组织工程皮肤替代物构建的实验研究

目的探索组织工程皮肤替代物的构建方法。方法采用传代培养的角质形成细胞和成纤维细胞作为种子细胞,I型胶原作为真皮基质,采用气—液界面方式进行培养,用HE染色观察培养物的结构。结果培养的组织工程皮肤替代物具有正常皮肤的形态结构,具有结构致密的真皮和分化良好的表皮。结论本方法可用于活性皮肤替代物的制备。     

新型人工复合皮的构建及临床初步应用

目的 探讨以小肠黏膜下层(SIS)为真皮替代物构建复合皮的可行性。方法 制取家猪小肠黏膜下层为真皮替代物。致密层表面种植呈指数分裂状态的自体表皮细胞。继续体外培养2周，获得人工复合皮。移植复合皮修复26例皮肤全层缺损创面；观察复合皮早期存活质量。并分别于培养第1周、第2周和移植后第1周、第2周取复合皮标本作组织学观察。结果 表皮细胞在SIS表面定位、生长。21例移植的复合皮早期成活良好。SIS内新生血管形成。炎性细胞浸润。无移植排斥反应。结论 以SIS为真皮替代物构建的复合皮，移植修复体表创面切实可行。     

皮肤替代物的研究进展

烧伤创面愈合是一个十分复杂的过程,自体皮肤组织是最理想的烧伤创面修复物,但对于大面积深度烧伤的病人,常因自体皮源的不足,使得自体皮肤移植在应用上受到严重的限制;而生物敷料包括同种异体皮、异种皮和羊膜等各类暂时性皮肤替代物,由于抗原性及其他性能上的缺陷,只能在较短的时间内起到创面保护作用.近些年,由于分子生物学和组织工程技术的发展与应用,使得表皮替代物、真皮替代物和复合皮肤替代物成为了研究的热点.本文就皮肤替代物的研究进展作一简要综述.     

小型香猪复方壳多糖组织工程皮肤的构建及组织学特点

目的评价制备的小型香猪复方壳多糖组织工程皮肤在组织学方面的特性,为其修复皮肤缺损创面提供实验依据。方法采用传代培养的角质形成细胞和成纤维细胞作为种子细胞,I型胶原作为真皮基质。采用气—液界面方式进行培养,通过苏木精—伊红(HE)染色、比较小型香猪的体外构建组织工程皮肤与正常皮肤的组织学特征,包括表皮、真皮结构。结果制备的复方壳多糖组织工程皮肤表皮细胞增殖活跃,分层分化良好,厚约150μm,真皮层细胞生长正常,排列有序,与机体皮肤结构相似。结论复方壳多糖组织工程皮肤组织结构良好,符合新型皮肤替代物在治疗皮肤缺损时的组织学要求。     

异种脱细胞真皮基质治疗大面积深度烧伤的研究进展

自体皮源的严重缺乏一直是大面积深度烧伤临床治疗的主要难点,因此,制备新型皮肤替代物已经成为大面积深度烧伤临床治疗亟待解决的问题。伴随着组织工程学的发展及制备工艺的改善,异种脱细胞真皮基质作为理想的皮肤替代物,在治疗大面积深度烧伤中被大量应用。本文对近几年异种脱细胞真皮基质的临床应用现状、治疗机理研究现状、不同脱细胞真皮基质的优缺点进行综述。     

复合皮移植的功能重建

复合皮（脱细胞异体真皮和自体皮移植物）最大的优点就是具有接近正常的和不断优化的真皮替代物（SD）结构。脱细胞真皮基质（ADM）主要由胶原蛋白、弹性蛋白、非胶原性糖蛋白、蛋白多糖、氨基多糖等5种组分构成的动态大分子复合体，该结构成分在体移植后可充当自体表皮移植物的载体，通过调节宿主细胞的功能和活性，达到改善和提高复合皮结构和功能的目的。     

