FSP1、肾成纤维细胞与肾脏间质纤维化

肾小管萎缩 ,肾间质淋巴细胞和单核细胞浸润和纤维化在慢性肾脏疾病中总是伴同出现 ,三者关系密切 ,互为因果 ,称为肾脏间质纤维化 (ｒｅｎａｌｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｆｉｂｒｏｓｉｓ,ＲＩＦ)或肾小管间质纤维化[1 ] (ｔｕｂｕｌｏｉｎｔｅｒｓｔｉｔａｌｆｉｂｒｏｓｉｓ ,ＴＩＦ)。肾脏间质纤维化是多种肾脏疾病走向终末期肾衰的共同途径[2 ,3 ] ,近年研究发现成纤维细胞特异蛋白 (ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎ ,ＦＳＰ1 )和肾成纤维细胞 (ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ)在ＲＩＦ的产生中具有重要作用 ,下面就此…     

肾间质成纤维细胞体外培养的影响因素初探

肾间质纤维化是临床上多种慢性进行性肾脏疾病进展至终末期引起肾功能衰竭的共同病理变化,成纤维细胞是参与肾间质纤维化病理过程的功能细胞,成纤维细胞过量的增殖和细胞外基质大量分泌是导致肾间质纤维化的两个重要环节.     

白血病抑制因子对肾间质成纤维细胞活化的影响

目的 研究白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)对肾间质成纤维细胞活化的干预作用.方法 体外培养正常大鼠肾脏成纤维细胞,分对照组、转化生长因子β1 (transforming growth factor-β1,TGF-β1)处理组及TGF-β1和LIF共处理组,电镜下观察细胞形态变化,通过RT-PCR及Western blot检测肌成纤维细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)表达的改变,双抗体夹心ABC-ELISA检测细胞上清Ⅰ型胶原.结果 TGF-β1引起成纤维细胞激活,产生形态学改变,α-SMA表达增高(P<0.01),Ⅰ型胶原产生增加(P<0.01).与TGF-β1处理组相比,LIF干预组形态学改变不明显,LIF能干预TGF-β1引起大鼠肾间质成纤维细胞α-SMA表达和Ⅰ型胶原产生.结论 LIF可以抑制TGF-β1引起的肾间质成纤维细胞激活.     

C型钠尿肽在小鼠肾纤维化作用中的研究进展

<正>C型钠尿肽(CNP)是在肾脏中合成的激素,由心脏成纤维细胞以及血管内皮细胞合成,是钠尿肽家族成员之一,可与跨膜鸟苷酸环化酶(GC-B)受体联合[1]。肾间质纤维化的发病机制对于防治肾间质纤维化(TIF)以及终末期肾病来说具有重要的临床意义。肾脏的预后取决于肾小管间质的病变及严重程度。现已证明,肾间质纤维化程度与肾功能减退程度密切相关[2]。1 钠尿肽家族自1981年和1988年相续发现心房利钠利尿肽、脑钠素之后,现已证明钠尿肽家     

人胚胎肾间质成纤维细胞培养及其鉴定

目的：探讨人胚胎肾脏成纤维细胞培养方法。方法：利用人胚胎肾脏肾髓质进行培养，然后通过细胞形态学，超微结构，免疫细胞化学等方法进行分析鉴定。结果：培养的细胞为长梭形，单核，超微结构为典型的成纤维细胞，并表达成纤维细胞表面抗原，波形蛋白，结蛋白，不表达角蛋白。结论：成功地培养出人胚胎肾间质成纤维细胞。     

肾小管间质纤维化进程中肌成纤维细胞的来源

肾小管间质纤维化(renal tubulointerstitial fibrosis,RIF)是各种原因所致的肾小管间质病变的最终结果,也是多种慢性肾脏病发展到终末期肾衰竭的最后共同通路[1].RIF以肾小管萎缩或扩张,肾间质白细胞浸润,肌成纤维细胞积聚以及细胞外基质(extra-cellur martrix,ECM)在肾间质过度沉积为特征[2].而以α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)为主要形态学特征的肌成纤维细胞(myofi-broblast)在肾小管间质纤维化的发生和发展起着至关重要的作用,它是肾间质中过度积聚的ECM的主要来源,但其来源却是一个有争议的问题[3-6].本文将对肌成纤维细胞在肾小管间质纤维化中的来源、产生机制、及病理学意义相关方面的研究做一综述.     

