半边旗提取物5F对人结肠腺癌细胞株SW620埃兹蛋白表达及活性影响

目的 观察半边旗提取物5F对人结肠腺癌细胞株SW620的埃兹(Ezrin)蛋白表达及活性影响.方法 采用四氮甲唑蓝[3-(4,5-dimethyhhiazol-2-yl)-2,5-diphenyhetrazolium bromide,MTT]检测5F对SW620细胞的增殖抑制作用,采用逆转录-聚合酶链反应(revers...     

半边旗提取物5F诱导HepG2细胞凋亡与p53活化及血管内皮生长因子抑制有关

目的 观察半边旗提取物 Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid (5F) 对人肝癌细胞 HepG2 增殖的影响,并探讨 p53、血管内皮生长因子 (VEGF) 及 Caspase3 在 5F 诱导的 HepG2 细胞凋亡中的作用。方法 采用 MTT 分析检测 5F 对 HepG2 细胞增殖的影响,并通过细胞凋亡检测 ELISA 试剂盒分析经 5F 处理的 HepG2 细胞胞浆核小体片段,以确定5F能否诱导细胞凋亡,采用 Hoechst/PI 分析鉴定凋亡细胞核形态。通过免疫印迹 (Western blotting)分析测定 p53 及 VEGF 蛋白表达水平,并通过 Caspases-3 分光光度法检测试剂盒检测 Caspase-3 活性。结果 通过细胞活性分析证实,5F 对 HepG2 的细胞毒作用随着 5F 质量浓度的升高而增强。5F 诱导 HepG2 产生胞浆核小体片段,并且该诱导作用具有剂量依赖性。5F 处理后,凋亡变化,如染色质浓缩,被 Hoechst/PI 染色所确定。5F 处理后 HepG2 细胞核内 p53 表达水平显著提高,而胞浆 VEGF 表达水平却下降,同时,Caspase-3 活性通过浓度依赖方式增强。结论 5F 所诱导的 HepG2 细胞凋亡与 p53 及 Caspase3 活化、VEGF负调控有关。5F 可能具有抗癌尤其是抗肝细胞癌价值。     

半边旗提取物5F对高转移卵巢癌细胞HO-8910PM细胞增殖的影响及作用机制的实验研究

目的:探讨半边旗提取物5F(简称5F)对人高转移卵巢癌细胞HO-8910PM细胞增殖的影响及其作用机制.方法:以MTT法检测5F对HO-8910PM细胞增殖的影响;流式细胞术分析5F对HO-8910PM细胞周期的影响;Western blot分析NF-κB(P65)、焦点粘附激酶(focal adhesionkinase,FAK)的表达及FAK酪氨酸磷酸化水平.结果:不同浓度的5F分别处理细胞24 h后,对HO-8910PM细胞增殖有明显的抑制作用;使G0/G1期的细胞减少,阻断细胞于G2/M期;5F可使NF-κB(P65)的表达下调,上调FAK的表达,并下调FAK酪氨酸磷酸化水平.结论:5F通过影响HO-8910PM细胞周期、下调NF-κB(P65)表达及促进FAK的表达来抑制细胞生长.     

半边旗提取物5F对肝细胞癌BEL-7402生长抑制作用及增殖细胞核抗原表达的影响

目的 研究半边旗提取物5F对肝细胞癌BEL-7402细胞生长的抑制作用.方法 MTT法检测5F对BEL-7402细胞的生长抑制作用;用Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡:流式细胞仪检测5F对细胞周期的影响;免疫细胞化学法检测5F对增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响.结果 5F抑制BEL-7402细胞的生长,其效果与5F的浓度和作用时间相关,24、48和72h的IC50分别为60.33、21.32和11.22 mg/L;荧光双染色法显示经5F作用后细胞出现变形,染色质浓缩,产生凋亡小体;细胞被阻滞在G2/M,PCNA阳性表达率降低.结论 5F在体外能有效地抑制BEL-7402细胞的生长,其诱导凋亡作用可能与下调增殖细胞核抗原(PCNA)表达有关.     

薄层色谱法鉴别半边旗和刺齿半边旗

目的：研究半边旗和刺齿半边旗化学成分的差异，促进用药安全、有效。方法：采用薄层色谱法，展开剂为石油醚：丙酮：冰醋酸（7：3：0．05）。结果：二者薄层斑点数目不同，荧光显色也有区别。结论：两种药材的化学成分有差异，不能盲目等同使用。     

半边旗提取物5F对人胃癌细胞凋亡的影响及其机制

目的探讨草药半边旗提取物Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid(5F)对人胃癌SGC7901细胞凋亡的影响及其机制。方法通过生存及细胞凋亡分析检测5F对SGC7901增殖的抑制效果。同时,采用免疫印迹法评价5F对SGC7901细胞Bcl-2及Bax表达的影响。结果 MTT分析证实了5F呈剂量依赖、时间依赖方式抑制SGC7901增殖。Annexin V-EGFP染色及caspase-3活化则确认了5F诱导的细胞凋亡。并且,该凋亡伴随着Bcl-2表达的降低、Bax表达的提高。结论 5F通过激活细胞凋亡线粒体途径诱导SGC7901细胞凋亡。     

