脉冲电磁场对成骨细胞-破骨细胞复合培养体系中成骨细胞膜电位及细胞内钙离子的影响

目的探讨脉冲电磁场(pulsed electric-magneticfields,PEMF)对体外培养成骨细胞-破骨细胞复合体系中成骨细胞膜电位及细胞内游离钙离子浓度的影响,为脉冲电磁场治疗骨质疏松寻找理论依据.方法体外分离、培养1 d龄SD乳鼠颅骨成骨细胞和四肢骨破骨细胞,利用共育培养板将两者培育在同一环境中;实验分空白组、维拉帕米组、河豚毒素组及维拉帕米+河豚毒素组,根据荧光探针DiBAC4(3)及Fluo-3/AM能与活细胞细胞膜及胞内钙离子特异性动态结合后发出荧光的特性,分别对各组成骨细胞进行膜电位和钙离子荧光染色,染色后利用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)技术分别测量各组行PEMF处理前后荧光强度的改变,以间接反应细胞膜电位、细胞内钙离子浓度的变化.结果在行PEMF处理前各组细胞细胞膜电位及细胞内钙离子浓度稳定在一定基线水平(空白组细胞膜电位及细胞内钙离子浓度的荧光基准值分别为(37.68±1.81)和(164.24±2.82),而在PEMF作用后,空白组细胞胞内膜电位荧光值于40 s后开始升高,150 s左右达峰值(75.05±2.27),表明细胞膜电位出现了去极化;而钙荧光值的升高出现在PEMF作用后约60 s时,120 s后达到峰值(237.22±2 67),且升高后在PEMF作用过程中一直稳定在一定水平.PEMF使细胞出现去极化的效应能被钠通道阻断剂河豚毒素所阻断,而钙通道阻断剂维拉帕米对其没有明显的影响;但河豚毒素及维拉帕米均能使PEMF升高细胞内钙离子浓度的效应受阻.结论PEMF作用于成骨细胞钠离子通道引致细胞出现去极化,从而开放电压依赖型钙离子通道而升高细胞内钙离子浓度,钙离子作为细胞内第二信使,介导PEMF对成骨细胞功能的调节作用.     

脉冲电磁场在成骨细胞-破骨细胞共育培养体系中的生物学作用

目的：探讨脉冲电磁场在成骨细胞一破骨细胞共育培养体系中对成骨细胞的影响。方法：实验于2004-03／09在江西博士生物制品公司细胞生物实验室完成。体外分离、培养1d龄SD乳鼠颅骨成骨细胞和四肢骨破骨细胞．利用共育培养板将二者培育在同一环境中；分处理组、空白对照组、阳性对照组3组。处理组共育培养体系施加50Hz，8Gs的脉冲电磁场1h／d；空白对照组置于同样线圈下而不通以电流；阳性对照组加入成骨细胞促增殖剂氟化钠（1&;#215;10^-5mol/L）；处理7d后观察各组成骨细胞增殖、凋亡、碱性磷酸酶活性变化，处理15d后进行矿化结节测定。结果：①各组成骨细胞增殖情况：合成后期＋合成期细胞比率处理组和阳性对照组明显高于空白对照组[（12．34&;#177;1．85）％．（14．10&;#177;1．40）％，（9．57&;#177;1．05）％，r=4．25，P〈0．01]；而处理组和阳性对照组之间差别不显著（P〉0．05）。②细胞凋亡情况：处理组和阳性对照组明显低于空白对照组（0．0276&;#177;0．0059）％，（0．2853&;#177;0．01331％．（0．0386&;#177;0．00311％，χ^2=3．86，P〈0．01）；而处理组和阳性组之间亦无显著差别（P〉0．05）。（∞碱性磷酸酶活性：经脉冲电磁场作用以后，处理组培养上清碱性磷酸酶活性与空白对照组相比．有一定的升高[（3174&;#177;533）．（3019&;#177;583）nkat／L．t=5．63，P〈0．011，而与阳性组之间的差异无显著性意义（P〉0．05）。（少钙化结节结果：各组每40倍视野下矿化结节平均数量和单个结节平均面积亦均有显著的差异（r=3．45，t=6．33，P〈0．01）．，其大小排序为：处理组〉阳性组〉空白对照组。结论：一定频率和强度的脉冲电磁场对体外共育培养的成骨细胞具有明显的促增殖、促分化及促矿化功能。①经脉冲电磁场作用以后，成骨细胞周期发生了改变，DNA合成和细胞分裂增加，促进了复合培养体系中成骨细胞的自然增殖，减少了成骨细胞的自然凋亡，其促增殖及降低细胞自然凋亡的效应同成骨细胞增殖促进剂氟化钠相当。②脉冲电磁场在促进成骨细胞由幼稚细胞向成熟分泌型细胞分化方面．有明显的促进作用。③经脉冲电磁场作用15d后，共育体系成骨细胞室矿化率增加，成骨细胞矿化功能得以提高．同其经脉冲电磁场作用以后分化加速相适应。     

