核转录因子κB在非酒精性脂肪肝大鼠肝组织中的表达

目的观察高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝大鼠肝组织核转录因子κB(NF-κB)的表达、脂质过氧化损伤及血清细胞因子的变化情况,探讨非酒精性脂肪肝的发病机制.方法20只大鼠随机分为正常组10只、模型组10只,模型组予高脂饲料喂养,正常组予普通标准饲料喂养,连续12周,观察肝组织的病理改变,免疫组化法检测大鼠肝组织NF-κBp65的表达,TBA法检测肝匀浆MDA含量,黄嘌呤氧化酶法检测肝匀浆SOD活力,放免法测定血清中TNF-α、IL-6的含量,硝酸还原酶法检测血清NO含量.结果模型组大鼠肝组织可见重度脂肪变、炎症细胞浸润、肝细胞坏死、汇管区渗出.NF-κBp65在模型组大鼠肝组织中表达较在正常组中明显增高(P＜0.01),模型组大鼠肝匀浆MDA含量和血清TNF-α、IL-6、NO含量均较正常组明显升高,肝匀浆SOD活力则较正常组明显降低(P＜0.01或P＜0.05).结论高脂饮食可引起大鼠肝脏发生非酒精性脂肪变性,NF-κB参与了高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝损伤过程,在其发生发展中可能起重要作用.     

三七对酒精性肝病大鼠肝组织NF-κB/IκB表达的影响

目的 观察三七时酒精性大鼠肝组织的防治及时NF-κB/IκB表达的影响.方法 SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组、三七高、低剂量组和硫普罗宁组,连续14周建立酒精性肝病模型.在模型制备同时,每天下午分别灌服给药,连续14周.ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-α).常规HE及Masson染色,光镜观察肝组织的脂肪变、炎症及纤维化程度;免疫组化法检测肝组织中NF-κBp65/IκBα蛋白的表达.结果 酒精性肝病模型组大鼠肝组织脂肪变及炎症程度计分、血清TNF-α水平明显增高(P＜0.01).三七高、低剂量组,硫普罗宁组大鼠肝组织脂肪变及炎症程度、血清TNF-α水平较模型组明显减轻(P＜0.01,P＜0.05).酒精性肝病模型组大鼠肝组织NF-κBp65和IκBα均较正常组明显升高(P＜0.01);三七高、低剂量组大鼠肝组织NF-κBp65/IκBα表达较模型组明显降低(P＜0.01,P＜0.05).相关分析显示,肝组织NF-κBp65表达与肝组织炎症程度计分呈正相关(r=0.63,P＜0.01),与血清TNF-α水平呈正相关(r=0.43,P＜0.01);肝组织IκBα表达与肝组织炎症程度计分呈正相关(r=0.36,P＜0.05),与血清TNF-α水平呈正相关(r=0.44,P＜0.01);血清TNF-α水平与与肝组织炎症程度计分呈正相关(r=0.60,P＜0.01).结论 用白酒-玉米油-吡唑混合液灌服大鼠14周可成功制作ALD模型.三七可明显减轻酒精性肝病大鼠肝组织脂肪变和炎症程度.三七能显著抑制肝组织中NF-κBp65/IκBα的过度表达,降低血清TNF-α水平,这可能是其有效防治酒精性肝病的发生发展的重要机制之一.     