让皮肤年轻的秘密

皮肤的结构 皮肤是由表皮、真皮、皮下组织三部分组成的。1、表皮：表皮与外界接触最多,只有普通纸一样薄,最厚处也不过0．2毫米,是由下面的基底层发育而成。基底层由基底细胞和黑色素细胞组成。黑色素细胞产生黑色素。     

无细胞真皮基质的研制

目的研制人同种脱细胞真皮基质,用于大面积深度烧伤后真皮成分的替代、美容医学中的填充及皮肤组织工程中的支架材料。方法获得的正常人新鲜尸体皮肤,用高渗盐溶液去除表皮,十二烷基硫酸钠、胰蛋白酶等处理以去除真皮中的细胞成分,得到人同种脱细胞真皮基质,经光镜、电镜和免疫组织化学分析。结果经处理后得到的人无细胞真皮基质,完全去除了表皮和真皮中的细胞成分,保留了完整的基底膜复合物,胶原束结构和排列正常,弹力纤维结构正常。结论用此方法制备无细胞真皮基质,能完全去除表皮和真皮中的细胞成分,不改变真皮中胶原纤维和弹力纤维结构,其制备工艺操作性强,是一种简单有效的制备方法。     

无细胞异种真皮与自体薄皮片移植的术后护理

无细胞真皮基质是以提供移植皮肤足够量的真皮成分的一种永久性皮肤替代物，他对治疗深度烧伤创面及皮肤缺损具有很大的临床意义，采用无细胞真皮基质与自体薄皮片移植术，对当前解决植皮外观和功能起到相当重要的作用。1999年2月-2004年3月，我院进行无细胞异体真皮基质与自体薄皮片移植，治疗深度烧伤创面及疤痕畸形患者15例均获得成功．收到了明显的效果。该术的成功与术后护理有非常重要的关系。现将术后护理报道如下：     

一种脱细胞真皮基质（ADM）制备方法的实验研究

目的：优化实验条件，建立提取脱细胞真皮基质的可靠方法。方法：选择20例包皮环切术后切除包皮为研究材料，用胰蛋白酶的消化方式、高渗盐水分离皮肤表皮，用去垢剂法和胰蛋白酶去除真皮细胞成分，用组织病理学，抗原性和生物原性观察制备后细胞真皮基质进行鉴定。结果：20例同种异体真皮在组织学、抗原性及生物原性体征方面符合真皮基质的特性。结论：用酶消化法分离皮肤表皮，用酶消化法祛除真皮细胞成分，方法可靠，操作简单，制备脱细胞基质，符合真皮基质的特征，制成的真皮基质真皮基底膜完整，抗原性小，是理想的组织修复材料。     

脱细胞异种真皮基质与自体薄皮片复合移植治疗创面全层软组织缺损

人体真皮组织的主要成分是胶原,其富于弹性,质地致密坚韧。因此使皮肤具有柔韧性和耐久性,Ⅲ°烧伤切痂创面,应用薄皮片移植愈合后因缺少真皮,皮肤弹性差,挛缩严重。在真皮替代物中,天然异体真皮、复合皮、人工皮等因排异及其它原因尚未取得满意而可信的临床结果。我科自2000年4月至2005年2月应用异体脱细胞真皮与自体薄皮片复合移植修复16例全层软组织缺损,现报道如下。资料与方法1·一般资料本组16例,男12例,女4例。年龄5~60岁。深度烧伤切痂病人10例14个创面,皮肤撕脱伤及其它外伤后皮肤软组织缺损6例6个创面。均采用异种脱细胞真皮基质…     

脱细胞异体真皮加自体表皮复合移植20例

脱细胞真皮是将异体或异种真皮中的细胞去除,保留了细胞外基质,降低了抗原性,脱细胞异体真皮与自体表皮细胞复合移植,两者之间连接紧密,形成完整的表皮真皮复合组织,国内外已广泛应用于烧伤整形创面的覆盖、软组织填充等领域。我科应用脱细胞异体真皮加自体表皮复合移植20例,均获得成功,修复了创面并取得了满意的整形美容效果,现报告如下。     

