安五脂素对α-黑色素细胞刺激素诱导的小鼠黑色素瘤B16F10细胞中黑色素生成的影响及机制

目的研究安五脂素对小鼠黑色素瘤B16F10细胞黑色素生成的影响及机制。方法体外培养B16F10细胞,用MTT法检测B16F10细胞存活率。随后实验分为细胞对照组、α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)诱导模型组和模型+安五脂素5,10和20μmol·L^-1组,培养48 h。NaOH裂解法和多巴氧化速率法检测细胞内黑色素含量和酪氨酸酶活性,WST-1法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,化学荧光法检测活性氧(ROS)水平,实时-定量PCR检测血红素加氧酶1(HO-1)mRNA表达水平,Western印迹法检测核因子E2相关因子2(Nrf-2)和HO-1蛋白表达水平。结果安五脂素5,10和20μmol·L^-1对B16F10细胞存活无影响。与细胞对照组相比,模型组黑色素含量和酪氨酸酶活性显著升高(P<0.01);SOD活性降低(P<0.01),MDA和ROS水平升高(P<0.01);Nrf-2蛋白及下游HO-1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组相比,模型+安五脂素10和20μmol·...     

诱导血红素加氧酶-1对肝硬化大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的 探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对肝硬化大鼠肠黏膜屏障的保护作用.方法 建立四氯化碳(CCl4)致大鼠肝硬化动物模型,钴原卟啉诱导HO-1表达.FITC-荧光标记法检测大鼠肠黏膜通透性.ELISA法检测血浆TNF-α及IL-6含量.分光光度法检测肠组织HO活性及MDA含量.TUNEL染色法检测肠黏膜细胞凋亡.Western blot检测肠组织Bcl-2蛋白表达.结果 与control组比较,肝硬化(HC)组大鼠肠道通透性显著增高(P＜0.01);HC+HO组大鼠肠道通透性比HC组显著降低(P＜0.05).血浆TNF-α水平在HC组显著高于control组(P＜0.01),而在HC+HO组显著低于HC组(P＜0.05);IL-6水平在HC组显著高于control组(P＜0.01).肠组织匀浆MDA含量在HC组显著高于control组(P＜0.01),而在HC+HO组显著低于HC组(P＜0.01).诱导HO-1可有效抑制肝硬化大鼠肠黏膜细胞凋亡.HC组大鼠Bcl-2蛋白表达量显著低于control组(P＜0.01),诱导HO-1可使Bcl-2蛋白表达量显著高于control组(P＜0.01).结论 诱导HO-1可能通过抑制炎症与细胞凋亡保护肝硬化大鼠肠黏膜屏障.     

新型大气污染物MMT诱导人SK-N-SH细胞凋亡的分子机制

目的 研究甲基环戊二烯羰基锰(MMT)诱导人SK-N-SH细胞凋亡的分子机制.方法 MMT诱导SK-N-SH细胞后,MTT法检测细胞存活率,分光光度法检测活性氧(ROS)生成;化学发光法检测Caspase-3活性;Western blot法检测p38 MAPK磷酸化程度.结果 在MMT诱导SK-N-SH细胞过程中,细胞ROS生成量为正常组的5.2倍(P＜0.01);抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)及二硫苏糖醇(DTT)可有效抑制细胞ROS生成(P＜0.01).提高细胞存活率(P＜0.01);在这一过程中,Capase-3活性明显增强,为对照组的3.01倍(P＜0.01);同时p38 MAPK磷酸化程度加强;p38 MAPK特异性抑制剂SB203580可提高细胞存活率(P＜0.05),抑制Caspase-3的活性(P＜0.01).结论 MMT诱导的SK-N-SH细胞凋亡与ROS升高,激活Caspase-3有关,这一过程有p38 MAPK相关信号转导途径参与.     

