乌贼墨抗肿瘤活性的实验研究

用乌贼墨致敏小鼠后采集血清。体外试验证明，乌贼墨致敏血清对Ｌ＿（９２９）细胞有杀伤作用。致敏血清粗提液，经局部和静脉注射荷ＭｅｔｈＡ瘤鼠体内，２４ｈ后见肿瘤组织有出血、坏死，细胞核溶解等现象。乌贼墨的抗肿瘤活性可能是乌贼墨诱生了肿瘤坏死因子。     

乌贼墨诱生小鼠细胞毒因子活性的检测

用乌贼墨处理小鼠后，采集血清。经体外细胞毒实验证明：乌贼墨诱生的血清对人和鼠的肿瘤细胞株均有不同程度的杀伤作用。这一结果提示：乌贼墨可能具有诱生内源性细胞毒因子产生的活性。     

芦荟提取物C诱生小鼠细胞毒因子的研究

目的：研究芦荟提取物C（Aloe Extract C,AE-C)在BALB／C鼠体内诱生细胞毒因子的作用。方法：连续5d给小鼠注射AE－C，第6d取血分离血清，应用结晶紫染色法测其细胞毒因子活性；观察经AE－C诱生的鼠血甭对多种瘤细胞的杀伤作用；杀伤作用的持续时间和对温度的敏感性及血清不同稀释度的杀伤效果。结果：AE－C能诱导小鼠产生杀伤活性较强的细胞毒因子，与对照组比较有明显的差异（P＜0.01)；并且对多种靶细胞有杀伤作用；诱生后24h达高峰，第4d下降明显，5d接近正常水平；血清标本稀释至200倍时，仍具有较强的杀伤活性；诱生后的细胞毒因子有一定的温度敏感生。结论：A－C有诱生BALB／C鼠产生细胞毒因子的作用。     

缝裂层孔菌对小鼠的抑瘤及免疫调节作用

目的：研究缝裂层孔菌（PL）的抗肿瘤作用，初步探讨其抑瘤作用的机理。方法：建立小鼠实体瘤动物模型，连续10 d灌胃给予PL，处死后同时检测治疗组及对照组皮下瘤重、胸腺重、脾重；采用MTT法检测荷瘤小鼠脾T淋巴细胞及B淋巴细胞对ConA及LPS刺激的转化能力；采用绵羊红细胞作为抗原，检测荷瘤鼠抗体生成细胞功能；采用L₉₂₉为靶细胞 ，检测NK细胞杀伤L₉₂₉细胞功能；荷瘤鼠腹腔注射诱导剂诱生巨噬细胞，体外检测巨噬细胞 吞噬中性红功能。结果：PL 2.0、1.0 g•kg^-1可抑制小鼠肝癌、胃癌和S₁₈₀细胞的生长，其对肝癌的抑制率分别为38.19%和37.15%，对胃癌的抑制率分别为32.46%和30.91%，对小鼠S₁₈₀肉瘤的抑制率分别为36.09%和34.16%，与对照组比较差异有显著性（P<0.05）；PL 2.0 g•kg^-1可明显提高小鼠T、B淋巴细胞对ConA及LPS的反应性，提高淋巴细胞转化功能（P<0.05）；抗体生成细胞实验结果显示，PL 2.0及1.0 g•kg^-1剂量组A值高于对照组，说 明其溶血红细胞释放血红蛋白量多于对照组，其抗体生成细胞溶解绵羊红细胞能力强于对照组（P<0.05， P<0.001）；PL 2.0 g•kg^-1也可提高小鼠NK细胞杀伤L₉₂₉细胞功能， 杀伤率为67.82%，明显强于对照组（P<0.01）；PL 2.0及1.0 g•kg^-1还可明显增强小鼠腹腔 巨噬细胞的吞噬功能，与对照组比较差异有显著性（P<0.05，P<0.01）。结论：PL能增强免疫细胞功能 ，提高机体免疫力，其抗瘤作用与激活体内免疫系统有关。     

