90%甲胺基阿维菌素苯甲酸盐原药的急性毒性研究

目的探讨90%甲胺基阿维菌素苯甲酸盐原药的急性毒性,为该药的安全使用提供毒理学依据。方法根据中华人民共和国《农药安全性毒理学评价程序》的要求,按照国家标准GBl5670-1995《农药登记毒理学试验方法》规定方法进行急性经口毒性、急性经皮毒性、眼睛粘膜和皮肤刺激试验和皮肤过敏试验。结果急性经口LD50均为121mg/kg.BW,为中等毒性。急性经皮LD50为1210mg/kg.BW,为中等毒性。给药后不洗眼眼刺激积分指数(I.A.O.I)为10;眼刺激平均指数(M.I.O.I.)4d后小于5,呈现轻度至中度刺激性;给药后洗眼眼刺激积分指数(I.A.O.I.)为7;眼刺激平均指数(M.I.O.I)48h后小于5,呈现轻度刺激性。对豚鼠皮肤刺激积分为0呈现无刺激性。皮肤过敏试验致敏率为0%,属弱致敏物。结论90%甲胺基阿维菌素苯甲酸盐原药急性经口、急性经皮毒性较低,对皮肤无刺激作用,属弱致敏物。且具有药效广谱、低毒安全、持效期长等特点,有良好的应用前景。     

单甲脒盐酸盐原药的亚慢性毒性研究

目的研究85%单甲脒盐酸盐原药对大鼠的亚慢性经口毒性。方法分别用含625、125、25、0 mg/kg 85%单甲脒盐酸盐原药的饲料,给大鼠连续喂饲染毒3个月,观察一般表现、体重、进食量,实验结束时测定血常规7项、血生化11项、尿常规及生化8项,取脏器称重计算脏器质量系数并进行病理组织学检查。结果实验期间,对照组和低剂量组动物无异常发现;高、中剂量组动物活动减少,烦躁,眼鼻血性分泌物,会阴部污秽,皮肤破损或溃烂,体重、进食量下降,体重增长缓慢。实验结束时,高剂量组雌雄动物尿素氮(BUN)、碱性磷酸酶(ALP)升高,胆碱酯酶(ChE)降低;雄性动物天门冬氨酸氨基转移酶(AST)升高,总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)降低。中剂量组雌雄动物总蛋白(TP)、血糖(GLU)降低。高、中剂量组部分动物尿蛋白呈阳性。高剂量组动物脑、心、肝、肾、肾上腺及雄性睾丸脏器质量系数均高于对照组;中剂量组雌性动物脑、肾及雄性动物脑、肝及睾丸脏器重量系数均高于对照组。病理检查显示高剂量组部分动物可见肝细胞肿胀,细胞内有小圆形空泡,肝窦结构受压,中剂量组部分雌性动物周边性肝细胞内小圆形空泡。结论85%单甲脒盐酸盐原药影响动物食量、营养状况,引起行为改变、抗感染能力减低,体重和食物利用率下降,部分生化指标(TP、ALB、GLU、BUN、ALP、ChE)及部分脏器质量系数改变,且能造成部分动物肝脏损害。该药喂饲染毒最大无作用剂量,雌性大鼠为2.34 mg/kg,雄性大鼠为1.59 mg/kg。     

95%草胺磷原药基因致突变作用的研究

目的评价95%草胺磷原药的致突变作用。方法按照GB/T21793-2008《化学品体外哺乳动物细胞基因突变实验方法》进行。结果在非代谢活化及肝微粒体酶系S-9代谢活化条件下,95%草胺磷原药实验结果为阴性,阳性对照组突变率显著增加。结论 95%草胺磷原药对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞TK基因无致突变作用。     

运用TK基因突变试验及小鼠微核试验测定95%乙草胺原药的遗传毒性

[目的]观察95%乙草胺原药的遗传毒性,为其安全使用及农药管理登记提供依据。[方法]建立95%乙草胺原药的致突变试验模型,通过TK基因突变频率和微核率对其遗传毒性进行评价。[结果]95%乙草胺原药各剂量组TK6细胞TK位点突变频率与阴性对照组比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;与阴性对照组比较,95%乙草胺原药染毒组的骨髓嗜多染红细胞微核率未见明显增高（P〉0.05）。[结论]在本试验条件下,95%乙草胺原药无诱导小鼠骨髓细胞染色体损伤及致TK6细胞基因突变的作用。     

