桂枝茯苓丸对荷瘤鼠Fas表达的影响

目的观察桂枝茯苓丸对S180荷瘤鼠的抑瘤作用及对脾脏中T淋巴细胞凋亡相关蛋白Fas的影响。方法计算抑瘤率,流式细胞仪测定正常组、模型组、中药组、环磷酰胺组脾脏中T细胞Fas表达。结果模型组、环磷酰胺组脾脏中T细胞Fas表达升高,与正常组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。中药组Fas表达与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01),与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论桂枝茯苓丸可通过抑制T淋巴细胞凋亡调节机体的细胞免疫。其机制可能与桂枝茯苓丸能调节脾脏中T细胞Fas表达密切相关。     

桂枝茯苓丸对荷瘤鼠抑瘤作用及T淋巴细胞Fas表达的影响

目的观察桂枝茯苓丸对荷瘤鼠的抑瘤作用及对脾脏中T淋巴细胞凋亡相关蛋白Fas的影响。方法计算抑瘤率,流式细胞仪测定正常组、模型组、中药组、环磷酰胺组脾脏中T细胞Fas表达。结果模型组、环磷酰胺组脾脏中T细胞Fas表达升高,与正常组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。中药组Fas表达与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01),与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论桂枝茯苓丸可纠正荷瘤小鼠T细胞Fas表达的异常,使其恢复正常,提示桂枝茯苓丸可通过降低T细胞Fas的表达,抑制T淋巴细胞凋亡,从而提高机体的细胞免疫。     

理冲生髓饮对卵巢癌细胞株SKOV3基因表达的影响

目的:研究理冲生髓饮对人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株SKOV3的抑制作用,并利用基因表达谱芯片探索其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分组,灌胃给药,采血制备含药血清。提取对照组及理冲生髓饮组肿瘤细胞mRNA,制备cDNA探针并分别用Cy3和Cy5两种荧光染料标记,与基因表达谱芯片进行杂交,经扫描、分析,得出药物作用后表达有差异的基因。结果:共筛选出显著表达差异基因136种,其中16种基因表达水平下调,120种基因表达上调。结论:理冲生髓饮对SKOV3生长有抑制作用,调节癌基因及其相关的信号传导、改变肿瘤细胞蛋白合成等可能是其作用机制。     

中药复方药物血清对CDKN2A和RPS3a基因在人卵巢癌细胞株SKOV3中表达的影响

目的研究CDKN2A（细胞周期依赖性激酶抑制基因）和RPS3a基因（核糖体蛋白质S3a）在中药复方理冲生髓饮诱导人卵巢癌细胞株人卵巢浆液性乳头状囊腺癌（SKOV3）细胞凋亡中的作用。方法将20只Wistar大鼠随机分为理冲生髓饮组和生理盐水组,灌胃给药,采血制备含药血清。提取生理盐水组及理冲生髓饮组肿瘤细胞mRNA,制备DNA探针并分别用Cy3和Cy5两种荧光染料标记,与人细胞凋亡寡核苷酸微阵列芯片进行杂交,经扫描、分析,得出药物作用后表达有差异的基因。结果共筛选出显著差异表达基因66个,其中20个基因表达水平上调,46个基因表达水平下调。结论理冲生髓饮可能通过上调CDKN2A基因和下调RPS3a基因,达到诱导卵巢癌细胞凋亡的目的。诱导细胞周期停滞,阻碍肿瘤细胞蛋白质合成,影响细胞正常代谢等,可能是其诱导细胞凋亡的作用机制。     