组织工程皮肤支架材料的研究和发展

组织工程化皮肤是指由细胞或细胞外基质或由两者共同结合组成的皮肤产品,是应用生命科学和工程学的原理与技术将种子细胞与适当的支架材料相结合构建出的用于修复、维护和改善损伤皮肤组织功能和形态的生物替代物。组织工程支架材料在人工皮肤的构建中起着重要作用,支架材料的研究及其优选是人工皮肤的重要研究内容之一,按化学性质可将其分为合或类与生物类,它们各有优缺点,现分别将其研究现状及其发展作一综述。     

雄激素、 雌激素受体在尿道下裂患儿阴茎皮肤中的表达

摘要： 目的 探讨雄激素受体 （AR） 及雌激素受体 （ER） 在尿道下裂患儿阴茎不同部位表皮及真皮中的分布特点。方法 收集 30 例尿道下裂患儿阴茎背侧皮肤 （背侧组）、 异位尿道口腹侧皮肤 （腹侧组） 及尿道板皮肤组织 （尿道板组）, 应用免疫组织化学检测各组中 AR 和 ER 在表皮和真皮成纤维细胞中的表达情况, Image Pro plus 6.0 分析 AR 和 ER 在不同部位的表皮和真皮中的光密度 （OD） 值。结果 各组 AR、 ER 主要表达于阴茎皮肤基底细胞及棘细胞的细胞核, 也表达于真皮成纤维细胞的细胞核。AR 在表皮中的表达, 尿道板组低于背侧组和腹侧组 （P＜0.05）; 各组 AR 在真皮成纤维细胞中的表达差异无统计学意义。ER 在表皮中的表达, 背侧组高于腹侧组和尿道板组 （P＜ 0.05）; ER 在真皮成纤维细胞中的表达, 背侧组、 腹侧组和尿道板组呈依次升高趋势 （P＜0.05）。结论 阴茎尿道板组织中 AR 表达数量减少在尿道下裂发生中起重要作用, 阴茎皮肤真皮成纤维细胞中 ER 表达的失衡可能参与了尿道下裂的发生。     

你了解自己的皮肤吗？

皮肤位于人体的表面，是人体的第一道防线．故有人体卫士之称。据研究证实．皮肤由表皮、真皮和皮下脂肪三层组成。表皮由数层上皮细胞重叠而成，最表面的是衰老死去的细胞，平时我们常见的皮屑就是衰老脱落的细胞。可千万别以为这些表层的细胞是老而无用的，它是真皮和皮下脂肪的重要保护屏障。真皮是皮肤中最重要的一层．含有丰富的毛细血管，皮脂腺、汗腺．充满了弹力纤维、胶原和透明质酸，还有毛发。正是这些腺体分泌的水分和油脂滋润着皮肤，而丰富的弹力纤维和胶原叉使皮肤富有弹性。     

小型香猪组织工程皮肤移植后基底膜重建的实验研究

目的研究贵州小型香猪来源的组织工程皮肤自体及同种异体移植后基底膜形成情况,为复合壳多糖组织工程皮肤临床应用提供实验依据。方法按我科已建立的方法构建猪的组织工程皮肤,然后进行自体及同种异体移植实验,观察移植的猪组织工程皮肤的存活及创面愈合情况,并于移植后1、4、8周取标本,行组织学检查和免疫组化染色,观察移植后猪组织工程皮肤基底膜形成情况。结果猪组织工程皮肤自体及同种异体移植后均存活,创面达到理想的愈合效果,组织学检查显示表皮明显增厚,表皮突明显,真皮胶原束显著增粗变密,新生血管网丰富。PAS染色基底膜带呈完整连续阳性。免疫组化染色显示:表、真皮交界处层粘连蛋白抗体免疫组化染色阳性。结论我们构建的猪组织工程皮肤自体及同种异体移植后,可获得理想的创面愈合效果,组织工程皮肤基底膜形成完整,与正常皮肤相似。本实验为复合壳多糖组织工程皮肤临床应用提供了有力的实验依据。     

