胚胎干细胞/诱导多能干细胞向间充质干细胞转化的研究进展

胚胎干细胞(ESCs)/诱导多能干细胞(iPSCs)因其有潜在成瘤性,制约了它的临床应用.间充质干细胞(MSCs)具有多向分化能力、免疫调节功能以及低免疫原性,且仍未发现它有成瘤性,因而成为干细胞治疗颇具临床应用价值的种子细胞.近年来研究发现应用合适的诱导方案可以从ESCs/iPSCs获取MSCs,结合ESCs/iPSCs的无限自我更新能力,ESCs/iPSCs向MSCs转化将可能是获取MSCs的一种数量充足且稳定的新来源.本文将对目前ESCs/iPSCs向MSCs转化的方法 、机制以及新衍生的MSCs的免疫调节功能、干性特征做一综述.     

间充质干细胞归巢机制及影响因素研究进展

间充质干细胞(MSCs)是一种能够从多种生物组织中分离出来的非造血干细胞,因其具有多向分化潜能及组织修复能力故被广泛应用于组织工程以及再生医学治疗中。然而MSCs归巢效率低下,无法在靶组织中达到足够的归巢数量。这一缺点明显影响其治疗效果。提高MSCs的归巢率进而提升其疗效是当下研究以及应用再生医学治疗的重点所在。本文对MSCs的归巢机制和影响因素做一综述。     

CXCR4转基因骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死的实验性研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)及CXCR4转基因MSCs(CXCR4-MSCs)治疗心肌梗死(MI)的机制、效果及简单有效的移植方法.方法:将SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、细胞治疗的MSCs组及CXCR4-MSCs组.生理盐水组及细胞治疗组左冠状动脉前降支结扎60 min后再灌注.术后24 h,细胞治疗组分别经尾静脉注射2.5×10<'6>个DiI标定的体外扩增的MSCs/CXCR4-MSCs.生理盐水组注射1 mL生理盐水.分别于术后3 d及30 d检查移植细胞MI区归巢情况及在MI区生存及分化情况.测定MI区胶原含量、胶原Ⅰ/Ⅲ比率.用超声心动图评估MI 30 d后各组鼠左心室功能等.结果:CXCR4-MSCs治疗组移植细胞归巢至MI区数目是MSCs治疗组的2.5倍,体外迁移实验中CXCR4-MSCs治疗组细胞向基质细胞衍生因子-Ⅰ(SDF-1)迁移数目是MSCs治疗组的3.8倍,超声心动图评估MI区室壁变薄及心功能下降均轻于MSCs治疗组,与大体组织形态学改变吻合.细胞治疗组胶原Ⅰ/Ⅲ比率比生理盐水组明显下降75%以上.结论:CXCR4-MSCs恢复了植入的MSCs向梗死心肌的靶向迁移能力.提高了静脉移植MSCs治疗MI的效果.     

CXCR4转基因骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死的实验性研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)及CXCR4转基因MSCs(CXCR4-MSCs)治疗心肌梗死(MI)的机制、效果及简单有效的移植方法.方法:将SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、细胞治疗的MSCs组及CXCR4-MSCs组.生理盐水组及细胞治疗组左冠状动脉前降支结扎60 min后再灌注.术后24 h,细胞治疗组分别经尾静脉注射2.5×10<'6>个DiI标定的体外扩增的MSCs/CXCR4-MSCs.生理盐水组注射1 mL生理盐水.分别于术后3 d及30 d检查移植细胞MI区归巢情况及在MI区生存及分化情况.测定MI区胶原含量、胶原Ⅰ/Ⅲ比率.用超声心动图评估MI 30 d后各组鼠左心室功能等.结果:CXCR4-MSCs治疗组移植细胞归巢至MI区数目是MSCs治疗组的2.5倍,体外迁移实验中CXCR4-MSCs治疗组细胞向基质细胞衍生因子-Ⅰ(SDF-1)迁移数目是MSCs治疗组的3.8倍,超声心动图评估MI区室壁变薄及心功能下降均轻于MSCs治疗组,与大体组织形态学改变吻合.细胞治疗组胶原Ⅰ/Ⅲ比率比生理盐水组明显下降75%以上.结论:CXCR4-MSCs恢复了植入的MSCs向梗死心肌的靶向迁移能力.提高了静脉移植MSCs治疗MI的效果.     

