心肌梗死后心力衰竭大鼠β肾上腺素受体信号传导改变的机制及药物干预作用

[摘要] 目的探讨p肾上腺素受体(卢受体)信号传导系统,特别是p肾上腺素受体激酶一1(PIARKl)在心力衰竭(心衰)发生发展中的重要作用,以及第三代卢受体阻滞剂卡维地洛在心肌梗死(心梗)后心衰中的保护机制。方法结扎大鼠冠状动脉前降支建立心梗心衰的动物模型,并应用卡维地洛进行干预性治疗。雄性Sp吨Plc—Dawley 大鼠心梗模型建立后,随机分成心梗3周组、4周组和12周组及卡维地洛治疗组。另取假手术组大鼠随机分成假手术3周组、4周组和12周组。卡维地洛治疗组大鼠于心梗模型建立后4周末开始给予卡维地洛10ms／(吨．d)灌胃共8周。观察心梗后不同时相大鼠的左心功能、心室重塑、血浆去甲肾上腺素水平、心肌组织pARKl活性及其 mRNA和蛋白表达、臼受体信号传导的变化以及卡维地洛的干预效果。结果 (1)心梗后大鼠发生心室重塑,充血性心力衰竭形成;(2)心梗后心衰大鼠心肌腺苷酸环化酶基础活性和对异丙肾上腺素激活活性均受到抑制,即p受体信号传导减弱,表现为以p受体脱耦联为特征的p受体减敏;(3)心梗后心衰大鼠交感神经系统(SNS)激活,介导 甽]表达和活性增高,并与心室重塑和心衰进程同步;(4)卡维地洛能够抑制心室重量增加,延缓心室重塑,改善心功能,同时抑制pARKl表达,降低pARKl活性。结论 SNS通过pARKl诱导p受体减敏,可能是心梗后心衰发生、发展的因素;而抑制尽Am;1表达,降低pARKl活性,从而恢复卢受体系统信号传导通路的反应性,是卡维地洛防治,C,衰的机制之一。     

慢性充血性心力衰竭大鼠模型的建立

目的：探讨建立慢性充血性心力衰竭大鼠模型的方法。方法：通过结扎大鼠左冠状动脉造成大面积心肌梗死。术后8周，进行血流动力学、心室质量指数检测及心肌标本留取。结果：术后大鼠出现明显的心肌梗死改变。血流动力学提示大鼠MBP下降，LVSP，±dp／dt显著下降，LVEDP明显升高。大鼠心室质量指数增加。光镜下大鼠心肌梗死区心肌纤维明显，心肌梗死边缘心肌排列紊乱、心肌细胞肥大，核增大，部分细胞可有核固缩。结论：结扎左冠状动脉可成功制造慢性心力衰竭大鼠模型，对心力衰竭的实验研究有益。     

心肌梗死后心力衰竭发生机制及诊治进展

心肌梗死(心梗)后心力衰竭(心衰)是临床上心衰发生的常见类型。虽然心梗诊疗手段的进步提高了患者的生存率,且一些研究报道心梗后心衰的发生率有所减少[1],但是心梗后心衰的发生与患者的预后联系紧密,往往导致预后不良[2]。因此,有必要对心梗后心衰的发生机制及诊治进展加以阐述。心梗后心衰发生机制一、心室重构心梗后心肌和细胞外基质(ECM)发生适应不     