桂枝茯苓丸对大鼠卵巢癌移植瘤的抑瘤作用及其机制

目的 探讨桂枝茯苓丸对大鼠卵巢癌移植瘤的抑瘤作用及其机制。方法 将30只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组和桂枝茯苓丸组,每组10只。模型组和桂枝茯苓丸组皮下接种人卵巢癌HO 8910细胞,建立裸鼠卵巢癌移植瘤模型。造模成功后,桂枝茯苓丸组灌胃桂枝茯苓丸组方,连续灌胃10d,对照组和模型组大鼠灌胃等体积的蒸馏水。治疗后,检测卵巢癌移植瘤的体积和重量,测定大鼠血清卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）、血清糖链蛋白（CA）125、白介素（IL）-2和IL-6水平,荧光定量PCR和Western Blot检测卵巢癌移植瘤组织中半胱氨酸蛋白酶（Caspase-3）、存活蛋白（survivin）和p21waf/cip蛋白和mRNA的表达。结果 与模型组比较,桂枝茯苓丸组卵巢癌移植瘤的体积和重量显著减小,血清IL 2的水平显著升高,血清FSH、LH、CA125、IL 6的水平显著降低,survivin的蛋白和mRNA表达量显著下降,Caspase-3和p21waf/cip的蛋白和mRNA表达量显著升高（均P＜0.05）。结论 桂枝茯苓丸可以增强机体免疫力,促进肿瘤细胞的凋亡,从而达到抗肿瘤的作用。     

黄芪对糖尿病大鼠肾组织血管生成素表达的影响

目的 探讨黄芪对糖尿病大鼠肾组织中血管生成素(Ang)及其受体Tie-2和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响. 方法 18只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和糖尿病黄芪治疗组.实时PCR和免疫组化法分别检测3组大鼠肾组织中Ang-1、Ang-2、Tie-2和VEGF的mRNA和蛋白表达. 结果 与正常对照组比较,糖尿病组大鼠肾组织VEGF mRNA以及VEGF、Ang-2和Tie-2蛋白表达明显升高(P＜0.01);与糖尿病组大鼠比较,糖尿病黄芪治疗组大鼠肾组织VEGF mRNA表达显著升高,而Tie-2蛋白表达显著下调(P＜0.01),两组间Ang-1和Ang-2的mRNA和蛋白表达未见统计学差异(P＞0.05). 结论 黄芪对糖尿病大鼠肾组织Ang表达的调节作用不明显,但可下调其受体Tie-2的表达.     

中药复方药物血清对FADD和MCL-1基因在人卵巢癌细胞株SKOV3中表达的影响

目的研究FADD和MCL-1基因在中药复方理冲生髓饮诱导人卵巢癌细胞株SKOV3细胞凋亡中的作用。方法 Wistar大鼠随机分组,灌胃给药,采血制备含药血清。提取生理盐水组及理冲生髓饮组肿瘤细胞mRNA,制备DNA探针并分别用Cy3和Cy5两种荧光染料标记,与人细胞凋亡寡核苷酸微阵列芯片进行杂交,经扫描、分析,得出药物作用后表达有差异的基因。结果共筛选出显著表达差异基因66种,其中20种基因表达水平上调,46种基因表达水平下调。结论理冲生髓饮能够抑制细胞增殖并诱导其凋亡,其细胞凋亡机制与上调FADD基因和下调MCL-1基因有关。     

流式细胞仪检测GFW对荷瘤鼠细胞免疫的影响

目的探讨桂枝茯苓丸抑瘤作用及对T细胞亚群的影响。方法制备荷瘤小鼠模型,计算抑瘤率,FACS直接免疫荧光染色法测定T淋巴细胞表型CD4、CD8分子。结果中药组抑瘤率为38.93%。模型组、环磷酰胺组CD8分子表达降低,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。中药组CD8分子表达升高,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组和环磷酰胺组CD4/CD8升高,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05),GFW可以降低荷瘤鼠CD4/CD8,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05);但不能使之恢复正常,与正常组比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论桂枝茯苓丸能促进CD8分子的表达,使荷瘤鼠异常分布的T细胞亚群趋于正常水平,提示桂枝茯苓丸可通过调节机体免疫功能发挥抑瘤作用。     

