水中痕量镉(Ⅱ)的荧光素-曙红Y能量转移荧光猝灭测定法

目的建立水中痕量镉(Ⅱ)的荧光素-曙红Y能量转移荧光猝灭测定法。方法取0.50ml的水样置于5.0 ml的比色管中,分别加入1×10-4mol/L荧光素溶液0.30 ml,1×10-5mol/L曙红Y溶液0.10 ml,BR缓冲液(pH 6.5)0.50 ml,定容后在502 nm处测定溶液荧光强度(F)值,以内标法定量。结果在3.43×10-7~1.246×10-5 mol/L的线性范围为,该方法所得镉(Ⅱ)的线性回归方程为ΔF=14.221+546.81×10-5c,r=0.999 5。该方法的检出限为1.03×10-8 mol/L,平均回收率为94.53%~98.15%,RSD为2.44%~4.67%。结论该方法操作简便、灵敏、选择性好,适用于水中镉(Ⅱ)的测定。     

天然水中痕量苯酚的罗丹明B-溴酸钾抑阻动力学荧光光度测定法

目的建立了罗丹明B-溴酸钾体系测定微量苯酚的抑阻动力学荧光光度法。方法水样经预处理后加入1×10-5mol/L罗丹明B溶液1.0 ml,1×10-2 mol/L溴酸钾溶液0.6 ml,0.184 mol/ml硫酸0.4 ml,在80℃水浴条件下加热12 min,于580.0 nm处测定阻抑体系F值和非阻抑体系的荧光强度F0值,计算ΔF(ΔF=F0-F)。结果在0.02~0.44μg/ml的线性范围内,所得苯酚的回归方程为lgΔF=5.502c+4.260 4,r=0.998 0。该方法的检出限为0.017 6μg/ml,该方法的平均回收率为96%~103%,RSD为0.4%~5.7%。结论该方法操作简单,快速,灵敏度和准确度较高,适用于天然水中苯酚的测定。     

水中镉的聚乙烯吡咯烷酮纳米银荧光增强测定法

目的建立水中镉离子的聚乙烯吡咯烷酮纳米银荧光增强测定法。方法在水样中加入1.6×10~(-5) mol/L聚乙烯吡咯烷酮纳米银溶液2.0 ml、磷酸盐缓冲溶液(pH 5.8)0.2 ml、聚乙二醇0.3 ml,25℃反应10 min后,在激发波长337 nm,发射波长380 nm处进行荧光测定。结果在2.0×10-6～2.2×10~(-5) mol/L范围内,所得镉离子的回归方程为ΔF=2.720 3x-1.076 3,r=0.997 8。该方法的检出限为1.2×10~(-6) mol/L;平均回收率为91.3%～103.5%,RSD为0.6%～2.2%。结论该方法具有简便快速,灵敏度和精密度较高的优点,适用于水样中镉离子的检测。     

铬盐与香烟烟雾溶液对A549细胞毒性和DNA断裂的影响

目的研究重铬酸钾和香烟烟雾溶液(CSS)对A549细胞的细胞毒性和DNA损伤的联合作用。方法应用四甲基偶氮唑盐法和单细胞凝胶电泳法检测了重铬酸钾和CSS联合处理对A549细胞的细胞毒性以及DNA链的断裂损伤。结果低浓度重铬酸钾(0．2-0．6μmol／L)与高浓度CSS(10支／L)联合作用促进了细胞的增殖，高浓度重铬酸钾(5．4—16．2μmol／L)与高浓度CSS联合作用表现为明显的细胞毒性。重铬酸钾(0．2、0．6和1．8μmol／L)或CSS(0．1、0．2、0．5支／L)单独处理均可诱导DNA断裂，存在一定的剂量-反应关系。在重铬酸钾的0．6μmol／L时．随CSS(0．1、0．2、0．5支／L)浓度的升高，A549细胞DNA链断裂程度逐渐增加。结论重铬酸钾和CSS对A549细胞均有细胞毒性和DNA损伤作用。重铬酸钾和CSS联合处理诱导A549细胞DNA链断裂，并显著高于两者单独处理引起的DNA链断裂作用。     

