克拉霉素和头孢他啶对体外腹膜透析管大肠杆菌生物被膜的干预作用

目的通过在腹膜透析管(简称腹透管)上建立大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)生物被膜(bio-film,BF)模型,探讨克拉霉素和头孢他啶对腹透管E.coli BF的体外影响。方法按透析后无菌腹透液-腹透管系统建立体外E.coli BF模型。用试管二倍稀释法测定药物的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结晶紫染色法观察克拉霉素对E.coli形成BF的干预作用。1/4 MIC克拉霉素、1 MBC头孢他啶单独和联合作用(1/4MIC克拉霉素+1MBC头孢他啶)成熟BF后,以连续稀释法、结晶紫染色半定量法和扫描电镜(SEM)观察药物作用后BF的变化。结果腹透管上成功建立E.coli BF,1 d形成早期BF,7 d形成成熟BF。与对照组比较克拉霉素干预E.coli形成BF于1、3、7 d的酶标值均降低(P<0.05)。克拉霉素组、头孢他啶组、克拉霉素+头孢他啶组(联合组)与对照组比较,BF内活菌数和BF酶标值均减少,且联合组减少更显著(P<0.01)。SEM观察到联合组对成熟BF破坏更明显。结论本实验在腹透管上成功建立E.coli BF模型。克拉霉素可减少E.coli对腹透管的黏附和抑制E.coli BF的形成,且与头孢他啶联合对腹透管E.coli BF呈抗菌协同作用。     

Effects of mesna alone or combined with ciprofloxacin on Escherichia coli biofilm

目的 研究巯乙磺酸钠(Mesna)对大肠杆菌生物膜(biofilm,BF)形成的影响,以及单独及联合环丙沙星(ciprofloxacin,CIP)对大肠杆菌BF的作用.方法 琼脂平板稀释法检测Mesna、CIP的最低抑菌浓度,扫描电镜观察Mesna对大肠杆菌BF形成的作用,平板计数法检测Mesna单独及与CIP联用后BF内活菌数,用激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)观察Mesna对已形成的大肠杆菌BF空间结构的影响并结合BF图像结构分析软件(image structure analyer,ISA)定量分析BF结构参数.结果 Mesna能减少BF中基质样物质以及被膜的厚度;单用Mesna (8 mg/ml)才能使BF中的活菌数减少(P＜0.05),单用CIP 1 MIC才可使BF中活菌数降低(P＜0.05),小剂量Mesna(1 mg/nl)与1/2 MIC的CIP联合应用就可使BF上的活菌数明显减少(P＜0.05);CLSM图像显示经Mesna作用后的BF厚度逐渐减少,密度逐渐稀疏;ISA软件定量分析显示:5 mg/ml Mesna作用后,BF厚度、平均扩散距离(average diffusion distance,ADD)和结构熵(textual entropy,TE)均减少(P＜0.05),区域孔率(areal porosity,AP)增加(P＜0.05),2 mg/mlMesna干预后,效应不如高浓度明显.结论 Mesna能够抑制大肠杆菌BF形成,破坏成熟大肠杆菌BF形态结构;Mesra与环丙沙星存在协同作用,增强其杀菌能力.     

蹭行运动和胞外藻酸盐在铜绿假单胞菌生物被膜形成中的作用

目的 比较3株铜绿假单胞菌即含新的mucA基因突变的黏液型PA17、mucA基因经典突变的黏液型PD0300、含野生型mucA基因的非黏液型PA01生物被膜早期形成和成熟形态,探讨铜绿假单胞菌纤毛介导的蹭行运动和胞外基质藻酸盐在黏液型及非黏液型铜绿假单胞菌生物被膜形成中的作用.方法 用PAl7、PAO1、PD0300的单菌落穿刺接种1%琼脂糖平板,肉眼观察细菌纤毛介导的蹭行运动,测定细菌运动环评估3株细菌的蹭行运动能力;在生物被膜形成早期采用结晶紫对膜内黏附细菌染色,测定其吸光度(A)值,建立24 h内3株细菌的黏附曲线;建立未饱和铜绿假单胞菌生物被膜模型,检测早期和成熟期的胞外藻酸盐分泌;将含绿色荧光蛋白的pUCP/UV质粒转化3株铜绿假单胞菌,在激光共聚焦显微镜下观察静态生物被膜不同时期的形态和结构.结果 黏液型PA17、非黏液型PAO1菌株蹭行运动的直径小于黏液型PDO300(P<0.05),PA17、PAO1的运动能力弱于PDO300菌株;黏液型PDO300在早期生物被膜形成中黏附能力最强,非黏液型PAO1次之,黏液型PA17最弱;在未饱和生物被膜早期和成熟期黏液型菌株PA17、PDO300藻酸盐合成均明显高于非黏液型菌株PAO1(P<0.05),而PA17和PDO300在生物被膜相同时期的藻酸盐合成无明显差异(P>0.05);激光共聚焦显微镜下PA17菌株在生物被膜形成中,不可逆黏附形成明显迟于非黏液型PAO1和黏液型PDO300,PA17成熟生物被膜形态呈薄膜状,与非黏液型PAO1成熟生物被膜类似;而PDO300不可逆黏附形成早,成熟生物被膜形态呈蘑菇状.结论 纤毛介导的蹭行运动是早期生物被膜形成中黏附的重要方式,可能影响成熟生物被膜的形态;而藻酸盐不是早期黏附的主要决定因素,与成熟生物被膜形态无关.     

