培养基成分对怀牛膝愈伤组织诱导及牛膝多糖含量的影响

目的:研究培养基成分对怀牛膝愈伤组织诱导形成及牛膝多糖含量的影响。方法:以怀牛膝无菌苗的叶片、茎段为材料,采用正交设计研究基本培养基,碳源,2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)、N-苯基-N′-噻二唑-5-脲(TDZ)、水解酪蛋白(CH)对愈伤组织诱导和多糖含量的影响。结果:诱导叶片愈伤组织形成的适宜培养基为B₅+2mg·L^-12,4-D+0.5mg·L^-16-BA+30g·L^-1葡萄糖+1g·L^-1CH,诱导茎段愈伤组织形成的适宜培养基为B₅+2mg·L^-12,4-D+1mg·L^-16-BA+30g·L^-1葡萄糖+0.5g·L^-1CH;有利于叶片愈伤组织中多糖含量提高的培养基是LS+1mg·L^-16-BA+1mg·L^-1TDZ+30g·L^-1蔗糖,有利于茎段愈伤组织中多糖含量提高的培养基是LS+1mg.L^-12,4-D+0.5mg·L^-16-BA+1mg·L^-1TDZ+30g·L^-1葡萄糖。结论:初步建立了怀牛膝叶片、茎段诱导愈伤组织的适宜培养条件,为通过植物组织细胞培养途径生产牛膝多糖提供了依据。     

羟丙基-β-环糊精对葛根素溶解性与角膜渗透性的影响

 目的研究羟丙基-β-环糊精(HPCD)对葛根素溶解性与角膜透过性的影响。方法采用了相溶解度法和离体角膜扩散实验。结果在不同浓度HPCD下,葛根素的相溶解曲线呈AL型;随着HPCD浓度的增大,葛根素的表观渗透系数减小。50 g·L^-1HPCD增溶的表观渗透系数分别是以150 g·L^-1HPCD和40 g·L^-1PVP增溶的3.12和2.86倍,但150 g·L^-1HPCD与40 g·L^-1PVP增溶的表观渗透系数相比没有显著性差异(P>0.05)。结论HPCD能增加葛根素的溶解度与提高其角膜透过性。     

人参-黄芪与熟地-山茱萸影响肾上腺皮质瘤细胞皮质酮生成的比较研究＊

目的 研究“补气生津”人参-黄芪与“填精补肾”熟地-山茱萸对皮质激素生成的影响。方法 采用0.25-8 g·L^-1人参-黄芪与0.25-8 g·L^-1熟地-山茱萸水煎醇沉液分别干预小鼠肾上腺皮质瘤细胞（Y1 adrenocortical cell，Y1细胞）48 h，采用MTT比色法（MTT assay，MTT）检测细胞增殖，运用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测细胞分泌皮质酮含量，实时荧光定量PCR（Real-time Quantitative polymerase chain reaction，qPCR）检测类固醇激素合成酶基因表达，免疫蛋白印迹法（Western blot，WB）检测蛋白表达。结果 与空白组（Control，Con）比较，0.25-8 g·L^-1人参-黄芪和熟地-山茱萸均抑制Y1细胞增殖（P < 0.01）；4 g·L^-1和8 g·L^-1人参-黄芪促进皮质酮分泌（P < 0.01），4 g·L^-1和8 g·L^-1熟地-山茱萸抑制皮质酮分泌（P < 0.01）；8 g·L^-1人参-黄芪增强CYP11A1、CYP21A2、CYP11B1蛋白表达（P < 0.05），8 g·L^-1熟地-山茱萸抑制CYP11A1、CYP21A2、CYP11B1蛋白表达（P < 0.01）；8 g·L^-1人参-黄芪抑制Star基因表达（P < 0.05），而8 g·L^-1熟地-山茱萸促进Star基因表达（P < 0.01），4 g·L^-1与8 g·L^-1人参-黄芪和0.25-8 g·L^-1熟地-山茱萸均能显著抑制Cyp11a1基因表达（P < 0.01），8 g·L^-1人参-黄芪和1-8 g·L^-1熟地-山茱萸都抑制Cyp21a1基因表达（P < 0.05），1-8 g·L^-1人参-黄芪和0.25-8 g·L^-1熟地-山茱萸均抑制了Cyp11b1基因表达（P < 0.05）。与佛司可林（Forskolin，FSK）组比较，人参-黄芪与熟地-山茱萸预处理Y1细胞后，FSK不能诱导Star、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b11基因表达（P < 0.01）。结论 人参-黄芪促进皮质酮分泌，熟地-山茱萸抑制皮质酮分泌，主要通过调节类固醇激素合成酶表达发挥药效。     