用TK基因突变试验评价大蒜素的抗诱变性

[目的]用TK6人类淋巴母细胞的TK基因突变试验评价大蒜素的抗诱变性,为大蒜素抗诱变作用及其可能机制的研究提供毒理学依据,并为TK基因突变试验在抗诱变性检测方面的应用及推广积累资料。[方法]设溶剂对照组、5μg/ml MMS组、5μg/ml MMS＋大蒜素0.1μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml试验组、5μg/ml MMS＋100μg/ml VitC对照组。分别采用同时处理和后处理两种方法测定PE0、PE3、RS和TFT。[结果]大蒜素在两种处理条件下均能显著降低MMS诱导的TK基因突变频率,并呈较好的量效关系,两种处理条件的作用强度差异无统计学意义。[结论]在本实验条件下,大蒜素可抑制MMS诱导的TK6细胞TK基因突变,有很好的开发应用前景。     

重症单甲脒中毒的抢救与护理

本文通过对13例重症单甲脒中毒患者的抢救和护理，探讨了单甲脒中毒的临床表现和护理要点，并采取了一系列针对性救治和护理，从而达到成功救护重症单甲脒中毒的护理体会。     

用TK基因突变试验评价大豆低聚肽的抗诱变性

[目的]了解大豆低聚肽的抗诱变作用,为其进一步开发利用提供依据. [方法]采用TK6细胞TK基因突变试验,以前处理、同时处理、后处理3种方式给予大豆低聚肽,观察4个剂量大豆低聚肽(1.25、2.5、5.0、10.0mg/ml)对MMS诱导的tk基因突变频率的影响. [结果]在前处理与同时处理条件下,4个剂量的大豆低聚肽均可显著降低MMS诱导的tk基因突变频率,并呈良好的剂量反应关系;而后处理条件下,大豆低聚肽仅在5.0和10.0 mg/ml时表现出对MMS的拮抗作用;大豆低聚肽前处理时的tk基因突变指数亦显著低于其余两种处理方式. [结论]大豆低聚肽具有良好的抑制MMS诱导的tk基因突变的作用,以前处理方式的抗诱变作用最强.     

苯醚甲环唑原药的亚慢性毒性研究

目的研究苯醚甲环唑原药90d染毒后可能产生的对健康的危害;提供有关靶器官、蓄积作用与无作用剂量的资料。方法SD大鼠80只,雌雄各半,随机分为33、100、250mg/kg3个剂量组和1个对照组,每日经口灌胃染毒90d,对照组给予等量吐温水溶液。观察大鼠一般状况和在实验前、90d实验后分别于颈静脉取血测定血常规及血生化指标。实验结束剖杀前留取6h尿液,剖杀时测定脏器湿重计算系数及行组织病理学检查,分析对脏器的损害情况。结果①250mg/kg剂量组雌性大鼠体重增长缓慢,90d时与对照组比差异有显著性(P<0.05);②肝脏器和肾脏器系数:高剂量组与对照组比差异均有显著性(P<0.05);③各染毒组红、白细胞总数及血红蛋白含量与对照组比差异均无显著性(P>0.05);④高剂量组雄性大鼠血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶与对照组比差异有显著性(P<0.05),其他血生化指标与对照组比差异均无显著性(P>0.05);⑤病理组织学检查:各染毒组动物组织与对照组比较均无明显差异。结论大鼠连续90d摄入250mg/kg剂量的苯醚甲环唑原药对肾脏及肝脏组织有一定影响,其最大无作用剂量为33mg.kg-1.d-1。     

TK基因突变试验——琼脂平皿法与微孔平板法的比较

目的　TK(thymidinekinase)基因突变试验可采用琼脂平皿法或微孔平板法 ,本研究旨在比较两种方法的优劣 ,为选择一种适于在国内推广的方法提供依据。方法　同时使用琼脂平皿法和微孔平板法对四种化学物 (MMS、EMS、MMC、KCl)的致突变性进行检测与评价。结果　两种方法检出三种诱变剂的结果基本一致 ,但对KCl而言 ,琼脂平皿法检测结果为阴性 ,而微孔平板法检测结果为阳性。结论　就目前实验结果来看 ,宜推广琼脂平皿法在国内的应用。最终结论尚需增加更多受实物后才能确定。     

醋酸铅体外诱发人外周血淋巴细胞HPRT基因位点突变的研究

目的 了解醋酸铅对人外周血淋巴细胞HPRT基因位点的影响,以探讨铅的致突变性。方法 采用多核细胞法体外研究醋酸铅对人外周血淋巴细胞HPRT基因位点的影响及突变频率。结果 0．25mmol/L醋酸铅即可诱发人外周血淋巴细胞HPRT基因位点突变,且突变频率随着染毒浓度的增加而升高,突变频率Y(10^-3)与醋酸铅浓度C(mmol/L)之间存在一定的剂量-效应关系,直线方程分别为：Y=1．0566 0．1661C(r=0．9582)和Y=1．0762 0．1987C(r=0．9434)。结论 在一定条件下,醋酸铅对人外周血淋巴细胞HPRT基因位点及突变频率有影响,HPRT基因突变频率可望成为接触环境致突变物人群检测的敏感指标。     

