都柏林念珠菌的鉴定

都柏林念珠菌是一种新近鉴定的机会致病念珠菌,其表型特征如菌落颜色、形态及染色形态均类似于白念珠菌,许多生化特征也与其相同,所以需要多种表形特征结合才能鉴定都柏林念珠菌。鉴别方法较多,如培养基鉴定、生化鉴定、分子生物学鉴定、免疫鉴定及光学鉴定。尤其近年分子生物学兴起,提供了方便、快速的实验方法。     

都柏林念珠菌分子生物学鉴定研究进展

都柏林念珠菌(candida dubliniensis)是近年来主要从人类免疫缺陷病毒感染者和艾滋病患者口腔中分离出来的一种新的念珠菌,表型与白念珠菌相似,单凭表型和生化特征常常不能做出正确的判断,近年来随着分子生物学的发展为菌种间鉴定提供了广阔的空间。分子生物学方法仍然是鉴定菌种的金标准。     

在Staib琼脂上形成厚膜孢子是都柏林念珠菌种的特异性特征

念珠菌主要通过形态学和生化试验来鉴别。新近发现的都柏林念珠菌的主要鉴定特征与白念珠菌极其相似 ,只能用其他不同的试验加以鉴别。Ｓｔａｉｂ琼脂是临床用于从艾滋病患者分离新生隐球菌的常规培养基 ,作者研究利用Ｓｔａｉｂ琼脂鉴定白念珠菌和都柏林念珠菌。方法 :待测白念珠菌和都柏林念珠菌经分子生物学、表型和温度试验明确鉴定 ,接种于Ｓｔａｉｂ琼脂 3 0℃培养。自培养皿上形成菌落开始 ,观察菌落形态和显微镜下形态。Ｓｔａｉｂ琼脂的成分为鸟子粉 (Ｇｕｉｚｏｔｉａａｂｙｓｓｉｎｉｃａｓｅｅｄ) 5 0ｇ、葡萄糖 1ｇ、ＫＨ2 Ｐ…     

都柏林念珠菌与白念珠菌鉴别研究进展

综述都柏林念珠菌与白念珠菌的鉴别方法。表型比较的方法相对简便易行,可以从芽管、菌落形态及厚壁孢子、产色、荧光、温度、酶活性、碳源同化、红外光谱等多个方面进行鉴别;分子生物学方法可靠性强,包括DNA指纹图、聚合酶链反应、限制性片段长度多态、随机扩增多态DNA、核糖体DNA测序等。     

都柏林念珠菌的国内首次分离

都柏林念珠菌是最近从白念珠菌菌种中分离出来的一种具厚壁孢子和芽管试验阳性的独立菌种。４５℃孵育是一种简便、可靠的区分都柏林念珠菌和白念珠菌的方法。我们采用这一方法分析了都柏林念珠菌的临床分离率。结果口腔念珠菌病和健康人口中都柏林念菌的分离率分别为８．８２％和４．７６％,阴道念珠菌病和健康人阴道中都柏林念珠菌的分离率分别为１０．３４％和０。这提示都柏林念珠菌在临床有较高分离率。     

微孔板双探针杂交法快速鉴别都柏林念珠菌和白念珠菌

目的 建立微孔板双探针杂交法,快速鉴别都柏林念珠菌和白念珠菌,并应用于临床分离株的快速鉴定。方法 利用真菌保守区核糖体基因和可变区内转录间隔区基因为靶序列,应用生物素标记的通用引物进行念珠菌DNA的PCR扩增,并将该PCR产物分别与固定在微孔板上的都柏林念珠菌和白念珠菌特异性探针杂交,经酶联显色反应测其A值。结果 能特异地鉴别白念珠菌和都柏林念珠菌标准菌株。对108株常规培养方法从临床标本分离的白念珠菌检测,结果显示106株菌株仅白念珠菌探针检测阳性,另2株菌株仅都柏林念珠菌探针阳性。结论 微孔板双探针杂交法能快速、特异地鉴别都柏林念珠菌和白念珠菌。     

DNA芯片鉴定念珠菌种和氟康唑耐药基因ERG11突变

目的 建立DNA芯片技术鉴定念珠菌种和氟康唑耐药基因ERG11突变。方法 根据6种常见念珠菌内转录间隔（ITS2）区种特异性序列和白念珠菌ERG11基因中已证实可导致对氟康唑耐药的6种突变序列设计探针,制备DNA芯片,鉴定12条50 bp的念珠菌种特异性序列和ERG11突变序列及34株念珠菌（其中白念珠菌29株,热带念珠菌、光滑念珠菌、都柏林念珠菌、近平滑念珠菌和克柔念珠菌各1株）。结果 ①芯片正确鉴定12条人工合成序列;②正确鉴定34株试验菌株的菌种;③正确鉴定29株白念珠菌ERG11基因中可致耐药的已知突变。敏感性和特异性均为100%。结论 用DNA芯片进行念珠菌菌种鉴定和白念珠菌ERG11突变筛查,结果可靠。     

