CYP1B1在成年肥胖小鼠巨噬细胞浸润及组织炎症中的作用

目的探讨CYP1B1(cytochrome P450,family 1,subfamily B,polypeptide 1)缺失对成年小鼠巨噬细胞募集及组织炎症作用。方法选择6 w周龄SPF级CYP1B1基因敲除(KO)和野生型(WT)雄性小鼠,给予低脂肪(LFD)、高脂肪(HFD)饲料,喂养6 w后分别测定各组全血葡萄糖及血清胰岛素水平。利用葡萄糖耐量实验,判断糖耐量损伤情况。HE染色及免疫荧光检测小鼠附睾脂肪组织的巨噬细胞浸润情况。多重实时定量PCR(qRT-PCR)检测附睾脂肪组织及肝脏中巨噬细胞特异性蛋白(Emr1)及肿瘤坏死因子α(TNF-a)的表达水平。结果 CYP1B1敲除可以改善高脂膳食导致的胰岛素敏感性下降;在附睾脂肪组织中,CYP1B1基因缺失与高脂肪膳食均促进巨噬细胞的募集,但CYP1B1缺失抑制高脂膳食对炎症因子的诱导;在肝脏组织中,高脂膳食诱导巨噬细胞的浸润,但CYP1B1基因缺失抑制小鼠巨噬细胞浸润并下调组织炎症因子的表达。结论 CYP1B1基因缺失对高脂膳食诱导的肥胖及相关的胰岛素敏感性下降的保护作用可能是由其对炎症抑制的组织特异性决定的。     

CYP1B1基因敲除对高脂膳食诱导小鼠肥胖的抑制作用

目的 从整体水平探讨基因CYP1B1在机体脂肪代谢中的作用.方法 选择3周龄SPF级CYP1B1基因敲除(KO)和野生型(WT)雄性小鼠各16只,给予低(LFD)、高脂肪(HFD)饲料,每组8只.连续喂养11周.测定血清中甘油三酯(TG)的含量和肝脏组织中过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)、脂肪酸转移酶(CD3...     

CYP1B1对肥胖小鼠脂肪组织血管新生因子影响

目的 探讨血管新生因子血管生成素Ⅰ和Ⅱ在保护幼年细胞色素P4501B1(CYP1B1)基因敲除小鼠营养性肥胖中作用。方法 CYP1B1基因敲除和野生型雄性C57/BL小鼠(3周龄)各16只,给予低脂膳食(10%脂肪)、高脂膳食(60%脂肪)饲料11周;小鼠处死后取附睾脂肪组织检测血管密度及血管新生因子基因和蛋白表达。结果 野生高脂组小鼠脂肪组织血管密度下降,基因敲除小鼠脂肪组织血管分布不受影响;高脂膳食诱导下,野生型和基因敲除小鼠血小板-内皮细胞粘附分子CD31 mRNA表达下调(P<0.05),野生型小鼠CD31蛋白表达下调(P<0.05);与野生低脂组比较,高脂诱导后野生型和基因敲除小鼠血管生成素Ⅰ表达量分别为0.35和0.50(P<0.05),瘦素表达量则分别为2.48和1.42(P<0.05);敲除高脂组瘦素表达量较野生高脂组下降(P<0.05)。结论 CYP1B1基因敲除对血管新生相关因子的调控可能在其营养性肥胖中起一定保护作用。     