脉冲电磁场在成骨细胞-破骨细胞共育培养体系中的生物学作用

目的:探讨脉冲电磁场在成骨细胞-破骨细胞共育培养体系中对成骨细胞的影响。方法:实验于2004-03/09在江西博士生物制品公司细胞生物实验室完成。体外分离、培养1d龄SD乳鼠颅骨成骨细胞和四肢骨破骨细胞,利用共育培养板将二者培育在同一环境中;分处理组、空白对照组、阳性对照组3组。处理组共育培养体系施加50Hz,8Gs的脉冲电磁场,1h/d;空白对照组置于同样线圈下而不通以电流;阳性对照组加入成骨细胞促增殖剂氟化钠(1×10-5mol/L);处理7d后观察各组成骨细胞增殖、凋亡、碱性磷酸酶活性变化,处理15d后进行矿化结节测定。结果:①各组成骨细胞增殖情况:合成后期+合成期细胞比率处理组和阳性对照组明显高于空白对照组[(12.34±1.85)%,(14.10±1.40)%,(9.57±1.05)%,χ2=4.25,P<0.01];而处理组和阳性对照组之间差别不显著(P>0.05)。②细胞凋亡情况:处理组和阳性对照组明显低于空白对照组(0.0276±0.0059)%,(0.2853±0.0133)%,(0.0386±0.0031)%,χ2=3.86,P<0.01);而处理组和阳性组之间亦无显著差别(P>0.05)。③碱性磷酸酶活性:经脉冲电磁场作用以后,处理组培养上清碱性磷酸酶活性与空白对照组相比,有一定的升高[(3174±533),(3019±583)nkat/L,t=5.63,P<0.01],而与阳性组之间的差异无显著性意义(P>0.05)。④钙化结节结果:各组每40倍视野下矿化结节平均数量和单个结节平均面积亦均有显著的差异(χ2=3.45,t=6.33,P<0.01),其大小排序为:处理组>阳性组>空白对照组。结论:一定频率和强度的脉冲电磁场对体外共育培养的成骨细胞具有明显的促增殖、促分化及促矿化功能。①经脉冲电磁场作用以后,成骨细胞周期发生了改变,DNA合成和细胞分裂增加,促进了复合培养体系中成骨细胞的自然增殖,减少了成骨细胞的自然凋亡,其促增殖及降低细胞自然凋亡的效应同成骨细胞增殖促进剂氟化钠相当。②脉冲电磁场在促进成骨细胞由幼稚细胞向成熟分泌型细胞分化方面,有明显的促进作用。③经脉冲电磁场作用15d后,共育体系成骨细胞室矿化率增加,成骨细胞矿化功能得以提高,同其经脉冲电磁场作用以后分化加速相适应。     