纳米银参与的化学发光法测定蜘蛛香中的香叶木素

目的建立化学发光法测定蜘蛛香中香叶木素的新方法。方法在纳米银参与的碱性介质中,高锰酸钾-鲁米诺-香叶木素体系产生较强的化学发光反应且发光强度与香叶木素的浓度有很好的线性关系,据此建立流动注射化学发光法测定香叶木素的含量。结果在鲁米诺、Na OH、纳米银、KMn O4溶液浓度分别为8.0×10-7mol/L、0.05 mol/L、5.0×10-6mol/L、3.0×10-5mol/L的最佳条件下,香叶木素的线性范围为5.0×10-9g/ml~5.0×10-7g/ml,r=0.998 7,对1.0×10-7g/ml香叶木素平行测定11次,其相对标准偏差RSD为1.88%,检出限为1.8×10-9g/ml,提出了化学发光反应可能的机理。结论该法简单、准确,可用于蜘蛛香中香叶木素的测定。     

基因组DNA甲基化的高效毛细管电泳定量检测

目的建立快速准确的高效毛细管电泳(HPCE)定量基因组DNA甲基化的方法。方法以含有十二烷基磺酸钠(SDS)的碳酸氢钠溶液作为背景电解质溶液,优化运行电压、柱温,对DNA组成单元脱氧核苷酸进行分离定量。结果 5种脱氧核糖核苷和5种核糖核苷在10 min内实现基线分离。脱氧胞苷(dC)的标准曲线为Y=172540.15X-6.19,相关系数(R)为0.999,线性范围从2×10^(-3)mol/L到2×10(-3)mol/L到2×10^(-1)mol/L。5-甲基脱氧胞苷(5 mdC)的标准曲线为Y=170271.74X-46.19,相关系数(R)为0.995,线性范围从1×10(-1)mol/L。5-甲基脱氧胞苷(5 mdC)的标准曲线为Y=170271.74X-46.19,相关系数(R)为0.995,线性范围从1×10^(-4)mol/L到2×10(-4)mol/L到2×10^(-2)mol/L。日内相对标准偏差(RSD%)<5%,日间相对标准偏差(RSD%)<9%。5 mdC和dC的检测限均为1×10(-2)mol/L。日内相对标准偏差(RSD%)<5%,日间相对标准偏差(RSD%)<9%。5 mdC和dC的检测限均为1×10^(-5)mol/L。样品的甲基化程度以(5 mdC)含量占总脱氧胞苷(5 mdC+dC)的比率表示。应用本方法分析小牛胸腺DNA的甲基化水平,结果为6.18%,与本研究组所得液质联用(LC-MS/MS)的定量结果 (6.77%)和文献报导中应用液相色谱-紫外检测器(HPLC-UV)的检测结果 (6.26%)对比,一致性好。结论本研究建立的方法分析速度快,准确性高,稳定性好,灵敏度满足微量样本的检测需求,可以用于临床甲基化诊断。     

水中痕量双酚A的罗丹明6G-动力学共振荧光测定法

目的建立环境水样中双酚A(bisphenol A,BPA)的罗丹明6G-动力学共振荧光测定法。方法向水样品中依次加入0.1 mol/L硫酸溶液0.6 ml,1.0×10-4 mol/L罗丹明6G溶液0.4 ml,0.1 mol/L溴酸钾溶液0.5 ml,70℃水浴加热12 min,流水冷却3 min,在524.2 nm处测定共振荧光强度。结果在0.02~1.40μg/ml线性范围内,该方法所得BPA的回归方程为ΔF=1 708.4c+33.2,r=0.999 8。该方法的检出限为0.014μg/ml,回收率为97.5%~106.5%,RSD为3.9%~5.0%。结论该方法简单、方便、灵敏,适用于饮用水中BPA的测定。     

环境水样中痕量砷(Ⅲ)的动力学荧光测定法

目的 建立环境水样中痕量砷(Ⅲ)的动力学荧光测定法.方法 水样经消化处理和离子交换树脂后,加入1.0×10-4 mol/L的二氯荧光素溶液0.6 ml、0.1 mol/L盐酸溶液1.5 ml和1.0×10-3 mol/L碘酸钾溶液0.8 ml,沸水浴中反应10 min后冷却;并设立试剂空白.以438 nm激发波长,512 nm发射波长处测定荧光强度(F).结果 在2.0～200 μg/L范围内,所得砷(Ⅲ)的回归方程为△F=1.754 9+0.177 8 c,r=0.998 6,呈良好的线性关系.该方法的检出限为0.5μg/L,加标回收率在96.8％～102.1％之间,RSD为2.5％～3.4％.结论 该方法具有快速、简便、灵敏度高、选择性好等优点,适用于环境水样中砷(Ⅲ)的测定.     

