“一测多评”模式在淫羊藿药材、饮片及含淫羊藿中成药黄酮类成分检测中的一体化研究

采用反相高效液相色谱法,经一系列方法学考察,建立对淫羊藿中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷和宝藿苷Ⅰ5种黄酮类成分进行同步含量测定的方法。采用"一测多评"中药质量评价模式,以淫羊藿苷为内参物,建立朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和宝藿苷Ⅰ与淫羊藿苷间的相对校正因子与相对保留值,最终实现了在同一色谱条件下,仅采用淫羊藿苷1个中药对照品对中药材淫羊藿、淫羊藿饮片和含淫羊藿中成药抗骨增生胶囊中上述5种黄酮类成分的同步质量控制,建立了从药材-饮片-中成药一体的含淫羊藿中药"一测多评"质量评价模式,为单味药QAMS方法在复方中的推广应用起到示范作用。     

淫羊藿药材中主要黄酮类成分含量对比研究

目的 对比分析朝鲜淫羊藿与其他4种品种淫羊藿药材中金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ的含量.方法 采用RP-HPLC法对5种淫羊藿品种里的6种黄酮类成分(金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ)进行测定,并考察实验方法的重复性和稳定性.结果 6种主要黄酮类成分的进样量分别在4...     

淫羊藿总黄酮抗老年痴呆化学成分研究

目的：对箭叶淫羊糖Epimedium sagittatum（Sieb．et Zucc．）Maxim．抗老年痴呆药理活性部位总黄酮提取物进行成分分析。方法：分别用分析型和制备型高效液相对淫羊截总黄酮部位进行了分离制备,并通过光谱分析对得到的化合物进行成分确定。结果：从淫羊攘总黄酮部位分离鉴定了4个化合物：朝藿定A（epimedoside A）,朝藿定B（epimedoside B）,朝藿定C（epimedoside C）,淫羊茬苷（icariin）。结论：箭叶淫羊藿总黄酮具有一定抗老年痴呆活性,总黄酮主要成分为淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C等。     

淫羊藿总黄酮胶囊中黄酮类成分含量测定及抗骨质疏松活性研究

采用快速液相色谱法(RRLC)对淫羊藿总黄酮胶囊进行含量测定,建立了淫羊藿新苷A、朝霍定A1、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、淫羊藿次苷Ⅰ、箭藿苷B、鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ、宝藿苷Ⅰ等11个黄酮类成分的含量测定方法。同时,通过检测碱性磷酸酶(AKP)含量,考察了11个化合物诱导MC3T3-E1细胞增殖分化的效果,结果显示宝藿苷Ⅱ活性最好,宝藿苷Ⅱ和淫羊藿次苷Ⅰ活性都大于淫羊藿苷。该研究建立了黄酮苷类成分的含量测定方法,并比较了每个单体抗骨质疏松的效果,为淫羊藿总黄酮胶囊药效物质基础和作用机制研究提供了技术支持。     

淫羊藿富集部位微乳凝胶的制备及药效学评价北大核心CSCD

该研究拟在淫羊藿富集部位微乳的前期研究基础上,制备淫羊藿富集部位微乳凝胶剂,进行质量评价并考察其对化疗药损伤周围神经系统的保护作用。该实验从流变学、制备难易程度及载药量角度,对凝胶的制备方法、基质的种类及用量进行筛选,确定最优处方并制备淫羊藿富集部位微乳凝胶;以朝藿定A1、A、B、C及淫羊藿苷为评价指标,采用Franz扩散池法对凝胶剂的体外释放及体外透皮行为进行研究;采用Wistar大鼠建立奥沙利铂诱导的周围神经毒性模型(oxaliplatin-induced peripheral neuropathy,OIPN),通过给药后的行为学测定和背根神经节、坐骨神经的组织病理学检测,评价淫羊藿富集部位微乳凝胶对化疗药物损伤周围神经的保护作用。淫羊藿富集部位微乳凝胶剂制备工艺稳定,5种成分的释放最符合Hixson-crowell动力学模型;行为学指标直观地显示了药物可以有效地缓解奥沙利铂引起的机械异常性疼痛,进一步的组织病理学研究发现,药物可以改善奥沙利铂引起的背根神经节神经元损伤、轴突变性和脱髓鞘现象。因此,淫羊藿富集部位微乳凝胶制备工艺可行,释药稳定,对化疗所致周围神经病变(chemotherapy-induced peripheral neuropathy,CIPN)具有一定的治疗作用。     

