创伤患者纤维蛋白单体的聚合功能

背景：创伤可以引发机体高凝血状态，并可导致显微外科手术失败。目的：观察创伤患者治疗前后纤维蛋白单体聚合功能的变化，探索预测创伤后高凝状态和血栓形成的有效辅助手段。设计：病例一对照观察，前后对照观察。单位：华中科技大学同济医学院协和医院血栓与止血研究室。对象：创伤组受检病例为2001—05／2002-01华中科技大学同济医学院协和医院住院的创伤患者34例，男18例，女16例，年龄8～65岁；正常对照组为健康体检者96例，男50例，女46例，年龄21～68岁。所有受检者均无凝血障碍病史，无全身性与凝血相关疾病。方法：血浆纤维蛋白单体聚合功能采用血浆纤维蛋白单体聚合功能测定系统进行测定。在蕲蛇毒的作用下，纤维蛋白原转变为纤维蛋白单体并发生聚合反应，伴随纤维蛋白单体聚合反应发生的浊度变化，用光度仪在340nm连续进行监测，并将电信号输入微机进行分析。创伤组分别于患者创伤后入院时和入院后经过临床清仓虬手术、缝合、补液及应用抗生素后第3天采集静脉血，测定纤维蛋白单体聚合功能。主要观察指标：①纤维蛋白单体聚合速率（反映血浆纤维蛋白原浓度和功能的综合参数）。②最大吸光度（反映标本中凝固性血浆纤维蛋白原的量）。（曼）纤维蛋白单体聚合速率与最大吸光度的比值（反映血浆纤维蛋白原分子的聚合功能）。结果：全体受检者均完成相应检测并纳入数据统计中。①创伤组患者纤维蛋白单体聚合反应速率、纤维蛋白原含量、纤维蛋白单体聚合速率与最大吸光度的比值均显著高于正常对照组【创伤组：0．87&;#177;0．31，（5．81&;#177;3．22）g／L，4．61&;#177;0．97；正常对照组：0．61&;#177;0．15，（3．36&;#177;1．02）g/L，3.93&;#177;0．68，P〈0．01]。②治疗3d后，尽管纤维蛋白单体聚合速率、纤维蛋白原含量有所下降，但仍高于正常组[3．93&;#177;0．68，（4．21&;#177;1．93）g／L]，而纤维蛋白单体聚合速率与最大吸光度的比值无改变（4．68&;#177;1．19）。结论：创伤患者纤维蛋白原水平增高功能增强。创伤患者机体处于高凝状态，有血栓形成趋势。纤维蛋白单体聚合功能测定可作为创伤后预测高凝状态和血栓形成的有效辅助手段。     

纤维蛋白原与纤维蛋白单体聚合功能在亚急性重症乙型肝炎患者中的测定与意义

目的　检测亚急性重症乙型肝炎患者血浆中纤维蛋白原与纤维蛋白单体聚合功能 ,以了解其凝血功能。方法　用蕲蛇酶水解纤维蛋白原和其相关数值。结果　 16例亚急性重症乙型肝炎患者①纤维蛋白原聚合反应速度为 0 312± 0 0 6 5 ;②最大吸光度为 0 175± 0 .0 35 ;③凝固性纤维蛋白含量为 15 0± 30 (mg/dl) ;④纤维蛋白聚合体反应速率 /最大吸光度比值为 1 790± 0 .16 0 ;⑤反应延滞时间为 - 2 1± 5 (s)。结论　亚急性重症乙型肝炎患者的纤维蛋白原反应时间增快 ,但其他各项指标均下调 ,表明患者出血与凝血功能受损有关     

血浆纤维蛋白原水平与纤维蛋白单体聚合功能的测定

目的 :建立广州地区健康成人血浆纤维蛋白水平及纤维蛋白原单体聚合功能的正常参考值。方法 :用蕲蛇酶 (Acutulase)水解纤维蛋白 ,用计算机自动检测系统测定。结果 :①纤维蛋白单体聚合反应速率 (FMPV)为 0 498± 0 1 1 0 ;②最大吸光度 (Amax)为 0 2 50± 0 0 5;③纤维蛋白原的浓度 (S)为 2 80±0 65( g/L) ;④FMPV/Amax比值为 1 992± 0 1 80 ;⑤反应延滞时间 (DT)为 2 5± 5(s)。结论 :计算机自动检测系统操作简单快捷 ,测出的纤维蛋白原浓度与传统改良的Clauss法相比 ,无显著性差异。FMPV/Amax比值稳定 ,表明正常人的纤维蛋白单体聚合能力与纤维蛋白的量成正相关。     