魔芋胶为载体的结肠定位给药系统体外释放介质研究

 目的筛选合适的释放介质,用于魔芋胶为载体结肠定位给药系统的体外评价。方法采用压制包衣法制备魔芋胶包衣片;制备含大鼠盲、结肠内容物,内容物降解酶和β-甘露聚糖酶的3种体外释放介质;通过测定不同pH、温度条件下酶的活性,比较魔芋胶包衣片在不同介质中的药物释放及衣膜溶蚀情况,筛选合适的体外释放介质。结果酶的活性研究表明,在体外释放37℃,pH 6.8介质条件下,内容物降解酶和β-甘露聚糖酶可保持较高活性(为最大酶活性的80%～90%);体外药物释放及衣膜溶蚀研究表明,在含酶介质中,魔芋胶包衣片的药物释放及衣膜溶蚀随酶浓度增加而加快(P<0.05),具有结肠定位释放特性;在含0.1 g·L^-1(酶活性6.27 U·mL^-1)β-甘露聚糖酶、1.0 g·L^-1(酶活性7.32 U·mL^-1)盲结肠内容物降解酶、50 g·L^-1大鼠盲结肠内容物的3种介质中,包衣片药物释放及衣膜溶蚀情况相似。结论含0.1 g·L^-1(酶活性6.27 U·mL^-1)β-甘露聚糖酶的pH 6.8磷酸盐缓冲液可有效模拟体内结肠环境,用于魔芋胶为载体结肠定位给药系统的体外评价。     

黄连素单用及合用谷维素在家兔及健康志愿者体内的药代动力学研究

 目的:研究黄连素单用及与谷维素伍用在家兔和健康志愿者体内的药代动力学。方法:反相高效液相色谱法,紫外检测。用3P87程序软件处理数据,用t检验法进行显著性检验结果:在此色谱条件下,黄连素在20～640μg·L^-1之间呈良好的线性关系,其最低检测极限为20μg·L^-1,平均回收率为(99.85士3.20)%。黄连素单用制剂组,在家兔体内:其最高血药浓度c_max为92.7μg·L^-1,t_peak为0.63 h,AUCo-_∞为491.7μg·L^-1·h^-1在人体内:其最高血药浓度。c_max为394.7μg·L^-1,t_peak为2.37h,AUCo-_∞为3028.3μg·L^-1·h^-1,黄连素与谷维素合用制剂组,在家兔体内:其最高血药浓度c_peak为210.8μg·L^-1,t_peak为0.65 h,AUCo-_∞为1105.4g·L^-1·h^-1在人体内:其最高血药浓度。c_max为534.2μg·L^-1,t_peak为2.45 h,AUCo-_∞为4136.9g·L^-1·h。两组体内的血药浓度-时间曲线无论在家兔及人体均符合一室开放模型。结论:无论在家兔及人体,黄连素与谷维素合用比黄连素单用吸收好,说明谷维素可促进黄连素吸收,两组之间的AUCo-值具有显著差别(P<0.05),而其它的体内动力学行为基本一致。     