MiR-29c在大鼠肾间质成纤维细胞中的抗纤维化作用

目的:在细胞水平探索miR-29c在肾脏纤维化中的作用.方法:检测TGF-β,对大鼠肾间质成纤维细胞的促纤维化作用及该过程中miR-29c表达的变化.miRanda和高通量测序找出miR-29c的靶基因.通过转染miR-29c mimics(高表达),检测其对胶原Ⅰ(Col Ⅰ)表达的影响.结果:TGF-β1能刺激大鼠肾间质成纤维细胞转分化;大鼠肾间质成纤维细胞转分化后miR-29c表达下调;上调miR-29c能抑制TGF-β1的促转分化作用.结论:miR-29c mimics通过有效抑制TGF-β1刺激NRK-49F细胞株Col Ⅰ表达起到抗纤维化作用,人工合成的miR-29c mimics转染NRK-49F细胞株有效提高miR-29c表达量从而抑制Col Ⅰ表达,为治疗肾间质纤维化提供了一个新的靶点.     

PDGF及PDGFR在大鼠肾间质纤维化过程中的作用

目的探讨PDGF及其受体PDGFR在单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化中的作用。方法24只SD大鼠,采用单侧输尿管梗阻模型,分别于造模后第3、7、14及21天各处死6只大鼠,取双侧肾脏(未手术侧为对照组)分别做光镜和电镜检查,观察其病理改变。并以免疫组织化学法检测肾组织中PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-α、PDGFR-β以及α-SMA(活化肌成纤维细胞的标志)和Ⅲ型胶原的表达。结果与对照组相比PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-α、PDGFR-β在不同时间点的梗阻肾脏中表达均增强,主要定位于扩张或萎缩的皮质肾小管上皮细胞,肾间质有少量表达。随着梗阻时间的延长,肾间质表达α-SMA的细胞和Ⅲ型胶原逐渐增多,两者呈正相关关系,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。肾间质α-SMA、Ⅲ型胶原的表达与肾小管PDGF-B和PDGFR-β的表达呈正相关,而与PDGF-A和PDGFR-α的表达无明显相关性。结论大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型中受损的肾小管过度表达PDGF-B、PDGFR-β,可促进肌成纤维细胞的形成和Ⅲ型胶原的沉积,在肾间质纤维化过程中可能起重要作用。     

HGF对高糖诱导肾间质成纤维细胞增殖的影响

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)对高糖诱导肾间质成纤维细胞损伤的修复作用.方法将人肾脏间质成纤维细胞培养于不同浓度的葡萄糖中,其中25 mmol/L葡萄糖组培养液中加入不同浓度的rhHGF,分别于不同时间段收集细胞,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期.结果高糖作用早期细胞增殖旺盛,随着高糖的持续刺激,细胞增殖发生停滞,同时细胞出现肥大.外源性加入HGF后,对高糖造成的细胞损伤具有修复作用.结论高糖作用下的肾间质成纤维细胞早期出现自限性增殖后细胞增殖停滞,出现肥大.HGF可以通过促进细胞增殖,抑制由于高糖诱导的细胞肥大.     

β-转化生长因子在肾纤维化中的作用机制及中药干预

肾脏纤维化是肾脏对慢性损伤的病理修复过程，包括肾间质纤维化与肾小球硬化。主要病理特征为成纤维细胞增生和细胞外基质的过度沉积。肾脏纤维化的发生和发展涉及多种病因和细胞因子。     

Wnt信号通路与肾脏纤维化

肾小管间质纤维化是各种不同病因的慢性肾脏疾病进行性发展的共同通路,是导致终末期肾病的主要病理基础.近年研究显示,肾小管上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是肾小管间质纤维化的重要机制之一[1],肾小管上皮细胞可通过EMT转分化为肌成纤维细胞(myofibroblast,MF),进入间质,合成细胞外基质(extracellularmatrix,ECM),直接导致肾间质纤维化的进行性发展.     