缺血性脑血管病康复介入与纤维蛋白单体聚合功能变化的关系

背景血浆纤维蛋白原(fibrinogen,Fbg)水平的升高是脑血管病的主要危险因素,纤维蛋白单体聚合功能的评价远较Fbg水平的测定具有更重要的临床价值.目的研究缺血性脑血管病患者纤维蛋白单体聚合功能的临床意义及康复介入对其的影响作用.设计以患者和正常人为研究对象,病例-对照研究.单位一所大学医院血液病研究所和神经内科.对象2001-09/2002-03检测华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科110例不同类型的缺血性脑血管病患者和50例健康人.方法随机选取31例脑梗死患者进行康复介入,采用血浆纤维蛋白单位聚合功能测定系统进行测定各组血浆纤维蛋白单体聚合功能参数.主要观察指标纤维蛋白单体聚合功能各项参数的异常情况.结果缺血性脑血管病患者较健康人纤维蛋白单体聚合功能各项参数均显著增高(P＜0.01);缺血性脑血管病患者Fbg水平和纤维蛋白单体聚合速率(FMPV)的异常率较健康人显著增高(P＜0.01),纤维蛋白单体聚合功能异常患者缺血性脑血管病的相对危险度(RR)分别是健康对照组的4～31倍;脑梗死患者中,前循环梗死组FMPV较后循环梗死组和腔隙性脑梗死组显著升高(P＜0.05);康复介入前脑梗死患者纤维蛋白单体聚合功能显著高于健康对照组,康复介入后纤维蛋白单体聚合功能各参数有所降低,但与治疗前差异无显著性意义.结论纤维蛋白单体聚合功能测定能更全面、客观的反映缺血性脑血管病患者的凝血状态,能在一定程度上反应梗死的范围和严重程度.尽管一般的康复介入不能有效改善血液的高凝状态,但随着医学技术的不断发展,特殊的康复介入对于凝血机制的影响值得进一步研究.     

缺血性脑血管病康复介入与纤维蛋白单体聚合功能变化的关系

背景：血浆纤维蛋白原(fibrinogen，Fbg)水平的升高是脑血管病的主要危险因素，纤维蛋白单体聚合功能的评价远较Fbg水平的测定具有更重要的临床价值。目的：研究缺血性脑血管病患者纤维蛋白单体聚合功能的临床意义及康复介入对其的影响作用。设计：以患者和正常人为研究对象，病例一对照研究。单位：一所大学医院血液病研究所和神经内科。对象：2001—09／2002—03检测华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科110例不同类型的缺血性脑血管病患者和50例健康人。方法：随机选取31例脑梗死患者进行康复介入，采用血浆纤维蛋白单位聚合功能测定系统进行测定各组血浆纤维蛋白单体聚合功能参数。主要观察指标：纤维蛋白单体聚合功能各项参数的异常情况。结果：缺血性脑血管病患者较健康人纤维蛋白单体聚合功能各项参数均显著增高(P&;lt;0．01)；缺血性脑血管病患者Fbg水平和纤维蛋白单体聚合速率(FMPV)的异常率较健康人显著增高(P&;lt;0．01)，纤维蛋白单体聚合功能异常患者缺血性脑血管病的相对危险度(RR)分别是健康对照组的4～31倍；脑梗死患者中，前循环梗死组FMPV较后循环梗死组和腔隙性脑梗死组显著升高(P&;lt;0．05)；康复介入前脑梗死患者纤维蛋白单体聚合功能显著高于健康对照组，康复介入后纤维蛋白单体聚合功能各参数有所降低，但与治疗前差异无显著性意义。结论：纤维蛋白单体聚合功能测定能更全面、客观的反映缺血性脑血管病患者的凝血状态，能在一定程度上反应梗死的范围和严重程度。尽管一般的康复介入不能有效改善血液的高凝状态，但随着医学技术的不断发展，特殊的康复介入对于凝血机制的影响值得进一步研究．     

高纤维蛋白原血症与高凝状态

纤维蛋白原(Fbg)参与血液凝固、血小板聚集、动脉粥样硬化和肿瘤血行转移等病理过程.纤维蛋白单体聚合反应自动检测系统,是在分析Fbg转变动力参数的基础上发展起来的一种功能性测定方法,该系统是利用微机对纤维蛋白单体聚合反应过程的实时监测并计算纤维蛋白单体聚合反应速率和功能指标,以反映纤维蛋白原分子功能和维蛋白原的血浆浓度.我们对47例高Fbg病例进行了上述指标的检测和分析.     

