上皮性卵巢癌患者溶血磷脂酸测定及其临床意义

目的研究溶血磷脂酸(LPA)与上皮性卵巢癌之间的相关性.方法上皮性卵巢癌患者37例作为实验组,同时随机选取卵巢良性肿瘤患者35例作为对照组,分别检测上述患者血浆LPA水平,结合免疫组化方法观察卵巢癌组织和卵巢良性肿瘤的增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果卵巢癌患者血浆LPA水平(6.10±2.62)μmol/L,卵巢良性肿瘤患者血浆LPA水平(2.35±1.57)μmol/L,两组比较差异有显著性意义(t=7.35,P＜0.01).实验组患者PCNA表达显著高于对照组(t=30.70,P＜0.05).结论LPA在上皮性卵巢癌患者血浆中明显升高,可能是上皮性卵巢癌早期诊断的一个重要潜在指标.     

溶血磷脂酸与卵巢癌

卵巢位居盆腔,癌变早期无明显症状,约2/3患者初诊时已发生转移,因此迫切需要一种理想的早期诊断方法.局限于腹腔的广泛种植转移和大量腹水的形成是卵巢癌的重要特征,阻断癌细胞的浸润转移、控制腹水形成将明显改善卵巢癌的治疗效果,溶血磷脂酸(LPA)是新近发现的一种细胞间磷脂类信号分子,它通过G蛋白偶联受体引起多种生物学效应,被称为是多功能的"磷脂信使"[1].现将LPA在卵巢癌方面的研究综述如下.     

卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸测定及临床意义

目的探讨卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸（LPA）表达水平及其临床意义。方法观察LPA对卵巢癌细胞增殖力的影响;测定卵巢癌患者48例、卵巢良性肿瘤患者20例及14例健康妇女的血浆LPA水平,并作对比分析。结果 LPA可增加细胞的增殖能力,且存在剂量依赖性。正常妇女和卵巢良性肿瘤患者血浆LPA水平无统计学意义;卵巢上皮性癌患者血浆LPA水平显著高于正常妇女和良性卵巢上皮性肿瘤患者（P〈0.01）。结论 LPA与卵巢癌的发生发展相关,对卵巢上皮性癌的诊断和病情监测具有潜在的临床应用价值。     

内皮素参与溶血磷脂酸促血管平滑肌细胞的增殖

目的 :观察内皮素 (endothelin ,ET)对溶血磷脂酸 (lysophosphatidicacid ,LPA)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用。方法 :离体培养的VSMCs经不同浓度的LPA孵育后测定 [3 H] 胸腺嘧啶 (3 H TdR)掺入 ,ETmRNA含量及ET的合成和释放量。结果 :LPA(5、10和 2 0 μmol·L-1)增加VSMCsETmRNA表达 ,VSMCsETmRNA含量分别较对照组高 16 %、2 1%和 2 3%。LPA亦以浓度依赖的方式增加VSMCsET的合成释放。 5～2 0 μmol·L-1LPA处理组细胞培养上清中ET含量较对照组高 14 0 %～ 2 0 0 % (P <0 .0 1)。 5～ 2 0 μmol·L-1LPA以浓度依赖的方式促进VSMCsDNA合成 ,非选择性的ETA 受体拮抗剂BQ12 3显著拮抗LPA刺激的VSMCs的DNA合成增加。结论 :LPA可促进VSMCs的ET产生 ,LPA的促VSMCs增殖效应部分是通过ET/ETA 受体途径介导。提示LPA和ET作为内源性活性物质相互协调发挥其生物学效应     

溶血磷脂酸与卵巢癌的关系研究进展

近20年来,卵巢上皮性癌的治疗效果一直未能根本改善,5年生存率徘徊于30%～40%,死亡率居妇科恶性肿瘤首位,其主要原因是70%的患者在就诊时已为晚期,治疗后70%的患者将会复发,难以治愈。而Ⅰ期卵巢癌的5年生存率可达90%。     