超高效液相色谱/串联质谱分析生活饮用水中2,4-滴、2,4,6-三氯酚和五氯酚的方法研究

目的:建立检测生活饮用水中2,4-滴、2,4,6-三氯酚和五氯酚的超高效液相色谱/串联质谱法(UPLC-MS/MS)。方法:水样经高速离心,Waters ACQUITY UPLC BEHC181.0×50 mm柱分离,以纯水和乙腈为流动相,采用UPLC-ESI-MS/MS法,以负离子检测方式,多离子反应监测(MRM)定量法检测生活饮用水中2,4-滴、2,4,6-三氯酚和五氯酚。结果:经方法学验证,该方法对2,4-滴、2,4,6-三氯酚和五氯酚的最低检测限分别为0.5、3.0、1.0μg/L(进样量10μl)。在线性范围中,相关系数r均大于0.99,平均回收率分别在85%~115%之间。结论:方法快速、灵敏度高、操作简单、定量准确、测定浓度范围宽阔,是生活饮用水样品中2,4-滴、2,4,6-三氯酚和五氯酚含量快速检测的理想方法。对东莞市生活饮用水样品检测表明:此水体中2,4-滴、2,4,6-三氯酚和五氯酚的含量都低于检测限。     

水环境对硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴趋向运动的影响

目的探索硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴侵入钉螺的最佳水环境。方法采用改良的Rorbert比较法,以0.2 mol/L硫酸亚铁胺溶液进行实验,等量去离子水作为对照组,比较不同pH、不同水硬度和盐度对硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴侵入钉螺的影响。结果在pH(6～10)的环境对硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴趋向运动无显著的影响。随着溶液的酸碱度在相对安全的范围内改变,毛蚴的趋向仍为排斥作用;水的硬度对硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴趋向运动无显著的影响;而水中盐度变化时,硫酸亚铁胺对日本血吸虫毛蚴大多仍呈排斥作用。结论以上结果说明硫酸亚铁胺无论在酸性或碱性土壤环境中都具有较好地抑制毛蚴侵入钉螺的作用;水硬度和含盐度在一定范围内变动对硫酸亚铁胺抑制日本血吸虫毛蚴趋向作用无显著影响。     

四氯化碳中毒大鼠肝脏Ca~(2 )-ATP酶和磷酸化酶a活性的研究

本实验采用雄性S.D.大鼠,经日一次灌注2.2ml/kg 四氯化碳,于染毒后12、24、48小时测定肝微粒体Ca~2 -ATP 酶和肝细胞液磷酸化酶a 活性变化。结果发现,染毒后大鼠肝微粒体Ca~2 -ATP 酶活性显著降低,以染毒后24小时为甚;肝细胞液磷酸化酶a 活性显著增高,以染毒后24小时为最高。说明四氯化碳致肝损伤时,肝内质网隔离钙的能力降低,胞液中钙浓度升高。本实验对于阐明四氯化碳中毒性肝病发病机理有一定的意义。     

1,25(OH)_2D_3缺乏对小鼠脂多糖诱导的应激反应的影响

<正>自发现一些免疫细胞上存在维生素D受体(vitamin Dreceptor,VDR),维生素D(VD)对免疫调节的研究成为热点[1]。巨噬细胞是一类     

La(Sal)2(Qu)对重组Fas基因酵母促凋亡作用

目的观察氯化镧水杨酸8-羟基喹啉三元稀土配合物[La(C₇H₅O₃)₂·(C₉H₆NO)],对重组Fas基因酵母的促凋亡作用。方法抽提Jurkat细胞RNA;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)制备Jurkat细胞的cDNA;PCR扩增人Fas基因;将人Fas基因克隆到pREP3X-HA质粒中构建pREP3X-HA-Fas穿梭载体,电转化穿梭载体到野生型粟酒裂殖酵母细胞中;应用蛋白印迹法(Western blotting)鉴定蛋白表达产物;应用La(Sal)₂(Qu)诱导重组Fas酵母产生凋亡应答。结果经原位末端标记(TUNEL)法显微计数检测发现,对照组细胞膜泡形成、细胞核碎裂和细胞核溶解的细胞各占计数细胞总数的2.80%、3.74%和2.80%,而处理组分别为26.67%、22.86%和13.33%,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术检测发现,对照组细胞凋亡检出率为1.24%,而处理组为50.17%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 La(Sal)₂(Qu)可能通过Fas诱导酵母细胞凋亡。     