都柏林念珠菌和白念珠菌的致病性比较研究进展

都柏林念珠菌是一种新近分离鉴定的条件致病念珠菌,以往曾被误认为是白念珠菌,但实际上是一个独立的菌种,由于该菌常引起免疫缺陷者的感染,所以近年来颇受关注。本文就近年对该菌在致病性方面的研究及与白念珠菌致病性的比较进行了综述。     

念珠菌显色培养基鉴定阴道念珠菌的应用评价

目的：评价念珠菌显色培养基在外阴阴道念珠菌病诊断及菌种鉴定中的应用价值。方法：用念珠菌显色培养基对外阴阴道念珠菌进行培养，根据菌落形态，进行了菌种鉴定。结果：白念珠菌仍然是最常见的病原菌。念珠菌显色培养基对白念珠菌、克柔念珠菌的检出有很好的敏感性和特异性，对少数非白念珠菌的检出率有待商榷人：念珠菌显色培养基在阴道分泌物病原快速诊断、菌种鉴定中有较好的应用价值。     

念珠菌鉴定的研究进展

近十多年来，由于各学科的迅猛发展及相互渗透，促使念珠菌的分类鉴定取得了长足的进步，主要包括①利用气－液相色谱法等方法对其化学成分或其代谢产物进行化学分类法，②根据其基因的结构和组成进行的基因分类法，③免疫学分类法，尤其是基因探针，限制性内切酶片段长度多态性研究和多聚酶链式反应等分子遗传学方法的应用，使得念珠菌分类鉴定手段达到了分子水平，开辟了一个广阔的领域。这些方法虽然尚欠成熟，但无疑为我们展示…     

阴道都柏林念珠菌的分离和体外药敏试验

目的：了解都柏林念珠菌在阴道念珠菌病的临床分离率及对常用抗真菌药物的敏感性。方法：通过45℃生长试验，区分都柏林念珠菌和白念珠菌，用微量稀释法测定都柏林念珠菌对氟康唑等6种药物的MIC。结果：都柏林念珠菌在阴道念珠菌病的临床分离率为13．74％，25株都柏林念珠菌的MIC范围：氟康唑0．25～64μg/mL，伊曲康唑0．06～8μg/mL，5-氟胞嘧啶0．25～64μm/mL，酮康唑0．06～8μg/mL，咪康唑0．015～4μg/mL，特比萘芬0．06～8μg/mL。结论：都柏林念珠菌在阴道念珠菌病有较高的临床分离率，多数都柏林念珠菌对常用抗真菌药物敏感，部分都柏林念珠菌可产生剂量依赖敏感或耐药。     

念珠菌新种——都柏林念株菌

都柏林念珠菌是近年来主要从人类免疫缺陷病毒感染者和艾滋病患者口腔中分离出的一种新的念珠菌，因为其表型和基因型与白念珠菌等其它念珠菌存在着一种程度的差异而成为一个独立菌种。现就其生物学性状，而药性和流行状况等几方面加以概述。     

外阴阴道念珠菌病的致病菌群分析

目的 探讨青岛及周边地区外阴阴道念珠菌病致病菌的菌种特征。 方法 采用常规念珠菌培养方法鉴定菌种,包括沙氏培养基,血清芽管实验,CHROMagar念珠菌显色培养基及API 20C AUX酵母菌鉴定系统。结果 2011年5 ~ 11月共收集362例妇科门诊患者的阴道分泌物,病原学分析显示,念珠菌阳性例数为313例,总感染率为86.46%,菌种构成分布为白念珠菌275株,光滑念珠菌13株,近平滑念珠菌8株,热带念珠菌7株,克柔念珠菌5株,葡萄牙念珠菌1株,都柏林念珠菌1株,粘质红酵母菌1株,奥默毕赤酵母菌1株,粘性丝孢酵母菌1株。结论 白念珠菌仍是外阴阴道念珠菌病的常见致病菌,非白念以光滑念珠菌为主。     

聚合酶链反应结合尿嘧啶糖基化酶鉴定临床常见念珠菌

体外基于聚合酶链反应(PCR)技术用于念珠菌DNA特异性鉴定方法很多,但所用引物序列和种级水平鉴定临床常见念珠菌的方法不同,加之防污措施的不足或欠缺,致使其特异性、稳定性、重复性受到影响而未能应用于临床.本研究选取真菌界高度保守内转录间隔区ITS1-ITS4做外引物及据此外引物设计白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌内引物序列;据ITS1-ITS3设计光滑念珠菌内引物序列,采用套式PCR及酶学防污措施进行念珠菌种间鉴定^[1,2].旨在探索该套引物和酶学防污措施的临床实用价值,同时对5种临床常见念珠菌分离物进行PCR鉴定.     