溶血磷脂酸刺激兔血管平滑肌细胞增殖的信号转导途径

目的：探讨溶血磷脂酸（ＬＰＡ）刺激兔血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的信号转导途径，方法：在培养的家兔血管平滑肌细胞上，测定＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）参入和丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性。结果：ＬＰＡ呈浓度依赖地刺激＾３Ｈ－ＴｄＲ参入，并平行地激活ＭＡＰＫ二间呈显正相关，乙二醇－双（氨基乙酯）－四乙酸（ＥＧＴＡ）尼卡地平，ｒｙａｎｏｄｉｎｅｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎｈｅｒｂｉｍｙｃ     

溶血磷脂酸与卵巢癌的分子机制

溶血磷脂酸（LPA）的功能逐渐受到重视，LPA与卵巢癌细胞的发生、发展、浸润、转移等密切相关，阻断LPA的一系列级联反应有可能成为治疗卵巢癌的新途径。     

溶血磷脂酸早期诊断卵巢癌的价值

[目的]探讨应用溶血磷脂酸(LPA)早期诊断卵巢癌的价值。[方法]收集卵巢癌35例,良性卵巢肿物34例,两组患者分别进行LPA检测,并对LPA检测结果进行比较。[结果]两种不同标记物检测卵巢癌结果评价,LPA检测卵巢癌的敏感性=85.7%,特异性=94.1%,准确性=89.9%;CA125检测卵巢癌的敏感性=57.1%,特异性=76.5%,准确性=66.7%。[结论]①LPA可能成为一种新的检测卵巢癌标记物。②应用这两种标记物早期诊断卵巢癌,LPA与CA125相比,LPA可能更有临床价值。     

溶血磷脂酸对脊髓星形胶质细胞增殖的影响

目的观察溶血磷脂酸(LPA)对体外培养脊髓星形胶质细胞增殖的影响。方法采用原代培养的大鼠脊髓星形胶质细胞,实验分为对照组(正常培养液培养)和LPA干预组(含有10μmol/L LPA的培养液培养);在不同时间点(0、6、12、24和48h),计数各组的细胞数目,采用Western blot和流式细胞术检测各实验组增殖细胞核抗原(PCNA)表达量变化及细胞周期进展情况。结果免疫荧光染色显示原代培养的脊髓星形胶质细胞纯度达98%;在各观察时间点,对照组和LPA干预组的星形胶质细胞的细胞增殖数目、PCNA蛋白表达量及细胞周期分布情况均无显著差异(均P>0.05)。结论 LPA对体外培养脊髓星形胶质细胞的增殖活力和细胞周期进展并无显著影响。     

溶血磷脂酸与卵巢癌的关系

溶血磷脂酸是一种脂类小分子物质,具有多种生物学功能。近年的研究发现在卵巢癌患者腹腔积液及血浆中存在高浓度的溶血磷脂酸,并与卵巢肿瘤的生长、浸润、转移有关。可作为卵巢癌早期诊断的生物学指标及治疗靶点。     

全反式维甲酸对人卵巢癌细胞株COC1增殖分化的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对人卵巢癌细胞株COC1增殖分化的影响.方法:选用人卵巢癌细胞株COC1进行体外培养,以不同浓度的ATRA处理COC1细胞,MTT比色法检测细胞增殖抑制情况;流式细胞仪进行细胞周期时相分析;光镜及透射电镜进行形态学观察;免疫细胞化学法测定细胞内增殖细胞核抗原Ki-67的表达;酶联免疫法测定培养液中卵巢癌标志物CA125水平的变化.结果:ATRA浓度为10～10-5mol/L时,均明显抑制COC1细胞的增殖;ATRA处理COC1细胞后G0/G1期细胞增加,S期细胞减少.经ATRA处理的COC1细胞发生显著形态学分化,Ki-67表达减弱,培养液中CA125的表达水平降低.结论:ATRA能明显抑制人卵巢癌细胞株COC1的生长增殖并诱导部分细胞向良性分化.     