缺血性脑血管病患者纤维蛋白单体聚合功能及康复介入的影响

目的　研究缺血性脑血管病患者纤维蛋白单体聚合功能的临床意义及康复介入的影响。方法　检测 110例不同类型缺血性脑血管病患者、及其中 31例脑梗死患者康复介入前后和 5 0例健康人的纤维蛋白单体聚合功能参数。结果　缺血性脑血管病患者较健康人纤维蛋白单体聚合功能各项参数均显著增高(P <0 .0 1) ;缺血性脑血管病患者纤维蛋白原 (Fbg)水平和纤维蛋白单体聚合速率 (FMPV)的异常率较健康人显著增高 (P <0 .0 1) ,Fbg水平异常和纤维蛋白单体聚合功能异常患者缺血性脑血管病的相对危险度 (RR)分别是健康对照组的 4和 31倍 ;脑梗死患者中 ,前循环梗死组FMPV较后循环梗死组和腔隙性脑梗死组显著升高 (P <0 .0 5 ) ;康复介入前脑梗死患者纤维蛋白单体聚合功能显著高于健康对照组 ,康复介入后纤维蛋白单体聚合功能各参数有所降低 ,但与治疗前无显著性差异。结论　纤维蛋白单体聚合功能测定能更全面、客观地反映缺血性脑血管病患者的凝血状态 ,其异常幅度能在一定程度上反应梗死的范围和严重程度。尽管一般的康复介入不能有效改善血液的高凝状态 ,但随着医学技术的不断发展 ,特殊的康复介入对于血液凝血机制的影响值得进一步研究。     

癌症患者血浆纤维蛋白原水平与功能指标变化

目的：了解癌症患者血浆纤维蛋白原含量和功能状态。方法：用蕲蛇酶水解纤维蛋白原,通过计算机自动检测系统测定以下项目：①纤维蛋白单体聚合反应速率（FMPS）;②最大吸光度（Amax);③纤维蛋白原含量（Fbg:c); ④反应延滞时间（DT）;⑤纤维蛋白原功能指数（FI）。结果：癌症1组FMPS、Amax,Fbg:c含量均升高,DT缩短,与正常对照组比较差异显著（P＜0．05）,FI虽上升但无统计学意义。癌症2组FMPS、Amax,Fbg:c含量升高更为明显,与正常对照组及癌症1组比较均有显著差异（P＜0．01及0．05）,FI上升亦无统计学意义。结论：两组癌症患者Fbg:c含量均明显高于政党对照组,Amax数值亦增高,证实癌症患者存在着高凝状态。FMPS、DT数值均可反映纤维蛋白单体的聚合功能,FMPS数值高于政党对照组,DT数值明显缩短,均说明纤维蛋白单体聚合功能明显增强。本资料有转移灶的癌症2组患者Fbg:c,Amax,FMPS数值均明显高于无转移灶的癌症1组,DT明显缩短,这说明高凝状态与癌症的轻重程度有关,有转移灶的癌症患者高凝程度较无转移灶癌症尤甚。     

高纤维蛋白原血症与高凝状态

纤维蛋白原 (Ｆｂｇ)参与血液凝固、血小板聚集、动脉粥样硬化和肿瘤血行转移等病理过程。纤维蛋白单体聚合反应自动检测系统 ,是在分析Ｆｂｇ转变动力参数的基础上发展起来的一种功能性测定方法 ,该系统是利用微机对纤维蛋白单体聚合反应过程的实时监测并计算纤维蛋白单体聚合反应速率和功能指标 ,以反映纤维蛋白原分子功能和维蛋白原的血浆浓度。我们对 47例高Ｆｂｇ病例进行了上述指标的检测和分析。材料与方法一、研究对象　正常对照组 96例 ,男 5 0例、女46例 ,年龄 2 1～ 68岁。受检患者组 47例 ,男 31例、女 1 6例 ,年龄 40ｄ～ 78岁…     