不同厂家淫羊藿配方颗粒主成分含量对比研究

目的:对2厂家生产的淫羊藿配方颗粒中的主要黄酮类成分进行比较。方法:建立反相高效液相色谱法同时测定淫羊藿配方颗粒中5种主要黄酮类成分:淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ的含量。结果:2厂家生产的淫羊藿配方颗粒中朝藿定A的含量较一致,生产厂家A产品中朝藿定B的含量较高;生产厂家B产品中淫羊藿苷、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ的含量较高。但按药典规定的药材中淫羊藿苷含量折算,2厂家产品淫羊藿苷的提取转移率均较低,只有25%~38%。结论:建议淫羊藿配方颗粒应进一步完善制备工艺,建立多种成分的含量测定方法,以全面控制淫羊藿配方颗粒的质量。     

药材品种与受热时间对淫羊藿饮片中主要黄酮类成分的影响规律研究

目的:研究药材品种与受热时间两因素对淫羊藿饮片中主要黄酮类成分含量的影响规律。方法:设定温度为170℃,不同品种共39批淫羊藿饮片加热炮制0 min、5 min、10 min,高效液相色谱仪测定其主要黄酮类成分朝藿定A、B、C、淫羊藿苷及宝藿苷Ⅰ的含量,并采用方差分析研究药材品种与受热时间2因素对5种主要黄酮类成分含量变化的影响。结果:朝藿定A、B、C的含量受药材品种影响极显著(P0.01),宝藿苷Ⅰ影响显著(P0.05);朝藿定A、朝藿定B、淫羊藿苷和宝藿苷Ⅰ的含量受加热时间影响极显著(P0.01);但5种黄酮类成分不受品种和受热时间互作效应的影响(P0.05)。结论:药材品种与受热时间是影响淫羊藿黄酮类成分含量的2个重要因素,柔毛淫羊藿中朝藿定A、C含量丰富,淫羊藿中朝藿定B、宝藿苷Ⅰ的含量相对较高;受热后朝藿定A、B、C含量减少,淫羊藿苷和宝藿苷Ⅰ含量增加。本研究为淫羊藿的饮片品种鉴别、炮制工艺制定、炮制机理探索以及临床合理用药提供科学依据。     

淫羊藿黄酮类组分表观溶解度和油水分配系数的测定

目的:测定淫羊藿黄酮类组分的表观溶解度和油水分配系数,为该组分整体水溶性和脂溶性的表征提供参考。方法:以淫羊藿黄酮类组分为模型药物,采用HPLC测定朝藿定A,B,C及淫羊藿苷在不同缓冲液中的平衡溶解度和表观油水分配系数(Papp),流动相乙腈-水(25∶75),检测波长270 nm。结果:朝藿定A,B,C和淫羊藿苷在不同pH缓冲液中的整体平衡溶解度顺序为朝藿定B>朝藿定A>朝藿定C>淫羊藿苷,Papp总体变化趋势均为先变大后变小再变大,油水分配系数-1.437~3.147。结论:淫羊藿黄酮类组分的水溶性及脂溶性较好,在不同pH缓冲液中变化趋势相近,朝藿定B属于微解,朝藿定A,C和淫羊藿苷属于极微溶解。     