CYP1B1基因敲除对成年小鼠肝脏脂肪代谢的影响及可能机制

目的探讨CYP1B1对高脂膳食诱导的成年小鼠脂肪代谢的作用。方法 CYP1B1基因敲除(KO)和野生型(WT)雄性成年C57/BL小鼠(6 w龄)各16只,给予低脂(LFD,30%)、高脂肪(HFD,60%)饲料共6 w。小鼠处死后取血清、附睾脂肪和肝脏组织检测相应的生化和分子生物学指标。结果 6 w高脂膳食后,KO小鼠能量摄入总量稍高于WT小鼠,但其体重增量和附睾脂肪组织重量均显著低于WT小鼠;WT小鼠脂肪细胞直径明显大于KO小鼠,且血糖、血清及肝脏组织中甘油三酯(TG)水平亦明显高于KO小鼠;肝脏组织RT-PCR结果显示,CYP1B1基因敲除后,启动脂肪形成的核因子及脂肪合成相关基因如CD36、SREBP1c、SCD1等表达下降,而调控脂肪氧化分解的基因如CPT-1α,UCP-2表达显著上升;蛋白印迹结果显示,CYP1B1基因敲除增强腺苷-磷酸激酶(AMPK)的磷酸化。结论 CYP1B1基因敲除对成年小鼠营养性肥胖的保护作用可能与AMPK磷酸化增强并调控肝脏中脂肪代谢相关基因的表达有关。     

低脂膳食对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织蛋白激酶B表达的影响

目的:在高脂饮食诱导胰岛素抵抗的基础上,观察低脂膳食对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中蛋白激酶B(proteinkinaseB,PKB)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组(controlgroup,C)10只,给予低脂饲料;模型组(modelgroup,M)20只,给予高脂饲料。喂养4w后,又随机分为2组:高脂喂养组(highfatdiet,HF),继续高脂饮食;低脂喂养组(lowfatdietedgroup,LF),给予低脂饮食。干预6w后,蛋白印迹法检测大鼠脂肪组织中胰岛素刺激PKB的蛋白表达含量。结果:1.高脂M组的空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)及胰岛素抵抗指数(homeostasismodelassessment-insulinresistanceindex,HOMA-IR)明显升高,胰岛素敏感指数(insulinresistanceindex,ISI)显著下降,出现了胰岛素抵抗。2.低脂膳食干预6w,LF组的FBG、TG、TC及HOMA-IR下降,ISI显著升高。3.长期高脂膳食,HF组大鼠脂肪组织中PKB的表达明显减少,较C组下降了23.5%。低脂饮食6w后,LF组大鼠PKB蛋白表达明显升高,较HF组增加了16.1%。结论:低脂膳食纠正糖脂代谢紊乱,改善胰岛素抵抗,可能与增加脂肪组织中PKB蛋白表达有关。     

Plin1基因敲除对肥胖小鼠脂肪组织炎症反应的影响及机制研究

目的 探究Plin1基因敲除对肥胖小鼠脂肪组织炎症水平的作用及其可能分子机制。方法 将雄性野生型C57BL/6J小鼠和Plin1基因敲除小鼠随机分为普通饲料组和高脂饲料组4组（n=6）,喂养12 w后,隔夜禁食自由饮水12h,眼眶采取所有新鲜血液及组织样本,并颈椎脱臼处死,取各组小鼠血清及部分附睾脂肪组织,酶法测定小鼠血清中游离脂肪酸（nonesterified fatty acid,NEFAs）的水平;酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）试验测定小鼠血清和脂肪组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)及单核细胞趋化因子1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)的水平;免疫组织化学染色法观测F4/80的表达程度;免疫荧光染色法和Western blot法观察核因子κB (Nuclear Factor kappa-B,NF-κB)亚基P65的转位及表达水平和NF-κB亚基P65表达及磷酸化差异...     

2型糖尿病胰岛素抵抗脂肪组织炎症机制的中西医研究进展

糖尿病(DM)是一个在世界范围内快速增长、严重危害人类健康的常见、多发性疾病.其中肥胖者的2型糖尿病(T2DM)发病率逐年升高,近10多年来,我国DM患病率亦增加迅速,患者中>90%为T2DM,而在T2DM中80%的患.者肥胖或超重,所以肥胖成为T2DM的根源~([1]),且肥胖的T2DM普遍存在胰岛素抵抗(IR).     