缺血性心脑血管病的纤维蛋白原分子反应性的观察

应用计算机辅助分析研究了８０例冠心病、６０例血栓性脑血管病患者及６０名健康对照者血浆纤维蛋白单体聚合反应的动力学。发现患者组纤维蛋白单体聚合速率（ＦＭＰＶ）及ＦＭＰＶ与凝固性纤维蛋白原的比值均较对照组明显增高（Ｐ＜０．００１），表明纤维蛋白原分子反应性增强关系到纤维蛋白原分子结构变异。这可能是缺血性心脑血管病发病的重要因素     

Fibrinogen Sevilla, a congenital dysfibrinogenemia characterized by an abnormal monomer aggregation and a defective plasmin lysis

A dysfibrinogenemia (fibrinogen Sevilla) was detected in a 64-yr-old woman with no previous history of hemorrhagic diathesis or thrombosis. Thrombin and reptilase times were prolonged. The aggregation of fibrin monomers showed a prolonged latency time with a defective slope although fibrinopeptide release and clot stabilization were found to be normal. Plasmin proteolysis was abnormal with a much slower plasmic degradation in patient's purified fibrinogen. By chromatofocussing the patient's fibrinogen showed an abnormality in pattern elution with a second peak eluting at a pH slightly more basic than the normal one (pH 5.5). Likewise, the isoelectrofocussing of purified non-reduced patient's fibrinogen in agarose gel showed an abnormal distribution in its focussed bands, especially in a group which focussed in a pI-interval between 5.20-5.85. By two-dimensional electrophoresis we did not find any abnormality in the fibrinogen-reduced chains. These results could indicate that the abnormal monomer aggregation, as well as the defective plasmin lysis, could be due to conformational aspects of fibrinogen rather than to structural defects.     

"Fibrinogen Tokyo II". An abnormal fibrinogen with an impaired polymerization site on the aligned DD domain of fibrin molecules.

A hereditary dysfibrinogenemia associated with defective aggregation of fibrin monomers was found in a 39-yr-old female and in the members of her immediate family, who had all been asymptomatic. The abnormality was probably due to an impaired polymerization site exposed in the DD domain of two adjacent fibrin molecules, because plasmic fragment DD derived from the propositus' cross-linked fibrin bound far less tightly to insolubilized normal fragment E than that from the normal one. Its complementary polymerization site in the E domain of fibrin, which was exposed by thrombin cleavage, and the polymerization site in the D domain of fibrinogen, which was available without activation by thrombin, were both found to be normal. More anodal migration of the abnormal fragment DD than the normal one, as shown by immunoelectrophoresis, seemed to support our concept that the mutation most likely resides in the D domain of the abnormal fibrinogen molecule at or near a region closely related to the polymerization site that is exposed when two fibrin molecules are linearly aligned. The work of others on the polymerization of normal fibrin with different techniques yielded results consistent with our conclusions. We tentatively designate this type of abnormal fibrinogen "fibrinogen Tokyo II," but its possible identity with other abnormalities of fibrinogen reported heretofore is not excluded.     

武汉地区缺血修饰白蛋白参考区间的建立

目的建立武汉地区缺血修饰白蛋白(IMA)的参考区间。方法 1016名健康体检者来自武汉大学医学院附属湖北省人民医院、华中科技大学同济医学院附属同济医院、华中科技大学同济医学院附属梨园医院和武汉市第一医院。测定所有体检者的IMA、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清白蛋白(Alb)、血清葡萄糖(Glu)、肌酐(Cr)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和心电图(ECG),排除Alb、ALT、Glu、Cr、TG、TC和ECG异常者后,计算并删除IMA的离群值,统计剩余的911名健康体检者的IMA检测结果。按性别、年龄分组计算参考区间。结果男性、女性IMA水平间差异无统计学意义,<30岁人群的IMA参考区间为≥67.0 U/mL,≥30岁人群的IMA参考区间为≥64.4 U/mL,参考区间的差异是由Alb浓度的差异导致的。结论 IMA参考区间的规范建立对IMA检测结果解释及临床应用有重要价值。     

A unique property of a plasma proteoglycan, the C1q inhibitor. An anticoagulant state resulting from its binding to fibrinogen.