溶血磷脂酸对心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的：观察溶血磷脂酸（LPA）对体外培养心脏成纤维细胞（CF）的细胞增殖和胶原合成的影响。方法：用消化法培养新生SD大鼠的CF，实验分为四组。对照组（加含5％小牛血清的DMEM培养液），实验组根据不同浓度的LPA又分为10^-6μmol／L组、10^-7μmol／L组和10^-8μmol／L组。用单四唑（MTT）比色法测定细胞增殖，羟脯氨酸碱水解法测定胶原合成，分别观察不同浓度LPA对CF增殖和胶原合成的影响。结果：①随着LPA浓度的升高，MTT比色法吸光度（A490）值呈上升趋势。在药物作用48h后，仅有10^-6μmol／L组A。值较对照组有显著升高（P〈0．05）；作用至72h后，10^-8μmol／L组、10^-7μmol／L组、10^-6μmol／L组A490值均较对照组显著升高（P〈0．05）；作用至96h后，各实验组A。值较对照组均有显著升高（P〈0．05和P〈0．01）。②随着LPA浓度和作用时间的增加，CF分泌的胶原呈递增趋势。LPA作用48h仅10^-6μmol／L组胶原浓度较对照组显著升高（P〈0．01）；作用至72h后，10^-7μmol／L组、10^-8μmol／L组胶原含量较对照组有显著升高（P〈0．05和P〈0．01）；作用至96h，各实验组胶原含量均较对照组有显著升高，10^-6μmol／L组与10^-7μmol／L组、10^-8μmol／L组之间差异亦有显著性意义（P〈0．05）。结论：LPA具有促进SD新生大鼠CF增殖和胶原合成的作用。     

卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸水平及Edg-2/Edg-7表达研究

目的:探讨卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸(LPA)水平及其受体Edg-2/Edg-7在卵巢肿瘤组织中的表达情况。方法:测定卵巢恶性肿瘤57例、良性肿瘤66例及健康对照37例血浆LPA水平,并用RT-PCR方法检测其中正常卵巢组织16例、卵巢恶性肿瘤24例及卵巢良性肿瘤组织32例Edg-2/Edg-7mRNA的表达情况。结果:卵巢恶性肿瘤,良性肿瘤及健康对照者血浆LPA水平分别为(5.63±2.35)μmol/L、(2.80±1.13)μmol/L(、2.51±1.08)μmol/L,前者血浆LPA水平与后两者相比,差异有统计学意义(P<0.01);后两者之间血浆LPA水平差异无统计学意义(P>0.05)。Edg-7的表达水平恶性肿瘤组织高于良性及正常卵巢组织(P<0.01);Edg-2的表达卵巢低于后两者(P<0.01)。结论:血浆LPA及其受体Edg-2/Edg-7可能成为治疗卵巢恶性肿瘤的新靶点。     

NS398逆转溶血磷脂酸拮抗顺铂抑制卵巢癌细胞增殖作用的研究

目的:观察环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂NS398对溶血磷脂酸(Lysophosphatidic acid,LPA)拮抗顺铂抑制卵巢癌细胞细胞增殖作用的影响,并探讨其可能机制.方法:体外培养人卵巢癌细胞3AO,MTY法检测NS398对LPA拮抗顺铂抑制3AO细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期变化;RT-PCR检测LPA单独或合用NS398对3AO细胞表达COX-2的影响.结果:LPA对顺铂抑制卵巢癌细胞增殖有拮抗作用,并降低G_0/G_1期的细胞比率;联合用NS398后,卵巢癌细胞的生长显著受抑制,同时G_0/G_1期细胞比率上升;RT-PCR结果显示40μmol/L LPA能促进COX-2的表达,而合用NS398后COX-2表达降低.结论:NS398可能通过抑制COX-2表达,实现逆转LPA拮抗顺铂抑制卵巢癌细胞细胞增殖的作用.     