UPLC–MS/MS同时测定大鼠血、脑脊液中奎硫平及其活性代谢物

 目的建立同时测定大鼠血、脑脊液中奎硫平及其活性代谢物7-羟基奎硫平羟7-羟基-N-去烷基奎硫平浓度的UPLC-MS/MS法。方法样品经碱化后用叔丁基甲醚提取,采用Acquity UPLC^TM BEH C₁₈柱(2.1mm×50mm,1.7μm),柱温40℃,以水(含50mmol·L^-1醋酸铵,3‰甲酸)-乙腈(73∶27)为流动相,流速0.25mL·min^-1,进样量5μL。采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,选择离子监测方式进行扫描,测定样品浓度,卡马西平作为内标。结果血浆中:奎硫平在0.0775～155μg·L^-1,7-羟基奎硫平在0.049～98μg·L^-1,7-羟基-N-去烷基奎硫平在0.067～670μg·L^-1内线性关系良好,萃取回收率均>89%,方法回收率均>87%,,内羟,间,密度RSD均<9%。脑脊液中:奎硫平在0.02～38.75μg·L^-1,7-羟基奎硫平在0.0098～29.5μg·L^-1,7-羟基-N-去烷基奎硫平在0.067～670μg·L^-1内线性关系良好,萃取回收率均>87%,方法回收率均>85%,,内羟,间,密度RSD均<16%。结论该方法该该度高、快速羟该确羟有效,且血、脑中浓度均可测定,为研究转运蛋白对抗,神分裂药物进入血脑屏障的影响提供了依据。     

复方单硝酸异山梨酯缓释片的人体药动学和生物等效性研究

 目的研究复方单硝酸异山梨酯缓释片的人体药动学和生物等效性。方法健康受试者交叉口服单剂量和多剂量受试制剂和参比制剂,用高效液相色谱质谱检测器(MSD)和二极管阵列检测器(DAD)串联在线测定血浆中单硝酸异山梨酯和水杨酸的浓度;单硝酸异山梨酯用高效液相色谱电喷雾质谱(HPLC/ESIMS)选择离子检测,水杨酸用DAD检测。结果单剂量口服受试制剂和参比制剂后,单硝酸异山梨酯的AUC_0→36h分别为(100251±13369)和(94720±11393)μg·h·L^-1,t_max分别为(47±10)和(45±08)h,c_max分别为(6619±765)和(6580±832)μg·L^-1;水杨酸的AUC_0→∞分别为(21864±6329)和(18872±5379)μg·h·L^-1,t_max分别为(08±04)和(47±10)h,c_max分别为(6050±1133)和(3797±872)μg·L^-1。受试制剂单硝酸异山梨酯和水杨酸的相对生物利用度分别为(1059±64)%和(1175±193)%。受试者口服多剂量受试制剂和参比制剂后,单硝酸异山梨酯的AUC^ss_0→24h分别为(103335±15192)和(104105±17675)μg·h·L^-1,t_max分别为(43±11)和(43±08)h,c_max分别为(7248±955)和(7867±1100)μg·L^-1,c_min分别为(1294±400)和(1219±360)μg·L^-1,c_av分别为(4306±633)和(4338±736)μg·L^-1,DF分别为(1401±159)%和(1552±207)%;稳态时受试制剂单硝酸异山梨酯的相对生物利用度为(100.5±13.0)%。结论 以单硝酸异山梨酯为研究对象,受试制剂与参比制剂具有生物等效性;以阿司匹林为研究对象，受试制剂和参比制剂吸收程度相当,吸收速度较快。     

新疆雪莲细胞悬浮系的建立和黄酮类活性成分的产生

目的:建立新疆雪莲的悬浮培养体系。方法:研究不同培养基、培养基初始pH、碳源、接种量、植物生长物质含量对雪莲细胞生长和黄酮合成的影响。结果:N₆液体培养基在pH5.8、蔗糖含量50g·L^-1、接种量60-80g·L^-1FW时有利于细胞生长和黄酮合成,附加BA0.2mg·L^-1+NAA2mg·L^-1有利于黄酮合成,而附加BA0.5mg·L^-1+NAA3mg·L^-1则对生长有利。结论:培养条件的优化可有效提高雪莲悬浮细胞的生长和总黄酮的合成。     