槲皮素与金属元素配合物的制备及抗氧化活性研究

目的:合成槲皮素金属配合物并研究它们的抗氧化活性。方法:利用单因素实验设计制备槲皮素金属的配合物,采用分光光度法测定槲皮素及其金属配合物清除超氧自由基和羟基自由基的能力;用HPLC法测定清除DPPH自由基的能力。结果:槲皮素-Ca对超氧自由基、羟基自由基和DPPH自由基均表现出了较强的清除能力,槲皮素、槲皮素-Ca、槲皮素-Cu、槲皮素-Zn、槲皮素-Cr及Vc对超氧阴离子清除的IC50值分别为20.00×10-6mol/L,3.070×10-6mol/L,26.14×10-6mol/L,11.79×10-6mol/L,6.28×10-6mol/L和9.12×10-6mol/L;对羟自由基清除的IC50值分别为22.07×10-6mol/L,3.10×10-6mol/L,12.75×10-6mol/L,22.22×10-6mol/L,42.47×10-6mol/L和16.24×10-6mol/L;对DPPH自由基清除的IC50值分别为47.51×10-5mol/L,11.25×10-5mol/L,35.21×10-5mol/L,29.75×10-5mol/L,43.06×10-5mol/L和13.20×10-5mol/L。结论:槲皮素-Ca的清除能力最强,具有较好的开发前景。     

示波极谱法测定环境空气中微量砷化氢

以高锰酸钾吸收环境空气中的微量砷化氢,砷化氢被高锰酸钾氧化成砷酸,在支持电解质中用示谱极谱法测定其含量。标准曲线范围为0～1.3×10~(-5)mol/L,检测限为4.1×10~(-9)mol/L,相对标准偏差分别为4.6%(0.1μg As/10ml)、2.3%(1.0μgAs/10mL)和1.4%(10.0μgAs/10ml),平均吸收率为97.4%。     

阴离子表面活性剂的龙胆紫褪色光度测定法

在弱酸性的邻苯二甲酸氢钾-HCl缓冲介质中,阴离子表面活性剂(AS)与龙胆紫(CV)染料反应,形成离子缔合物,溶液颜色发生明显改变。最大褪色波长为578 nm[十二烷基硫酸钠(SDS)体系]、574 nm[十二烷基苯磺酸钠(SDBS)体系],在此波长处,阴离子表面活性剂的浓度与体系吸光度呈良好线性关系,从而建立测定阴离子表面活性剂的光度法。在最大褪色波长处,AS的浓度在0~2.79×10-5mol/L(SDS体系)、0~2.90×10-5mol/L(SDBS体系)范围内遵守比耳定律,表现摩尔吸光系数为1.72×104L/(mol.cm)(SDS体系)、1.86×104L/(mol.cm)(SDBS体系),检出限为8.90×10-7mol/L(SDS体系)、7.81×10-7mol/L(SDBS体系)。该方法具有较高的灵敏度和良好的选择性,用于水样中AS的测定,结果满意。     

用铅-碘化钾-乙基紫法测定白酒中的铅

近年来,用碱性染料作为显色剂水相光度法测定微量铅,如结晶紫法、罗丹明B法、丁基罗丹明B法等已有报道.我们采用铅-碘化钾-乙基紫显色体系,测定白酒中的徽量铅,取得较好结果.1 材料与方法1.1 主要试剂与仪器 200g/L碘化钾-20g/L抗坏血酸混合水溶液(配制后3天内使用);1.02×10~(-3)mol/L乙基紫溶液(称取0.5g乙基紫溶于1000ml水中);1%聚乙烯醇(PVA)溶液;0.025mol/L硫酸溶液:铅标准溶液0.1mg/ml(使用时逐级稀释成含铅量为1μg/ml的工作溶液).以上试剂均为分析纯.721分光光度计(上海分析仪器厂).1.2 实验方法 于25ml比色管中加入适量铅标准工作溶液,依次加入4.0ml0.025mol/L硫酸溶液、2.0ml碘化钾-抗坏血酸混合溶液,混合后放置10分钟.再加入3.0ml1%聚乙烯醇,2.0ml乙基紫溶液,用     

塑料器具中双酚A溶出量的荧光分析测定法

目的建立塑料器具中双酚A(bisphenol-A,BPA)溶出量的荧光分析测定法。方法浸泡液加热浓缩至约5 ml时,用1 mol/L盐酸1 ml润洗并转移;在pH=1的盐酸介质体系中,加入2×10-3mol/L的β-环糊精溶液1 ml,定容至10 ml,放置10 min后,在281 nm波长激发、311 nm波长处进行荧光强度测定。结果在2.0～50.0μg/L的线性范围内,所得回归方程为y=0.285 7x+0.862 1,相关系数为0.997。该方法的检出限为1.84μg/L,平均回收率在95.1%～100.5%之间,RSD为3.5%～9.4%。结论该方法操作简便,灵敏度高,且不使用有毒有害的有机溶剂,适用于塑料器具中BPA溶出量的检测。     

