蕏苓多糖对小鼠HepA瘤细胞p16,Rb基因表达的影响

目的探讨蕏苓多糖抗肿瘤作用可能机制.方法采用免疫组化的方法研究蕏苓多糖对小鼠p16、Rb基因表达的影响.结果蕏苓多糖作用后,小鼠HepA瘤细胞p16基因表达产物(P16蛋白)表达显著增强(P<0.01);Rb基因表达产物(P105-Rb蛋白)表达增强(P<0.05).结论蕏苓多糖对小鼠HepA瘤细胞抑癌基因p16、Rb有激活作用.     

蕏苓多糖对小鼠HepA瘤细胞p16,Rb基因表ZH达的影响

目的　探讨蕏苓多糖抗肿瘤作用可能机制。方法　采用免疫组化的方法研究蕏苓多糖对小鼠p1 6、Rb基因表达的影响。结果　蕏苓多糖作用后 ,小鼠HepA瘤细胞p1 6基因表达产物 (P1 6蛋白 )表达显著增强 (P <0 0 1 ) ;Rb基因表达产物 (P1 0 5-Rb蛋白 )表达增强 (P <0 0 5)。结论 :　蕏苓多糖对小鼠HepA瘤细胞抑癌基因p1 6、Rb有激活作用。     

树舌多糖对HepA小鼠骨髓细胞染色体SCE影响的研究

目的：为了探讨树舌多糖抑制肿瘤的作用原理。方法：用树舌多糖作用于HepA(腹水型肝癌）小鼠。结果：其抑瘤效果显著，并且能明显降低其染色体SCE值。结论：经统计学分析差异显著，认为树舌多糖的抗肿瘤作用是从细胞和基因水平进行的。     

哮喘小鼠支气管MIP-1α、RANTES基因和蛋白的表达

目的 :研究巨噬细胞炎性蛋白 - 1α(MIP - 1α)、调节激活正常T细胞表达和分泌细胞因子 (RANTES)基因和蛋白在哮喘小鼠支气管中的表达情况。方法 :2 0只二级雄性BALB/C小鼠随机分为两组 :正常小鼠组 (A0 组 )和哮喘小鼠组 (B0 组 )。以卵清白蛋白 (OVA)致敏激发法复制小鼠哮喘模型 ,采用免疫组化法和原位杂交法测定两组小鼠支气管MIP - 1α、RANTES蛋白及基因的表达情况。结果 :免疫组化显示 ,B0 组支气管MIP - 1α、RANTES蛋白的表达均显著高于A0 组 (P <0 0 1) ,其主要表达细胞是上皮细胞 ;原位杂交亦显示 ,B0 组支气管MIP - 1α、RANTES基因的表达均显著高于A0 组 (P <0 0 1) ,其主要表达细胞是上皮细胞。结论 :本研究证明MIP - 1α和RANTES等在实验性哮喘时支气管中的高表达 ,上皮细胞是主要表达细胞。     

树舌多糖的免疫调节效应及其抑瘤作用

树舌多糖在体外可协同ConA激活T淋巴细胞增殖效应、诱导Th细胞产生淋巴因子活IL-2、γ-IFN),可直接刺激小鼠腹腔Mφ分泌IL-1样活性物质;在体内树舌多糖亦增强ConA诱导T淋巴细胞增殖效应、γ-IFN的产生。此外尚观察到:树舌多糖可使小鼠带瘤率降低及瘤重减轻,并部分拮抗由于接种肿瘤引起的小鼠体内NKC活性和脾细胞产生IL-2、γ-IFN的抑制。     

p16INK4A和 p15INK4B对人肝癌细胞增殖和凋亡影响的研究

目的　为探讨抑癌基因 p16 INK4 A和 p15 INK4 B对 Rb基因状态不同的人肝癌细胞系增殖和凋亡的影响。方法　在分析细胞系遗传背景鉴定基础上采用脂质体将构建的 p XJ- p16、p XJ- p15重组质粒转染人肝癌细胞系 BEL74 0 2 (p16 / p15 Rb )和 SMMC772 1(p16 / p15 / Rb- )。应用 PCR、RNA斑点印迹、MTT、集落形成、流式细胞仪等技术检测外源性 p16和 p15基因、m RNA表达及其对肝癌细胞增殖、凋亡的影响。结果　经转染的 BEL74 0 2 - p16 ,BEL74 0 2 - p15细胞 ,分别存在外源性 p16、p15基因 ,在含外源基因细胞中相应的 m RNA表达增强 ;BEL74 0 2 - p15细胞生长速度、集落形成率显著低于对照细胞 BEL 74 0 2 (P<0 .0 1) ;细胞周期分析观察到与亲本细胞比较 ,BEL 74 0 2 - p15的 G1期细胞由 37.7%增高到 4 3.6 % ,S期细胞由 2 2 %下降到 13% (P<0 .0 5 ) ,并出现 G1亚峰 (凋亡峰 )。与此相反 ,BEL74 0 2 - p16细胞增殖未见抑制 ,细胞周期分布无明显差异 ,集落形成率也未见减少。此外 ,SMMC772 1- p16细胞增殖也无抑制。结论　外源性 p15 INK4 B具有抑制人肝癌细胞生长 ,诱导细胞凋亡的作用 ,其作用不受内源性p15影响。而 p16 INK4 A对肝癌细胞生长抑制的作用可能依赖于 RB途径的完整性。     