抑制JAK/STAT信号通路对心力衰竭大鼠心功能的 影响抑制JAK/STAT信号通路对心力衰竭大鼠心功能的 影响

目的：通过使用AG490抑制JAK/STAT信号通路探讨抑制该通路对心力衰竭大鼠血流动力学及BNP的影响。方法：实验大鼠随机分为3组，对照组(n=15)；心力衰竭组(n=15)，缩窄腹主动脉直径至0.45mm；AG490药物干预组(n=15)，腹主动脉缩窄术后每周经腹腔注射AG490。术后观察大鼠生存情况，分别在4周和8周后应用超声心动图检测IVSd 、LVPWd 、LVEDd、LVEDs和LVEF，并于第8周测量BNP的变化。结果：4周时心衰组大鼠IVSd、LVPWd、LVEDs、LVEDd、LVEF与对照组和AG490干预组均有差异(P<0.05)，IVSd、LVEDd、LVEF干预组和对照组差异无统计意义(P>0.05)。8周时3组大鼠各项超声检测指标均有明显差异(P<0.05)，心衰组变化更明显(P<0.05)。心衰组大鼠血清BNP明显高于其余两组(P<0.01)，AG490干预组BNP高于对照 组，低于心衰组，差异具有统计学意义 (P<0.05)。结论： JAK/STAT信号通路参与慢性心力衰竭进程，干预JAK/STAT信号通路可减轻腹主动脉缩窄大鼠心力衰竭的严重程度。     

心衰2号方对慢性心力衰竭大鼠血清AngⅡ及IL-6的影响

目的 观察心衰2号方对慢性心力衰竭时神经内分泌及炎症因子的影响.方法 以30只SD大鼠为实验对象,在腹主动脉缩窄法制作慢性心力衰竭大鼠模型基础上,进行血瘀造模,并随机分为假手术组、血瘀对照组、血瘀心衰加心衰2号方组(即心衰2号方组).其中血瘀心衰加心衰2号方组给予心衰2号方灌胃,血瘀心衰组及假手术组不予药物干预.灌胃4周后,对比各组大鼠血清血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、白细胞介素-6(IL-6)水平.结果 心衰2号方组与血瘀对照组比较AngⅡ、IL-6显著降低(P<0.01).结论 心力衰竭2号方能调控心衰时大鼠神经内分泌和炎症因子水平.     

慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及Fas基因、FasL（Fas蛋白配体）的变化

目的　本实验将探讨腹主动脉缩窄所致慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡与Fas及Fas蛋白配体 (FasLigand ,FasL)基因表达的变化 ,揭示二者与心力衰竭发展过程的关系。方法　以腹主动脉缩窄法建立大鼠慢性心力衰竭模型。 3 0只大鼠随机分成假手术组、手术左室代偿性肥厚组 (简称肥厚组 )及手术心衰组。采用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)观察发生心衰的大鼠和同期仅左室肥厚而未发生心衰的大鼠的心肌细胞凋亡情况 ,同时以免疫组化ABC显色法分别检测Fas与FasL蛋白水平变化 ,以逆转录聚合酶链反应法检测Fas基因mRNA的表达改变 ,从而探讨心肌组织中Fas基因的蛋白与mRNA表达水平与心肌细胞凋亡的关系以及二者在心衰发展过程中的作用。结果　假手术组心肌中仅有少许心肌细胞凋亡 ,实施手术的代偿性肥厚组与心衰组大鼠均有心肌细胞凋亡发生 ,但心衰组心肌细胞凋亡的数目明显高于对照组。大鼠经腹主动脉缩窄术后 4周 ,左室肥厚而未发生心衰的大鼠其心肌组织Fas蛋白阳性染色指数明显高于假手术组 ,但Fas配体蛋白阳性染色指数与假手术组间无显著性差异 ;而发生心衰的大鼠其心肌组织Fas及Fas配体蛋白阳性染色指数明显高于肥厚组 ,差异有显著性意义 (P <0 0 5)。与假手术组和肥厚组相比     

老年慢性心力衰竭合并低钠血症的分析与治疗

慢性心力衰竭亦称慢性充血性心力衰竭，是常见且严重的临床综合征，是心脏疾病的终末阶段。随着老龄人口的增加，心力衰竭成为老年人群住院的主要原因，而低钠血症作为主要的离子代谢紊乱又可诱发和加重心衰。笔者分析了老年慢性心力衰竭合并低钠血症20例的有关资料，探讨了心衰过程中低钠血症的发生机制及防治方法，现报告如下。     