食用油中没食子酸丙酯的纳米银催化-高碘酸钠-鲁米诺化学发光测定法

为建立纳米银参与的调和食用油中没食子酸丙酯的高碘酸钠-鲁米诺化学发光体系测定法,在纳米银参与的碱性介质及最佳测定条件(负高压为700 V,泵速为45 r/min,L1为30 cm,L2为31 cm,L3为36 cm,鲁米诺溶液、氢氧化钠溶液、纳米银溶液、高碘酸钠溶液的浓度分别为8.0×10-6、1.0×10-2、1.0×10-6、5.0×10-5 mol/L)下,采用高碘酸钠-鲁米诺化学发光法测定没食子酸丙酯的化学发光强度,以确定调和食用油中没食子酸丙酯的含量。结果显示,在1.0×10-6~8.0×10-4 g/L的线性范围内,所得回归方程均呈良好的线性关系,r≥0.997。方法的检出限为9.4×10-7 g/L,平均回收率为99.5%~106.0%,RSD为1.75%。表明该方法简单、准确,灵敏度高,抗干扰能力强,适用于食用调和油中没食子酸丙脂的测定。     

红肠中亚硝酸盐含量的测定

测定红肠中的亚硝酸盐含量时,按现行国家检测方法[1 ]处理后滤液呈红色,使结果偏高,本文报道加聚酰胺粉[2 ]吸附着色剂后,再测定亚硝酸盐含量。1　材料与方法1.1　试剂　聚酰胺粉(尼龙6 ) 2 0 0目;柠檬酸溶液(2 0 0 g/L ) ;其它试剂均见GB/ T5 0 0 9.33- 96第1法。1.2　方法1.2 .1　样品处理　称取约10 .0 g经绞碎混匀样品于烧杯中,加70 ml水和12 m l氢氧化钠深液(2 0 g/ L)混匀,用氢氧化钠调样品p H =8,移至2 0 0 m l容量瓶中,加硫酸锌(0 .4 2 mol/ L) 10 ml,如不产生白色沉淀,补加2～5 ml氢氧化化钠溶液,混匀,放置0 .5 h,用滤纸过滤后,…     

气相色谱-质谱法测定咖啡类饮品中3种糠醛类物质

目的 建立咖啡类饮品中糠醛、5-甲基糠醛、5-羟甲基糠醛的气相色谱-质谱测定方法。方法 样品加入5 ml 50%乙醇溶液、5 ml 10%碳酸钠溶液超声提取10 min, QuEChERS净化管净化,以HP-INNOWAX毛细管柱(30 m×0.25 mm, 0.25μm)分离,质谱检测器检测,内标标准曲线法定量。结果 本法在0.05μg/ml～10.0μg/ml浓度内呈良好的线性关系,r>0.999,检出限为0.2 mg/kg,平均回收率为94.9%～102.6%,相对标准偏差<10%。结论 该方法适合咖啡中3种糠醛类物质的检测。     

T-2毒素对原代培养的小鼠睾丸间质细胞睾酮合成的影响

目的 探讨T-2毒素对原代培养的小鼠睾丸间质细胞(Leydig cells)睾酮合成的影响.方法 建立健康清洁级成年雄性昆明小鼠睾丸间质细胞原代培养模型,使细胞悬液密度为5×10~3个/ml,采用改进3β-羟基类固醇脱氢酶(HSD)染色法进行纯度鉴定.将其分为空白对照[0 ng/ml人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,hCG)+0 mol/L T-2毒素]组、诱导对照(10 ng/ml hCG+0 mol/L T-2毒素)组、10 ng/ml hCG+10~(-9)mol/L T-2毒素组、10 ng/ml hCG+10~(-8)mol/T~(-2)毒素组、10 ng/ml hCG+10~(-7) mol/L T-2毒素组,培养24 h后检测睾酮含量.结果 新鲜分离的小鼠睾丸间质细胞在有血清培养液中培养24h后,细胞贴壁良好,其纯度在90%以上.在10ng/ml hCG诱导下,原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞培养液中睾酮合成量明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).与诱导对照组相比,10 ng/ml hCG+10~(-7)、10~(-8)、10~(-9)mol/的T-2毒素染毒组培养液中睾酮合成量均降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);且睾酮合成量随着T-2毒素染毒浓度的升高而降低.结论 T-2毒素可以直接降低原代培养的小鼠Leydig细胞睾酮合成功能.