肾上腺素受体介导心脏纤维化模型中核转录因子NF-κB的活化

目的:应用非选择性β肾上腺素受体激动剂——异丙基肾上腺素(isoproterenol,ISO)连续皮下注射7d诱导心脏纤维化模型,并观察此模型中炎症调控核转录因子NF-κB的变化.方法:采用10周龄体重为280 ～320 g的SD大鼠,ISO以0.25 mg/(kg·d)剂量连续背部皮下注射7d诱导心脏纤维化模型.心脏组织切片进行苦味酸-天狼猩红染色观察纤维化,以胶原容量分数进行胶原面积定量统计.应用real-time PCR法检测心脏组织中Ⅰ型/Ⅲ型胶原及炎症因子IL-6的mRNA表达.组织切片进行HE染色观察心脏病理变化.免疫组织化学方法检测心脏组织中NF-κB在细胞内的定位,Western blot法检测心脏组织中磷酸化的NF-κB水平.结果:ISO诱导的心脏纤维化模型中天狼猩红染色面积明显大于对照(control,CON)组,且ISO组的胶原容积分数显著高于CON组(12.01±1.64vs.0.95±0.06,P＜0.001);ISO组Ⅰ、Ⅲ型胶原的mRNA表达显著高于CON组(Ⅰ型胶原:10.51±0.47vs.0.98±0.02,P＜0.001;Ⅲ型胶原:9.58±1.33 vs.1.02±0.02,P＜0.001).ISO组心脏组织中可见细胞核增多、聚集,提示可能炎症细胞浸润,且炎症因子IL-6的mRNA表达水平明显增加(1.64±0.18 vs.1.04±0.07,P ＜0.01).CON组NF-κB主要定位于心肌细胞胞浆中,心肌细胞核中未见NF-κB的定位;ISO组出现明显NF-κB核转位活化,心肌细胞胞浆中的NF-κB较CON组减少,心肌细胞核及间质细胞核均可见明显的NF-κB定位,同时,ISO组心脏组织磷酸化NF-κB的水平明显高于CON组(10.83±2.05vs.1.05±0.27,P＜0.001).结论:连续7d皮下注射ISO可成功诱导心脏纤维化模型,且此模型心脏组织中活化的核转录因子NF-κB增加.     

谷氨酰胺对克雷伯杆菌引起的大鼠肺炎炎症的抑制作用

目的 探讨谷氨酰胺对克雷伯杆菌引起的大鼠肺炎炎症的抑制作用及机制.方法 将36只SD大鼠随机分为3组,正常组、模型组、谷氨酰胺组,通过气管滴入克雷伯杆菌建立大鼠肺炎模型,谷氨酰胺组在造模前1d即腹腔注射10 mL/kg谷氨酰胺,正常组和模型组给予等量生理盐水,连续给药7d,大鼠脱颈处死,取肺组织及血清进行检测.称量记录右肺湿重及干重(W/D),HE染色检测肺组织病理形态,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肺组织匀浆及血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量,RT-PCR检测核因子-κB(NF-κB)p65和NF-κ:B抑制蛋白(IκBα) mRNA表达,Western blot检测NF-κB p6和IκBα蛋白表达.结果 与模型组比较,谷氨酰胺组能降低W/D比值5.98±0.29 vs.4.32±0.33(P＜0.05)],减轻肺组织充血水肿、炎性细胞浸润,改善肺组织形态,抑制血清和肺组织匀浆中TNF-α、IL-1β及IL-6的分泌(P＜0.05),并抑制NF-κB p65和kBα磷酸化水平(P＜0.05).结论 谷氨酰胺能抑制克雷伯杆菌引起的大鼠肺炎炎症,与抑制NF-κB信号通路有关.     

丹参对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂质代谢及脂肪细胞因子影响

目的:观察丹参注射液对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂质代谢、肝组织病理变化及脂肪细胞因子的影响,探讨其防治非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholic steato-hepatitis,NASH)的可能作用机制。方法:采用高脂饮食16周建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型,并用丹参注射液5 m L/(kg·d)进行干预治疗,观察各组大鼠肝湿质量、肝指数,血清及肝组织匀浆TG、TC含量,HE染色光镜观察肝组织脂肪变和炎症程度,ELISA法检测血清脂联素、TNF-α水平。结果:模型组大鼠肝湿质量、肝指数,血清及肝组织匀浆TG、TC含量升高,血清TNF-α水平升高,脂联素水平下降,肝组织炎症积分升高(P0.01);丹参治疗后肝组织炎症程度较模型组明显减轻,血清及肝组织匀浆TG、TC含量较模型组明显降低,血清脂联素水平较模型组增高,TNF-α水平较模型组显著下降(P0.01)。结论:丹参注射液能通过上调脂联素水平、下调TNF-α水平,降低肝脏脂质蓄积,从而抑制肝细胞炎症,防止NASH的进展。     