脉冲电磁场对去卵巢骨质疏松症大鼠成骨细胞和破骨细胞凋亡的影响

目的观察脉冲电磁场（PEMF）对去卵巢骨质疏松症（OVX-OP）大鼠成骨细胞、破骨细胞凋亡的影响，并探讨PEMF治疗OVX-OP的作用机制。方法取6月龄雌性未孕Wistar大鼠40只，随机分为假手术组、卵巢切除组（模型组）、卵巢切除＋雌激素替代治疗组（雌激素组）和卵巢切除＋PEMF治疗组（电磁场组）。模型组、电磁场组和雌激素组均行双侧卵巢切除术，假手术组不切除卵巢。术后第9周开始治疗：雌激素组采用苯甲酸雌二醇肌肉注射，剂量为0．5mg／kg体重，每2周注射1次；电磁场组大鼠暴露于PEMF中，每日1次，每次1h。模型组和假手术组动物不予以任何治疗。治疗10周后处死各组实验动物，取左侧胫骨上1／3进行骨形态计量学检查。采用原位DNA末端标记染色法（TUNEL法）和透射电镜检测L6椎体成骨细胞、破骨细胞的凋亡情况。采用免疫组织化学法检测k椎体成骨细胞、破骨细胞中Fas、Bax和Bcl-2的表达。结果①透射电镜观察显示，电磁场组成骨细胞活性增强，无明显凋亡征象；而破骨细胞活性减弱，可见典型细胞凋亡征象。②电磁场组的成骨细胞凋亡指数明显低于模型组（P〈0．05），而破骨细胞凋亡指数明显高于模型组（P〈0．05）。③电磁场组Fas阳性成骨细胞数明显少于模型组，Fas阳性破骨细胞数明显多于模型组（P〈0．05），成骨细胞Bax／Bcl-2显著降低（P〈0．05），破骨细胞Bax／Bcl-2显著增高（P〈0．05）。④电磁场组OVX-OP大鼠骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数量明显高于模型组，而骨小梁分离度明显低于模型组（P〈0．05）。结论PEMF对OVX-OP大鼠成骨细胞凋亡具有抑制作用，对破骨细胞凋亡具有促进作用，汶可能县苴治疗OVX-0P的机制之一。     

旋转恒定强磁场对大鼠骨密度及生物力学参数以及破骨细胞影响的体内外实验

目的：探讨磁场直接提高骨密度的作用途径，从而为骨质疏松的磁疗提供科学依据。方法：实验分别于2003—12／2004—06在深圳大学生命科学学院微生物基因工程重点实验室及香港城市大学深圳研究中心细胞学实验室完成。①体内研究：选择雌性SD大鼠90只，随机分为6组，每组15只，除假手术组外另5组大鼠均切除卵巢。曝磁处理于卵巢切除2周后进行。假手术组仅手术切除卵巢附近一小块脂肪；去卵巢组仅进行卵巢切除术；去卵巢＋钙组另外给予200mg／kg苏糖酸钙灌胃，1次／d；去卵巢＋钙＋磁30min／d组在去卵巢＋钙组的基础上给予30min／d曝磁30d处理；去卵巢＋磁30min／d组仅给予去卵巢大鼠30min／d曝磁30d处理；去卵巢＋磁60min／d组在去卵巢＋磁30min／d组基础上曝磁时间延长为60min／d，共30d。分别磁场对各组大鼠骨密度、骨强度、骨钙含量、雌二醇和骨钙素的影响。检测成骨细胞、破骨细胞的生长和功能的指标-骨碱性磷酸酶及尿脱氧吡啶交联水平。②体外研究：为进一步在细胞水平阐明磁场影响骨密度的原理，培养RAW264．7细胞株（前破骨细胞），使用破骨细胞分化因子诱导其向破骨细胞分化，同时外加磁场处理，观察磁场对RAW264．7细胞株生长、成熟情况的影响。另外在不同强度磁场下培养兔破骨细胞，观察对骨片的吸收情况。结果：纳入大鼠90只，全部进入结果分析，无脱失。①体内研究：各组大鼠骨密度及生物力学参数的变化：所有曝磁组大鼠的骨密度均高于去卵巢组，其中去卵巢＋磁60min／d组大鼠显著高于去卵巢组（F=6．98，P〈0．05）。各曝磁组大鼠骨碱性磷酸酶含量显著高于去卵巢组及假手术组（F=6．98，9．14，P〈0．05）。各曝磁组大鼠尿脱氧吡啶交联水平显著低于去卵巢组（F=21．41，P〈0．01）。②体外研究：强恒定磁场对RAW264．7细胞生长、分化和功能的影响：在磁场作用下培养的经破骨细胞分化因子诱导的RAW264．7细胞株加速凋亡，而兔破骨细胞裙边消失，吸收骨片的能力丧失。结论：旋转恒定磁场能够促进大鼠成骨细胞的生长和分泌功能、抑制破骨细胞生长和破骨功能，从而提高骨密度及骨强度，对于骨质疏松有较好的干预效果。     