超顺磁性氧化铁作为细胞标记试剂的可行性研究

目的:评价目前临床使用的磁共振对比增强剂超顺磁性氧化铁颗粒(SPIO)进行骨髓间充质干细胞(MSCs)标记的安全性、有效性.方法:从中华小型猪髂骨处抽取骨髓,体外培养扩增MSCs.将SPIO和MSCs共同孵育培养36 h.普鲁士蓝染色评价细胞的标记效率;通过MTT比色实验评价SPIO对细胞生长能力的影响;台盼蓝染色检测标记后细胞的活性;使用Costar Transwell方法评价铁离子对细胞迁移能力的影响;用细胞分化诱导液培养标记后的细胞评价其向成脂肪细胞和成骨细胞的分化能力.结果:①MSCs经SPIO标记后普鲁士蓝染色阳性率在95%以上,电镜切片观察可见高密度铁颗粒位于细胞浆内.②MSCs经SPIO标记后,MTT比色实验发现随着培养液中SPIO浓度的增加细胞增殖能力没有明显改变;台盼蓝染色显示98%的细胞保持活性;仍可保持原有的细胞形态,可继续培养、传代;细胞迁移试验发现MSCs对SDF-1和VEGF诱导的迁移能力没有明显的减弱;细胞仍可向成脂肪细胞和成骨细胞分化.结论:SPIO可以安全、有效地标记MSCs.     

间充质干细胞在肿瘤治疗应用的研究进展

间充质干细胞（MSCs）作为一种多能干细胞,具有广泛的生物学功能。在颅内肿瘤的治疗中,血脑屏障（BBB）的存在阻碍了药物向脑内肿瘤的扩散,药物难于达到有效的治疗。而MSCs可绕过BBB,因此在颅内肿瘤的治疗中,其可以作为药物载体应用于肿瘤治疗。同时,经过基因修饰的MSCs,可以迁移到肿瘤局部,起到治疗肿瘤的作用,显著降低对正常细胞的毒副作用。基于已有的研究表明,MSCs在肿瘤治疗的应用中具有广阔的前景。本文综述了关于MSCs与肿瘤细胞的相互作用、MSCs对肿瘤微环境的影响、MSCs作为药物载体在肿瘤治疗上的应用以及基因修饰的MSCs在肿瘤治疗上的应用、MSCs分泌的细胞外囊泡（EVs）在肿瘤治疗上的应用等方面的研究进展。     

超顺磁性氧化铁作为细胞标记试剂的可行性研究

目的:评价目前临床使用的磁共振对比增强剂超顺磁性氧化铁颗粒(SPIO)进行骨髓间充质干细胞(MSCs)标记的安全性、有效性.方法:从中华小型猪髂骨处抽取骨髓,体外培养扩增MSCs.将SPIO和MSCs共同孵育培养36 h.普鲁士蓝染色评价细胞的标记效率;通过MTT比色实验评价SPIO对细胞生长能力的影响;台盼蓝染色检测标记后细胞的活性;使用Costar Transwell方法评价铁离子对细胞迁移能力的影响;用细胞分化诱导液培养标记后的细胞评价其向成脂肪细胞和成骨细胞的分化能力.结果:①MSCs经SPIO标记后普鲁士蓝染色阳性率在95%以上,电镜切片观察可见高密度铁颗粒位于细胞浆内.②MSCs经SPIO标记后,MTT比色实验发现随着培养液中SPIO浓度的增加细胞增殖能力没有明显改变;台盼蓝染色显示98%的细胞保持活性;仍可保持原有的细胞形态,可继续培养、传代;细胞迁移试验发现MSCs对SDF-1和VEGF诱导的迁移能力没有明显的减弱;细胞仍可向成脂肪细胞和成骨细胞分化.结论:SPIO可以安全、有效地标记MSCs.     

人间充质干细胞转染条件的优化

间充质干细胞(MSCs)在人体内分布广泛，具有强大的自我更新能力、多能性以及免疫调节能力，并且具有迁移到受损组织和肿瘤部位的特性，表达抗体的MSCs在肿瘤治疗方面显示出良好的应用前景。然而，MSCs难以转染，限制了实际应用。该文采用4种方法转染脐带血来源的人间充质干细胞，并优化了转染条件。结果表明，三质粒系统制备慢病毒转染MSCs的效率较高，当包装条件为m(DNA)∶m(Lipo)=1∶2、m(vector)∶m(psPAX2)∶m(VSVG)=3∶2∶1时，50%的MSCs可成功表达目的蛋白。利用优化后的条件，本研究成功构建了分别表达Anti-CD24和BiTE-Fc 2种不同结构抗体的MSCs，为MSCs在肿瘤治疗领域的应用研究提供了试验基础。     