薄层色谱法鉴别半边旗和刺齿半边旗

目的:研究半边旗和刺齿半边旗化学成分的差异,促进用药安全、有效。方法:采用薄层色谱法,展开剂为石油醚∶丙酮∶冰醋酸(7∶3∶0.05)。结果:二者薄层斑点数目不同,荧光显色也有区别。结论:两种药材的化学成分有差异,不能盲目等同使用。     

半边旗祛瘢乳膏的制备及皮肤安全性评价

目的制备半边旗提取物5F祛瘢乳膏,并对其安全性进行评价。方法将5F瘢痕乳膏涂敷于实验动物的完整和破损皮肤上,24h后观察其局部刺激作用、过敏反应和急性皮肤毒性,并与正常对照组相比较。结果局部应用半边旗祛瘢乳膏后对大鼠皮肤无刺激性,及在大鼠完整皮肤和破损皮肤均未见毒性作用,并且对豚鼠也不起过敏反应。病理学检查未见明显改变。结论半边旗乳膏是一种安全的外用制剂。     

半边旗中二萜类化合物5F对乳腺癌生长和转移的体内抑制作用

为研究半边旗中二萜类化合物5F在体内对乳腺癌生长和转移的影响及其作用机制,以MDA-MB-231乳腺癌原位移植模型观察5F抗乳腺癌的效应。在治疗的同时,观察5F对裸鼠的不良反应。以RT-PCR、Western blot法检测5F对乳腺肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)、激酶嵌入结构域受体(KDR)mRNA和蛋白表达的影响。结果显示,5F通过减少原发肿瘤体积和肺转移结节数目,显著抑制MDA-MB-231乳腺癌移植瘤的生长和肺转移。这种抑制转移的作用不依赖于其对原发肿瘤的生长抑制作用。5F对裸鼠的肝肾功能无明显的影响。5F抗MDA-MB-231乳腺癌作用机制与5F下调肿瘤组织VEGF、KDR mRNA和蛋白表达水平有关。     

半边旗5F对瘢痕成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的通过对天然药物半边旗5F对瘢痕成纤维细胞凋亡作用的研究,以期探寻新的治疗病理性瘢痕的有效药物。方法以四甲基偶氮唑(MTT)法、流式细胞术和原位末端标记技术检测半边旗5F对成纤维细胞增殖和凋亡的影响。结果半边旗5F对成纤维细胞的增殖具有显著的抑制作用,且呈现浓度和时间依赖性。采用流式细胞术和TUNEL法检测凋亡指数,均呈剂量依赖性增高(P<0.05)。结论半边旗5F对瘢痕成纤维细胞的增殖具有显著的抑制作用,并且能够诱导其发生凋亡,为寻找有效治疗增生性瘢痕的药物进行了新的尝试。     

克拉霉素的体外抗菌作用

测试克拉霉素对166株临床分离的革兰阳性和阴性菌的体外抗菌活性,并与其他8种抗生素进行对比。克拉霉素对肺炎球菌的抗菌活性和红霉素相似,前者的MIC_(50)及MIC_(90)分别为0.015mg/L和0.01mg/L,后者的MIC_(50)及MIC_(90)分别为0.015mg/L和0.03/L。克拉霉素对非产酶金葡菌的作用比红霉素约强8倍。0.5mg/L的本品即能抑制90％的各组链球菌,对流感杆菌的抑菌率也高这95％。结果表明克拉霉素的抗菌作用明显优于其他大环内酯类抗生素。     

Azone 对5—氟脲嘧啶体外透皮促进作用

本文研究了含乙醇、丙二醇的水溶液系统中的 Azone 对 5-Fu 的体外透皮促进作用,发现1%～4%浓度的 Azone 均可极显著地促进5-Fu 的透皮作用,且随浓度的增加而加强。但浓度大于4%时促进作用不再成比例的增加。含4% Azone 者可提高5-Fu 透皮作用189倍之多,其稳态透皮速度为12μg/min·cm~2。     

免疫珠试验检测抗精子抗体技术在体外受精-胚胎移植中的应用

对17对不明原因不育夫妇作了免疫珠试验以测定抗精子抗体,发现1例女性血清IgA抗精子抗体阳性;IgA免疫珠在活动精子头部的结合率达46％。该例先前作了IVF—ET治疗失败;回收的三个卵母细胞在自身血清制备的培养基中无一受精。故认为免疫珠试验测精子抗体技术可作为IVF—ET治疗前的一项常规检查,以排除不孕的免疫因素。     

STUDY OF IN VITRO ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF 19 ANTIMICROBIAL AGENTS AGAINST PSEUDOMONAS AERUGINOSA