丹参抗急性肺损伤及其机制的研究

目的 探讨丹参对急性肺损伤(ALI)的预防、治疗作用.方法 32 只SD 大鼠随机分为模型组、对照组、丹参预处理及丹参干预组,每组8 只.鼠尾静脉分别注射生理盐水、脂多糖及丹参.造模6h后,观察肺组织形态学改变,测定左肺/ 体重比值,免疫荧光法测定肺组织中核转录因子-κB(NF-κB)、炎症因子(IL-6、TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1).结果 肺组织形态学显示模型组肺组织明显充血、水肿,并有炎性细胞浸润,而在丹参预处理组及丹参干预组上述表现明显减轻;肺/ 体重比值模型组[(5.12±0.25)mg/g]较对照组[(4.65±0.45)mg/g]明显升高,但丹参预处理组[(4.80±0.15)mg/g]及丹参干预组[(4.78±0.29)mg/g]较模型组明显降低(P＜0.01 或0.05);炎性因子(IL-6、TNF-α)、NF-κB 及ICAM-1 模型组较对照组分泌增多,但丹参预处理组及丹参干预组较模型组降低,且上述因子的分泌主要分布在血管内皮细胞附近.结论 丹参对ALI 起着预防和治疗作用,这种保护作用可能与抑制ICAM-1活性及NF-κB 信号转导途径有关.     

TNF-α和NF-κB基因在大鼠急性酒精性肝损伤中的表达及意义

目的 探讨TNF-α和NF-κB基因在大鼠急性酒精性肝损伤中的表达及意义.方法 将92只Wistar大鼠分为模型组(46只)和对照组(46只).采用灌胃法制备大鼠急性酒精性肝损伤模型,模型组给予56％酒精1Og/(kg·d),每日分3次灌胃,共5d,对照组给予等量的生理盐水灌胃.利用免疫组织化学染色(SABC法),观察TNF-α和NF-κB的表达和分布.结果 模型组中TNF-α和NF-κB主要在中央静脉周围的肝细胞中呈阳性表达.TNF-α的阳性表达率:第3天对照组为5.56％,模型组为66.67％;第5天对照组为11.11％,模型组为83.33％,差异均有显著性(P＜0.01);模型组第5夭与第3天比较阳性表达率明显增高(P＜0.05).NF-κB的阳性表达率:第3天对照组为11.11％,模型组为72.22％;第5天对照组为16.67％,模型组为88.89％,差异均有显著性(P＜0.01);模型组第5天与第3天比较阳性表达率明显增高(P＜0.05).肝组织TNF-α的表达和NF-κB的表达呈正相关(r=0.687,p＜0.01).结论 TNF-α在急性酒精性肝损伤的过程中发挥作用,并且TNF-α可能通过NF-κB的活化参与急性酒精性肝损伤的发生.     

趋化因子FKN对外周血单个核细胞NF-κB和TNF-α表达的影响及卡托普利的干预作用

[目的]通过研究趋化因子(fractalkine,FKN)对单个核细胞合成核因子-κB(nuclearfactor-κappaB,NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响,探索了FKN-CX3CR1可能存在的信号传导机制及在动脉粥样硬化形成中的作用,并探讨了卡托普利在这其中可能的干预作用.[方法]①抗凝血用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞.②将每份提取的单个核细胞分3组分别为:空白对照组、FKN组、卡托普利组.③应用免疫细胞化学法检测各组单个核细胞中NF-κB表达情况.④应用酶联免疫法检测各组培养液中TNF-α的表达水平.[结果]①FKN诱导组NF-κB(34.80±2.69)%和TNF-α(1506.1±69.3)pg/mL较空白组NF-κB(3.80±0.95)%和TNF-α(80.5±5.5)pg/mL表达显著增多(P＜0.05).②卡托普利干预组NF-κB(27.55±1.96)%和TNF-α(1119.3±116.2)pg/mL较FKN组NF-κB(34.80±2.69)%和TNF-α(1506.1±69.3)pg/mL表达显著减少(P＜0.05).[结论]FKN-CX3CR1有增加单个核细胞表达NF-κB、TNF-α的作用;而卡托普利可通过减弱FKN-CX3CR1诱导的单个核细胞合成NF-κB、TNF-α,抑制炎症反应.     