The C1q inhibitor, C1qI, an approximately 30-kD circulating chondroitin-4 sulfate proteoglycan, displayed concentration-dependent prolongation of plasma and fibrinogen solution clotting times. Under factor XIIIa catalyzed cross-linking conditions and maximum C1qI concentrations, minor amounts of clot formed displaying complete gamma-gamma dimer formation but virtually no alpha-polymer formation. The anticoagulant effect was undiminished by its binding to C1q, by increased ionic strength, and by CaCl2, but was abolished by incubation of C1qI with chondroitinase ABC. 125I-labeled C1qI bound to immobilized fibrinogen, fibrin monomer, fibrinogen plasmic fragments D1 and E, and fibrin polymers. Occupancy on the E domain required uncleaved fibrinopeptides together with another structure(s), and it did not decrease binding of thrombin to fibrinogen. Occupancy on the D domain did not decrease the fibrinogen binding to fibrin monomer. We conclude that the E domain occupancy impaired fibrinopeptide cleavage, and occupancy on the D domain impaired polymerization, both steric hindrance effects. C1qI binding to fibrinogen explains at least in part the well-known fibrin(ogen) presence in immune complex-related lesions, and the fibrinogen presence in vascular basement membranes and atheromata. We postulate that fibrin binding by resident basement membrane proteoglycans provides dense anchoring of thrombus, substantially enhancing its hemostatic function.     

银杏提取物与潘生丁复方制剂联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变

背景大量基础研究和临床观察证明银杏提取物与潘生丁复方制剂有明显的改善微循环的作用,甲钴胺是临床上常用的神经修复剂,将两者联合治疗糖尿病周围神经病变疗效更佳.目的观察银杏提取物与潘生丁复方制剂与甲钴胺联合应用对糖尿病周围神经病变患者腓总神经神经传导速度和血液流变学的改善效果.设计以患者为观察对象,随机对照设计的验证性实验.单位华中科技大学同济医学院附属同济医院综合科.对象选择2002-01/2005-01在华中科技大学同济医学院附属同济医院综合科住院的2型糖尿病并发周围神经病变患者120例,随机(投币)分为治疗组和对照组各60例,患者对治疗均知情同意.方法治疗组应用银杏提取物与潘生丁复方制剂(贵州益佰制药有限公司生产)25 mL+生理盐水250 mL静脉滴注,1次/d,同时应用甲钴胺(日本卫材株式会社产品)500μg肌肉注射,1次/d,连续应用4周;对照组用甲钴胺500μg肌肉注射,1次/d,连续应用4周.主要观察指标治疗前1d及治疗4周后两组患者腓神经的神经传导速度,血液流变学指标(包括血黏度、红细胞压积和血小板聚集率).结果120例全部进入结果分析.①运动神经传导速度治疗组治疗后快于治疗前和对照组治疗后[(45.6±4.3),(38.5±3.8),(41.4±6.2)m/s,t=9.585,4.312,P＜0.01];感觉神经传导速度治疗组治疗后快于治疗前和对照组治疗后[(45.8±4.2),(36.7±4.8),(38.2±4.9)m/s,t=11.047,9.120,P＜0.01].②治疗组治疗后全血黏度高切、低切和血浆黏度均显著低于治疗前和对照组治疗后(P＜0.01).③治疗组治疗后红细胞压积显著低于治疗前和对照组治疗后[(41.32±3.56)%,(46.32±3.43)%,(44.32±4.49)%,t=7.834,4.05,P＜0.01].④治疗组治疗后血小板聚集率显著低于治疗前和对照组治疗后[(31.35±2.11)%,(48.44±2.68)%,(45.91±3.54)%,t=38.810,27.367,P＜0.01].结论银杏提取物与潘生丁复方制剂与甲钴胺联合应用可提高神经传导速度,降低血黏度和血小板聚集率,是治疗糖尿病周围神经病变的有效方法.     