The in vitro antibacterial activity of 19 antimicrobial agents against 40 strains of P aeruginosa was studied. The 19 antimicrobial agents included 7 semisynthetic penicillins, 6 third generation cephalosporins, 5 aminoglycosides and l quinolone agent. The minimal inhibition concentrations (MIGs) were measured by the serial dilution on solid agar. Ceftazidime was the most active in 19 antimicrobial agents again P aeruginosa (MIC50: I pg / ml, MIC90: 2 /ig / ml) Amikacin and ofloxaxin followed it in activity. Acylureido-penicillins, such as azlocillin, fur- benicillin and piperacillin were highly active against P aeruginosa, which could inhibit, 92.5%, 90% and 85% of these strains at a concentration of 8 µg/ml. Cefsulodine and cefoperazone were also active against the same strains, inhibiting 92.5% and 99% of the strains at a concentration of 8 µg / ml. The potency of the agents mentioned above against P.aeruginosa was similar to that of aminoglycosides. The drug susceptibility of 10 strains isolated in our hospital was compared with that of 29 strains of other hospitals in Beijing. The MICS of 5 penicillins and 3 cephalosporins against the isolates of our hospi- tal was higher than that of other hospitals, suggesting that the susceptibility of β-lactam antibiotics against isolates of our hospital was lower. The effects of combined use of azlocillin with oxacillin and piperacillin with ofloxacin against 4 strains of carbenicillin-resistant P aeruginosa was studied using check-board testing. The synergy and partial synergy were observed in both combinations.     

铜绿假单胞菌抗菌物质对白色念珠菌的

目的 观察铜绿假单胞菌抗菌物质对白色念珠菌的体外抑菌活性.方法 用交叉条带实验方法测定铜绿假单胞菌对18株白色念珠菌等的体外抑制活性.结果 铜绿假单胞菌抗菌物质对白色念珠菌体外抑菌活性良好,第6和8株铜绿假单胞菌对白色念珠菌的抑制率均达到了100%,铜绿假单胞菌产生色素的菌株抗真菌活性显著优于不产色素的菌株.铜绿假单胞菌抑制白色念珠菌的生长,主要是铜绿假单胞菌产生的绿脓素.结论 铜绿假单胞菌产生的抗菌物质对白色念珠菌具有较强的抗真菌活性.     

3种抗菌药物体外抗5种支原体的活性研究

采用液体与琼脂对倍稀释方法，测定了3种抗菌药物对5种支原体体外抗菌作用效果。结果显示：交沙霉素与泰洛星有较强的抗5种支原体作用。交沙霉素抗尿素支原体（Uu）、人型支原体（Mh）、口腔支原体的MIC50与MIC90作用相同，为0．0625与0．125μg／ml，抗唾液与精氨酸支原体为0．125与0．25μg／ml；泰洛星抗Uu、Mh的MIC50与MIC90，为0．5与1μg／ml，抗口腔支原体为0．25与1μg／ml，抗唾液支原作为0．25与0．5μg／ml，抗精氨酸支原体为0．5与1μg／ml；小檗碱抗唾液与口腔支原体的MIC50与MIC90为4与8μg／ml，抗Uu与Mh为8与16μg／ml，抗精氨酸支原体为16与32μg／ml。     

潘生丁增强5-氟脲嘧啶抗肿瘤作用的体外实验研究

通过检测 MKN45人胃癌细胞株3~H-TDR 掺入情况,在体外实验研究潘生丁和抗癌药物5-氟脲嘧啶之间的协同作用。结果表明二者间有显著的协同效应(P<0.01),为下一步的动物实验和临床应用提供了理论依据。     

白血病化疗药物MTT法体外敏感试验的临床意义（附14例分析）

应用ＭＴＴ法对１４例白血病患者进行了ＤＮＲ、Ｈａｒ、Ａｒａ－ｃ、ＶＣＲ、ＡＤＭ和ＶＰ＿（１６）等６种常用化疗药物的体外敏感试验及临床观察。按体外药敏结果选择药物组成方案进行化疗，杀伤指数＞５５％者占６６．７％，未按药敏结果组成方案进行化疗，杀伤指数＞５５％者仅占２５％，二者差异有显著性，表明体外药敏与临床用药间有一定关系。     

不同取材来源肝细胞体外培养的比较

目的：比较体外培养正常成年大鼠,大鼠乳鼠及人胎肝细胞的生物学性能,方法：采用不同的分离方法获取肝细胞进行体外培养,台盼蓝染色法测定细胞活率,MTT法检测细胞增殖活力,通过检测白蛋白分泌反映肝细胞的功能,结果：人胎肝细胞生长活力和蛋白合成功能最佳,乳鼠肝细胞次之,乳鼠肝细胞较人胎肝细胞易传代,成年大鼠肝细胞分离操作方便,但在体外存活时间较短。结论：不同取材来源的肝细胞体外培养性能有显著性差异（P＜0．05）。