红景天苷对大鼠脑出血后血脑屏障损伤的保护作用研究

目的:研究大鼠脑出血后血脑屏障(BBB)通透性与核因子-κB(NF-κB)的关系及红景天苷的干预作用.方法:采用自体血注入尾状核法制成大鼠脑出血模型,免疫组化法观察NF-κB的表达,伊文思蓝法测BBB的通透性,干湿重法测脑含水量表示脑水肿.结果:与对照组相比,模型组及给药组BBB通透性均在出血后6小时开始升高,3天最高,给药组明显小于模型组(P＜0.01).两组的NF-κB也于6小时开始升高,3天达到高峰,给药组明显小于模型组(P＜0.05).BBB通透性与NF-κB表达呈显著正相关(R =0.638,P＜0.01),与脑水肿变化趋势一致.结论:脑出血后产生的NF-κB可能通过炎症反应的启动,增加BBB通透性,参与脑水肿形成和发展,红景天苷可改善此过程.     

丁苯酞对血管性痴呆大鼠认知功能及海马区核因子-κB表达的影响

目的 观察丁苯酞对血管性痴呆大鼠认知功能及海马区核因子-κB表达的影响.方法 采用结扎双侧颈总动脉方法制备大鼠血管性痴呆(VD)模型.90只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型对照组和丁苯酞治疗组.水迷宫试验检测大鼠认知功能的改变,免疫组织化学法检测大鼠海马区核因子-κB的表达变化.结果 与假手术组比较,大鼠学习记忆能力在造模后差异有统计学意义(P＜0.05),与模型组比较,丁苯酞治疗组学习记忆能力明显改善(P＜0.05);治疗组大鼠海马区核因子-κB表达的平均光密度值为(0.11±0.01),较模型组显著降低(P＜0.05).结论 丁苯酞能显著改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与抑制VD大鼠海马区核因子-κB的表达有关.     

褪黑素对急性百草枯中毒大鼠肺组织核因子-κB及诱导型一氧化氮合酶的影响及治疗作用的研究

目的 观察褪黑素(MT)治疗前后急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺组织中核因子-κB(NF-κB)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的变化,探讨它们在百草枯所致肺损伤中的作用.方法 将45只SD大鼠随机分为染毒组、MT治疗组和对照组.3 d后分别测定三组大鼠血清中一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)含量,同时取大鼠肺组织,采用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测NF-κB活性;RT-PCR检测iNOSmRNA的表达.结果 大鼠肺组织NF-κB活性及iNOS mRNA的表达在染毒组明显高于对照组(P＜0.01).经MT治疗后显著降低(P＜0.01),但仍高于对照组(P＜0.01).染毒组大鼠血清中NO及MDA的浓度较对照组明显升高(P＜0.01),经MT治疗显著降低(P＜0.01).结论 NF-κB及iNOS在百草枯所致大鼠肺损伤中起重要作用;MT能减少染毒大鼠肺组织NF-κB的激活,降低其调控的iNOS活性,减轻染毒大鼠肺组织损伤.     