脊髓损伤患者肌电图F波与痉挛的相关性

背景:中枢神经系统受损后,肌电图F波是检测损伤节段以下的腱反射和肌张力的有价值的手段。上运动神经元损伤所致的痉挛、僵硬和肌张力增高可以有F波放电的改变。然而,目前对脊髓损伤后F波的变化以及F波与损伤后节段以下肢体痉挛之间的关系尚不十分明确。目的:分析脊髓损伤患者F波的最小潜伏期、F波的出现率以及F波的时间离散度各指标与脊髓损伤后痉挛之间的相关性。设计:病例-对照观察。单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院康复医学科。对象:于2002-06/2004-03在华中科技大学同济医学院附属同济医院康复医学科住院的外伤性脊髓损伤患者29例,为脊髓损伤组;另选取同期正常健康自愿受试者29例,为正常对照组。方法:采用Ashworth量表对脊髓损伤患者双下肢痉挛程度进行分级,评定患者双侧髋关节屈曲、膝关节屈曲和踝背屈的Ashworth分级。采用丹麦产的Kepoint1.5型肌电图仪进行F波的检测。记录双下肢胫神经F波的最小潜伏期、F波的最大潜伏期和F波的出现率,计算F波的时间离散度(即为F波的最大潜伏期与F波的最小潜伏期之间的差值)以及F波的平均出现率。主要观察指标:比较各指标在脊髓损伤患者和正常人之间的差异并分析脊髓损伤患者痉挛与F波的时间离散度、F波的出现率以及F波的最小潜伏期之间的相关性。结果:纳入患者29例和正常对照者29例,均进入结果分析。①脊髓损伤患者F波的时间离散度值比正常对照者高,两者比较差异非常显著眼分别为(9.2±1.9),(6.7±1.0)ms,P<0.0001演。②脊髓损伤患者F波的出现率比正常对照者低,两者比较差异显著眼分别为(84.5±6.2)%,(89.5±5.7)%,P<0.05演。③脊髓损伤患者F波的最小潜伏期比正常对照者高,两者比较差异无显著性穴P>0.05雪。④脊髓损伤患者F波的时间离散度与痉挛Ashworth评分之间呈线性正相关(r=0.79031,P<0.0001);脊髓损伤患者F波的出现率与痉挛Ashworth评分之间呈线性正相关(r=0.74203,P<0.0001);脊髓损伤患者F波的最小潜伏期与痉挛Ashworth评分之间无明显相关性(r=0.08168,P>0.05)。结论:F波的时间离散度和F波的出现率可以作为脊髓损伤患者电生理评价的敏感性指标,用于评价脊髓损伤患者的痉挛程度。     

Analysis of fibrinogen degradation product in severe liver disorders by immunoblotting

Increased serum fibrinogen degradation product (FDP) in liver cirrhosis and hepatic carcinoma as measured by latex agglutination was analyzed by means of SDS-polyacrylamide gel electrophoresis followed by immunoblotting with anti-fibrinogen antibody. The antibody used in this study reacts with fibrinogen, fragment X, Y, D-D, D and E. The validity of this technique was confirmed by the analysis of the serum samples from patients with definite diagnosis of disseminated intravascular coagulation. Serum samples of 14 patients out of 18 with elevated FDP values and severe liver diseases were shown to contain no plasmic digest of fibrin or fibrinogen. By using the SDS-gel electrophoresis after disulfide bond reduction, seven serum samples from these 14 patients, who were shown to have no plasmic digest in serum, were found to contain unclottable fibrinogen retained in sera, while the remaining seven samples were revealed to have fibrin monomer in their sera. Four serum samples from the 18 patients were shown to have plasmic digest of fibrinogen, but these patients had additional diseases leading to intravascular coagulation.     