一种快速鉴定光滑念珠菌与热带念珠菌的方法

目的：探讨一种快速检测光滑念珠菌与热带念珠菌的方法。方法：试验菌株经API 20、科玛嘉色原法、玉米吐温琼脂鉴定后,并以传统发酵法检测光滑念珠菌、白念珠菌、热带念珠菌发酵海藻糖情况。采用4％海藻糖液孵育各试验株3小时后用尿糖试纸检测。E－test法测试光滑念珠菌对氟康唑、伊曲康唑的敏感性。结果：光滑念珠菌与热带念珠菌皆可发酵海藻糖,尿糖试纸呈阳性反应,但后者菌落在科玛嘉色原培基为蓝色,在米粉吐温琼脂有假菌丝。结论：采用海藻糖法配合米粉吐温琼脂或科玛嘉色原培养基可以快速简便鉴定光滑念珠菌和热带念珠菌。     

常见病原念珠菌鉴定的数码分类方法

建立了一种用于常见病原性念珠菌菌种鉴定的多种碳源同化试验及结果分析的数码分类方法。结果，对１４种碳源固相同化试验结果的编码分析可形成５位数码，进而形成１８种数码可明确区分８种受试的病原念珠菌。结果表明，多种碳源同化试验及编码分析方法可以快速、明确地鉴定８种临床最常见的念珠菌，也为今后建立临床酵母菌快速鉴定系统打下了基础。     

念珠菌属显色培养基在念珠菌性阴道炎检测中的应用

对念珠菌属显色培养基在念珠菌性阴道炎检测中应用的评价。利用念珠菌属显色培养基根据不同种类念珠菌呈现不同颜色，直接判定结果，并与生化试验对７２ｈ内鉴定效率进行比较。该培养基对２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ鉴定效率为８８％，９３％，１００％，均高于生化试验（３９％，８１％，９３％）。故认为念珠菌属显色培养基在念珠菌性阴道炎检测中的应用优于传统检测法，对指导临床诊断和选择用药具有重要意义。     

用葡萄球菌A蛋白增强的念珠菌因子抗体鉴定人体念珠菌

用葡萄球菌A蛋白菌体试剂（SPA）结合“CANDIDA CHECK”试剂盒中因子抗体，并作100倍稀释，与218株人体念珠菌作凝集试验，血清法对非血清法的总符合率为87．2％。常见菌种白念珠菌和热带念珠菌的符合率为97．1％和98．7％，少见菌种的符合率较低。此外，仅检出白念珠菌血清B型1株，未发现类星形念珠菌。本文表明采用SPA协同凝集法可以很大地节约原因子抗体量，血清法与非血清法结合可显著提高鉴定率。     

PCR反向线点杂交鉴定常见念珠菌的研究

目的 建立PCR反向线点杂交技术（PCR-RLB）快速检测和鉴定常见念珠菌的方法。方法 以念珠菌属间隔序列Ⅱ（ITS2）为靶基因设计通用引物，用生物素标记反义引物，PCR扩增白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、光滑念球菌、近平滑念珠菌、都柏林念珠菌DNA，然后与通过氨基标记固定在尼龙膜上的各特异性寡核苷酸探针杂交，并进行临床标本和分离株的检测。结果 念珠菌标准菌株可扩增出302 ~ 441 bp DNA片段，6种特异性寡核苷酸探针可分别与相应念珠菌PCR产物杂交，其敏感性为10 cfu/mL。通过对100例分离株的检测，然后与培养法鉴定（Merieux Vitek）的结果比较，有97株与培养结果一致，另外3株通过DNA测序结果证实与PCR-RLB测定结果一致。通过对200例女性阴道拭子进行检测，PCR-RLB阳性率为49%，而涂片法和培养法阳性率分别为27%和39%，明显高于涂片法和培养法（P < 0.05）。结论 该方法可快速、敏感、准确鉴定临床上常见的念珠菌。     

念珠菌碱溶性β—葡萄糖水解生成葡萄糖含量的分类鉴定意义

目的：探讨8种医学上重要的念珠菌酵母相胞壁碱溶性β－葡聚糖解生成的D－葡萄糖占菌体干重含量百分率的分类鉴定意义。方法：采用双波长薄层扫描法，测定65株8种念珠菌及8种酿酒酵母的标准菌株上述含量值，并检测46株念珠菌临床分离株，且与标准株结果相比较。结果：实验结果经Tukey法统计处理，可将9种菌分为3个同质性亚群，亚群1：酿酒酵母、克柔、季也蒙、光滑、热带念珠菌（P＝0．065），亚群2：克柔、季也蒙、光滑、热带、近平滑、伪热带、星形念珠菌（P＝0．336），亚群3：白念珠菌（P＝1．000）。此外，酿酒酵母与8种念珠菌经t检验，均有显著性差异。临床分离株与标准标均无显著性差异。结论：该指标能在属水平区分念珠菌和酿酒酵母，可将8种念珠菌分为3个亚群，且重复性较好。因此似能作为一种念珠菌分类鉴定研究的化学分类法指标。