雷公藤甲素诱导人肝细胞凋亡的机制

目的 探讨雷公藤甲素诱导人肝细胞L-02凋亡的机制.方法 将L-02细胞分为对照组和雷公藤甲素50 nM实验组,处理48 h后,采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率、活性氧(ROS)的荧光强度,试剂盒检测细胞色素C的浓度以及半胱天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)和Caspase-3的活性,Western blot检测细胞中B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)的表达.结果 与对照组相比,实验组细胞存活率下降,细胞凋亡率上升,Bcl-2表达下调,Bax表达、细胞色素C浓度、ROS荧光强度、Caspase-9和Caspase-3活性均明显上调(P＜0.05或P＜0.01).结论 雷公藤甲素可以抑制L-02细胞的存活,通过激活线粒体凋亡途径促进L-02细胞凋亡,下调Bcl-2与Bax比率,促进细胞色素C释放,诱导ROS生成,进一步破坏线粒体膜,增加细胞色素C的释放,激活Caspase-9和Caspase-3介导的细胞凋亡通路,最终诱导细胞凋亡.     

感染Ad-HGF对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨高糖条件下感染携带肝细胞生长因子的重组腺病毒(Ad-HGF)对人脐静脉内皮细胞(humanumbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响.方法 将HUVECs分为低糖组(LG组,5.5 mmol/L)、高糖组(HG组,35 mmol/L)、腺病毒对照组(HG+ Ad-GFP组)和实验组(HG+ Ad-HGF组).检测4组HUVECs增殖情况、细胞内活性氧(ROS)水平及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达.结果 HG组、HG+ Ad-GFP组HUVECs存活率低于LG组,HG+ Ad-HGF组高于HG组(P＜0.05,P＜0.01).HG组、HG+ Ad-HGF组HUVECs内ROS水平高于LG组,但HG+ Ad-HGF组低于HG组(P＜0.05).HG组、HG+ Ad-GFP组Bax、Bax/Bcl-2高于LG组,Bcl-2低于LG组,但HG+ Ad-HGF组Bax、Bax/Bcl-2低于HG组,Bcl-2高于HG组(P＜0.05).结论 感染Ad-HGF可通过降低细胞内ROS水平和Bax/Bcl-2减少细胞凋亡,进而对高糖诱导的HUVECs起到保护作用.     

人参皂苷Rg1可能通过丝裂素活化蛋白激酶途径抑制细胞凋亡

目的探讨人参皂苷Rg1对MPP+诱导细胞凋亡保护作用的可能信号传导途径.方法用吖啶橙-溴化乙锭染色观察SHSY5Y细胞凋亡率,流式细胞仪检测细胞内活性氧ROS水平,Western Blotting法检测JNK(c-jun NH2-terminal kinase)激酶活性,免疫细胞化学染色法检测裂解的Caspase-3阳性细胞的表达率.结果经10 μmol*L-1 Rg1或2.5 mmol*L-1 N-乙酰半胱氨酸预处理后,MPP+诱导的SHSY5Y细胞凋亡受到明显抑制,同时细胞内ROS下降,JNK激酶的活性减弱,裂解的Caspase-3阳性细胞表达率下降.结论 Rg1可抑制MPP+诱导的SHSY5Y细胞凋亡,其作用机制可能是通过清除ROS、减弱JNK激酶的活性,从而减少Caspase-3的激活.     

表没食子儿茶素没食子酸酯调控食管癌细胞线粒体膜电位诱导细胞凋亡作用研究

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)调控食管癌细胞Ec9706线粒体膜电位诱导细胞凋亡作用.方法 不同浓度(100、200、300 mg/L) EGCG作用Ec9706细胞24 h后,Annexin V/PI双标流式细胞术方法检测细胞凋亡水平;流式细胞术检测细胞线粒体膜电位;Western Blot方法检测细胞中Caspase-3蛋白表达水平,0.9％氯化钠溶液代替EGCG作为对照组.结果 100、200、300 mg/L EGCG作用Ec9706细胞24 h后,与对照组相比Ec9706细胞凋亡率显著增高(P＜0.01),300 mg/L EGCG组细胞凋亡率显著高于100、200 mg/L EGCG组(P＜0.01).EGCG可显著降低细胞线粒体膜电位(P＜0.01),且具有剂量依赖性.western-blot结果显示,EGCG组与对照组相比Caspase-3蛋白表达水平显著增高(P＜0.05).结论 EGCG具有诱导食管癌Ec9706细胞凋亡作用,其作用机制可能与调控线粒体膜电位引起内源性细胞凋亡有关.     