益肾导痰调冲汤对多囊卵巢综合征大鼠瘦素及其受体和IGF-IR表达的影响

目的:观察益肾导痰调冲汤对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠瘦素及其受体和胰岛素样生长因子I受体(IGF-IR)表达的影响。方法:SD大鼠,采用"T+HCG"造模法建立PCOS大鼠模型。随机分为正常对照组、空白模型组、益肾导痰调冲汤等效剂量组(以下简称中药组)、西药达英-35组、达英加中药组、桂枝茯苓丸组各10只。观察卵巢组织形态学改变;放射免疫法测定血清内分泌水平;ELISA法测定瘦素(Lep);免疫组化法测定卵巢组织瘦素受体(OB-R)及IGF-IR表达。结果:益肾导痰调冲汤可改善PCOS大鼠卵巢组织结构,缩小卵巢体积,减少囊状卵泡及闭锁卵泡数目。降低LH、LH/FSH、T、Lep,增高E2水平,降低OB-R、IGF-IR阳性表达(P<0.05或P<0.01)。结论:益肾导痰调冲汤可改善PCOS大鼠lep与OB-R的结合障碍,调节OB-R、IGF-IR的生物利用度,从而改善PCOS大鼠的高雄激素血症及排卵障碍。     

何首乌饮对衰老大鼠卵巢组织凋亡相关蛋白FOX、SIRT1和c—Myc的调节作用

目的观察分析对衰老大鼠给予何首乌饮后大鼠卯巢组织凋亡相关蛋白FOX、SIRTI、c—Myc表达的影响。方法大鼠给予D-半乳糖连续腹腔注射法制备亚急性衰老大鼠模型,模型制备成功后何首乌饮连续灌胃60d,大鼠断头取卵巢。采用WesternBloting法检测各组大鼠卵巢FOX、SIRTl及e—Myc蛋白表达的变化。结果模型组较正常组卵巢细胞FOX、SIRTl及e—Mye表达量降低;何首乌饮可使卵巢组织FOX、SIRTI及c—Myc表达量增加,并呈现一定的剂量依赖性,以高剂量最佳,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论何首乌饮方剂能延缓衰老大鼠卵巢细胞凋亡的发生,其机制可能是通过干预凋亡相关基因FOX、SIRTl及e—Myc蛋白表达抑制卵巢细胞的凋亡。     

HIF-1α，VEGF的表达及与乳腺癌生物学行为的关系

目的探讨乳腺癌组织中缺氧诱导因子-1α（hypoxia—inducible factor-1 alpha,HIF-1α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达及其与乳腺癌生物学行为之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测乳腺纤维腺瘤、癌旁正常乳腺组织和乳腺癌中HIF-1α,VEGF蛋白的表达。结果HIF-1α蛋白在乳腺纤维腺瘤、癌旁正常乳腺组织中几乎无表达,乳腺导管原位癌中阳性率46．67％（14／30）,导管癌早期浸润中63．33％（19／30）,浸润性乳腺癌中76．67％（23／30）;乳腺癌中VEGF阳性率67．78％（61／90）;乳腺癌中HIF-1α表达与VEGF（r=0．64,P〈0．01）呈正相关,与c—erbB-2正相关（r=0．276,P〈0．01）;HIF-1α及其靶基因VEGF在乳腺癌组织中明显上调,HIF—1α表达与淋巴结转移、雌激素受体状态、组织学分级及临床分期相关。结论HIF-1α和VEGF的表达与乳腺癌的生物学行为有关,HIF—1α可能成为早期诊断乳腺癌、预测其转移的重要指标。     