TGF-β1对人肾成纤维细胞热休克蛋白47表达的影响

目的 探讨TGF-β1在肾组织纤维化中的作用机制.方法 采用原代培养的人肾成纤维细胞,将细胞分为0、0.1、1、5ng/ml和10ng/ml不同浓度TGF-β1刺激培养组.应用免疫细胞化学方法检测TGF-β1作用下人肾成纤维细胞热休克蛋白47(heat shock protein 47,HSP47)表达,RT-PCR方法检测TGF-β1作用下人肾成纤维细胞HSP47和I型胶原mRNA表达.结果 (1)对照组(0ng/ml TGF-β1组)人肾成纤维细胞几乎无HSP47表达,在 TGF-β1刺激下,培养的人肾成纤维细胞HSP47表达增强.(2)在0.1～5ng/ml范围内,TGF-β1以剂量依赖方式促进培养的人肾间质成纤维细胞表达HSP47和I型胶原mRNA.结论 TGF-β1促进肾组织纤维化形成,可能部分是通过其促进肾间质成纤维细胞表达HSP47,进而增加胶原合成所致.     

IGF-1与实验性慢性肾衰竭大鼠肾间质纤维化的关系

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)与慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾间质纤维化的关系。方法雄性Wister大鼠24只,随机平均分为3组。采用5/6肾切除制作大鼠CRF模型,sham组(假手术组)仅分离肾动脉及其分支,不予结扎。肾切除大鼠分为2组,Nx组(对照组)每日腹腔注射生理盐水,IGF组(rhIGF-1干预)腹腔注射rhIGF-1750ng/(kg·d)。12周后,观察各组肾功能、蛋白尿、肾脏质量、心脏质量、肾脏病理变化及肾脏IGF-1、α-SMA、vimentin表达变化。结果①Nx组和IGF组肾切除大鼠Scr、BUN、24h尿蛋白定量及肾脏和心脏质量均明显高于sham组(P<0.05),且IGF组较Nx组均增加(P<0.05)。②残肾组织表现为肾小球肥大,球性或节段性硬化和/或玻璃样变,肾小管扩张,管型形成,肾小管萎缩,间质纤维化,间质淋巴细胞浸润。IGF组肾小球硬化指数(GSI)及肾小管间质损伤指数(TII)均较Nx组增加(P<0.05)。③Nx组IGF-1在肾间质的表达明显增加,外源性IGF-1可致肾间质IGF-1表达增加。④sham组仅血管平滑肌细胞可见α-SMA表达,Nx组肾间质α-SMA表达增加,瘢痕部位更为明显,IGF组较Nx组α-SMA表达增加(P<0.05);sham组肾间质未见vi-mentin表达,Nx组大鼠vimentin表达增加,外源性IGF-1可致肾间质vimentin表达进一步增加。结论IGF-1可能参与了残肾的间质细胞转分化为肌成纤维细胞,导致间质纤维化和肾功能损害。     

骨形态发生蛋白-7诱导人肾成纤维细胞间质-上皮转化的研究

目的 探讨骨形态发生蛋白-7(bone morphogenic protein-7,BMP-7)能否诱导人肾成纤维细胞出现间质-上皮的转化.方法 原代培养获得人肾间质成纤维细胞,传至第3代用于本实验.培养液中添加1 000 ng/L BMP-7 72 h后,观察细胞形态变化,MTT法检测细胞增殖,ELISA法测定上清Ⅰ胶原含量,Western blot分析E-cadherin和Pax2蛋白表达.结果 细胞与BMP-7孵育72 h后,出现细胞聚集类似小管细胞团块.与对照组相比,成纤维细胞增殖活性减低,Ⅰ型胶原分泌下降,上皮标志物E-cadherin和肾发生的标志分子Pax2表达增加.结论 肾成纤维细胞至少保持部分它胚胎时的印迹和可塑性,BMP-7可诱导人肾成纤维细胞呈现间质-上皮的转化.     