虾青素调控AMPK-SIRT1通路对七氟醚诱导HT22神经细胞损伤的影响

目的研究虾青素对七氟醚诱导的海马神经元HT22细胞活力和细胞凋亡的作用与机制。方法体外培养HT22细胞分为对照组、七氟醚组、七氟醚+虾青素(1.25、2.50、5.00μmol/L)组;七氟醚组给予4%七氟醚刺激细胞6 h;七氟醚+虾青素组七氟醚刺激细胞前给予不同浓度的虾青素处理2 h。采用MTT实验检测各组HT22细胞存活率,DCFH-DA荧光探针和硫代巴比妥酸法分别检测各组细胞内的活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)含量,流式细胞术和TUNEL检测各组细胞凋亡,Western blotting检测各组细胞中CyclinD1、Cleaved Caspase-3、Bax和Bcl-2、AMPK、p-AMPK、SIRT1蛋白的表达。结果与对照组比较,七氟醚组HT22细胞存活率显著下降和细胞凋亡率显著增加(P0.05),CyclinD1、Bcl-2、p-AMPK和SIRT1蛋白表达减少(P0.05),Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达增加(P0.05),ROS活性和MDA含量降低(P0.05)。与模型组比较,七氟醚+虾青素HT22细胞Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达下调(P0.05),CyclinD1、Bcl-2、p-AMPK和SIRT1蛋白表达上调(P0.05),ROS活性和MDA含量降低(P0.05),且呈剂量相关性。结论虾青素对七氟醚诱导的HT22细胞凋亡和氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能与调控AMPK-SIRT1通路有关。     

咖啡酸苯乙酯对糖尿病大鼠视网膜VEGF和ICAM-1表达的影响

【摘要】 目的 观察咖啡酸苯乙酯对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子（VEGF ）和细胞间黏附因子-1（ICAM-1）蛋白表达的影响。方法 将30只STZ诱导的糖尿病大鼠随机分为3组,糖尿病组（DM,n=10）,CAPE低剂量治疗组（CAPE5,n=10）,CAPE高剂量治疗组（CAPE10,n=10）。另取10只大鼠作为正常对照组（CON,n=10）。饲养三个月后,取大鼠双眼视网膜做组织匀浆,Elisa法检测视网膜VEGF 和ICAM-1的表达。结果 腹腔注射咖啡酸苯乙酯（CAPE）后,糖尿病大鼠视网膜VEGF和ICAM-1蛋白水平表达降低,低剂量治疗组可分别减少40%VEGF和29% ICAM-1蛋白的表达,高剂量治疗组可分别减少42%VEGF和44% ICAM-1蛋白的表达。 结论 咖啡酸苯乙酯可减少糖尿病大鼠视网膜VEGF 和ICAM-1蛋白的表达。     

人参皂苷Rg3对H2O2诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的保护作用#br#

摘要：目的　探讨人参皂苷Rg3对过氧化氢（H2O2）诱导人卵巢颗粒细胞（KGN）损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法　体外培养KGN,采用不同剂量H2O2孵育细胞2 h,建立H2O2刺激的KGN损伤模型。人参皂苷Rg3预处理24 h,H2O2刺激KGN后,CCK-8检测细胞活力,筛选有效的干预剂量,随后将KGN分为空白组、H2O2模型组、H2O2+Rg3组和Rg3组,采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）水平;AnnexinⅤ/PI双染,流式细胞术检测人参皂苷Rg3对H2O2诱导KGN凋亡的影响;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、BAX及细胞色素C的表达。结果　与空白组相比,H2O2模型组细胞活力下降,凋亡比例升高（P＜0.01）,ROS水平增高,细胞色素C水平显著升高,Bcl-2/BAX降低（均P＜0.05）。与模型组相比,H2O2+Rg3组能够明显提高细胞活力,减少ROS的产生,降低凋亡细胞比例,降低细胞色素C水平,提高Bcl-2/BAX（均P＜0.05）。与空白组相比,Rg3组无明显差异。结论　人参皂苷Rg3预处理对H2O2诱导的KGN氧化损伤具有保护作用,其机制与减缓ROS过量累积以及抑制线粒体凋亡途径有关。     