大鼠心肌梗死后心力衰竭模型的建立和评估

目的建立大鼠心肌梗死后心力衰竭（心衰）模型,并进行评估,以提高存活率和成功率。方法分批对160只大鼠行冠状动脉左前降支结扎手术,同时设48只假手术组,计算死亡率。在4周时行血流动力学检查,检测心率（HR）、左心室舒张末压（LVEDP）、计算左室压力最大上升速率（+dp/dtm ax）和左室压力最大下降速率（-dp/dtm ax）。结果4周时模型组心率、+dp/dtm ax和-dp/dtm ax绝对值均低于假手术组（分别为P<0.05,P<0.01,P<0.01）,LVEDP则高于假术组（P<0.01）。随着手术大鼠例数的增多,存活率得到提高（P<0.05）。结论心梗后4周形成心衰模型,通过采取必要的措施,可以提高动物生存率。     

心力衰竭过程中调节性T细胞的变化及意义

目的 观察大鼠心力衰竭过程中外周血调节性T(Treg)细胞的变化规律并探讨其意义.方法 采用腹主动脉缩窄法制备大鼠心力衰竭模型,定期应用流式细胞术检测实验大鼠外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T细胞的比例.结果 ①大鼠经腹主动脉缩窄术处理8周时,心功能明显下降,心衰模型建立成功.②在腹主动脉缩窄术处理4周、8周时,心衰组大鼠外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T和CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T比例较同期sham组明显降低(P＜0.05)；在处理12周、16周时,其比例与sham组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 心衰发病过程中Treg细胞明显下调.Treg细胞可能成为心衰免疫调节治疗的新靶点.     

脂联素在慢性压力负荷性心力衰竭大鼠心肌中的表达

目的：探讨脂联素（adiponectin）蛋白在慢性心力衰竭尤其是伴有2型糖尿病的大鼠心肌组织中的分布及表达,以及糖尿病对心衰大鼠心肌中脂联素表达的影响.方法：选取Sprague-Dawley雄性大鼠,将其随机分为假手术组（SHAM组）、单纯2型糖尿病组（DM组）、单纯心力衰竭组（HFNDM组）和心力衰竭伴2型糖尿病组（HFDM组）.建立慢性压力负荷性心力衰竭的大鼠模型及高脂高糖饮食后小剂量链脲佐菌素（STZ）诱导的2型糖尿病大鼠模型.运用苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠的心脏组织学形态.通过免疫组化、Western Blot定位、定量研究脂联素在心肌中的表达. 结果：大鼠模型建立8周后,DM组及HFDM组大鼠体质量明显低于SHAM组（均P＜0.01）.HFNDM组、DM组及HFDM组的心脏重量指数均显著增加（P＜0.01）.HE染色显示心力衰竭大鼠心肌细胞肥大、排列不整齐、细胞间连接松散,心肌纤维紊乱.免疫组化结果表明各组大鼠心肌中均有脂联素蛋白的表达,定位于细胞浆.Western Blot显示脂联素在糖尿病心肌中低表达（P＜0.05）,心力衰竭心肌中高表达（P＜0.01）. 结论：尽管糖尿病会影响脂联素在大鼠心肌组织中的表达,但在心衰伴糖尿病时心肌中脂联素的表达量仍高于正常大鼠.     

利用超声心动图评定大鼠心脏功能的可行性研究

目的 :通过与血流动力学检测比较 ,确定 M-型超声心动图是否可用来评价正常和心肌梗死大鼠左心室功能和结构变化。方法　利用冠状动脉左前降支结扎术制备大鼠大面积心肌梗死模型后 ,术后 3 d和 3 0 d进行 M-型超声心动图测定、血流动力学检测和取材称左心室重量 ;同时也对心脏功能正常大鼠进行上述研究。结果　用 M-型超声心动图测定心脏功能正常大鼠 ( NOR组 )、心肌梗死急性心力衰竭大鼠 ( AHF组 )和慢性充血性心力衰竭大鼠( CHF组 )的 EF和 FS值与用血流动力学方法测得的 LVdp/ dtmax值呈良好的正相关 ( r=0 .811-0 .972 ,均 P<0 .0 1) ;心肌梗死后 3 d和 1月 EF值与 FS值变化趋势与 L Vdp/ dtmax值变化趋势一样 ,均明显低于 NOR组 (均 P<0 .0 1) ,而且 CHF组各值也明显低于 AHF组 (均 P<0 .0 1)。同时还观察到应用超声心动图测得的三种心功能状态大鼠左心室重量与精密天平检测结果基本一致 (均 P>0 .5 )。结论　无创性经胸壁二维引导 M-型超声心动图可用来动态评价心肌梗死引起的大鼠心脏功能和结构改变     