脉冲电磁场对成骨和破骨代谢的影响

背景：脉冲电磁场对成骨细胞、破骨细胞、骨基质合成均有明显作用。目的：旨在探究脉冲电磁场在成骨和破骨代谢中的作用以及治疗骨质疏松的机制,以促进其临床应用。方法：由第一作者应用计算机检索PubMed、中国期刊全文数据库（CNKI）、维普数据库和万方数据库1997-05/2011-08相关文献。在标题、摘要、关键词中以＂pulsed electromagnetic field（PEMFs）,bone metabolism,osteoporosis,osteoblast,osteoclast,bone marrow mesenchymal stem cells（BMMSCs）＂或＂脉冲电磁场,骨代谢,骨质疏松,成骨细胞,破骨细胞,骨髓间充质干细胞＂为检索词进行检索。选择文章内容与脉冲电磁场有关者,同一领域文献则选择近期发表在权威杂志文章进行分析。结果与结论：初检得到389篇文献,根据纳入标准选择关于假体无菌性松动分析及处理的46篇文献进行综述。脉冲电磁场可促进成骨代谢,抑制破骨代谢,参与调节转化生长因子β,白细胞介素6等骨代谢相关的细胞因子,促进骨基质形成,改善骨生长微环境,对骨髓间充质干细胞的增殖分化亦有促进作用。推测脉冲电磁场治疗骨质疏松及其并发症有重要的临床价值。     

体外成骨细胞和破骨细胞联合培养方式的研究进展

国内外对成骨细胞、破骨细胞的来源、功能和分泌进行了大量的实验和研究,但随着研究的深入,诸多的学者发现成骨细胞和破骨细胞之间存在着复杂的联系,对成骨细胞和破骨细胞共育的研究,有助于探索骨改建的过程,特别是对骨代谢性疾病有较全面的认识。国内外对于成骨细胞、破骨细胞分别培养的方式,特别是联合培养所采用的方式有着不同的观点。     

脉冲电磁场对成骨和破骨代谢的影响

背景:脉冲电磁场对成骨细胞、破骨细胞、骨基质合成均有明显作用。目的:旨在探究脉冲电磁场在成骨和破骨代谢中的作用以及治疗骨质疏松的机制,以促进其临床应用。方法:由第一作者应用计算机检索PubMed、中国期刊全文数据库(CNKI)、维普数据库和万方数据库1997-05/2011-08相关文献。在标题、摘要、关键词中以"pulsed electromagnetic field(PEMFs),bone metabolism,osteoporosis,osteoblast,osteoclast,bone marrow mesenchymal stem cells(BMMSCs)"或"脉冲电磁场,骨代谢,骨质疏松,成骨细胞,破骨细胞,骨髓间充质干细胞"为检索词进行检索。选择文章内容与脉冲电磁场有关者,同一领域文献则选择近期发表在权威杂志文章进行分析。结果与结论:初检得到389篇文献,根据纳入标准选择关于假体无菌性松动分析及处理的46篇文献进行综述。脉冲电磁场可促进成骨代谢,抑制破骨代谢,参与调节转化生长因子β,白细胞介素6等骨代谢相关的细胞因子,促进骨基质形成,改善骨生长微环境,对骨髓间充质干细胞的增殖分化亦有促进作用。推测脉冲电磁场治疗骨质疏松及其并发症有重要的临床价值。     

马钱子碱对多发性骨髓瘤中成骨细胞及破骨细胞代谢的影响

本研究旨在探讨体外马钱子碱对多发性骨髓瘤(MM)中成骨细胞早期分化和破骨细胞代谢途径的影响,同时比较马钱子碱与硼替佐米在体外对多发性骨髓瘤的影响。用MTT法检测硼替佐米与马钱子碱对多发性骨髓瘤细胞株U266的半数抑制浓度(IC50);将多发性骨髓瘤细胞株U266的上清液加入到成骨细胞MC3T3-E1诱导分化体系中培养后,用RT-PCR方法测定碱性磷酸酶(ALP)、骨钙蛋白(OC)、骨保护蛋白(OPG)及骨保护蛋白配体(RANKL)的mRNA水平。结果表明,硼替佐米作用于多发性骨髓瘤细胞株U266 48小时后半数抑制浓度(IC50)为22.4 nmol/L,马钱子碱为0.16 mg/ml;经马钱子碱及多发性骨髓瘤细胞上清液共同干预组的成骨细胞中ALP、OC及OPG的mRNA水平高于只经多发性骨髓瘤细胞上清液干预组的成骨细胞的表达水平(p<0.05),而RANKL的mRNA水平则降低(p<0.05),且它们增高或降低的程度大于硼替佐米作用组(p<0.05)。结论:马钱子碱对多发性骨髓瘤中骨代谢机制的影响可能通过成骨细胞对破骨细胞的调节而发挥作用。实验证实,马钱子碱对多发性骨髓瘤的治疗效果优于硼替佐米。     