大肠杆菌细菌生物膜菌落计数实验技术改良初探

目的:应用高速离心技术对大肠杆菌生物被膜(biofilm,BF)菌落计数方法进行改良,为大肠杆菌BF实验提供更稳定、更简便计数条件.方法:采用1.5%腹膜透析液(乳酸盐)-腹膜透析留置管系统培养大肠杆菌BF,建模3 d.以对载体的处理时间不同设立对照组(30 min)和改良组(13 min),分别采用现有实验技术方法及使用高速离心技术改良方法处理BF内活菌,计算BF内活菌落数.结果:经两种方法处理后,计数菌落数差异无统计学意义(P＞0.05),且改良组[(5.96±0.320)lgCFU/mL]较对照组[(5.92±0.470)lgCFU/mL]实验数据结果离散程度更小,改良组较对照组实验时间更为节约.结论:生物被膜菌落计数实验,改良实验技术更优于现有技术.     

罗格列酮对大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化的影响

目的观察罗格列酮(rosiglitazone,RGZ)对腹膜透析所致腹膜纤维化的影响。方法 50只SD大鼠随机分为6组:空白对照组(n=5)、生理盐水(NS)组、模型组、二甲亚砜(DMSO)组、低浓度RGZ组、高浓度RGZ组(后5组n=9)。除空白对照组外其余大鼠均置入腹透管,除空白组和NS组外其余组均采用高糖腹膜透析液+红霉素制作慢性腹膜透析无菌性腹膜纤维化的大鼠模型。DMSO组、低浓度RGZ组、高浓度RGZ组分别采用DMSO、1.5mg/kg RGZ、15mg/kg RGZ治疗。透析5周后行1h腹膜平衡试验,检测血糖及血脂,计算超滤量(UF)、初始腹透液与透出液葡萄糖比值(D1/D0)、透出液与血浆尿素氮比值(D/Purea);处死大鼠,取壁层腹膜行H-E及Masson染色,观察腹膜形态改变,半定量计算腹膜单位面积血管数及炎症细胞数;免疫组化检测腹膜转化生长因子(TGF)-β1和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。结果与空白对照组相比,模型组和DMSO组间皮下基质增厚,血管增生及炎症细胞浸润增加(P<0.05);TGF-β1、α-SMA表达水平增高(P<0.05);RGZ能改善上述病理改变,下调TGF-β1、α-SMA表达(P<0.05);与空白对照组比较,NS组、模型组、DMSO组、低浓度RGZ组及高浓度RGZ组的超滤量和D1/D0减少,D/Purea增加(P<0.05),其中以DMSO组及模型组改变最为显著。两种剂量RGZ间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在大鼠腹膜透析模型中加用罗格列酮能有效保护腹膜功能,抑制腹膜纤维化。     

万古霉素血药浓度测定在腹膜透析相关性腹膜炎患者治疗中的作用

目的:研究万古霉素血药浓度测定在腹膜透析相关性腹膜炎患者治疗中的作用,为腹膜炎的治疗提供更多理论依据.方法:收集皖南医学院弋矶山医院2016年1月1日至2018年12月31日腹膜透析相关性腹膜炎患者的临床资料进行回顾性分析,按照万古霉素血药浓度将患者分成低浓度组(＜15 μg/mL)和高浓度组(≥15 μg/mL),分析2组患者性别、发病特征、年龄、透析龄、各项常规生化检测指标,以及尿量、腹膜透析退出率、体质指数、住院日的差异,logistic回归分析影响万古霉素血药浓度的因素.结果:近3年共发生106例次腹膜透析相关性腹膜炎,平均腹膜炎发生率为0.19次/风险年.透出液致病菌培养阳性共72例次(67.92％),其中革兰阳性菌39株(54.17％),革兰阳性菌中表皮葡萄球菌与金黄色葡萄球菌最常见,且均对万古霉素敏感.万古霉素低浓度组与高浓度组间体质指数、尿量、住院日存在明显差异.Logistic回归分析提示低密度脂蛋白(OR=2.240,P=0.038)、体质指数(OR=1.981,P＜0.001)、尿量(OR=1 3.749,P=0.010)是影响万古霉素浓度的主要因素.结论:万古霉素血药浓度测定为腹膜炎治疗提供更加合理的用药方案,具有重要的指导意义.     