银杏叶提取物改善学习记忆障碍老龄大鼠痴呆模型的作用途径

背景近年研究显示,银杏叶提取物是一种天然的自由基清除剂,可保护机体免受自由基引起的损害,改善脑循环障碍和神经元的功能,而关于银杏叶提取物对认知功能等高级神经功能活动影响的实验或临床研究相对滞后.目的探讨银杏叶提取物对中枢神经系统高级功能活动的作用,为临床应用银杏叶提取物治疗认知功能障碍提供实验依据.设计随机对照实验.单位华中科技大学同济医学院附属精神病医院老年科,华中科技大学同济医学院病理生理教研室,华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科.材料实验于2002-06在华中科技大学同济医学院基础部完成.选择Wistar大鼠40只,随机分为5组正常老龄对照组、模型组、银杏叶提取物75 mg/kg组、银杏叶提取物150 m/kg组,银杏叶提取物500 mg/kg组,每组8只.方法采用东莨菪碱致老龄大鼠学习记忆障碍的拟老年性痴呆动物模型,其中正常老龄对照组和模型组以相同体积的生理盐水灌胃,银杏叶提取物各组分别按75,150,500 mg/kg银杏叶提取物灌胃,50～400g/次,单次连续给药5 d,于第6天测试水迷宫及避暗试验,测试期间停止灌药,以水迷宫和避暗实验等学习记忆行为训练及生化检测方法,观察用药前后动物学习记忆行为和脑海马区乙酰胆碱及蛋白质含量的变化.主要观察指标①各组大鼠游迷宫所需时间.②各组大鼠游迷宫错误次数.③各组大鼠避暗试验所需时间及错误次数.④各组大鼠脑海马区乙酰胆碱及蛋白质含量.结果银杏叶提取物150 mg/kg组中除1只大鼠不明原因死亡外,银杏叶提取物75,500 mg/kg组各有1只大鼠在灌胃时逃走,最终进入结果分析大鼠为37只.①银杏叶提取物各剂量组造模大鼠游迷宫所需时间和途中错误次数均明显少于模型组(P＜0.05或P＜0.01),模型组大鼠游迷宫所需时间和途中错误次数明显高于正常老龄对照组(P＜0.01).②银杏叶提取物500,150,75 mg/kg组大鼠为达到暗环境被动回避试验内容,学习过程明显短于模型组[(156.78±25.97),(172.66±13.56),(198.54±17.12),(208.34±28.56)s,P＜0.05或P＜0.01].模型组学习时间较正常老年对照组显著延长[(208.46±28.56),(127.46±11.03)s,P＜0.01];银杏叶提取物500,150,75 m/kg组发生电击的错误次数也明显少于模型组[(3.41±0.26),(6.97±0.35),(7.23±0.62),(8.38±0.92)次,P＜0.01],银杏叶提取物500mg/kg组电击次数显著少于150mg/kg组(P＜0.01),150mg/kg组明显少于75mg/kg组(P＜0.05).③银杏叶提取物500,150,75 mg/kg组造模大鼠海马乙酰胆碱含量明显高于模型组[(421.89±36.32),(387.45±32.76),(380.17±41.25),(36528±11.42)mg/g,P＜0.05或P＜0.01],而银杏叶提取物500 mg/kg组的海马乙酰胆碱含量显著高于银杏叶提取物150,75 mg/kg组(P＜0.01).另外,与正常老龄对照组比较,东莨菪碱致学习记忆障碍模型组大鼠海马脑区的蛋白质含量显著降低[(41.75±3.82),(95.13±6.34)mg/kg,P＜0.01],在给予银杏叶提取物后,造模后的实验大鼠海马脑区蛋白质含量虽有所增加,但差异无显著性意义(P＞0.05).结论银杏叶提取物呈剂量依赖性显著改善实验动物的学习记忆能力,并显著增加海马脑区乙酰胆碱含量.     

人bcl-xl转基因小鼠外源基因的复制及其传代稳定性

背景:近年的研究表明,在脑缺血再灌注损伤机制中,bcl-xl基因可能起着抗神经细胞凋亡的脑保护作用。目的:观察转bcl-xl基因小鼠外源基因的复制及传代稳定性问题。设计:以基因为观察对象。单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科和湖北省农科院畜牧兽医研究所。材料:实验于1999-10/2001-04在华中科技大学同济医学院附属同济医院完成。选取昆明种小鼠4只。方法:通过显微注射法建立转人bcl-xl基因小鼠,将PCR及Southern-blot检测整合阳性的小鼠与正常鼠交配并传代,然后检测子代小鼠外源基因的表达情况。作Southern-blot检测,结果证实第10,13,5,6号小鼠为整合阳性小鼠。以4只整合阳性小鼠作为首建者,分别与正常的昆明白小鼠交配繁殖传代,所生子代记为F1代,各系列的F1～F4代均采用阳性转基因小鼠与正常的昆明白小鼠交配繁殖传代方法,保持其杂合子形式。主要观察指标:检测外源基因的复制和传代的稳定性。结果:10号小鼠传代过程中外源基因PCR检测阳性率保持稳定,符合孟德尔遗传规律,表明外源基因能够稳定遗传。6号小鼠PCR阳性率呈轻微下降趋势,但仍能够保持相对稳定遗传。13号和5号小鼠PCR阳性率均呈明显的下降趋势,表明这2只小鼠存在外源基因遗传丢失现象。结论:应用基因组DNA做目的基因,可获得能够稳定遗传的转基因鼠系。