炎症介质与肥胖和多囊卵巢综合征

多囊卵巢综合征是育龄期妇女常见的内分泌疾病之一,且伴有高发病率的心血管疾病.多囊卵巢综合征患者的肥胖多为腹型肥胖,患者的肥胖与其慢性低度炎症和炎性细胞因子的增多有关.该文对多囊卵巢综合征患者的脂肪分布、脂肪细胞功能障碍及炎性标志物之间的潜在联系进行了论述.     

UCP4基因在大鼠脂肪组织中的表达及与肥胖关系的研究

【目的】　验证UCP4基因在大鼠脂肪组织中的mRNA表达 ,探讨脂肪组织中UCP4基因mRNA表达水平变化与肥胖之间的关系。　【方法】　①采用RT PCR技术获得大鼠腹膜后脂肪组织中UCP4基因的PCR产物 ,测序结果用BLAST软件进行序列同源性比对分析 ,以验证UCP4基因在大鼠脂肪组织中的表达 ;②建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型 ,应用RT PCR技术检测正常与肥胖大鼠腹膜后脂肪组织中UCP4基因表达水平的差异。　【结果】　①PCR产物测序结果的序列同源性比对分析证实UCP4基因表达于大鼠脂肪组织 ;②肥胖大鼠腹膜后脂肪组织中UCP4基因的表达水平显著低于正常大鼠 (P <0 .0 0 1)。　【结论】　UCP4基因表达于大鼠脂肪组织中 ,并可能参与肥胖的发生发展     

CYP19和CYP1B1基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症易感性的研究

目的:探讨P450酶系的CYP19和CYP1B1基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段多态性技术(PCR-RFLP)和等位基因特异性PCR技术(AS-PCR)对100例ICP患者和100例正常对照孕妇CYP19基因第3外显子Rsal酶切多态和CYP1B1基因外显子3密码子432(C-G)多态性进行分析。结果:①对照组CYP19的基因型AA、AG、GG频率分别为30.0%、50.0%、20.0%,ICP组分别为38.0%、45.0%、17.0%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组等位基因A、G频率分别为55.0%、45.0%,ICP组分别为60.5%、39.5%,两组比较差异也无统计学意义(P>0.05)。②对照组CYP1B1的基因型CC、CG频率分别为80.0%、20.0%,ICP组分别为70.0%、30.0%,两组均无突变纯合子(GG),两组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组等位基因C、G频率分别为90%、10%,ICP组分别为85%、15%,两组比较差异也无统计学意义(P>0.0S)。结论:CYP19外显子3基因多态性和CYP1B1外显子3密码子432基因多态性与ICP发病无关。     

肥胖患者血清胰岛素、真胰岛素的变化及其胰岛素抵抗的影响因素分析

目的　观察单纯性肥胖患者血清胰岛素、真胰岛素变化 ,并分析胰岛素抵抗的影响因素。方法　单纯性肥胖者 70例 ,正常对照组 3 0例 ,均检测身高、体重、腰围、臀围 ,同时测定血清真胰岛素 (TI)、免疫活性胰岛素 (IRI)、空腹血糖 (FPG)、血甘油三脂 (TG)、胆固醇 (CHO) ,计算胰岛素敏感指数 (ISI) [ISI1=1/(FPG×TI) ,ISI2 =1/(FPG×IRI) ] ,并对ISI1与各指标进行相关性分析。结果　肥胖患者血清胰岛素、真胰岛素水平明显高于对照组 (P <0 0 1) ,ISI1、ISI2 显著低于对照组 (P <0 0 1) ,但ISI1的降低要比ISI2 降低明显 ( P <0 0 1) ;直线相关分析显示 ,ISI1与BMI、体重、腰围、TG呈负相关 ,γ依次为 -0 678、-0 5 40、-0 5 68( P <0 0 1) ,-0 2 47,(P <0 0 5 )。多元步回归分析显示影响肥胖患者ISI1的最重要因素是BMI( -0 5 14 )、TG( -0 3 5 0 )、腰围 ( -0 3 11) ( χ2 =0 669,F =3 3 814 ,P <0 0 1)。去除BMI的影响因素后 ,ISI1与TG明显负相关 (γ =-0 2 96,P <0 0 5 )。结论　肥胖患者有高胰岛素血症和胰岛素抵抗 ,真胰岛素水平比免疫活性胰岛素水平更能反映胰岛素抵抗的程度 ,胰岛素抵抗与BMI、甘油三脂、腰围明显相关。     