NSCLC组织中nm-23和VEGF蛋白的表达及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌科scLc）组织中nm-23和VEGF蛋白的表达情况及其临床意义。方法通过免疫组化和组织芯片技术,分别检测208例NSCLC患者肿瘤组织、150例癌旁组织及17例良性疾病肺组织中nm-23和VEGF蛋白的表达状况。结果①NSCLC癌组织中nm-23蛋白的表达程度显著高于癌旁组织及良性肺疾病组织（P〈0．001）;nm-23蛋白表达程度与NSCL的C临床分期、分化程度相关（P〈0．05）。②NSCLC癌组织中VEGF蛋白表达程度显著高于癌旁组织及良性肺疾病组织（P＜0．001）;VEGF蛋白表达程度与NSCLC分化程度、临床分期和淋巴结转移与否相关（P〈0．05）。结论①NSCLC肿瘤组织中nm-23及VEGF蛋白均呈高表达,提示两者与NSCLC的发生发展密切相关;②NSCLC的临床分期及分化程度与nm-23蛋白表达程度相关。NSCLC的临床分期、分化程度及淋巴结转移与否与VEGF蛋白表达的程度相关,提示两者均与肿瘤恶性生物学行为密切相关。     

卵巢癌患者血清VEGF和SE—CAD检测的临床意义

目的探讨卵巢癌患者围手术期血清血管内皮生长因子（VEGF）和可溶性上皮型钙粘蛋白（SE—CAD）的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫法（ELISA）测定82例卵巢癌患者手术前后血清VEGF和SE—CAD的水平,并与健康对照组比较。结果卵巢癌组治疗前血清VEGF和SE—CAD均增高,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;且与淋巴结转移和卵巢癌临床分期有明显相关性。行根治性手术组术后血清VEGF和SE—CAD均降低,与术前比较差异有统计学意义（P〈0．05）。而姑息性手术组血清VEGF和SE—CAD差异则无统计学意义（p〉0．05）。结论卵巢癌患者血清VEGF和SE—CAD的水平与肿瘤的浸润转移和病程有关,检测卵巢癌患者血清VEGF和SE—CAD的变化,有助于估计患者的预后。     

KISS-1、Cath-D及VEGF在乳腺癌组织中的表达及相关性

目的:研究KISS-1、Cath-D及VEGF在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床病理学特征的关系,探讨三者在乳腺癌发病过程中是否具有相关性。方法:用免疫组织化学S-P法检测50例乳腺癌患者肿瘤组织和50例癌旁3cm外正常乳腺组织中KISS-1、Cath-D及VEGF的表达水平。结果:①KISS-1在乳腺癌组织中的表达显著低于在正常乳腺组织中的表达(P<0.01);Cath-D、VEGF在乳腺癌组织中的表达率显著高于在正常乳腺组织中的表达(P<0.01)。②KISS-1在有淋巴结转移乳腺癌中的表达显著低于无淋巴结转移乳腺癌(P<0.05);Cath-D及VEGF在有淋巴结转移乳腺癌中的表达显著高于无淋巴结转移乳腺癌(P<0.05)。③KISS-1与Cath-D及VEGF在乳腺癌组织中的表达均具有负相关性(P<0.05)。结论:KISS-1基因表达在抑制乳腺癌转移过程中起一定作用,KISS-1基因的失表达可能通过参与淋巴及血行转移促进乳腺癌的浸润转移。     

HPV16／18感染与卵巢癌的关系

目的探讨高危型人乳头状瘤病毒感染与卵巢癌发生的关系。方法采用原位杂交法检测卵巢上皮性良性肿瘤32例、交界性肿瘤25例、卵巢癌45例中HPV16／18病毒,用正常卵巢组织作对照。结果卵巢癌中HPV16／18的感染与正常卵巢组织、上皮性良性肿瘤比较均有显著性差异（P〈0．001）,与交界性肿瘤比较无差异;低分化卵巢癌中HPV16／18的感染率高（P〈0．05）,与患者组织学类型及临床分期等无关。结论高危型HPV的感染可能与卵巢癌的发生有关。     