卵泡刺激素对卵巢癌细胞株增殖、凋亡和迁移侵袭的影响

目的 观察卵泡刺激素（FSH）对卵巢癌细胞株SKOV-3和ES-2细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响。方法将FSH以不同浓度（10、20、40、80、160mU／m1）分别作用于1×10^5或2．5×10^6个SKOV-3细胞和6×10^4或1．5×10^6个ES-2细胞,FSH0mU／ml为对照组,其中FSH作用于SKOV-3细胞的适宜时间为48h,ES-2细胞为24h,分别测定细胞的增殖活性;细胞凋亡和细胞周期情况;细胞培养上清液中基质金属蛋白酶2（MMP-2）的活性;SKOV-3和ES-2细胞内MMP-2蛋白及mRNA表达的变化;细胞的迁移侵袭能力。结果 （1）随着FSH浓度的增加,SKOV-3细胞的增殖活性升高,与对照组相比差异均有统计学意义（均P〈0．01）。（2）随着FSH浓度的增加,SKOV-3细胞的凋亡率下降,分别为0．94％±0．06％、0．71％±0．03％、0．22％±0．02％、0．32％±0．02％、0．55％±0．05％,与对照组（1．30％±0．10％）比,差异均有统计学意义（均P〈0．01）。（3）FSH浓度自40mU／ml起,SKOV-3细胞G0／G1（均P〈0．05）。（4）FSH可提高SKOV-3细胞MMP-2mRNA和胞质中MMP-2蛋白含量及细胞培养上清液中MMP-2的活性。（5）侵袭实验：SKOV-3细胞加FSH组和对照组穿透基底膜细胞数分别为（157±20）、（27±9）个／高倍镜（×200）,两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;划痕实验也显示FSH提高了SKOV-3细胞的迁移能力。FSH作用于ES-2细胞的表现与SKOV．3细胞基本一致。结论 FSH可促进卵巢癌细胞株SKOV-3和ES-2细胞增殖、迁移和侵袭,抑制细胞的凋亡。     

XIAP、survivin、LPA及CA125在上皮性卵巢癌中的表达

目的：探讨上皮性卵巢癌患者的组织标本中survivin mRNA和XIAP mRNA及血浆LPA和血清CA125表达与卵巢癌患者临床病理学指标的关系。方法：采用逆转录－聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测50例上皮性卵巢癌及12例正常卵巢组织标本中survivin mRNA和XIAP mRNA的表达,检测50例卵巢癌、44例卵巢良性疾病患者及20例健康女性血浆LPA和血清CA125的表达情况。结果：在正常卵巢标本与卵巢癌标本中,XIAP mRNA的阳性表达率分别为2/12（16.7%）、37/50（74%）,差异有统计学意义（P<0.05）;survivin mRNA的阳性表达率分别为0、42/50（84%）,差异有统计学意义（P<0.05）。survivin mRNA与XIAP mRNA在卵巢癌组织中的表达呈正相关rs=0.03(P<0.05)。XIAP、survivin表达与肿瘤的病理分期、病理类型、淋巴结转移和腹水形成有关（P<0.05）。卵巢癌组血浆LPA均值为(7.67±3.02)μmol/L,阳性率为78.0%;卵巢良性疾病组LPA均值为(2.734±1.471)μmol/L,阳性率为27.3%,健康对照组LPA均值为(1.557±1.294)μmol/L,阳性率为5.0%,三者间的差异有统计学意义（P<0.05）。卵巢癌的诊断中LPA的特异度为75.0%,高于CA125;早期卵巢癌的诊断中二者联合检测的灵敏度最高,为85.7%;LPA的灵敏度为71.4%,高于CA125的28.6%,差异有统计学意义（P<0.05）。Ⅱ～Ⅳ期患者血浆LPA水平较Ⅰ期显著升（P<0.01）;Ⅱ～Ⅳ期各期之间无显著性差异（P>0.05）。3种病理类型中LPA阳性率的差异无显著性（P>0.05）。结论: survivin和XIAP基因系重要的肿瘤相关基因,与卵巢癌的发生发展有关;血浆LPA诊断早期卵巢癌的特异性和敏感性均高于CA125,联合检测有较高的临床价值。     