雷米普利对心肌梗死后心衰大鼠非梗死区胶原的抑制作用

目的 研究心肌梗死后心衰大鼠非梗死区心肌血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)及其Ⅰ型受体(AT1-R)表达对心室重构的影响及雷米普利的干预作用.方法 结扎大鼠左冠状动脉前降支并饲养6 w的16只存活大鼠,随机分为模型组及雷米普利组,每组8只,另取8只大鼠为假手术组,连续灌胃给药4 w后测定大鼠血流动力学参数,ELISA方法检测血清及左心室非梗死区AngⅡ的含量,RT-PCR 法测定左心室非梗死区心肌组织AT1-R mRNA表达水平,Masson染色观察非梗死区心肌胶原的沉积.结果 雷米普利能明显升高左心室内压最大上升和最大下降速率(±dp/dt_(max)),降低左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)(P<0.05或P<0.01),但对心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)无明显影响(P>0.05),同时明显降低血清及左心室非梗死区AngⅡ的含量及下调AT1-R mRNA 表达水平(P<0.01或P<0.001),Masson染色可见非梗死区心肌胶原沉积明显减轻.结论 雷米普利对梗死后心衰大鼠非梗死区心肌间质胶原重构有显著的抑制作用,其作用机制与下调AT1-R表达水平及减轻胶原沉积有关.     

鼠龄对急性心肌梗死大鼠Bcl-2和Bax表达的影响

目的 建立成年和老年Wistar大鼠急性心肌梗死模型,比较鼠龄对大鼠冠状动脉(冠脉)结扎后不同时间点的凋亡指数及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.方法 115只6～24月龄大鼠中,95只结扎冠脉左前降支,80只(成年、老年大鼠各40只)术后存活,根据鼠龄分为老年心肌梗死组(40只)和成年心肌梗死组(40只),按结扎前降支后的1 h、3 h、5 h、1 d和7 d各分为5组(每组8只).假手术老年组和假手术成年组各10只.心肌梗死组分别于冠脉结扎后1、3、5 h和1、7d时记录血流动力学参数,包括心率、左室收缩压(LVSP)、左室终末舒张压(LVEDP)和左室内压最大收缩和舒张速率(±dp/dtmax).采用伊文蓝-红四氮唑(TTC)染色和原位末端标记(TUNEL)法检测心肌坏死和凋亡程度.免疫组化染色检测心肌内Bcl-2和Bax的形成.结果 大鼠心肌在冠脉结扎后的1 h内即有凋亡出现,并且凋亡达高峰的时间老年心肌梗死组较成年心肌梗死组早.在冠脉结扎3 h,老年心肌梗死组与成年心肌梗死组的凋亡指数分别为(51.90±23.15)%与(18.67±17.15)%,差异有统计学意义(P<0.01).Bcl-2蛋白的表达值老年假手术组和成年假手术组分别为(2.7±0.9)分和(1.8±0.8)分,差异有统计学意义(P<0.05).Bax蛋白的表达两组分别为(6.2±2.9)分和(4.2±1.5)分,差异有统计学意义(P<0.05).结论 老年大鼠抵抗心肌缺血的能力差,鼠龄可能会改变Bcl-2和Bax蛋白的表达而增加心肌细胞凋亡.     