Abstract：

Objective To investigate the effects of T-2 toxin on testosterone biosynthesis in primary cultured Leydig cell derived from the mouse testis.Methods Leydig cells isolated from Kunming male mice were adjusted to 5×10~5/ml and the purity was identified by the modified 3β-hydroxysteroid dehydrogenase(HSD) staining method.Blank control group(treated with 0 n/ml hCG and 0 mol/L T-2 toxin),inductive control group(treated with 10 ng/ml hCG and 0 mol/L T-2 toxin),low dose T-2 toxin exposure group(treated with 10 ng/ml hCG and 10~(-9) mol/L T-2 toxin),middle dose T-2 toxin exposure group(treated with 10 ng/ml hCG and 10~(-8) mol/L T-2 toxin) and high dose T-2 toxin exposure group(treated with 10 ng/ml hCG and 10~(-7) mol/L T-2 toxin)were designed,respectively.The testosterone level was measured after 24 h of incubation.Results After 24 hours culture in liquid medium contained serum,the fresh isolated Leydig cells grew well and the purity exceeded 90%.Through 10 ng/ml hCG induce,the testosterone level of Legdig cells increased significantly and the difference compared to blank control was of statistical sense (P<0.05).Compared to inductive control group,the testosterone level in Legdig cells decreased significantly in all T-2 toxin exposure groups with a dose dependant manner (P<0.05 or P<0.01).Conclusion T-2 toxin can directly decrease the testosterone biosynthesis of the primary Leydig cells derived from the mouse testis.     

叔丁基对苯二酚对Chng肝细胞无机砷甲基化代谢的影响

目的 探讨叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,tBHQ)对Chang肝细胞无机砷甲基化代谢的影响.方法 将Chang肝细胞密度调整为1×105个/ml,采用25μmol/LtBHQ溶液预处理24 h后,再用5 μmol/L的tBHQ溶液和0.1、0.5、1.0和5.0μmol/L亚砷酸钠溶液...     

氟电极测定茶叶中氟的质量内控实验

根据实验室内部质控要求 ,采取了一系列控制手段以保证分析结果的可重复性和准确性 ,现将实验方法及结果介绍如下。1　材料和方法1 1　仪器　氟电极和 2 32型饱和甘汞电极 (上海光电器件厂 ) ;PHS - 2型酸度计和磁力搅拌器 (上海第二分析仪器厂 ) ;电子交流自调稳压器。1 2　试剂1 2 1　 1mol/L盐酸　优级纯盐酸 10ml,用水稀释至 12 0ml。1 2 2　总离子强度缓冲液　 3mol/L醋酸钠溶液 :取 2 0 4 g分析纯醋酸钠 (NaAc·3H2 O)溶于 30 0ml水中 ,加稀醋酸调 pH至 7 0 ,加水至 5 0 0ml;0 75mol/L柠檬酸钠溶液 :取 110 g分析纯柠檬酸钠(N…     

高效液相色谱-荧光法同时测定血清5-羟色胺和色氨酸方法的建立

目的建立一种同时测定血清中5-羟色胺(5-HT)和色氨酸(Trp)浓度的高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FD)。方法采用的色谱柱为Hypersil C18柱(250mm×4.6mmi.d.,7μm),流动相为0.1mol/L磷酸二氢钾/甲醇(85:15,V/V)溶液,流速1.0ml/min,荧光检测激发波长和发射波长在0～6min分别为278和338nm,6～10min转换为280和340nm。结果5-HT保留时间约为4.9min,线性方程为Y=4223461X-35303.9,最低检出浓度为0.001μmol/L,回收率为82.70%～95.40%,日内和日间RSD分别为2.03%和3.42%;Trp保留时间约为8.4min,线性方程为Y=421314X+38292.9,最低检出浓度为0.007μmol/L,回收率为83.67%～94.98%,日内和日间RSD分别为1.32%和3.31%;苯丙氨酸、酪氨酸、犬尿氨酸和犬尿喹啉酸等物质对本方法无干扰;健康成人(n=71)血清中5-HT和Trp的浓度分别为(544.8±156.8)nmol/L和(53.08±8.29)μmol/L。结论该方法简便、快速、灵敏,适于临床和科研应用。