中国健康志愿者单次和多次口服阿德福韦酯片的药动学

 目的 研究健康受试者单次和多次口服阿德福韦酯片后的药动学过程。方法 12名中国男性健康受试者单次po和多次po 10 mg 阿德福韦酯片;采用液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS)测定阿德福韦酯活性代谢物阿德福韦的血药浓度。用DAS2.0程序计算主要药动学参数,并进行统计分析。结果 健康志愿者单次和多次口服阿德福韦酯片10 mg后,阿德福韦的ρmax分别为(24±9)和(24±8) μg·L^-1,t_max分别为(1.3±0.7)和(1.5±0.6)h,t_1/2分别为(7.4±1.2)和(8.5±2.1)h,AUC_0-24h分别为(210±54)和(213±73) μg·h·L^-1,AUC_0-∞分别为(236±64)和(250±90) μg·h·L^-1。多次po阿德福韦酯片后ρ^ss_av为(8.90±3.06) μg·L^-1,DF为(2.52±0.66) 。结论 阿德福韦酯片单次与多次口服的主要药动学参数无显著性差异,体内药物无蓄积现象,耐受性良好。     

离子导入对罗替戈汀体外渗透速率的影响

 目的 研究脉冲电流占空比、电流强度和药物浓度对罗替戈汀离子导入的渗透速率的影响。 方法 采用离子导入作为促透方法,分别测定不同占空比、电流强度和药物浓度下的盐酸罗替戈汀在离子导入后接受室溶液的浓度,计算它们的稳态透皮速率。 结果 固定药物质量浓度为 1.4 g·L^-1 ,电流强度为 0.5 mA·cm^-2 ,占空比为 1 ∶ 2 时稳态透过速率达到 93.74 μg·cm^-2·h^-1 ,而 1 ∶ 1 时达到 24.98 μg·cm^-2·h^-1 ;固定药物质量浓度为 1.4 g·L^-1 ,占空比为 1 ∶ 2 ,当电流强度由 0.125 mA·cm^-2 提高到 0.5 mA·cm^-2 时,稳态透皮速率由 3.03 增至 93.74 μg·cm^-2·h^-1 ;固定电流强度为 0.5 mA·cm^-2 ,占空比为 1 ∶ 2 ,药物质量浓度由 0.5 g·L^-1 提高到 1.4 g·L^-1 时,稳态透皮速率由 7.96 增至 93.74 μg·cm^-2·h^-1 。 结论 脉冲直流电占空比为 1 ∶ 2 时可以有效消除皮肤极化现象;且在漏槽条件下,罗替戈汀离子导入的渗透速率均随着电流强度和药物浓度的增大而增大,但并不是严格的线性关系。     

木蹄复方体外抗肿瘤作用的实验研究

目的:筛选木蹄复方抗肿瘤活性提取物,初步分析其化学成分并观察其体外抗肿瘤效应.方法:常规水提和醇提的方法提取复方中水溶和醇溶性组分.MTT法测定木蹄复方水提取物(distilled water extract of compound Fomes fomentarius,WECF)和木蹄复方乙醇提取物(ethanol extract of compound F.fomentarius,EECF)对体外培养肿瘤细胞A549,Hela,QGY生长的抑制效应.系统预试法分析WECF化学组成.流式细胞术检测WECF对A549细胞凋亡的影响.结果:WECF对A549,Hela,QGY 3种细胞的IC50分别为(0.28±0.02),(0.40 ±0.06),(0.28±0.05) g·L-1;EECF对3种细胞的IC50分别为(0.50±0.04),(0.50±0.03),(0.60 ±0.06)g·L-1,WECF对肿瘤细胞的生长具有较强的抑制作用.WECF含有有机酸,氨基酸、多肽和蛋白质,糖、多糖和苷类,皂苷,内酯、香豆素及其苷类,植物甾醇、三萜成分以及挥发油和油脂,多糖含量为(16.1±0.5)％.WECF对A549,Hela,QGY,DU145,MDA-MB-435S,SGC-79016种细胞的IC50分别为0.29,0.45,0.32,0.32,0.83,0.23g·L-1; WECF 1 g·L-1作用于A549 24 h后,细胞凋亡率为22.0％.结论:WECF具有较强的体外抗肿瘤效果,对多种肿瘤细胞的生长具有非常明显的抑制作用,并可诱导A549细胞凋亡.     