针刺督脉穴位对癫痫大鼠海马NF-κB表达的影响

目的探讨核因子-κB(NF-κB)在癫痫大鼠海马中的表达以及针刺督脉穴位治疗癫痫的机制。方法建立氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠模型,运用免疫组织化学方法观察大鼠海马中NF-κB的表达。结果空白组大鼠NF-κB免疫反应阳性细胞在细胞浆中分布较多,在细胞核内分布较少;模型组癫痫大鼠NF-κB免疫反应阳性细胞在细胞核中分布多;模型组癫痫大鼠与空白组大鼠的NF-κB比较差异有统计学意义(P<0.05);针刺组与模型组癫痫大鼠海马NF-κB比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论癫痫发作后NF-κB被激活后转移至细胞核内,其表达明显增加。针刺督脉穴位可明显抑制癫痫大鼠海马NF-κB的表达,其机理可能是使刺激冲动传入中枢神经系统,适度抑制NF-κB表达,减轻其介导的炎症反应,抑制细胞过度凋亡,降低神经元兴奋性,达到抑制癫痫目的。     

乌药对急性酒精性肝损伤的保护作用及机制初探

目的 探讨乌药对急性酒精性肝损伤的保护作用和可能机制. 方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、联苯双酯组以及乌药醇提物组. 各组分别于末次给药后测定血丙氨酸转氨酶( ALT )、天门冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平;处死大鼠后制备肝匀浆,分别检测 SOD和 MDA水平;HE染色法观察大鼠肝病理学变化,免疫组化法检测肝组织核因子-κB ( NF-κB)及肿瘤坏死因子-α( TNF-α)、白细胞介素1β( IL-1β)表达. 结果 与模型对照组比较,乌药醇提取物组大鼠血清中ALT、AST、MDA水平显著降低,血清SOD活性及肝组织SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0. 05). 乌药醇提取物组肝组织中IL-1β及NF-κB、TNF-α表达降低. 结论乌药醇提取物可提高急性酒精中毒性肝组织的 SOD 活性,增加抗氧化能力,并可降低肝细胞炎症因子,可能对酒精性肝损伤具有保护作用.     

氟伐他汀对心梗大鼠NF-KBp65和可溶性细胞间黏附因子-1表达的影响

目的 观察氟伐他汀对大鼠非心肌梗死区药物干预前后核因子-κB p65 (NF-κB p65)和可溶性细胞间黏附因子-1(sICAM-1)浓度的影响及临床意义.方法 40只大鼠随机分为正常组、假手术组、心梗组和氟伐他汀组,每组10只.手术成功后正常组、假手术组和心梗组给予生理盐水灌胃,氟伐他汀组给予氟伐他汀20 mg/kg灌胃,均每日1次,连续4周.4周后采用RT-PCR方法观察大鼠非心肌梗死区NF-κBp 65和可溶性细胞黏附因子-1表达的差异.结果 NF-κB p65和可溶性细胞黏附因子-1浓度水平,正常组与假手术组差异无显著性(P＞0.05);正常组及假手术组与心梗组比较有显著差异(P＜0.05);正常组及假手术组与氟伐他汀组比较有显著差异(P＜0.05);氟伐他汀组NF-κB p65和可溶性细胞黏附因子-1浓度水平相比心梗组有明显下降(P＜0.05).结论 氟伐他汀能显著改善大鼠非梗死区的炎症反应,其作用可能与其抑制核内转录因子NFKB的活性表达及降低可溶性细胞黏附因子sICAM-1浓度水平有关.     

尼莫地平对戊四氮致痫大鼠海马核转录因子-κB蛋白表达的影响

目的 研究尼莫地平(nimodipine,NM)对戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ) 致痫大鼠海马核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响,探讨尼莫地平的脑保护机制.方法 将SD大鼠随机分为正常对照(NC)组,癫痫持续状态(status epilepsy,SE)组和NM 组,观察3组大鼠的行为学改变,并用免疫组化方法和Western blot方法测定NF-κB蛋白的表达.结果 与SE组相比,NM 组癫痫发作级别明显减低,发作潜伏期延长.SE组和NM组大鼠NF-κB阳性细胞数、NF-κB蛋白表达水平均高于NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).NM 组大鼠NF-κB阳性细胞数、NF-κB蛋白表达水平均低于SE组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NM具有神经保护作用,该作用可能是通过抑制NF-κB蛋白的活化来实现的.     