法舒地尔对急性心肌梗死大鼠心肌组织Caspase-3、Rho激酶表达及血流动力学功能的影响

目的：研究法舒地尔对急性心肌梗死大鼠心肌组织Caspase-3、Rho激酶表达及血流动力学功能的影响。方法：取假手术和心肌梗死手术24 h后存活的雄性Wistar大鼠入组,随机分为3组,每日腹腔注射给药1次,至术后满3周。A组（正常大鼠假手术组）：磷酸盐缓冲盐水（PBS）+生理盐水。B组（心肌梗死组+安慰剂对照组）： PBS+生理盐水。C组（心肌梗死组+法舒地尔治疗组）：PBS+法舒地尔（100 mg/kg）。3周后通过HE染色观察心肌组织病理形态学变化,采用Masson检测心肌梗死面积,采用Western blot检测心肌组织Caspase-3蛋白的表达;RT-PCR法测定Rho激酶mRNA的表达;并分别检测血流动力学指标左心室内压峰值（LVSP）、左心室舒张末压（LVEDP）及左心室压力上升和下降最大速率（&#177;dp/dtmax）的变化。结果：HE染色显示A组心肌组织未出现任何变化,其心肌细胞以及肌纤维排列整齐,细胞核清晰,无中性粒细胞浸润。B组心肌组织中有大量炎性细胞,心肌横纹严重破坏,肌纤维断裂、溶解、坏死、心肌细胞间质充血水肿,间隙增大,局部存在炎细胞浸润。C组较B组来讲,组织形态学改变程度明显好转,中性粒细胞浸润减少,肌纤维排列有序,心肌组织充血、肿胀减轻。A组无心肌梗死,B组心肌梗死面积为（0.48&#177;0.03）%,C组心肌梗死面积为（0.20&#177;0.05）%,C组心肌梗死面积明显低于B组（t=16.793,P=0.000）。与A组相比,B组大鼠心肌细胞Caspase-3蛋白表达增加,Rho激酶mRNA表达增加,差异均有显著性（P=0.000）;与B组比较,C组大鼠Caspase-3蛋白表达显著减少,Rho激酶mRNA显著减少,差异均具有统计学意义（P=0.000）。血流动力学指标方面,与A组相比,B组大鼠LVSP、+dp/dtmax及-dp/dtmax降低,LVEDP指标升高,差异均有显著性（P&lt;0.01）;与B组相比,C组大鼠LVSP、+dp/dtmax及-dp/dtmax显著升高,LVEDP显著降低,差异均有统计学意义（P&lt;0.01）。结论： Caspase-3和Rho激酶在AMI大鼠中表达明显升高,两者可能参与了心肌细胞凋亡。法舒地尔能减少Caspase-3和Rho激酶表达,改善血流动力学功能,其对心肌的保护作用可能与抗心肌细胞凋亡机制有关。     

胰岛素与二甲双胍对Ⅱ型糖尿病大鼠心梗后心脏交感神经重构的影响

目的:探讨胰岛素与二甲双胍对Ⅱ型糖尿病(DM)大鼠心梗(MI)后心脏交感神经重构的影响。方法: 将30只实验大鼠随机分为对照组、胰岛素干预组及二甲双胍干预组,每组10只,分别从各组大鼠的左心室梗死周边、室间隔和右心室取材,通过免疫组化染色法并结合计算机图像处理技术,对心肌中交感神经的分布密度进行对比分析。结果: 与对照组比较,胰岛素干预组心脏各部位交感神经的密度均增加(P<005);而二甲双胍干预组则表现为降低(P<005)。结论: 胰岛素可加重Ⅱ型DM大鼠MI后心脏交感神经重构的程度;而二甲双胍正好相反。     

混合高脂饲料喂养新西兰白兔建立DHF模型的实验

目的:建立兔舒张性心力衰竭(DHF)模型。方法: 采用混合高脂饲料喂养新西兰白兔12周，并设正常饲料组进行对照观察。结果: 高脂组与空白对照组比较，高脂组有心力衰竭的症状、体征，在心率、左心室收缩期最大压力上升速率(LV+dp/dtmax)、左室收缩指数（S-1）没有差异，在左室收缩压（LVSP）、左心室舒张末压(LVEDP)、左室压力最大下降速率(LV-dp/dtmax)有显著差异（P<0.05），符合DHF动物模型。结论: 采用混合高脂饲料喂养新西兰白兔可建立DHF模型。     