体外构建新型化妆品检测用皮肤Inspectskin Ⅰ的初步研究

目的 探讨ES源表皮干细胞(ESC)与高分子材料构建人工皮肤Inspectskin Ⅰ的方法,为化妆品皮肤毒性检验替代模型奠定基础.方法 采用嵌入式培养法,先将3-羟基丁酸-co-3-羟基戊酸共聚物(PHBV)支架与原代小鼠成纤维细胞共培养5 d构建真皮,再于表面放置ESC细胞,气-液界面培养7～10 d,形态学和β1整合素、CK10、CK19免疫组化观察.结果成纤维细胞可在真皮支架内粘附,ESC细胞可在支架表面增殖分化形成含基底层、棘层和角化层的复层表皮结构,免疫组化表明基底层以上细胞中表达CK10明显增多,基底层有些细胞仍呈β1整合素和CK19阳性.结论 Inspectskin Ⅰ替代皮肤模型是由ESC细胞分化形成的角化复层表皮结构和PHBV真皮结构共同构成的全层皮肤模型.     

烧伤皮肤替代物研究进展

对于烧伤引起的大面积皮肤缺损来说,使用理想的皮肤替代物尽早封闭、修复缺损皮肤是非常重要的.多年来人们研制和应用了多种生物皮肤替代物和人工合成皮肤替代物用于烧伤创面的暂时性或永久性的覆盖,并取得了很大的成就.本文就烧伤皮肤替代物的研究进展进行综述,并对目前存在的问题和未来研究方向进行介绍.     

脂质体混悬液对荧光素钠在大鼠皮肤分布的影响

目的 :研究脂质体混悬液对荧光素钠在大鼠皮肤分布的影响。方法 :以0 125 %荧光素钠溶液为对照,在激光共聚焦显微镜下观察不同时间点0 125 %荧光素钠脂质体混悬液 (试验组 )荧光素钠在皮肤表皮、真皮分布的情况。结果 :试验组表皮及真皮荧光强度峰值与对照组比较均具有统计学差异 (P<0 05) ;试验组表皮及真皮内荧光强度值曲线下面积分别是对照组的2 09倍和2 4倍 ;试验组切片中毛囊周围的荧光强度值大于对照组。结论 :脂质体混悬液能使药物在皮肤组织中保持较高的浓度 ,从而提高其生物利用度 ;毛囊是脂质体制剂中药物扩散的重要途径。     

酮洛芬及其异丙酯对HaCaT细胞构建的组织工程皮肤的渗透作用

目的体外构建适用于经皮给药研究的组织工程皮肤。方法以表皮角质形成细胞系HaCaT细胞及人真皮成纤维细胞为细胞来源，用I型牛胶原蛋白为真皮基质包埋成纤维细胞，其上接种HaCaT细胞，采用气-液界面方式培养，观察不同的培养介质对组织工程皮肤的影响，HE染色切片观察培养皮肤结构形态。以酮洛芬及其异丙酯为模型药物研究经皮渗透和代谢特性。结果HaCaT细胞经气-液界面培养可形成类表皮层，但不能形成完整的角质层。维生素C可明显促进细胞增殖，维生素D₃可促进细胞分化，雌二醇对此组织工程皮肤没有明显的影响。同皮肤细胞匀浆代谢相似，酮洛芬异丙酯被代谢成原药酮洛芬。结论HaCaT细胞在气-液界面培养条件下可形成多层分化不完全的表皮层，保留了一定的酶活性，可用于药物的经皮渗透和代谢等研究。