亚低温对过氧化氢损伤后脑微血管内皮细胞NF-κB表达的影响

目的 研究亚低温对过氧化氢损伤后脑微血管内皮细胞核转录因子(NF-κB)表达的影响.方法 分离并培养大鼠脑微血管内皮细胞,用过氧化氢损伤的方法建立脑出血后血肿周围炎症反应内皮细胞模型.将细胞分为实验组(ICH)和对照组(C).ICH组分为过氧化氢损伤常温组(ICH+ N)和过氧化氢损伤亚低温组(ICH+ H),C组分为常温对照组(C+N)和亚低温对照组(C+H).采用Western blot技术检测各组NF-κB的表达水平.结果 实验组NF-κB的表达水平均高于各自对照组(P＜0.01),ICH+N组蛋白表达水平高于ICH+H组(P＜0.01).结论 亚低温可有效降低过氧化氢损伤的脑微血管内皮细胞NF-κB的表达,从而减轻血肿周围炎症反应,发挥其脑保护作用.     

肝豆灵片对铜负荷大鼠肝细胞凋亡的影响

目的通过观察肝豆灵片对铜负荷大鼠肝细胞凋亡及肝组织核转录因子kappa B(NF-κB)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响,分析肝豆灵片对铜负荷大鼠肝损伤治疗的作用机制。方法18只Wistar大鼠被随机分为对照组、模型组和肝豆灵组,每组6只。对照组自由饮食,模型组和肝豆灵组连续12周以铜负荷法复制大鼠模型,自第7周开始,肝豆灵组大鼠以肝豆灵片混悬液灌胃,直至造模结束。采用HE染色法观察大鼠肝组织病理变化,TUNEL法检测大鼠肝细胞凋亡,免疫组化技术检测大鼠肝组织NF-κB和Caspase-3的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠肝组织病理损伤严重,肝细胞凋亡指数显著升高(P0.05),NF-κB和Caspase-3表达显著升高(P0.05);与模型组比较,肝豆灵组大鼠肝组织病理损伤减轻,肝细胞凋亡指数及NF-κB,Caspase-3表达显著降低(P0.05)。结论肝豆灵片可减轻铜负荷大鼠肝损伤,其机制可能与其下调肝组织NF-κB和Caspase-3的表达、抑制肝细胞凋亡相关。     

甲氨喋呤对佐剂性关节炎大鼠滑膜病理和核转录因子-κB表达的影响

目的:甲氨喋呤治疗类风湿关节炎疗效确切,但机制研究较少,文中观察大鼠佐剂性关节炎(AA)模型滑膜组织苏木素-伊红(HE)染色变化,探讨甲氨喋呤(MTX)对AA滑膜组织病理和核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响. 方法:将30只SD大鼠用弗氏完全佐剂(CFA)造模后分为3组,正常对照组(对照组)、模型组及MTX组,每组10只.MTX组将MTX 0.3mg/(kg·d)溶于5%的葡萄糖注射液2ml,腹腔注射(共5次),对照组、模型组用5%葡萄糖注射液腹腔注射,正常饲养.15d后将大鼠处死,取滑膜组织、固定、包埋、切片、染色、镜检,对滑膜组织病理学的影响采用评分检测,免疫组化染色检测核转录因子-κB(NF-κB)的表达和活性. 结果:H-E染色后光镜下滑膜病理评分比较,MTX组较模型组低(P<0.05 ),膝关节滑膜组织NF-κB的表达增加(P<0.05),经MTX治疗后以上指标恢复至正常水平(P>0.05). 结论:MTX可减轻佐剂关节炎大鼠炎性反应,消除肿胀;减少滑膜组织炎性细胞浸润.其机制可能是通过下调滑膜细胞NF-κB的表达.