肥胖患者血清真胰岛素及其胰岛素抵抗的关系研究

目的　观察单纯性肥胖患者血清真胰岛素和胰岛素抵抗的关系。　方法　单纯性肥胖者 70例 ,正常对照组3 0例 ,均检测身高、体重、腰围、臀围 ,同时测定血清真胰岛素 (TI)、空腹血糖 (FPG)、血甘油三脂 (TG)、胆固醇 (CHO) ,计算胰岛素敏感指数 (ISI) [ISI =1/(FPG×TI) ] ,并对ISI与各指标进行相关性分析。　结果　肥胖患者血清真胰岛素水平明显高于对照组 (P <0 0 1) ,ISI显著低于对照组 (P <0 .0 1) ,直线相关分析显示 ,ISI与BMI、体重、腰围、TG呈负相关 ,r依次为 -0 .678、-0 .5 40、-0 .5 68(P <0 .0 1) ,-0 .2 47,(P <0 .0 5 )。多元逐步回归分析显示影响肥胖患者ISI的最重要因素是BMI( -0 .5 14 )、TG( -0 .3 5 0 )、腰围 ( -0 .3 11) (R2 =0 .669,F =3 3 .814 ,P <0 .0 1)。去除BMI的影响因素后 ,ISI与TG明显负相关 (r =-0 .2 96,P <0 .0 5 )。　结论　肥胖患者有高真胰岛素血症和胰岛素抵抗 ,胰岛素抵抗与BMI、甘油三脂、腰围明显相关。     

Aerobic Exercise Prevents Chronic Inflammation and Insulin Resistance in Skeletal Muscle of High-Fat Diet Mice

Obesity is commonly accompanied by chronic tissue inflammation and leads to insulin resistance. Aerobic exercise is an essential treatment for insulin resistance and has anti-inflammatory effects. However, the molecular mechanisms of exercise on obesity-associated inflammation and insulin resistance remain largely unknown. Here, we evaluated the effects of aerobic exercise on inflammation and insulin resistance in skeletal muscles of high-fat diet (HFD) mice. Male C57BL/6J mice were fed a high-fat diet or a normal diet for 12 weeks, and then aerobic training was performed on a treadmill for 8 weeks. Body weight, fasting blood glucose, food intake levels, and glucose and insulin tolerance were evaluated. The levels of cytokines, skeletal muscle insulin resistance, and inflammation were also analyzed. Eight weeks of aerobic exercise attenuated HFD-induced weight gain and glucose intolerance, and improved insulin sensitivity. This was accompanied by enhanced insulin signaling. Exercise directly resulted in a significant reduction of lipid content, inflammation, and macrophage infiltration in skeletal muscles. Moreover, exercise alleviated HFD-mediated inflammation by suppressing the activation of the NF-κB pathway within skeletal muscles. These results revealed that aerobic exercise could lead to an anti-inflammatory phenotype with protection from skeletal muscle insulin resistance in HFD-induced mice.     