ΔCREB真核表达载体的构建及对心肌细胞TNFα含量的影响

目的 :构建ΔCREB的真核表达载体 ,观察其对TNFα等细胞因子的影响 ,探索心衰发生发展的始动因素。方法 :利用穿梭质粒pAdTrack构建核转录因子ΔCREB的真核表达载体pAdTrack -ΔCREB ,然后转染培养的乳鼠心肌细胞。将心肌细胞随机分为空白对照组、forskolin(10 μmol/L)组、转染组和转染后加forskolin组 ,观察各组心肌细胞ΔCREB的表达以及TNFα含量的变化。结果 :①定量逆转录多聚酶链反应 (RT -PCR)显示 ,ΔCREB/β-actin定量比值 ,转染组 (1 0 0 10 16± 0 0 5 35 2 0 )明显高于对照组 (0 76 132 2± 0 0 4 4 0 90 ) ,(P <0 0 1) ;免疫细胞化学检测心肌细胞ΔCREB蛋白标记阳性率 ,转染组 (2 8 88% +9 0 5 % )亦明显高于对照组 (6 6 3% +3 38% ) ,(P <0 0 1)。②细胞上清TNFα含量 ,转染后加forskolin组 (34 36pmol/L± 12 17pmol/L)明显高于对照组 (16 91pmol/L± 5 16pmol/L) ,(P <0 0 1)。结论 :转染ΔCREB可显著升高心肌细胞TNFα含量。cAMP介导的CREB转录激活作用促进了TNFα基因表达 ,可能在心力衰竭的发展中起重要作用。     

谷胱甘肽对酵母多糖诱导的小鼠肝TNF-α基因表达的影响

在分子水平上研究谷胱甘肽对酵母多糖诱导的小鼠肝组织肿瘤坏死因子－α基因表达的影响。腹腔注射（ip)谷胱甘肽（20mg/kg)，然后ip酵母多糖（0.5g/kg)。RT－PCR检测肝组织TNF－αmRNA水平，放射免疫地检测TNF－α蛋白水平及DTNB显色法检测谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)活性。发现损伤组肝组织TNF－αmRNA，蛋白水平高于对照组（P＜0．05），谷胱甘肽组肝组织TNF－αmRNA，蛋白水平都低于损伤组。谷胱甘肽组肝组织谷胱甘须过氧化物酶活性高于其他各组（P＜0．05）。谷胱甘肽抑制了由酵母多糖诱导的小鼠肝组织TNF－αmRNA蛋白的表达。     

食管鳞状细胞癌中miR-4687-5P及STIM1的表达及调控机制

目的检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)细胞株及组织中miR-4687-5P及STIM1基因的表达及STIM1基因启动子区的甲基化状况,进一步探讨miR-4687-5P与STIM1基因表达的相关性以及两者是否具有共同的表达调控机制。方法应用qRT-PCR及甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法检测ESCC细胞株(TE13、KYSE150、T.Tn)及89例ESCC及相应癌旁非肿瘤组织中miR-4687-5P及STIM1基因的表达及甲基化情况,并分析其相关性。结果 ESCC组织中miR-4687-5P与STIM1基因表达均明显下调,且表达具有一致性。miR-4687-5P与STIM1基因在3株ESCC细胞系中表达较弱,应用甲基化抑制剂5-aza-2’-deoxycytidine(5-Aza-Dc)处理细胞株后两基因表达均明显增强,而甲基化条带明显减弱或消失; ESCC组织中,STIM1基因启动子区呈高甲基化状态,且其甲基化频率与STIM1及miR-4687-5P的表达均相关(P 0. 01)。结论 ESCC中miR-4687-5P与STIM1基因表达均下调; miR-4687-5P表达可能受宿主基因STIM1启动子的调控,其启动子区的高甲基化状态可能是引起miR-4687-5P与STIM1基因在ESCC中表达下调的共同机制之一。     

细胞因子对肾癌细胞株786-0、GRC-1 Fas、FasL表达的调节及其意义

目的 :研究细胞因子对肾癌株Fas、FasL表达的影响及其意义。方法 :单独或联合应用IFNγ ,IFNα ,IL 2 ,TNFα刺激肾癌株 786 0、GRC 1细胞并检测Fas、FasL表达 ,以Fas单克隆抗体 (FasAb)诱导其凋亡 ,以JurkatT细胞共培养试验检测其FasL功能。结果 :1 IFNγ、IFNα均能显著上调 786 0、GRC 1细胞的Fas表达 (P <0 0 1,P <0 0 1) ,并促进FasAb诱导的凋亡 (P <0 0 1,P <0 0 1)。 2 TNFα、IFNα能分别上调 786 0、GRC 1细胞的FasL表达。IFNγ能显著上调 786 0、GRC 1细胞的FasL表达(P<0 0 1,P <0 0 1) ,并促进JurkatT细胞凋亡 (P <0 0 1,P <0 0 1)。结论 :IFNγ、IFNα可增强肾癌细胞株的Fas表达 ,并促进FasAb介导的凋亡。但其亦能上调肾癌细胞FasL表达并增强其对淋巴细胞的攻击作用。