IFN-γ基因修饰对G422胶质母细胞瘤细胞致瘤性及荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：观察鼠干扰素－γ（mIFN－γ)基因修饰的小鼠G422胶质母细胞瘤细胞的致瘤性及免疫功能变化。方法：通过重组腺病毒以mIFN－γ基因转染G422胶质母细胞瘤细胞,观察肿瘤的生长和荷瘤小鼠的存活期,采用4h^51Cr释放法检测荷瘤小鼠脾细胞诱导的NK、LAK、CTL的杀伤活性,对治疗后的肿瘤进行常规病理分析。结果：mIFN－γ基因修饰的G422小鼠胶质母细胞瘤体内致瘤生长明显抑制（P＜0．01）,对荷瘤小鼠生存时间长于对照组（P＜0．01）。mIFN－γ组小鼠脾细胞的LAK、CTL杀伤活性显增强,肿瘤组织有灶性坏死,炎细胞浸润。结论：mIFN－γ基因对胶质细胞瘤有一定治疗作用,其机制可能是增强了宿主的局部和全身抗肿瘤免疫反应。     

香菇多糖抗肿瘤作用及其机制的研究

目的：运用中医“药食同源”的原理，研究香菇多糖对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及其机制。方法：制备S180荷瘤小鼠动物模型，随机分为荷瘤对照组，低、中、高剂量组；通过测定荷瘤小鼠的瘤重、抑瘤率及瘤体比观察香菇多糖对肿瘤生长的影响；通过检测脾细胞的增殖分化、NK细胞的活性以及腹腔巨噬细胞的吞噬功能，研究香菇多糖对荷瘤小鼠非特异性免疫和细胞免疫功能的影响。结果：香菇多糖能明显减小S180荷瘤小鼠的瘤重和瘤体比（P〈0．05），明显抑制肿瘤的生长（P〈0．05），低、中、高剂量组的平均抑瘤率分别为37％、46％、490%；明显增强S180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能（P〈0．05）；明显提高S180荷瘤小鼠脾细胞的转化功能和NK细胞的活性（P〈0．05）。结论：香菇多糖能明显抑制S180荷瘤小鼠肿瘤的生长，其作用机制可能是通过增强荷瘤小鼠的非特异性免疫功能和细胞免疫功能。     

成纤维细胞介导的IL-4基因疗法对小鼠浆细胞瘤的治疗效果

为观察白细胞介素4（IL－4）基因疗法对晚期浆细胞瘤的治疗作用，用成纤维细胞介导的IL－4基因疗法治疗小鼠J558L浆细胞瘤，并对其免疫学机理进行了初步探讨。对经治疗小鼠存活期的观察表明，该疗法对早期荷瘤小鼠（荷瘤3d以内）无明显治疗效果；而对晚期荷瘤小鼠（荷瘤10d以上）则具有较明显的治疗效果；与常规瘤苗联合应用时其疗效更加明显。对经治疗的荷瘤小鼠体内抗肿瘤免疫功能的检测表明，晚期荷瘤小鼠经IL－4基因治疗后第12天，脾细胞NK活性及经诱导后的LAK活性变化不明显，而经诱导的CTL杀伤活性明显提高；当与常规瘤苗联合…     

牡蛎多糖的制备和生物学活性研究

目的：改进制备工艺，分离、纯化东海近江牡蛎（Ostrea rivularis Gould）得到牡蛎多糖（Oyster polysaccharides，OPs），并探索其生物学活性。方法：采用热碱法提取，以三个剂量组（2．5、5、10mg／ml）进行正常小鼠脾淋巴细胞转化实验，迟发型超敏反应（DTH）、自然杀伤细胞（NK）活性测定，抗体形成细胞活性溶血空斑形成细胞实验（PFC）、碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、荷瘤小鼠脾淋巴细胞活性测定（MTT法）、红细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性测定。结果：制备得到牡蛎多糖粗品；免疫学实验表明OPs2．5mg／ml组能有效增加正常小鼠的脾淋巴细胞转化率、对小鼠DHT、NK细胞活性、PFC、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、荷瘤小鼠脾细胞活性起正向调节。三种浓度实验组均增强小鼠红细胞SOD活性。结论：牡蛎多糖能增强小鼠细胞免疫、体液免疫功能，并有一定的抗肿瘤和抗氧化作用。     