罗格列酮对体外培养小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1生长与分化的影响研究

目的:研究罗格列酮对体外培养小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1生长与分化的影响。方法:以小鼠MC3T3-E1作为药物筛选的细胞模型,分别加入1、2、5、10μmo·lL-1罗格列酮干预,MTT法测定细胞活性并计算生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫组化法分析细胞中促凋亡因子Bax和抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达;测定细胞中分化指标碱性磷酸酶(ALP)的活性。设立只加入培养基处理的空白对照组。结果:与空白对照组比较,罗格列酮各浓度组生长抑制率、细胞凋亡率升高(P均<0.05),Bax表达增强、Bcl-2表达减弱、ALP活性下降(P均<0.05),且呈浓度依赖性。结论:罗格列酮可抑制MC3T3-E1细胞生长及分化,并诱导其凋亡;而Bax/Bcl-2可能参与凋亡的发生,并可能起关键调控作用。     

仙茅提取物对小鼠成骨细胞增殖的影响

目的观察仙茅对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响。方法将稀释成不同梯度浓度的仙茅提取物与成骨样细胞MC3T3-E1共同体外培养,以四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测细胞的增殖。结果仙茅低浓度组(1∶1500)增殖率为6.0%,对MC3T3-E1细胞增殖没有影响;中浓度组(1∶1000)增殖率21.7%,对细胞增殖影响明显(P<0.05);高浓度组(1∶500)增殖率是51.9%(P<0.05);极高浓度组(1∶250)增殖率是66.3%(P<0.01)。结论在体外,仙茅提取物能明显促进MC3T3-E1细胞的增殖。     

The toxic effects of Aroclor 1254 exposure on the osteoblastic cell line MC3T3-E1 and its molecular mechanism

Polychlorinated biphenyls (PCBs) are still prevalent in the environment despite the fact that they have been banned in many countries for several decades. Recent epidemiologic studies have demonstrated a link between PCBs exposure and pathological alterations of bone tissues. The aim of this study was to investigate the toxic effects of the PCBs mixture Aroclor 1254 on MC3T3-E1 preosteoblasts and explore the underlying molecular mechanism. Different doses of Aroclor 1254 were used to treat MC3T3-E1 and the cell viability, apoptosis, ALP activity, intracellular calcium (Ca2+) level and oxidative stress response were measured. The expression level of related proteins TRPV6, Apaf-1 and Bax was evaluated with Western blot assay. The subcellular distribution of TRPV6 protein was detected with immunofluorescence assay. The results indicated that the higher dose of Aroclor 1254 (>10 mg/L) could inhibit the cell proliferation and induce apoptosis in MC3T3-E1. The ROS level following Aroclor 1254 exposure was elevated with the concentration, while the ALP activity and intracellular calcium (Ca2+) level decreased. After Aroclor 1254 exposure, the expression level of calcium transport related protein TRPV6 was down-regulated, while the expression level of apoptosis related proteins Apaf-1 and Bax up-regulated in a dose dependant manner. The immunofluorescence assay results showed that the expression of TRPV6 in the cytoplasm was greatly suppressed after Aroclor 1254 exposure. In conclusion, Aroclor 1254 exposure could induce toxic effects in MC3T3-E1 as evidenced by inhibition of proliferation, induction of apoptosis and suppression of ALP activity. The ROS production and alteration of intracellular Ca2+ level induced by down-regulation of TRPV6 might involve the toxic effects, and cell apoptosis induced by Aroclor 1254 exposure is associated with the pro-apoptotic Apaf-1 pathway as well as alteration of Bcl-2/Bax ratio.     