透皮促进剂对消旋延胡索乙素体外经皮渗透的影响

 目的 考察不同透皮促进剂对消旋延胡索乙素体外经皮渗透的影响。方法 采用Valia-Chien双室渗透扩散池,以大鼠离体皮肤为渗透屏障,用高效液相色谱法对延胡索乙素进行含量测定,考察月桂氮NFDB3酮、丙二醇及两者按不同比例混合对消旋延胡索乙素的促透效果。 结果 月桂氮NFDB3酮、丙二醇单独使用均对延胡索乙素有促透作用,月桂氮NFDB3酮促透效果较强,8%月桂氮NFDB3酮促透效果最好,平均渗透速率达到12.397 μg·cm^-2·h^-1 。单用丙二醇时,15%丙二醇促透效果较好,平均渗透速率为3.142 μg·cm^-2·h^-1。两者合用促透效果始终小于月桂氮NFDB3酮单独使用时效果,且与单用8%Azone有极显著性差异（P<0.01）。结论 月桂氮NFDB3酮浓度为8%时消旋延胡索乙素饱和溶液体外渗透具有最大促透效果,月桂氮NFDB3酮和丙二醇合用并未体现协同作用。     

扁担藤不同极性成分抗氧化活性研究

目的:研究扁担藤不同极性成分体外抗氧化活性。方法:以抗坏血酸和茶多酚为阳性对照,采用铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)、清除羟自由基(OH.)和[2,2’-连氨-(3-乙基苯并噻唑林-6-磺酸)二氨盐]自由基(ABTS+.)测定法,评价扁担藤总提取物、石油醚层、乙酸乙酯层、正丁醇层和水层5个不同极性成分在质量浓度为0.005～0.050 g·L-1范围内对铁离子的还原/抗氧化能力和清除OH.,ABTS+.能力。结果:扁担藤不同极性成分的Fe3+还原/抗氧化能力均弱于抗坏血酸,除水层外,均强于茶多酚;当浓度为0.050 g·L-1时,不同极性成分的铁离子还原/抗氧化能力为:抗坏血酸(FRAP值2 377.8)>总提取物(FRAP值683.8)>乙酸乙酯层(FRAP值419.8)>石油醚层(FRAP值201.8)>正丁醇层(FRAP值185.8)>茶多酚(FRAP值73.8)>水层(FRAP值63.8);乙酸乙酯层清除OH.的能力(IC500.028 g·L-1)均强于抗坏血酸(IC500.044 g·L-1)和茶多酚(IC500.032 g·L-1);各不同极性成分清除ABTS+.的能力均强于茶多酚(IC500.416 g·L-1),且乙酸乙酯层(IC500.008 g·L-1)强于抗坏血酸(IC500.011 g·L-1)。结论:扁担藤具有较好的抗氧化能力,为开发功能性抗氧化剂提供科学依据。     

菲律宾蛤仔寡肽体外抗氧化、抗肿瘤活性研究

目的:研究菲律宾蛤仔酶解寡肽的体外抗氧化、抗肿瘤活性.方法:采用分光光度法测定寡肽对2,2′-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、超氧阴离子(O2-·),羟自由基(·OH)的清除能力和寡肽的金属离子螯合能力,及四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测寡肽对肿瘤细胞DU-145的增殖抑制效应.结果:菲律宾蛤仔酶解寡肽有较显著的ABTS自由基[半数有效浓度(EC50)0.204 g·L-1]、羟自由基(EC500.815 g·L-1)和超氧阴离子自由基(EC500.066 g·L-1)清除能力和金属离子螯合能力(EC501.554 g·L-1)及有效的DU-145细胞增殖抑制活性(半数抑制浓度(IC50)5.202 g·L-1).结论:菲律宾蛤仔酶解寡肽具有较好的抗氧化及抗肿瘤活性,可能与其低相对分子质量及蛋白酶酶解构成寡肽的结构相关.     