KRN7000对荷NS－1骨髓瘤小鼠抗瘤作用机制的研究

目的 探讨KRN7000抗肿瘤作用的机理。方法 以负荷NS－1骨髓瘤细胞的小鼠为对象，观察KRN7000对小鼠脾细胞NK活性及对荷瘤鼠生存期的影响。结果 鼠脾细胞经KRN7000体内、外作用后，对Yac-1(NK敏感细胞）和NS－1细胞的杀伤活性均明显增强。KRN7000可以延长小鼠的生存期，单独或联合环磷酰胺（CY）用药分别可使20％（与对照组比较P＜0．05）和80％（与对照组比较P＜0．01）的小鼠获得长期存活。病理检查发现10μg/kg剂量的KRN700对小鼠的心、肝、肾等重要器官无明显的毒性作用。结论 KRN7000可能是一种非常有发展前途的免疫调节剂。     

荷瘤小鼠脾细胞NK活性及rhIL-2和rhIFN-α2a对其活性的影响

观察文氏腹水瘤荷病不同时期小鼠阵细胞NK活性的变化，并在体外检测重组人白细胞介素-2（rhIL－2）、重组人干扰素-a2a（rhIFN－a2a）对荷瘤八天小鼠脾细胞NK活性的影响。结果显示，荷病小鼠牌细胞NK活性在荷瘤第四天已明显降低（与对照组相比P＜0．001），第八天、第十二天NK活性继续降低，但荷瘤第八天和第十二天相比，血活性无显著性差异（P＞0．05）；rhIL－2和rhIFN－a2a对荷瘤八天小鼠NK活性均有明显的增强作用；但rhIL－2对荷瘤小鼠脾细胞NK活性的增强作用明显高于rhIFN－a2a（P＜0．001）。说明荷瘤小鼠脾细胞NK活性受到明显抑制，NK活性降低可用rhIL－2或rhIFN－a2a改善，但rhIL-2明显优于rhIFN－a2a。     

Antioxidant Effect of Sepia Ink Extract on Extrahepatic Cholestasis Induced by Bile Duct Ligation in Rats

Objective The aim of our study was to assess the complications of hepatic fibrosis associated with bile duct ligation and the potential curative role of sepia ink extract in hepatic damage induced by bile duct ligation.
Methods Rattus norvegicus rats were divided into 3 groups: Sham-operated group, model rats that underwent common bile duct ligation (BDL), and BDL rats treated orally with sepia ink extract (200 mg/kg body weight) for 7, 14, and 28 d after BDL.
Results There was a significant reduction in hepatic enzymes, ALP, GGT, bilirubin levels, and oxidative stress in the BDL group after treatment with sepia ink extract. Collagen deposition reduced after sepia ink extract treatment as compared to BDL groups, suggesting that the liver was repaired. Histopathological examination of liver treated with sepia ink extract showed moderate degeneration in the hepatic architecture and mild degeneration in hepatocytes as compared to BDL groups.
Conclusion Sepia ink extract provides a curative effect and an antioxidant capacity on BDL rats and could ameliorate the complications of liver cholestasis.     

Ge—132对荷瘤小鼠NK细胞活性及红细胞免疫功能的影响

为了探讨Ｇｅ－１３２抗癌作用机制，本文进行了Ｇｅ－１３２对荷瘤小鼠脾脏ＮＫ细胞活性和红细胞免疫粘附功能影响的体内实验研究。实验采用Ｃ５７ＢＬ／６荷瘤小鼠，腹腔注射Ｇｅ－１３２（剂量分别为１００ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ），每日１次，连续１４天后，取小鼠脾细胞和血液进行ＮＫ细胞活性及红细胞免疫粘附功能测定，并摘除瘤块称重，计算抑瘤率。结果表明，Ｇｅ－１３２对小鼠抑植瘤（Ｓ１８０）的生长具有显著的抑制效应，抑瘤率达５５％；荷瘤小鼠脾细胞ＮＫ活性明显低于正常对照组，Ｇｅ－１３２能使其得以恢复；荷瘤小鼠ＲＢＣ－Ｃ３ｂ受体花环率和肿瘤ＲＢＣ花环率明显低于正常对照组（Ｐ＜００１），ＲＢＣ－ＩＣ花环率则高于正常对照组（Ｐ＜００１），注射Ｇｅ－１３２可显著提高ＲＢＣ－Ｃ３ｂ受体花环率和肿瘤ＲＢＣ花环率，降低ＲＢＣ－ＩＣ花环率。表明Ｇｅ－１３２能增强荷瘤小鼠ＮＫ细胞杀伤活性和红细胞免疫粘附功能。     

