假单胞菌发酵制备精氨酸脱亚胺酶

采用假单胞菌（Pseudomonas sp．）发酵制备精氨酸脱亚胺酶，优化发酵培养基配方及培养条件，以葡萄糖为碳源，酵母膏和蛋白胨为氮源，30℃振荡培养20h时，发酵液中精氨酸脱亚胺酶的酶活力可达2．17u／ml。向HepG2肝癌细胞培养液中加入酶粗品0．5u／ml，对肿瘤细胞的生长抑制率为93．4％。     

耐亚胺培南的铜绿假单胞菌整合子基因研究

目的通过分析耐亚胺培南的铜绿假单胞菌的整合子所携带的耐药基因的种类及特点，探讨其耐药机制，为指导临床用药，预防院内感染和流行病学调查、新药的研发提供参考。方法根据美国国家临床标准化研究所（CLSI／NCCLS）2004年标准，应用纸片扩散法（KB）进行药敏试验，采用多重PCR方法对临床分离的23株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌进行整合酶（IntI）检测，并分析整合酶阳性菌株的耐药基因盒。结果药敏试验显示23株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌全部为泛耐株，5株为Ⅰ类整合酶阳性，其中3株为缺失型，无耐药基因盒，其余2株耐药基因为blaVIM4和blaPSE-1；14株为Ⅱ类整合酶阳性，其耐药基因盒均为dfr1-sat1-aadA1；3株Ⅰ、Ⅱ类整合酶均为阳性；7株不含Ⅰ、Ⅱ类整合酶。结论耐亚胺培南的铜绿假单胞菌大多都具备Ⅰ、Ⅱ类整合酶基因和基因盒，这是造成它们成为泛耐株的重要耐药机制。     

复方维生素B12软膏Ⅰ号中维生素B12的HPLC测定

建立了HPLC法测定复方维生素B12软膏Ⅰ号中维生素B12的含量.采用Hypersll BDS C18柱,流动相为乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(15:85),检测波长360nm.维生素B12在0.16～0.8μg范围内线性关系良好(r=0.9995),平均回收率为98.4%,RSD为0.9%.     

高效液相色谱法测定复方维生素胶囊中维生素B_(12)的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定复方维生素胶囊中维生素B12含量的方法。方法:色谱柱为HypersilODS,流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液(22∶78,pH=6.4),流速为1.0ml/min,检测波长为360nm,柱温为室温,进样量为20μl。结果:维生素B12进样量在10.20μg～204.00μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.7%(RSD=1.18%)。结论:本方法简便、快速、准确,不受维生素B6、叶酸等成分的干扰,可用于测定复方维生素胶囊中维生素B12的含量。     

反相离子对高效液相色谱法测定维生素B_（12）注射液的含量

目的：建立维生素B12注射液的含量测定方法。方法：采用Kromasil C18柱,以0.16%庚烷磺酸钠溶液-甲醇（82∶18）（用磷酸调pH值3.0）为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长361nm。结果：维生素B12进样量在0.04048～0.6072μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999（n=5）;平均加样回收率为99.0%（RSD=0.59%,n=6）。结论：该法准确、专属性强、重现性好。     

RP-HPLC法测定维生素B12片的含量

建立RP-HPLC法测定维生素B12片含量的方法。采用Kromasil C18色谱柱,以水-乙腈-三乙胺(含5mmol庚烷磺酸钠,用磷酸调pH至3.5)(81:19:0.3)为流动相,柱温为室温,流速为1.0mL.min-1,检测波长360nm,进样体积为20μL。维生素B12浓度在2.012～20.12μg.mL-1范围内与相应峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999(n=5);高、中、低3种浓度的平均加样回收率为99.3%(RSD=0.69%,n=9)。方法可行、简便、专属性强、重现性好。可作为维生素B12片的含量测定方法。     

红外分光光度法鉴别维生素B_（12）注射液

目的用红外分光光度法鉴别维生素B12注射液。方法采用红外光谱对照品比较法或标准图谱对比法进行鉴别。结果供试品与对照品的红外光谱及其标准图谱均一致。结论采用红外光谱对照品比较法或标准图谱对比法鉴别维生素B12注射液,专属性强,值得推广应用。     

反相高效液相色谱法测定维生素B12片的含量

目的建立测定维生素B12片含量的反相高效液相色谱法。方法色谱柱为Zorbax RX-C18柱（150mm×4.6mm,5μm）,流动相为水-乙腈（89：11）,流速1.0mL/min,检测波长361nm,柱温30℃。结果维生素B12质量浓度在0.002～0.1g/L范围内与峰面积线性关系良好（r=1）,平均回收率为100.93%,RSD=0.53%（n=6）。结论所用方法操作简便,经济可靠,重现性好,耐用性强,可作为维生素B12片的含量测定方法。     

庆大维B胶囊中维生素B1、B2、B6和B12的HPLC法测定

建立HPLC法测定庆大维B胶囊中维生素B1、B2、B6和B12的含量。采用C18柱，乙腈-10mmol／L磷酸二氢钾（pH3．2）为流动相，梯度洗脱，检测波长280nm。维生素B1、B2、B6和B12分别在50～150、20-60、20～60和0.5～1．5μg/ml浓度范围内线性关系良好，平均回收率分别为101．9％、98．1％、99．6％和99．4％。