右美托咪定对心脏手术患者术后认知功能的影响

目的 探讨右美托咪定对心脏手术患者术后认知功能的影响.方法 选择2014年3月-2015年3月行体外循环心脏外科手术的64例患者作为研究对象,采用回顾性队列研究方法,根据是否在麻醉诱导前给予右美托咪定,分为右美托咪定组和非右美托咪定组,各32例.对比分析两组患者麻醉诱导后切皮前(T0)、体外循环开始后30 min(T1)、体外循环停止后30 min(T2)、手术结束时(T3)、手术结束后24 h(T4)、手术结束后72 h(T5)不同时间点平均动脉压(MAP)、心率(HR)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)及IL-10水平差异,并评价患者术后的认知功能情况.结果 T1时右美托咪定组MAP和HR高于非右美托咪定组,且右美托咪定组T1时HR高于T0时(P＜0.05).T1 ～ T3时右美托咪定组TNF-α低于非右美托咪定组(P＜0.01);在T1 ～ T4时右美托咪定组IL-6水平低于非右美托咪定组,IL-10水平高于非右美托咪定组(P＜0.01).术后3d和7d时右美托咪定组术后认知功能障碍发生率均明显低于非右美托咪定组(P＜0.05).结论 右美托咪定在体外循环心脏外科手术中应用,可减少术后认知功能障碍的发生,可能与其抗炎作用有关.     

地塞米松通过抑制p53蛋白降解诱导成骨细胞凋亡

目的 观察地塞米松对成骨细胞凋亡的影响并探讨其作用机制。方法 分别采CellTiter-Glo?荧光细胞活力检测试剂盒和Annexin V-FITC/PI双染凋亡检测试剂盒测定地塞米松作用后MC3T3-E1细胞的增殖和凋亡。蛋白质印迹法(Western blotting)检测地塞米松作用后MC3T3-E1细胞和hFOB1.19细胞胱天蛋白酶3(caspase-3)/裂解caspase-3和PARP/裂解PARP的表达。用Western blotting和PCR分析地塞米松作用后MC3T3-E1细胞中p53和检控点激酶2(Chk2)的表达。探讨p53敲除和Chk2敲除在地塞米松诱导MC3T3-E1细胞凋亡中的作用。结果 地塞米松能显著抑制MC3T3-E1细胞的生长并诱导其凋亡。地塞米松能通过促进p53的表达诱导成骨细胞凋亡。地塞米松对P53蛋白表达的调节作用是通过上调Chk2来实现的，Chk2与P53相互作用，抑制P53蛋白的降解。P53基因敲除可通过降低裂解caspase-3和裂解PARP的表达来抑制地塞米松诱导的MC3T3-E1细胞凋亡，经Dex处理的MC3T3-E1和hFOB1.1...     

神经妥乐平对H2O2致PC12细胞损伤的保护作用

目的 探索神经妥乐平对H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤的影响及其潜在机制.方法 用CCK-8法检测细胞存活率,以流式细胞术检测细胞氧化损伤的发生、细胞内活性氧的生成及线粒体膜电位的变化,荧光显微镜观察细胞内活性氧的产生,qRT-PCR测定Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA的表达.结果 PC12细胞存活率随H2O2浓度的增加而逐渐下降.其中,450μM H2O2处理细胞24 h后细胞存活率、凋亡率、坏死率明显降低;细胞内活性氧水平表达明显升高;线粒体膜电位JC-1红/绿荧光比值下降;Bax和Caspase-3的mRNA表达升高,而Bcl-2的mRNA表达下降,以上指标与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).而预先给予0.01UN/ml的NTP处理细胞12h可明显提高细胞存活率,降低细胞凋亡率和坏死率,减少细胞内活性氧生成并提高线粒体膜电位,抑制Bax和Caspase-3的mRNA表达,促进Bcl-2 mRNA的表达,以上指标与H2O2组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NTP能抑制H2O2诱导的PC12细胞损伤,其神经细胞保护作用可能与其降低细胞内活性氧水平、维持线粒体膜电位的高能状态和抑制促凋亡基因表达、促进抗凋亡基因表达有关.     