间质干细胞与肿瘤的关系研究进展

间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是来源于中胚层的一类具有高度自我更新能力和多向分化潜能的非造血干细胞,具有很好的组织迁移能力和肿瘤靶向性。MSCs用于抗肿瘤治疗已经开展了广泛的研究,MSCs可以作为细胞载体发挥抗肿瘤作用,同时通过促肿瘤血管生成、免疫抑制、分化为肿瘤相关成纤维细胞等方式促进肿瘤的恶性行为。该文对近年来该领域的研究进展进行简要综述。     

快速诱导人骨髓间充质干细胞成脂培养基的研发

<正>间充质干细胞(MSCs)是在正常组织中发现的一种多能祖细胞[1],因其具有独特的自我更新能力和分化成脂肪细胞、骨细胞、心肌细胞、神经元细胞等组织特异性细胞的潜能[2-4],广泛用于再生医学研究,MSCs在组织损伤修复[4]、缺血性心肌病[5]、急性心肌梗死[6]、肝纤维化[7]等疾病治疗中发挥着重要作用。目前,面临的主要挑战是实现MSCs的大量来源及保证安全性,MSCs定义的主要特征是它的自我更新潜力、表面标记的表达以及多谱系分化能力,因此,向成脂肪细胞分化是鉴别MSCs不可少的部分。此外,MSCs的脂肪分化在再生医学研究中具有重要意义。从临床的角度来看,外科医生面临着患者软组织吸收重建的挑战。例如,烧伤患者经常遭受     

基因修饰间充质干细胞治疗肿瘤研究进展

间充质干细胞（MSCs）是来源于中胚层的成体干细胞,体内分布广泛,可从骨髓、脂肪、牙髓、脐带/胎盘等组织中分离获取,具有高度的可增殖和分化潜能,较低的免疫原性,同时具有向炎症损伤部位微环境的趋向性,在疾病治疗方面可作为基因药物的载体实现精准治疗。癌症被认为是永远无法愈合的伤口,其组织微环境在损伤与修复中呈无休止的动态变化,MSCs在其中扮演了重要角色。利用MSCs具有的向肿瘤组织中归巢及定位的特点,对其进行抗肿瘤药物的基因工程改造可能在癌症的治疗上是一种新的策略。概述MSCs在癌症发生发展中的作用以及基因修饰MSCs治疗癌症的研究进展,旨在为临床使用基因修饰MSCs治疗癌症提供策略和见解。     

间充质干细胞治疗特发性肺纤维化药理机制研究进展

间充质干细胞（MSCs）具有多种分化能力,可以直接迁移到损伤组织中并分化为肺泡上皮细胞,还可以分泌并释放多种细胞因子和外泌体,调节炎症和免疫反应。特发性肺纤维化（IPF）是与年龄相关、发病机制尚不明确的慢性进行性肺部疾病,临床上使用的吡非尼酮和尼达尼布仅能缓解症状。MSCs在治疗IPF方面具有广阔的应用前景,就目前关于MSCs治疗特发性肺纤维化的药理机制以及该疗法所存在的局限性进行综述和探讨。     

Notch信号通路在骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞过程中的作用

骨髓间充质干细胞(MSCs)具有多向分化潜能,可以通过细胞移植治疗多种疾病,并且在一定的条件下可以通过诱导分化为心肌细胞(CMs),为治疗心血管疾病带来了希望.在细胞的增殖和分化中,Notch 信号通路起到了非常重要的作用,本文对在 MSCs 分化为 CMs 过程中 Notch 信号通路的具体作用做一综述.     

间充质干细胞治疗ARDS作用机制的研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stromal/stem cells,MSCs)在急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)中有着潜在的治疗作用,现在认为主要的机制在于MSCs通过旁分泌可溶性生物活性因子与受损组织相互作用.文章着重介绍MSCs如何通过旁分泌作用减轻ARDS肺损伤严重程度及增强肺组织修复,同时对MSCs在ARDS疾病治疗的最新研究进行综述.     

SD大鼠骨髓基质细胞体外培养及分化研究

目的 研究SD大鼠骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)的生物学特性及其成骨和成脂分化能力.方法 处死16只6月龄SD大鼠动物,非连续密度梯度离心分离大鼠MSCs,传代后分别在成骨及成脂培养基中诱导培养14天,观察细胞形态,绘制细胞生长曲线,通过组织特染对MSCs的成骨,成脂表型进行鉴定,计数阳性染色细胞百分比.结果 SD大鼠MSCs在体外具有成骨细胞分化潜力,油红0染色显示成脂诱导培养基可定向诱导其分化.结论 本实验成功分离SD大鼠MSCs且保持分化能力.     