万古霉素血药浓度测定在腹膜透析相关性腹膜炎患者治疗中的作用

目的:研究万古霉素血药浓度测定在腹膜透析相关性腹膜炎患者治疗中的作用,为腹膜炎的治疗提供更多理论依据.方法:收集皖南医学院弋矶山医院2016年1月1日至2018年12月31日腹膜透析相关性腹膜炎患者的临床资料进行回顾性分析,按照万古霉素血药浓度将患者分成低浓度组(＜15 μg/mL)和高浓度组(≥15 μg/mL),分析2组患者性别、发病特征、年龄、透析龄、各项常规生化检测指标,以及尿量、腹膜透析退出率、体质指数、住院日的差异,logistic回归分析影响万古霉素血药浓度的因素.结果:近3年共发生106例次腹膜透析相关性腹膜炎,平均腹膜炎发生率为0.19次/风险年.透出液致病菌培养阳性共72例次(67.92％),其中革兰阳性菌39株(54.17％),革兰阳性菌中表皮葡萄球菌与金黄色葡萄球菌最常见,且均对万古霉素敏感.万古霉素低浓度组与高浓度组间体质指数、尿量、住院日存在明显差异.Logistic回归分析提示低密度脂蛋白(OR=2.240,P=0.038)、体质指数(OR=1.981,P＜0.001)、尿量(OR=1 3.749,P=0.010)是影响万古霉素浓度的主要因素.结论:万古霉素血药浓度测定为腹膜炎治疗提供更加合理的用药方案,具有重要的指导意义.     

不同亚抑菌浓度头孢他啶抑制大肠埃希菌生物膜形成的量效分析

目的 分析亚抑菌浓度头孢他啶在抑制临床分离大肠埃希菌株生物膜形成过程中的浓度变化以及其作用机制.方法 根据CLSI倍比稀释法检测大肠埃希菌临床耐药株E46对15种抗生素的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),通过PCR检测其超广谱β-内酰胺酶(superspectrumβ-1actamase,ESBLs)相关基因的表达,采用高效液相色谱法(HPLC)分析头孢他啶在抑制E46生物膜形成过程中药物的浓度变化.结果 E46仅对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、呋喃妥因敏感,对头孢他啶等9种抗菌药物耐药,头孢他啶在1/16 ～ 1/2MIC范围内呈剂量依赖性地抑制E46生物膜的形成(P＜0.05),E46携带TEM和CTX-M-15型酶,在对E46生物膜的抑制过程中,头孢他啶的浓度逐渐降低.结论 亚抑菌浓度的头孢他啶可以抑制大肠埃希菌临床耐药株E46生物膜的形成,但其作用浓度随时间延长降低显著.     

氨苄青霉素和莫西沙星对流感嗜血杆菌生物被膜的抑制作用

目的：探讨氨苄青霉素和莫西沙星对体外流感嗜血杆菌早期及成熟生物被膜的抑制作用。方法：通过结晶紫染色测定吸光度值的变化,观察不同浓度下两种抗生素对早期及成熟生物被膜的影响。结果：1/8、1/64MIC浓度的氨苄青霉素和莫西沙星可抑制流感嗜血杆菌的粘附以及生物被膜早期的形成,1/8、1、8MIC浓度的莫西沙星可破坏成熟的流感嗜血杆菌生物被膜。结论：低浓度氨苄青霉素和莫西沙星可抑制流感嗜血杆菌生物被膜的形成,莫西沙星可破坏成熟的生物被膜。     

单核细胞增生李斯特菌SigmaB、PrfA因子对生物被膜形成影响的研究

目的 探讨单核细胞增生李斯特菌(listeria monocytogenes,LM)sigmaB、prfA基因与生物被膜(biofilm,BF)形成的关系.方法 利用微孔板技术,体外建立LM野生菌株EGD、ΔsigmaB、ΔprfA及无害李斯特菌(listeria innocua)生物被膜模型,经1%结晶紫溶液染色,间接反映生物被膜的形成情况,并用倒置显微镜直接观察4种菌株生物被膜的形成情况.结果 ①利用结晶紫染色与倒置显微镜观察相结合的方法,实现了对上述4种菌株生物被膜形成差异的比较;②结晶紫染色结果显示:在595nm波长下,EGD光吸收值最高,ΔsigmaB与ΔprfA菌株次之,无害李斯特菌最低.统计学分析结果显示,EGD与ΔsigmaB、ΔprfA菌株差异不显著(P>0.05),EGD与无害李斯特菌之间存在显著差异(P<0.01);③倒置显微镜观察结果显示:EGD能形成致密的链网状膜结构,交联度较高;ΔsigmaB、ΔprfA形成的链网状膜结构相对比较疏松,交联度稍低;无害李斯特菌几乎没有成型的链网状膜结构形成.结论 实验结果表明LM生物被膜的形成与调控因子sigma B(σB)、prfA的作用有关,并且LM与无害李斯特菌之间生物被膜的形成差异暗示着生物被膜的形成可能与LM的致病性有关.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。