针“足三里”治疗后 ,放免测定血浆CS、胸腺GCR含量。结果 :模型组大鼠血浆CS明显下降 ,电针后CS水平明显升高 ,二者比较 ,P <0 .0 5,且达到正常水平 ,电针组与正常组比较 ,P >0 .0 5;模型组大鼠胸腺GCRKD值显著低于正常组和空电组 (P <0 .0 1 ) ,其浓度也明显低于正常组、空电组 (P <0 .0 5) ,电针治疗后GCRKD值和浓度水平与模型组相比均有显著提高 (P <0 .0 1 )。结论 :电针能够增加RA大鼠的CS、GCR含量水平     

六味地黄丸对去卵巢高血脂大鼠雌激素受体α、βmRNA表达的影响

目的观察六味地黄丸(地黄丸)对去卵巢高血脂大鼠雌激素受体α、β(ER α、β)mRNA 表达的影响。方法采用8周龄雌性大鼠建立去卵巢高血脂模型,将24只大鼠随机分为3组:去卵巢加六味地黄丸组(地黄丸组),去卵巢加苯甲酸雌二醇组(雌二醇组),去卵巢加生理盐水组(对照组),每组8只,地黄丸组用六味地黄丸每天每只2.4g,分2次灌胃,共6周;雌二醇组用苯甲酸雌二醇注射液按每鼠每3天1次皮下注射0.2mg,共12次;对照组给予生理盐水,早晚各1次灌胃,共6周。RT-PCR 法分析 ERα、ERβmRNA 表达。结果 ERα、ERβ mRNA 表达均明显高于对照组(P<0。01)。结论六味地黄丸具有调高去卵巢高脂大鼠主动脉 ERα、ERβ mRNA 的表达的作用,该作用为其在绝经女性防治动脉粥样硬化和冠心病等应用提供了依据。     

胆囊结石与胆囊收缩素及其受体的关系研究

目的探讨胆囊动力学异常在胆囊结石形成中的作用。方法随机选择胆囊结石患者35例,胆囊息肉样病变患者25例,正常对照30例。B超测胆囊容积。放免法测定血浆中胆囊收缩素(CCK)的浓度,逆转录-聚合酶链反应(rt-PCR)法测胆囊黏膜中胆囊收缩素受体(CCK-A)数目。结果①胆囊结石组胆囊空腹体积明显大于其他2组(F=3.45,P<0.05);②胆囊结石组胆囊收缩率明显低于其他2组(F=5.747,P<0.01);③各组之间CCK无显著性差异(F=0.654,P>0.05);④胆囊结石组CCK-A表达明显弱于胆囊息肉样病变组(t=4.390,P<0.05),具有显著性差异。结论①胆囊空腹体积增大与其胆囊结石形成有关;②胆囊结石组胆囊收缩功能下降导致结石形成;③CCK与胆囊收缩功能下降无明显关系;④CCK-A表达减弱会使胆囊收缩功能减弱,促进胆囊结石的形成。     

乳腺癌的ER、PR、C-erbB-2表达与钼靶X线表现相关性研究

目的探讨乳腺癌ER、PR、C-erbB-2因子表达与钼靶X线表现之间的相关性。方法分析87例乳腺患者钼靶X线中肿块、钙化、病变区密度和结构扭曲与免疫组织化学测定的ER、PR和C-erbB-2的表达的关系。结果87例乳腺癌患者中,肿块边缘毛刺征者ER、PR阳性表达率高;病变区有钙化和结构扭曲者C-erbB-2阳性表达率高;病变区高密度和结构扭曲ER、PR阳性表达率低;肿块大小与ER、PR和C-erbB-2表达均无关。结论乳腺癌钼靶X线征象和ER、PR及C-erbB-2的表达有密切关系,在一定程度上反映了ER、PR及C-erbB-2的表达状态,为乳腺癌的术前辅助内分泌治疗和预后评估提供了一定的信息。     

华蟾素对胰腺癌肿瘤相关基因表达的影响

目的检测华蟾素对胰腺癌肿瘤相关基因表达的影响,初步探索华蟾素抑制胰腺癌生长的作用机制。方法将荷人胰腺癌SW1990裸小鼠随机分为华蟾素组和生理盐水组,分别予腹腔注射华蟾素注射液和氯化钠注射液,共21d。实验结束时,随取两组瘤块组织,应用基因表达谱芯片检测肿瘤组织相关基因的表达。结果华蟾素作用3周后表达量上调比值大于6的差异基因主要为复制蛋白A、抑瘤素M受体、死亡受体配体基因;下调比值大于6的差异基因主要为细胞内激酶网络成员的蛋白激酶如蛋白磷酸激酶、酪氨酸蛋白激酶、丝裂原活化蛋白激酶、丝氨酸/苏氨酸激酶等。结论华蟾素有可能通过上调复制蛋白A,抑瘤素M受体、死亡受体配体基因表达,促进肿瘤细胞的死亡和凋亡;也可能选择性抑制细胞信号转导通路特别是MAPK通路中的关键酶,如蛋白酪氨酸激酶、丝裂原活化蛋白激酶等基因来发挥其有效的抗肿瘤特性。