绞股蓝总皂苷抑制小鼠Lewis肺癌生长与提高免疫力研究

目的 :研究绞股蓝总皂苷 ( gypenosides ,GPs)对小鼠Lewis肺癌肿瘤生长、脾淋巴细胞数及NK细胞活性的影响。方法 :采用整体动物的抑瘤试验、脾淋巴细胞计数及NK细胞活性测定。结果 :GPs对小鼠Lewis肺癌细胞具有明显的抑制作用 ,在剂量 10、2 0、4 0mg/kg腹腔注射 (ip)给药条件下 ,其瘤重抑制率 (TWI)分别为 ( 2 9.8± 1.3) %、 ( 51.4± 2 .2 ) %和 ( 50 .0± 1.6) %。同时 ,GPsip给药后荷瘤小鼠脾淋巴细胞总数明显增加 ,外周血NK细胞活性明显升高 ,脾NK细胞活性也明显升高。结论 :GPs的抗肿瘤作用与其对荷瘤小鼠免疫功能的增强作用密切相关。     

NK4基因转染对裸鼠人卵巢癌种植瘤生长的影响

目的 NK4不仅具有肝细胞生长因子(HGF)拮抗剂的作用,而且具有抗血管生成作用。该实验通过在人卵巢癌细胞SKOV-3中转染NK4cDNA片段,研究NK4在裸鼠体内对人卵巢癌的治疗作用。方法 NK4和荧光霉素(luciferase)表达质粒分别转染人卵巢癌细胞SKOV-3,稳定转染后,得到SKOV-3/NK4细胞和对照(SKOV-3/LUC)细胞。检测NK4在细胞培养基中的表达情况以及经不同培养基(SKOV-3、SKOV-3/LUC和SKOV-3/NK4培养基上清)培养后SKOV-3细胞中c-Met和磷酸化-c-Met的表达,检测三组肿瘤细胞(SKOV-3、SKOV-3/LUC和SKOV-3/NK4)体外生长速度,建立裸鼠皮下肿瘤生长模型,比较三组肿瘤细胞在裸鼠体内的生长速度。结果在SKOV-3/NK4培养基中有NK4蛋白表达,对照(SKOV-3和SKOV-3/LUC)细胞中无表达。磷酸化-c-Met在SKOV-3/NK4培养基培养的SKOV-3细胞中被抑制,而在对照(SKOV-3和SKOV-3/LUC)细胞培养基培养的SKOV-3细胞中正常表达。c-Met表达在各组无差别。三种细胞体外生长曲线差异无显著性(P>0.05)。一周后SKOV-3/NK4细胞接种的肿瘤生长缓慢,SKOV-3和SKOV-3/LUC细胞接种的肿瘤生长迅速,与SKOV-3/NK4组相比有统计学意义(P<0.05)。结论 NK4蛋白在SKOV-3/NK4细胞培养基中大量分泌,NK4能抑制人卵巢癌细胞c-Met受体磷酸化。在裸鼠体内NK4能抑制卵巢癌细胞生长,NK4可作为卵巢癌基因治疗的新方法。     

Anti-tumor effect of pEgr-interferon-γ-endostatin gene-radiotherapy in mice bearing Lewis lung carcinoma and its mechanism

Background Gene-radiotherapy, the combination of gene therapy and radiation therapy, is a new paradigm for cancer treatment. To enhance anti-tumor effect of gene-radiotherapy, in this study we construct a radiationinducible dual-gene co-expression vector pEgr-interferon(IFN)-γ/- endostatin and studied the anti-tumor effect of pEgr-IFN-γ/-endostatin gene-radiotherapy in mice bearing Lewis lung carcinoma and its mechanism.Methods Gene recombinant technique was used to construct dual-gene co-expression plasmid pEgr-IFN-γ endostatin, and single-gene expression plasmid pEgr-IFN-γ and pEgr-endostatin. The plasmids packed by liposome were injected locally into the tumors of the mice, and the tumors were irradiated with 5 Gy X-ray 36 hours later. The tumor growth rate at different time and mean survival period of the mice were observed.Cytotoxic activity of splenic cytotoxic T-lymphocyte ( CTL), natural killer (NK) cell and tumor necrosis factor (TNF)-α secretion activity of peritoneal macrophages of the mice in various groups were evaluated 15 days after irradiation. The intratumor micro-vessel density was evaluated by immunohistochemical staining 10 days after irradiation.Results The tumorgrowthrate of the mice in dual-gene-radiotherapy group was significantly lower than those in control group, 5 Gy group and single-gene-radiotherapy group at different time after gene-radiotherapy, and the mean survival period of which was longer. Cytotoxic activity of splenic CTL, NK and TNF-α secretion activity of peritoneal macrophages of the mice in dual-gene-radiotherapy group were significantly higher than those in control group, 5 Gy X-ray irradiation group and pEgr-endostatin gene-radiotherapy group 15 days after irradiation. The intratumor micro-vessel density of the mice in dual-gene-radiotherapy group was significantly lower than those in control group, 5 Gy X-ray irradiation group and pEgr-IFN-γ/gene-radiotherapy group.Conclusion The anti-tumor effect of dual-gene-radiotherapy was significantly better than that of single-gene-radiotherapy by combining the enhancement of anti-tumor immunologic function induced by IFN-γ/with the antiangiogenesis function of endostatin.     