旋转恒定强磁场对大鼠骨密度及生物力学参数以及破骨细胞影响的体内外实验

目的:探讨磁场直接提高骨密度的作用途径,从而为骨质疏松的磁疗提供科学依据。方法:实验分别于2003-12/2004-06在深圳大学生命科学学院微生物基因工程重点实验室及香港城市大学深圳研究中心细胞学实验室完成。①体内研究:选择雌性SD大鼠90只,随机分为6组,每组15只,除假手术组外另5组大鼠均切除卵巢。曝磁处理于卵巢切除2周后进行。假手术组仅手术切除卵巢附近一小块脂肪;去卵巢组仅进行卵巢切除术;去卵巢 钙组另外给予200mg/kg苏糖酸钙灌胃,1次/d;去卵巢 钙 磁30min/d组在去卵巢 钙组的基础上给予30min/d曝磁30d处理;去卵巢 磁30min/d组仅给予去卵巢大鼠30min/d曝磁30d处理;去卵巢 磁60min/d组在去卵巢 磁30min/d组基础上曝磁时间延长为60min/d,共30d。分别磁场对各组大鼠骨密度、骨强度、骨钙含量、雌二醇和骨钙素的影响。检测成骨细胞、破骨细胞的生长和功能的指标-骨碱性磷酸酶及尿脱氧吡啶交联水平。②体外研究:为进一步在细胞水平阐明磁场影响骨密度的原理,培养RAW264.7细胞株(前破骨细胞),使用破骨细胞分化因子诱导其向破骨细胞分化,同时外加磁场处理,观察磁场对RAW264.7细胞株生长、成熟情况的影响。另外在不同强度磁场下培养兔破骨细胞,观察对骨片的吸收情况。结果:纳入大鼠90只,全部进入结果分析,无脱失。①体内研究:各组大鼠骨密度及生物力学参数的变化:所有曝磁组大鼠的骨密度均高于去卵巢组,其中去卵巢 磁60min/d组大鼠显著高于去卵巢组(F=6.98,P<0.05)。各曝磁组大鼠骨碱性磷酸酶含量显著高于去卵巢组及假手术组(F=6.98,9.14,P<0.05)。各曝磁组大鼠尿脱氧吡啶交联水平显著低于去卵巢组(F=21.41,P<0.01)。②体外研究:强恒定磁场对RAW264.7细胞生长、分化和功能的影响:在磁场作用下培养的经破骨细胞分化因子诱导的RAW264.7细胞株加速凋亡,而兔破骨细胞裙边消失,吸收骨片的能力丧失。结论:旋转恒定磁场能够促进大鼠成骨细胞的生长和分泌功能、抑制破骨细胞生长和破骨功能,从而提高骨密度及骨强度,对于骨质疏松有较好的干预效果。     

鞘糖脂对破骨细胞、成骨细胞形成及溶骨性骨病的影响

鞘糖脂位于细胞膜脂质双分子层,是构成哺乳动物细胞膜的必需成分之一,并且在不同组织,甚至同一细胞不同间期组成成分是不同的;其生物学功能非常复杂。很多研究发现组织器官中鞘糖脂的异常分泌与各类疾病具有显著的相关性,因此鞘糖脂已成为近年来研究的热点问题。最近研究表明鞘糖脂在破骨细胞、成骨细胞形成过程中以及多溶骨性骨病的发生发展及治疗过程中都具有至关重要的作用。本文将对鞘糖脂在破骨细胞、成骨细胞形成过程中的作用机制以及溶骨性骨病的发生发展及治疗过程中的作用机制作一综述。     