消癥抑癌方对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移的影响

目的 探讨消癥抑癌方对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和迁移的影响及潜在作用机制。方法 利用网络药理学分析消癥抑癌方抗卵巢癌的关键活性成分和核心靶点,并通过基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析筛选其相关生物学过程和通路。制备消癥抑癌方含药血清,用含药血清处理卵巢癌SKOV3细胞。采用CCK-8法和EdU染色法检测消癥抑癌方含药血清对SKOV3细胞增殖的影响;采用划痕实验和Transwell迁移实验检测消癥抑癌方含药血清对SKOV3细胞迁移的影响;采用Western blotting法检测消癥抑癌方含药血清对SKOV3细胞自噬蛋白(P62)、自噬相关蛋白3(ATG3)、微管相关蛋白1轻链3 B(LC3B)及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白的影响。结果 网络药理学研究显示,消癥抑癌方抗卵巢癌的关键活性成分是槲皮素、山柰酚、木犀草素、汉黄芩素、柚皮素等,核心靶点是MAPK3、AKT1、SRC、MAPK1、TP53等。KEGG富集分析共得到171条通路(P<0.01),其中Degree值排名较靠前且与...     

脑缺血/再灌注损伤细胞凋亡中JNK信号通路及抑制剂SP600125的作用

c-jun氨基末端激酶(JNK)信号转导通路是细胞内作用蛋白网络的重要一环,参与胞外信号从细胞表面转导到细胞内部的过程,可被多种因素激活,在细胞的增殖与分化、形态维持、骨架构建和细胞凋亡等生物反应过程中发挥重要作用。脑缺血/再灌注损伤导致的细胞凋亡与丝裂原活化蛋白激酶家族有密切的关系,其中JNK信号通路是脑缺血/再灌注损伤中神经元凋亡进程的主要机制之一。大量实验提示,JNK信号转导通路及其抑制剂SP600125在脑缺血/再灌注损伤诱导的细胞凋亡中起重要的调控作用,应用JNK阻断剂可起到神经保护作用,通过对这些信号转导通路的组成及调节机制的研究,有望为临床上脑缺血疾病的治疗提供新的分子治疗靶点。     

溶血磷脂酸对移植肾血栓形成的预警作用

目的探讨在肾移植患者中监测血浆溶血磷脂酸(LPA)含量来判断体内凝血状态,评价血浆LPA水平对肾移植血栓性疾病早期诊断和积极预防的临床价值。方法入选患者150例,其中规律血透尿毒症患者50例(尿毒症组),肾移植患者(术后2周内)50例(肾移植组),50例健康者(对照组)。分别测定3组术后1～2周血浆中LPA水平,肾移植组术后2周内每日检测凝血功能常规、移植肾彩色多普勒及能量图(CDFI),计算部分凝血活酶时间(APTT)/凝血酶原时间(PT)值,记录移植肾主动脉、段动脉血流速度(VS)及阻力指数(RI)。结果术后1～2周,通过B超检查,肾移植组有血栓形成患者2例(血栓形成组),无血栓形成48例(无血栓形成组)。血栓形成组术后2周LPA浓度明显高于无血栓形成组(<0.01)。术后1周,无血栓形成组与尿毒症组及对照组LPA浓度差异均有统计学意义(均<0.01)。肾移植术后2周,血栓形成组与无血栓形成组肾主动脉及段动脉VS与RI差异均有统计学意义(均>0.05)。结论血浆中LPA作为体内凝血及血栓形成过程早期释放的标志物,对肾移植后移植肾血栓形成的诊断及指导合理应用抗血小板及抗凝药物有一定应用价值,可作为移植肾血栓形成的预警指标。