糖基化终产物对小鼠成骨样细胞基质金属蛋白酶2分泌的影响

目的 探讨糖基化终产物(AGEs)对小鼠成骨样细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)分泌的影响.方法 用不同浓度的AGEs(50、100、200、400 mg/L)干预培养的小鼠成骨样细胞(MC3T3-E1)24 h和用200 mg/L的AGEs干预MC3T3-E1不同时间(12、24、48 h),以无血清培养基(α-MEM)和相应浓度的牛血清白蛋白(BSA)为对照.用Western blot法检测小鼠成骨样细胞上清中MMP-2蛋白的表达.结果 不同浓度和不同时间的AGEs干预的MMP-2分泌水平明显高于对照组(P<0.01).结论 AGEs以时间及浓度依赖的方式增加小鼠成骨样细胞MMP-2分泌,AGEs可能通过调节成骨细胞MMP-2的分泌参与骨质疏松的发病.     

Effects of Ethyl Acetate Extract of Poncirus trifoliata Fruit for Glucocorticoid-Induced Osteoporosis

Poncirus trifoliata fruit (PTF) affects the digestive and cardiovascular systems, and kidney function. The authors studied the effects of ethyl acetate (EtOAc) extract of PTF on the activities of osteoblasts and in an animal model. The main compounds of the EtOAc extract, naringin and poncirin have been confi rmed by HPLC and NMR analysis. Effects of osteoblastic differentiation were mea-sured by alkaline phosphatase (ALP) activity, osteopontin (OPN) protein expression and osteoprotegerin (OPG) mRNA expression in MC3T3-E1 cells. Also, osteoclast differentiation was measured by multinucleated cells (MNCs) formation through tartrate resistance acid phosphatase (TRAP)-positive staining. Bone mineral density (BMD) was measured before and after treatment with EtOAc extract of PTF in prednisolone-induced osteoporotic mice. Dexamethasone (DEX) decreased OPN and OPG expression level in MC3T3-E1 cells and ALP activity was decreased by DEX dose-dependently. EtOAc extract of PTF recovered the levels of ALP activity, and the expression of OPN and OPG in MC3T3-E1 cells treated with DEX. In osteoclast differentiation, multinucleated TRAP-positive cell formation was significantly suppressed by the EtOAc extract of PTF. Total body BMD was restored by EtOAc extract of PTF in prednisolone-induced osteoporotic mice. In conclusion, EtOAc extract of PTF recovered DEX-mediated deteriorations in osteoblastic and osteoclastic functions, and increased BMD in glucocorticoid-induced osteoporosis.     

Stimulative effects of (22E,24R)-ergosta-7,22-diene-3beta,5alpha,6beta-triol from fruiting bodies of Tricholoma auratum,on a mouse osteoblastic cell line,MC3T3-E1

We screened the differentiation-inducing activities of 39 mushroom extracts from Akita prefecture, Japan, on the mouse osteoblastic cell line, MC3T3-E1. Sixteen phosphate buffered saline (PBS), 8 boiled PBS, 14 ethanol and 12 methanol extracts induced alkaline phosphatase (ALP) activities, an indicator of MC3T3-E1 cell differentiation. The enzyme activities were markedly induced by extracts of Tricholoma auratum, and we isolated the active compound from methanol extracts of this mushroom. Physical data for the isolated active compound were identical to those for (22E,24R)-ergosta-7,22-diene-3beta,5alpha,6beta-triol (1). 1 induced ALP activities of MC3T3-E1 cells and promoted cell proliferation. To investigate the relationships between the chemical structure and differentiation-inducing activity of the compound, ALP-inducing activities of MC3T3-E1 cells by 1, ergosterol (2), ergocalciferol (3), cholesta-3beta3,5alpha6beta-triol (4), 7-dehydrocholesterol (5) and cholecalciferol (6) were tested. The enzyme activities of MC3T3-E1 cells were increased 3.0-fold by 10 microM 1 and 2.4-fold by 10 microM 4. However, 2, 3, 5 and 6 did not induce MC3T3-E1 cell ALP activity at 0.1-10 microM. These results suggested that the OH groups at C-5 and/or C-6 of 1 and 4 played an important role in their differentiation-inducing activities on MC3T3-E1 cells. Furthermore, 1 suppressed induction of MC3T3-E1 cell apoptosis by serum starvation.