广西壮族人群CYP1B1基因Leu 432 Va1多态性分析

目的 研究CYP1B1第432密码子在广西壮族人群中遗传特征,为进一步研究CYP1B1基因多态性与疾病的发生易感性奠定基础。方法 采用人工修饰双等位基因特异性引物扩增法(diASA-AMP)技术对288名广西壮族正常成人进行CYP1B1 Leu 432 Va1基因分型,探讨性别间差异及与国内外其他人群分布频率差异。结果 广西壮族女性和男性人群CYP1B1 Leu 432 Va1均以C等位基因为主,分别为89.1%和91.4%;CC野生纯合子型、CG杂合子型和GG突变纯合型在女性人群中分别为78.3%、21.3%和0,男性人群则为83.6%、15.6%和0.8%;统计分析表明,广西壮族CYP1B1 Leu 432 Va1等位基因和基因型分布频率无性别差异,与朝鲜人群相应位点基因型分布频率无差异,但与国内江苏汉族、上海和四川女性相比具有统计学差异(P<0.05),与日本、印度、波兰、尼日利亚、美国白人和美国黑人等人群相应位点基因型分布频率有明显差异(P<0.01)。结论 广西壮族人群CYP1B1基因Leu 432 Va1呈多态性分布,基因型分布频率无性别差异,存在种族差异。     

2型糖尿病患者三酰甘油脂肪酶水平与肥胖及其胰岛素抵抗的关系

目的探讨2型糖尿病（T2DM）患者体质指数（BMI）、稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）、腰围、腰臀比（WHR）与血浆中三酰甘油脂肪酶（adipose triglyceride lipase,ATGL）水平之间的关系。方法选择T2DM患者131例,根据BMI分为正常体质量组（A组）、超重组（B组）和肥胖组（c组）,采用酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测三组空腹血浆ATGL水平,同时测定各组血糖、血脂、空腹胰岛素水平,计算WHR、HOMA—IR,分析各指标与ATGL的关系。结果三组中A组空腹ATGL水平[（56．74±21．46）ng／ml]明显高于B组[（21．92±6．12）ng／ml],P〈0．01;B组ATGL水平[（21．92±6．12）ng／ml]高于C组[（8．90±2．28）ng／ml],P〈0．01;空腹ATGL与BMI、三酰甘油（TG）、空腹胰岛素（Fins）、HOMA—IR呈负相关,r值分别为-0．828,-0．739,-0．674,-0．570,P〈0．01。以ATGL为因变量,BMI、空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hPG）、Fins、HOMA—IR等为自变量进行多元线性逐步回归分析,结果显示,BMI是ATGL的独立影响因素。结论T2DM患者血清ATGL水平与肥胖密切相关,与胰岛素抵抗也具有一定的相关性。     

CYP2B1新型自杀基因的真核表达载体的构建和瞬时表达

目的构建一种新型的CYP2B1自杀基因表达载体并检测其在肿瘤细胞中的表达。方法根据gene bank中鼠CYP2B1基因的核苷酸序列设计一对引物，以pc3／2B1为模板进行PCR扩增，将PCR CYP2B1基因产物定向插入到pcDNA3．0中．构建CYP2B1基因表达载体pcDNA3．0／CYP2B1；通过酶切、PCR及测序鉴定重组体。采用脂质体介导法将pcDNA3．0／CYP2B1转染三种肿瘤细胞株，RT—PCR检测CYP2B1基因在各细胞株中的表达。结果目的片段均成功插入相应的载体中，CMV启动子调控下的CYP2B1基因在不同的肿瘤细胞株中实现了表达。结论CMV启动子调控的CYP2B1真核基因表达栽体是肿瘤基因治疗中一种新型、高效的治疗载体、     

2型糖尿病肥胖患者的血脂水平与胰岛素抵抗的关系

目的探讨2型糖尿病且肥胖患者血脂水平异常与胰岛素抵抗的关系。方法选择66例确诊为2型糖尿病且符合肥胖标准的患者,对他们的血糖、血脂（包括TG、TC、HDL-C、LDL-C）、胰岛素抗体进行检测分析,并设定相应对照组。结果2型糖尿病且肥胖组血糖、胰岛素、TG、TC、HDL—C、LDL—C、胰岛素抗体阳性率与正常对照组和正常肥胖组比较明显异常（P〈0．01）。结论胰岛素抵抗（IR）与2型糖尿病患者肥胖和血脂异常有明显关联,改善IR,控制血脂水平,对预防2型糖尿病的发展以及控制并发症的发生有重要意义。