阳离子脂质体包裹的IL-12基因对小鼠黑色素瘤的治疗作用

目的:观察体内注射阳离子脂质体包裹的小鼠白细胞介素12(mIL-12)基因对小鼠黑色素细胞瘤的治疗作用.方法:C57BL/6小鼠在接种B16黑色素细胞后3、5、7、9 d分别给予lipofectin包裹的pCmIL-12质粒治疗,观察小鼠的肿瘤生长速度、生存期以及NK细胞活性的变化.结果:阳离子脂质体明显增强pCmIL-12质粒在体内的抗肿瘤生长活性,并延长荷瘤小鼠的存活期.此外,pCmIL-12/阳离子脂质体还能显著增强荷瘤小鼠的NK细胞活性.结论:阳离子脂质体介导的IL-12基因对小鼠黑色素瘤有明显的治疗效果.     

蜂毒素对胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其部分机制

目的 研究蜂毒素对人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤的抑制作用,并初步探讨其作用机制.方法 建立人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤模型,采用抑瘤率指标评价蜂毒素对荷瘤小鼠的抑瘤作用,采用脏器指数、中性红法测定腹腔巨噬细胞吞噬功能,改良的四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测自然杀伤(NK)细胞活性,ELISA法测定血清...     

康宝饮对小鼠的抑瘤作用

目的：为了研究康宝饮（一种微生态制剂）的抑瘤作用。方法：利用胃内灌注法,观察了植瘤小鼠的瘤体生长情况及其抗肿瘤免疫指标的改变。结果：康宝饮具有明显抑瘤作用,胃内灌注１５d后,抑瘤率达２９．１％,显著增强ＩＬ－２的生物学活性（Ｐ＜０．０１）;胃内灌注３０d后,抑瘤率达６８．３％（Ｐ＜０．０５）,且可以有效增强ＮＫ细胞杀伤活性（Ｐ＜０．０１）,提高腹腔巨噬细胞吞噬能力（Ｐ＜０．０５）,增加ＩＬ－１的生物学活性（Ｐ＜０．０５）和ＩＬ－２的生物活性（Ｐ＜０．０１）。结论：康宝饮对肿瘤的预防和治疗具有重要应用价值,可制成一种微生态保健饮品。     

草苁蓉多糖的抗肿瘤作用及免疫调节作用

目的：观察草苁蓉多糖对荷瘤小鼠免疫器官的调节作用及对免疫功能的影响。方法：接种肝癌细胞H₂₂的荷瘤小鼠随机分为50、100、200和400 mg•kg^-1•d^-1草苁蓉多糖组、阴性对照组及阳性对照组（环磷酰胺组），按剂量给药。10 d后处死小鼠，分别称量脾重、胸腺重，检测荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数；采用MTT法测定NK细胞活性；淋巴细胞转化实验测定T淋巴细胞转化率(LTT)；中性红比色法观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力；通过称量各小鼠实体瘤的重量，计算抑瘤率。结果：草苁蓉多糖能够显著抑制肿瘤生长，抑瘤率达38.86%;与阴性对照组比较,实验组荷瘤小鼠的脾脏指数显著提高(P<0.01)，胸腺指数则有降低趋势，T淋巴细胞的转化率、NK 细胞的活性、巨噬细胞的吞噬能力显著增强(P<0.01)，与给药剂量存在正相关关系。结论：草苁蓉能抑制肿瘤生长，对小鼠免疫功能具有调节作用。