邻苯二甲酸二乙基己酯致小鼠不同器官细胞 DNA-蛋白质效应研究

目的为了探讨邻苯二甲酸二乙基已酯（DEHP）导致生物机体内不同器官DNA-蛋白质的交联（DPC）作用。方法以采用KCl-SDS沉淀法来检测DEHP体外染毒后昆明纯系小鼠体内肝、脑、睾丸、肺等4个器官的细胞中DNA-蛋白质交联含量。结果当DEHP的浓度为5μM时,小鼠肝细胞的DPC系数与对照组相比没有发生显著的变化;当DEHP的浓度分别升高到10、20、40和80μM时,DPC系数显著上升,且DPC含量与对照组相比有极显著差异;在脑细胞中,当DEHP的浓度分别为5、10μM时,能显著诱导DPC的生成（P〈0．05）,但是,随着DEHP的浓度升高,DPC的含量与对照组相比没有显著性差异;在睾丸的细胞中,当DEHP的浓度为5μM时,小鼠睾丸的细胞DPC系数与对照组相比有显著的升高（P〈0．05）;当DEHP的浓度升高到10、20、40、80μM时,DPC系数显著上升,且DPC含量与对照组相比有极显著差异（P〈0．01）;在肺细胞中,DEHP的浓度为5μM时,就能显著诱导DPC的生成（P〈0．05）。结论DNA-蛋白质交联是一种严重的DNA损伤。DEHP可诱导DNA-蛋白质交联的产生。     

硫酸铈对果蝇寿命及繁殖力的影响

[目的]研究硫酸铈[Ce(SO4)2]对果蝇寿命和繁殖力的影响.[方法]以不同浓度的Ce(SO4)2(1、4、16、64、256、1 024 mg/L)配制的培养基喂饲野生型黑腹果蝇,并设置基本培养基为对照.寿命实验组,每天计数果蝇的死亡数直至全部果蝇死亡,计算果蝇的半数死亡时间、平均寿命与最高寿命;繁殖力实验组,亲本果蝇接入7d后去除,连续统计8d内新生成蝇的数目.[结果]随着Ce(SO4)2浓度的升高,果蝇的平均寿命、半数死亡时间、最高寿命和繁殖力出现明显下降,并呈现剂量-效应关系;当Ce(SO4)2≥16 mg/L时,与对照组相比,果蝇的平均寿命、半数死亡时间、最高寿命和繁殖力呈显著性下降,分别下降52.6%、62.7%、71.4%、80.4%.[结论]提示Ce(SO4)2可缩短果蝇寿命和降低其繁殖力.     

10例类孟买表型α1,2岩藻糖基转移酶基因序列分析

目的:分析10例类孟买血型表型的α1,2岩藻糖基转移酶基因序列情况。方法:ABO、H抗原检测采用血清学方法,利用PCR技术扩增FUT1编码区序列,PCR产物双酶切后直接测序分析。杂合子突变标本采用TOPO TA技术分离得到单链。结果:类孟买血型表型红细胞缺乏H抗原,与抗H试剂不凝集。10例标本直接测定FUT1基因编码区序列,3例为第547-552位AG两碱基缺失(CAGAGAG→CAGAG)纯合子,其它7例为有不同突变点的杂合子。单体型分析显示存在235C、293T、547-552delAG、658T、35T+682G、880-882delTT等6种单体型。结论:类孟买血型存在多种分子遗传机制,最常见单体型为547-552delAG。     

邻苯二甲酸二酯诱导果蝇脑组织基因差异表达谱的研究

[目的] 获得邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯[di(2-ethylhexyl) phthalate，DEHP]诱导果蝇脑组织的基因差异表达谱。[方法] 设喂饲0．2％DEHP浓度的果蝇为实验组，乳化剂为对照组，2周后断头进行总RNA抽提，DNaseI消化去除DNA污染；用Oligotex mRNA MiNi Kit(QIAGEN)得到纯的mRNA；合成双链cDNA；采用体外转录的方法获得大量cRNA与Affymetrix的果蝇表达谱芯片进行杂交，计算机扫描处理数据。[结果] 差异表达的基因片段共计35个：①上调的基因有20个，包括CYP6A2、CYP6A8、CYP6W1、CYP4P1、UGl36Bb、GST、羧酸酯酶、转甲基酶、氧化还原酶、ESTIO、JHEHI、KEAPI、CC．6908、CGl942、CGl0560、CG11529、CGl0553、CGl283、CGl2505等；②下调的基因有15个，包括MST57Da、MST57Db、ACP95EF、OS-E、OS-C、PBPRP3、PBPRP1、AIO、CGl8628、CG11391、CG1挖耐、CG8424、CG5290、CGl3947、CGl5263等。差异表达基因中大多数与信号传导、细胞代谢、生长、发育、组织分化及转录因子等功能相关，尚有一些基因功能未知。[结论] 运用高通量基因芯片技术获得DEHP诱导果蝇脑组织的基因差异表达谱，为从分子水平系统研究DEHP的毒性机制提供有益的线索。