天竺葵花抗氧化作用的研究

 目的：研究天竺葵花的抗氧化作用。方法：用化学发光法研究天竺葵花粗提液对超氧阴离子自由基（O〈sub〉2〈/sub〉^-）和羟在自由基（·OH）的清除作用。用分光光度法研究它对1,1一二苯基-2-苦肼基自由基（DPPH·）的清除作用。结果：天竺葵花具有很强的清除自由基活性。其粗提液清除O〈sub〉2〈/sub〉^-的IC〈sub〉50〈/sub〉分别为3.5μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉（红花）,3.0μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(粉花),1.6μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(浅粉花);清除·OH 的IC〈sub〉50〈/sub〉分别为5.7μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(红花),4.2μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉（粉花）,3.8μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(浅粉花);清除DPPH.的IC〈sub〉50〈/sub〉分别为12μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(红花),8.3μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(粉花),5.7μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉(浅粉花),均与市售茶多酚的清除能力相近（其IC〈sub〉50〈/sub〉。分别为：1.1,4.1,5.4μg·ml〈sup〉-1〈/sup〉）。结论：天竺葵花可能成为一种新的高效天然杭氧化剂。     

马缨丹挥发油体外抗氧化活性研究

目的:对马缨丹挥发油的抗氧化能力进行研究.方法:用95％乙醇将马缨丹挥发油配制成不同质量浓度(0.4,0.8,1.2,1.6,2.0 g·L-1)溶液,采用二苯代苦味酰自由基(DPPH·)法、2,2′-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS+·)法和铁氰化钾还原法检测各不同浓度挥发油的抗氧化能力.结果:马缨丹挥发油对ABTS+·的清除能力较强,清除率可高达52.50％;但对DPPH·清除能力较弱,清除率仅为21.05％;同时其还原能力也随着浓度的增大而增强.结论:马缨丹挥发油对DPPH·的清除能力较弱,但具有较强的清除ABTS+·能力和还原能力,其能力强弱与其浓度有一定的量效关系,可作为天然抗氧化剂及功能性食品的开发资源.     

罗汉果皂苷Ⅴ的镇咳、祛痰及解痉作用研究

 目的筛选罗汉果镇咳祛痰的有效部位,并进一步研究罗汉果皂苷Ⅴ的镇咳、祛痰及解痉作用。方法通过观察罗汉果水提部位、体积分数95%醇提部位及体积分数50%醇提部位对浓氨水致小鼠咳嗽次数及咳嗽潜伏期的影响,筛选出罗汉果镇咳的有效部位为体积分数50%醇提部分。进一步观察了50%醇提部分中的罗汉果皂苷Ⅴ对小鼠酚红排泄量及组胺致豚鼠离体回肠及离体气管痉挛的影响。结果罗汉果水煎剂50g生药·kg^-1,罗汉果体积分数50%醇提部位50g生药·kg^-1及罗汉果皂苷Ⅴ300,150,75mg·kg^-1能明显减少小鼠的咳嗽次数,罗汉果体积分数50%醇提部位50g生药·kg^-1及罗汉果皂苷Ⅴ300mg·kg^-1还能明显延长小鼠咳嗽潜伏期;罗汉果皂苷Ⅴ150mg·kg-1能明显增加小鼠气管酚红排泄量,提示有一定的祛痰作用;5g·L-1的罗汉果皂苷Ⅴ能明显拮抗组胺引起的回肠收缩;2.5及1.25g·L^-1剂量对组胺引起的气管痉挛有明显的拮抗作用。结论罗汉果皂苷Ⅴ显示出一定的镇咳、祛痰、解痉活性,推测为罗汉果镇咳的主要活性成分。