柚皮甙干预鼠颅顶骨破骨细胞的形成及功能

背景：柚皮甙能诱导骨形态发生蛋白2的基因表达,促进成骨细胞系的增殖和分化。体外细胞实验提示柚皮甙有抑制破骨细胞的形成及抗骨质疏松的作用。目的：建立含有柚皮甙的鼠颅顶骨培养模型,观察不同剂量下柚皮甙对破骨细胞增殖分化的影响。方法：实验选取出生4d的SD乳鼠颅顶骨,在分别含有O,1,10,100mg／L的柚皮甙的培养基中培养,于培养的第1,3,7,10天测定柚皮甙对鼠颅顶骨中破骨细胞标志酶抗酒石酸酸性磷酸酶阳性细胞数及培养基中钙离子浓度的影响。结果与结论：第1天各组间抗酒石酸酸性磷酸酶阳性细胞数及培养基中钙离子浓度无明显变化,第3,7天各组间抗酒石酸酸性磷酸酶阳性细胞数随柚皮甙质量浓度增加而减少,而培养基中钙离子浓度变化明显增加,到第10天这种变化趋势最为明显。说明柚皮甙能影响鼠颅顶骨中抗酒石酸酸性磷酸酶阳性细胞数量及其功能,并且这种作用成明显的时间剂量相关性。提示柚皮甙不仅能促进成骨细胞的增殖,同时也能减少破骨细胞的分化或加速其凋亡。     

破骨细胞三维培养体系的建立

背景:建立基质细胞与骨髓细胞共培养模型能诱导破骨样细胞产生,但这种培养体系存在细胞不单纯,不适合基因转染等缺点.目的:建立基质细胞MBA-1细胞与破骨前体细胞RAW264.7共培养形成不混杂基质细胞的成熟多核破骨细胞的新方法.设计、时间及地点:开放性实验,于2006-10/2007-03在南华大学附属第一医院临床研究所实验室完成.材料:小鼠源性破骨前体细胞RAW264.7细胞从ATCC引进,基质细胞MBA-1细胞由周厚德博士惠赠.方法:RAW264.7细胞以1×104/孔接种于Transwell三维培养板下层,将聚碳酸酯膜孔径0.4μm的培养板上层先取出接种MBA-1细胞,待细胞贴壁胞体伸展后,将其重新与下层联合共培养,共培养体系细胞每3d换液1次.主要观察指标:①抗酒石酸酸性磷酸酶染色法观察染色阳性的破骨细胞形态特点.②扫描电镜观察骨吸收陷窝形态,评价共培养形成的破骨样细胞骨吸收活性.结果:共培养体系中的RAW264.7细胞,第9天可见较多TRAP阳性单核细胞,出现TRAP阳性多核破骨样细胞.共培养14d后,已分化成熟的破骨细胞,能形成骨吸收陷窝.结论:MBA-1细胞与破骨前体细胞RAW264.7分层共培养可形成成熟的、有骨吸收功能的多核破骨细胞,且这种破骨细胞中不混杂基质细胞.     

凋亡破骨细胞的拉伸应变

背景：力学应变在骨重建中起重要作用。然而,力学应变是否影响破骨细胞的凋亡仍不清楚。目的：观察力学应变对体外培养破骨细胞凋亡的影响。方法：对小鼠单核细胞RAW264．7采用巨噬细胞集落刺激因子和破骨细胞分化因子诱导,抗酒石酸酸性磷酸酶染色和骨吸收实验确定成功诱导出了破骨细胞。实验共分为3组,对诱导的破骨细胞分别施加0（对照组）,2500和5000υε的基底拉伸应变3d,1h／次,1次／d。结果与结论：与对照组相比,生理强度载荷2500υε阻止了破骨细胞的凋亡和线粒体膜电位的下降。但是,病理强度载荷5000υε对破骨细胞的凋亡和线粒体膜电位没有影响。     

甲状旁腺素相关肽诱导骨髓细胞生成破骨细胞及对骨吸收的影响

目的:建立甲状旁腺素相关肽(PTHrP)诱导的破骨细胞培养系统,并观察其特点。方法:分离小鼠骨髓细胞后,用0,20,50,100ng的PTHrP刺激,第6天时观察生成的破骨细胞数目。用PTHrP50ng刺激,观察培养后4,6,8,10,14d时破骨细胞生成数目。结果:破骨细胞数目随PTHrP剂量的增高而增加。培养后4d有破骨细胞形成,6～8d破骨细胞数达到高峰,14d时几乎消失。结论:PTHrP可诱导破骨细胞形成,破骨细胞形成数目与甲状旁腺素相关肽呈剂量依赖,破骨细胞寿命少于两周。     

破骨细胞体外培养的影响因素

破骨细胞(OC)是人体生理性骨重建和病理性骨破坏过程中高度特异性的惟一具有骨质吸收功能的多核巨细胞,来源于造血干细胞的粒细胞-巨噬细胞集落形成单位.在体内它主要受骨髓基质细胞或成骨细胞分泌的破骨细胞分化因子(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophagecolony stimulating factor, M-CSF)两种分子的调控.在OC生成和分化的过程中,骨髓基质细胞、OB、OC间及M-CSF与RANKL间互相影响和依赖,形成某种"偶联"机制保持动态平衡[1].目前国内外对破骨细胞的研究主要针对OC的分化及其调节机制,但其分离、诱导培养的影响因素等方面总结性文献较少,本文就近年来破骨细胞体外培养的多种影响因素作一综述,以总结对破骨细胞的影响因素,提高培养破骨细胞的成功率、密度和纯度.     