补肾活血法组方中药防治肾间质纤维化的实验研究

目的　探讨依据补肾活血法组方中药对进展性肾间质纤维化的防治作用。方法　制备大鼠肾间质纤维化模型 ,将大鼠随机分为假手术组 ,高、低剂量治疗组和模型组。观察肾间质病变的程度及角蛋白 (CK)、波形蛋白(Vim )和α-平滑肌肌动蛋白 (α- SMA)在肾间质的表达情况。结果　治疗组肾间质损伤程度明显轻于模型组 (P<0 .0 1) ;Vim、α- SMA阳性细胞表达明显少于模型组 ,CK表达明显多于模型组 (P<0 .0 1)。结论　补肾活血法组方中药使肌成纤维细胞的表达减少 ,上皮细胞的表达增强 ,说明其抑制并逆转了肾小管上皮细胞肌成纤维细胞转分化 ,阻止了肾间质纤维化的进程。     

三氧化二砷对肾细胞作用的实验研究

对于肾脏疾病进展、肾间质纤维化病程 ,临床治疗手段还很有限。调控肾组织细胞的增殖与凋亡 ,可能是延缓病变发展的途径之一。目前 ,血液病领域研究已证实三氧化二砷是通过抑制增殖、诱导分化和促进凋亡达到治疗白血病的作用[1] 。本研究选择三氧化二砷作为实验药物 ,旨在通过体外实验观察了解三氧化二砷对来源于肾脏的多种细胞生长的影响 ,探讨砷剂是否有可能影响肾组织纤维化进程而介入临床肾脏病领域。材料与方法一、实验材料原代人肾间质成纤维细胞、系膜细胞株 (ＳＴＬ)、近端小管上皮细胞株 (ＯＫ ) ,三氧化二砷 (5ｍｍｏｌ/Ｌ ) ,Ｈ…     

内皮间质转化在肾脏纤维化中的作用

肾脏纤维化(renal fibrosis,RF)主要表现为肾小管萎缩、肾小球硬化等特征,是所有慢性肾脏病发展为终末期肾脏疾病的共同途径.因此,了解导致RF的基本机制对于开发更好的慢性肾脏病治疗方案至关重要.到目前为止,国内外对RF的发生机制多集中于肾间质成纤维细胞的活化、肾小管上皮细胞的损伤、细胞外基质(extrace...     

HGF对高糖诱导肾间质成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)对高糖诱导肾间质成纤维细胞损伤的修复作用。方法 将人肾脏间质成纤维细胞培养于不同浓度的葡萄糖中，其中25mmol／L葡萄糖组培养液中加入不同浓度的rhHGF，分别于不同时间段收集细胞，采用MTT法检测细胞增殖．流式细胞仪检测细胞周期结果高糖作用早期细胞增殖旺盛，随着高糖的持续刺激，细胞增殖发生停滞，同时细胞出现肥大外源性加入HGF后，对高糖造成的细胞损伤具有修复作用。结论 高糖作用下的肾间质成纤维细咆早期出现自限性增殖后细胞增殖停滞，出现肥大HGF可以通过促进细胞增殖，抑制由于高糖诱导的细胞肥大。     

地塞米松对肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的"探讨糖皮质激素在肾脏病治疗中可能的作用机理. 方法"采用MTT比色法和L-3H-脯氨酸掺入法,观察地塞米松对体外培养的肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响. 结果"一定浓度范围内的地塞米松抑制成纤维细胞的胶原合成,但未见其对细胞增殖有影响. 结论"糖皮质激素可作用于肾间质成纤维细胞,抑制胶原的合成,从而可延缓肾间质纤维化的进程.     

成纤维细胞激活蛋白在肾间质纤维化大鼠肾脏组织中的表达及意义

目的:探讨成纤维细胞激活蛋白(FAP)在肾间质纤维化(RIF)大鼠肾脏组织中的表达及意义.方法:将20只雄性SD大鼠随机分为假手术组和模型组,每组10只.模型组结扎左侧输尿管,假手术组仅开腹不结扎.2周后处死大鼠,取左肾组织进行病理学检查并计算RIF指数,分别采用实时荧光定量PCR法(qPCR)和Western blo...