乳腺癌患者血清VEGF表达与临床预后的关系

目的探讨乳腺癌患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)的表达以及与临床预后的关系。方法采集112例乳腺癌患者术前血清,用ELISA酶联免疫吸附法测定VEGF含量,并设48例乳腺良性疾病患者为对照组;分析乳腺癌血清VEGF表达与临床病理指标及预后的相关性。结果乳腺癌患者血清VEGF表达明显高于良性病变组;乳腺癌血清VEGF的表达与淋巴结转移情况、组织中ER和/或PR表达及CerbB-2的表达情况明显相关(P0.05),与患者年龄、肿瘤直径大小无相关性;术后随访显示,出现转移者术前血清VEGF含量明显高于无复发转移者,其差异有统计学意义(P0.05)。结论乳腺癌患者血清中VEGF的表达与其临床预后有关,可作为乳腺癌患者预后判断的重要参考指标之一。     

VEGF通过影响CXCR4的表达调节卵巢癌细胞侵袭性的研究

目的 初步探讨卵巢癌细胞中血管内皮生长因子（VEGF）是否通过影响趋化因子受体CXCR4的表达,从而调节癌细胞的侵袭性.方法 以卵巢癌Caov-3细胞系为研究对象,运用RT-PCR和流式细胞术检测VEGF因子对卵巢癌Caov-3细胞系中CXCR4 mRNA及其蛋白质表达水平的影响,同时采用Boyden侵袭小室检测VEGF因子刺激后Caov-3细胞侵袭性的变化;并应用免疫组化技术检测VEGF与CXCR4在卵巢癌组织中的表达情况.结果 PCR产物凝胶电泳结果 显示,VEGF因子可显著增加Caov-3细胞中CXCR4 mRNA的表达：流式细胞仪检测发现,VEGF因子刺激细胞24h后,细胞平均荧光强度为26.20±1.45,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;VEGF刺激细胞后癌细胞的侵袭性显著增强,加入中和抗体后,癌细胞的侵袭性呈剂量依赖式下降.免疫组化检测结果 提示：卵巢癌中VEGF表达水平在不同转移状况和腹水量间的差异均有统计学意义（均P〈0.01）;CXCR4的表达水平在不同临床分期和转移状况间的差异均有统计学意义（均P〈0.05或0.01）;卵巢癌组织中VEGF蛋白与CXCR4蛋白的表达呈正相关（Spearman相关系数为0.575,P〈0.01）.结论 VEGF因子可通过影响卵巢癌细胞中CXCR4分子的表达,从而增强肿瘤细胞的侵袭性,CXCR4中和抗体则可抑制这一效应;卵巢癌组织中,VEGF与CXCR4的表达均与转移有关,且两者的表达呈正相关.     

卵巢癌组织中VEGF的表达及其与MVD的关系

目的探讨卵巢癌组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其与微血管密度（MVD）的关系。方法应用免疫组织化学技术检测130例卵巢癌组织和36例正常卵巢组织中VEGF的表达,并以抗CD34抗体标记微血管内皮细胞,测定MVD。结果卵巢癌组织VEGF呈高表达,阳性的比例为70.8%（92/130）,而正常卵巢组织VEGF表达阳性的比例为27.8%（10/36）,两者之间差异有显著性（P〈0.05）。结论 VEGF可能通过促肿瘤血管生成来影响卵巢癌的浸润和转移。     

脑缺血大鼠HGF及VEGF的表达及其相关性

目的研究脑缺血大鼠肝细胞生长因子（HGF）及血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达情况及其相关性。方法48只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组及大脑中动脉线栓法制作局灶性脑缺血大鼠模型组,分别于2h、6h、12h、24h、3d、7d、14d处死动物,采用免疫组织化学法观察各组脑组织HGF和VEGF的表达。结果HGF在假手术组几乎无表达,缺血2hHGF表达增加,并随时间延长表达逐渐上升,缺血组与对照组比较均有统计学差异（P〈0．01）。VEGF假手术组即有表达,缺血6h表达明显增加,在3-14d时表达增高达高峰,缺血组与对照组比较均有统计学差异（P〈0．01）。结论脑缺血后HGF及VEGF表达增高,两者可能起相互协同促进作用,共同参与缺血灶周围血管新生及脑保护作用。