低频脉冲电磁场治疗原发性骨质疏松症的实验研究进展

骨质疏松是一种以骨量减少和骨微细结构破坏为特征,导致骨脆性增加和易于发生骨折的全身性代谢性骨病。2001年美国国立卫生研究院提出骨质疏松(osteoporosis,OP)是以骨强度下降,骨折风险性增加为特征的骨骼系统疾病[1]。随着人口趋于老龄化,骨质疏松症的防治变得日     

不同体积分数血清对培养原代破骨细胞噬骨能力的影响

目的:改变培养液中血清的浓度,观察破骨细胞形态结构,并比较不同体积分数血清对培养的原代破骨细胞噬骨能力的影响。方法:实验于2007-03/06在沈阳医学院中心实验室完成。①实验材料:选取清洁级新生24hWistar大鼠6只;胎牛血清(天津灏洋);新鲜成年牛股骨皮质(市售)。②实验过程:取新鲜成年牛股骨皮质,用磨片机磨成厚50μm的1cm×1cm骨片;取新生大鼠四肢长骨,分离破骨细胞,并用不同体积分数血清(分别为0,0.05,0.1,0.15,0.2,0.25)培养原代破骨细胞。③实验评估:第1,6天倒置显微镜下计数,第3天取细胞玻片观察细胞形态结构;扫描电镜观察不同体积分数血清培养的破骨细胞在牛骨皮质上产生骨陷凹面积的差异。结果:①破骨细胞的分离培养结果:分离培养的破骨细胞数量较少,体积大,胞浆丰满,细胞突起延展,细胞核呈圆形或椭圆形,积聚在细胞中央或排列在细胞周边。②不同体积分数血清培养液中骨片上吸收陷窝深度比较:随着培养液中血清体积分数的增加,骨片上陷窝深度逐渐增加,在培养液中血清体积分数为0.15时,骨片上陷窝最深,此后随着培养基血清体积分数的增加,形成骨陷凹的深度无明显增加。结论:血清体积分数为0.15培养基培养的破骨细胞在牛皮质骨片上产生骨陷凹最深,噬骨能力最强。     

力学刺激对软骨下骨修复过程中OPG/RANKL/RANK通路及破骨细胞的影响

正骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是生物学和力学因素共同作用下细胞外基质、软骨细胞、软骨下骨三者合成与分解失衡的结果,是一种以关节边缘和软骨下骨质再生以及关节软骨变性和丢失为特征的慢性骨性关节疾病。近年来,机械力学刺激在软骨下骨损伤修复以及重塑过程中的作用正日益受到关注。成骨细胞与破骨细胞的动态平衡是软骨下骨重塑与修复的关键,力学刺激对于成骨细胞的影响已有许多相关研究,而     

骨折愈合刺激素（金葡液）对体外培养成骨细胞的影响

目的：观察骨折愈合刺激素（金菊液）对体外培养成骨细胞的作用，方法：在新生SD大鼠头颅骨第二继代成骨细胞（OB2）培养液中分别加入不同浓度（20000－200U／L）骨折愈合刺激素（金葡液），分别观察OB2的增殖功能（用波长570nm处OD值表示），分化功能[用碱性磷酸酶（ALP）活性表示]和矿化功能（用矿化结节数量／视野表示），结果：OD值实验组为（0．336&;#177;0．073）－（0．359&;#177;0．051），对照组为0．347&;#177;0．035），ALP（U／g蛋白质）活性实验组为83&;#177;9，对照组为81&;#177;4，矿化结节数量／视野（个）实验组为6．000&;#177;1．826，对照组为1．5&;#177;1．0，结论：骨折愈合刺激素（金葡液）各浓度对OB2的增殖和分化功能均无明显作用（P＞0．05），而对其矿化功能具有明显的刺激作用（P＜0．01）。