丹参多酚酸盐协同间充质干细胞自体移植治疗大鼠急性心肌损伤

目的 研究丹参多酚酸盐协同间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)自体移植治疗急性心肌损伤(acute myocardial injury,AMI)的效果.方法 分离SD大鼠骨髓MSCs,体外培养,并加丹参多酚酸盐进行诱导干预(100 mg·L-1).采用免疫荧光检测MSCs中cTnI、N...     

间充质干细胞治疗老年衰弱研究进展

在全球老龄化加速的当下,老年衰弱是老年人群中亟待解决的公共卫生问题,迫切需要找到有效且有针对性的干预手段.近年来间充质干细胞(MSCs)在再生医学领域的巨大进展及应用,以及MSCs的功能与老年衰弱的病理生理机制的契合,为老年衰弱的干预带来了机遇.本文对MSCs治疗老年衰弱的研究进展进行综述,旨在为衰弱的干预提供参考.     

不同细胞移植对大鼠心肌梗死后修复的影响

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)和MSCs诱导后分别移植对急性心肌梗死(AMI)修复的影响,比较不同细胞移植的作用.方法 获取、培养大鼠骨髓MSCs;5-氮胞苷(5-aza)诱导MSCs,免疫细胞化学法和RT-PCR检测诱导后MSCs特性.结扎大鼠左冠状动脉前降支,建立急性心肌梗死模型,分三个组.对照组:梗死部位中央及四周移植磷酸盐缓冲液(PBS),50μl/点;MSCs移植组和MSCs诱导组:在上述部位分别移植MSCs、诱导的MSCs,2×106个/50μl/点.3周后,超声观察心室腔大小、室壁厚度及运动幅度,检测左室射血分数(EF%)、短轴缩短率(FS%);血流动力学测定左室收缩压(LVSP)、舒张末压(LVEDP)、压力变化最大速率(±dp/dtmax)等指标;免疫组化分析心肌组织中移植细胞情况.结果 诱导的MSCs对心肌肌钙蛋白T(cTnT)、连结蛋白43(Cx-43)表达阳性.MSCs移植组、MSCs诱导组与对照组相比,左室前壁运动增强,FS%、LVSP、±dp/dtmax均升高、LVEDP降低(P＜0.05),MSCs诱导组改变更明显(P＜0.05).MSCs移植组、MSCs诱导组心肌组织中移植细胞对cTnT、Cx-43表达阳性.结论 MSCs移植、MSCs诱导后移植对大鼠AMI均有修复作用,MSCs诱导后移植对AMI心功能的改善作用更明显.     

大鼠骨髓间充质干细胞的培养、扩增与鉴定

目的:建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分离及培养的方法,探讨体外培养MSCs的生物学特性.方法:采用密度梯度离心法和贴壁筛选法纯化MSCs,镜下连续观察细胞的形态变化.流式细胞仪鉴定其表面抗原CD29、CD34、CD44和CD45的表达情况.结果:原代MSCs呈集落状生长,细胞呈梭形、纺锤形,呈放射状排列.传代后大都均匀分布生长,细胞生长迅速,倍增时间约45.5 h.流式细胞术鉴定表明,培养的第3代和第5代MSCs CD44、CD29阳性,CD45和CD34阴性.结论:采用密度梯度离心法结合贴壁筛选法可成功分离和培养大鼠的骨髓MSCs,MSCs可以作为组织工程中种子细胞的来源.     

骨髓间质细胞移植对前脑缺血大鼠空间学习记忆能力的影响

目的 研究骨髓间质细胞（MSCs）颅内移植对前脑缺血大鼠学习、记忆能力的影响。方法 体外分离培乔MSCs，用四血管夹闭法制作前脑缺血模型，将60只SD大鼠随机分为空白对照组、冻融MSCs颅内移植组和MSCs颅内移植组3组，用morris水迷宫评定大鼠学习、记忆能力。结果 在定位航行试验中，MSCs颅内移植组评分与冻融MSCs颅内移植组、空白对照组之间有显著差异（P〈0．01），冻融MSCs颅内移植组、空白对照组两组评分无显著差异。空间探索试验中，3组评分没有明显区别。结论 MSCs颅内移植能促进大鼠空间定位学习能力的改善。对空间记忆能力无明显改善作用。