快速洋地黄类药对犬实验性急性心肌梗死早期血流动力学、梗死面积的影响

探讨洋地黄类药物对急性心肌梗死早期血流动力学、梗死面积的影响。方法３０只健康种状随机分为对照组及哇巴因组,结扎左冠状动脉前降支,造成实验性ＡＭＩ模型,通过心内导管及主动脉电磁流量计测量结扎前后、用药前后两组血流动力学,冠状动脉流量。心肌Ｎ－ＢＴ染色测量两组梗死面积。     

精氨酸加压素受体拮抗剂在实验性充血性心力衰竭力的作用

目的：探讨精氨酸加压素受体拮抗剂在慢性充血性心力衰竭中的作用。方法：大鼠左冠拮扎,造成左室大面积梗死,存活10周,行左心室,股动脉,。股静脉插管,测定其收缩压（SBP）,舒适压（DBP）,平均动脉后（MBP）,左心室压峰值（LVSP）,左室舒张末期压（LVEDP）,左室内压最大上升速率（＋d/dtmax),左室内压最大下降速率（－dp/dtmax),收缩期心力环L（1＋2）,舒张期心力不环（L（3＋4）,总心力环（Lo)及心率HR,LVEDP＞2kPa大鼠随机分为：（1）心衰给精氨酸加压素（AVP）V1／V2受体拮抗剂组;（2）心衰给50g/L葡萄糖（GS）组,另设（3）假手术组,静注V1／V2受体拮抗剂,3组产测定给药前及给药后10,20,30,40,60,90,120min时间点血液动力学及心肌舒缩下降,并持续到实验结束,30min时＋dp/dtmax及－dp/dtmaxz增加,并于40min时升至最大,伴有L（1＋2）,L（3＋4）和L0的明显增加,结论,心衰大鼠静注AVP V1／V2受体拮抗剂后,心肌的收缩,舒张功能得以改善,对充血性心衰有一定的治疗作用。     

心肌肽素对急性心肌梗死大鼠心脏血流动力学及心肌细胞钙电流的作用

目的探讨心肌肽素（cardiomyopeptidi）对急性心肌梗死（AMI）大鼠心脏血流动力学及心肌细胞钙电流的作用。方法大鼠开胸左前降支结扎造成AMI。开胸前5min实验组大鼠舌静脉注射浓度为50μg／ml的心肌肽素溶液50μl,并设正常对照组、AMI组及心肌肽素实验组,行血流动力学检查;酶解分离心室肌细胞,采用全细胞膜片钳记录技术记录左前降支供血区心外膜细胞的L型Ca^2＋电流（L—Ica）的作用。结果应用心肌肽素（50p,g／m1）后与AMI组比较,血流动力学指标明显改善（P〈0．05,n=7）。②应用心肌肽素（50μg／m1）后,L-型钙电流（L—ICa）由给药前的（0．15±0．34）nA增加到给药后的（0．31±0．37）nA（P〈0．01,n=7）。结论心肌肽素可以明显改善AMI大鼠心脏血流动力学,可以增加AMI大鼠心室肌细胞L-型钙电流的幅值。     

应变/应变率成像结合基质金属蛋白酶-9评价心力衰竭大鼠心肌收缩功能及心室重构

目的 应用应变/应变率成像(S/SRI)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达评价心肌梗死后心力衰竭(心衰)大鼠心肌收缩功能及心室重构.方法 70只雄性SD大鼠随机分为4组:手术4周组及手术8周组,开胸结扎左冠状动脉前降支;假手术组,同样开胸,但不结扎;正常组作为对照.应用S/SRI定量评价心肌局部收缩功能,用Western blot法检测各组实验大鼠心肌MMP-9蛋白表达.结果 (1)除下壁中间段及基底段外,手术4周组各节段收缩期峰值应变、收缩期峰值应变率、收缩末期应变均明显下降(P<0.05),收缩后应变指数升高(P<0.05);手术8周组各指标值较手术4周组变化更明显(P<0.05).(2)手术4周组和手术8周组大鼠心肌MMP-9蛋白的表达明显增加(P<0.05),且手术8周组MMP-9蛋白的表达高于手术4周组(P<0.05).结论 S/SRI技术可定量检测心衰大鼠局部心肌收缩功能,在术后8周内大鼠心肌组织MMP-9蛋白的表达随心衰的进展而增高.