一测多评法同时测定淫羊藿总黄酮胶囊中7种黄酮类成分

目的:采用一测多评技术建立UPLC快速测定淫羊藿总黄酮胶囊中7种成分(朝藿定A1,朝霍定A,朝霍定B,朝霍定C,淫羊藿苷,鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ以及宝霍苷I)的方法,并验证此方法在淫羊藿总黄酮胶囊中应用的可行性和方法适用性。方法:以淫羊藿总黄酮胶囊中7个具异戊烯基取代的黄酮类成分为指标成分,在一定的线性范围内,建立淫羊藿苷与其他6个成分的相对校正因子,计算朝藿定A1,朝霍定A,朝霍定B,朝霍定C,鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ以及宝霍苷I的含量,实现一测多评。结果:各成分相对淫羊藿苷的校正因子分别为f_(淫羊藿苷)/f_(朝藿定A)1=1.413,f_(淫羊藿苷)/f_(朝藿定A)=1.231,f_(淫羊藿苷)/f_(朝藿定B)=1.375,f_(淫羊藿苷)/f_(朝藿定C)=1.166,f_(淫羊藿苷)/f鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ=0.962,f_(淫羊藿苷)/f宝藿苷Ⅰ=0.689,且重复性良好,10批淫羊藿总黄酮胶囊中7个成分的计算值与外标法实测值无明显差异。结论:一测多评法可用于淫羊藿总黄酮胶囊中多成分的质量评价,结果稳定可靠。     

5种淫羊藿黄酮类成分对体外培养成骨细胞的影响

目的：观察5种淫羊藿黄酮——淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿定B、淫羊藿定C对体外培养成骨细胞增殖、细胞基质钙及矿化结节钙的影响。方法：取新生1～3dSD大鼠头盖骨用酶消化法分离成骨细胞，第3代细胞经MTT法、甲基百里香酚蓝(MTB)比色法观察5种黄酮对体外培养成骨细胞增殖、细胞基质钙及矿化结节钙的影响。结果：淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿定C0．1—10μmol／L浓度均能显著地促进成骨细胞增殖，淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿定B0．1—10tanol／L浓度均能显著增加细胞基质钙,淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿定B0．1～10pmol／L浓度、淫羊藿苷lpmol／L浓度及淫羊藿定C0．1～1pmol／L浓度均能显著增加矿化结节钙。结论：淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿定B、淫羊藿定C具有增加细胞基质钙及促进体外培养成骨细胞增殖和矿化的作用。     

七白散软膏皮肤毒性的动物实验研究

目的:观察七白散软膏对动物皮肤的毒性作用。方法:通过七白散软膏对SD大鼠的皮肤急性毒性实验、单次、多次给药刺激性实验、眼部刺激性实验及皮肤主动过敏实验,以皮肤的刺激性评价分数为指标,对七白散软膏的体外安全性进行评价。结果:单次和多次给予受试药物,水肿和红斑现象在SD大鼠完整皮肤组均未显现;红斑现象在SD大鼠破损皮肤组单次和多次给药时均略有显现,但停用药物后可完全消退。基于皮肤的刺激强度评分标准,单次和多次给药的刺激指数均小于0.5,所以七白散软膏外用对皮肤无刺激性。皮肤主动过敏实验表明,阳性致敏物的致敏率为100%,即称之为极度致敏性;任何红斑和水肿等过敏现象在七白散软膏组和空白软膏组对于致敏接触中和激发接触试验中均未显现,即致敏率为0。结论:通过体外安全性考察,七白散软膏对皮肤无刺激性并不产生过敏现象,作为外用软膏制剂,七白散软膏安全可靠。     

正交法筛选复方儿茶止泻霜基质的研究

目的:确定复方儿茶止泻霜最佳基质配比。方法:通过正交设计实验,采用高效液相色谱法,以外观和儿茶素为检测指标,确定霜剂基质最佳配比。结果:复方儿茶止泻霜的最佳基质配方为:硬脂酸12.0 g,单硬脂酸甘油酯5.5g,三乙醇胺0.2 g,液体石蜡10.0 g,凡士林5.0 g,羊毛脂19.5 g,甘油10.0 g,尼泊金乙酯0.5 g,蒸馏水50.0 mL。结论:该配比基质所制得的霜剂质量稳定,有效成分含量高。     

月桂氮艹（上）卓（下）酮促阿司匹林透皮吸收作用

 目的：研究不同浓度的月桂氮艹（上）卓（下）酮对阿司匹林小鼠离体皮肤渗透性的影响。方法：用改良的Franze扩散池，选不同浓度的月桂氮艹（上）卓（下）酮(0%,2%,5%)作促渗剂，紫外法测定药物累积释放量（Q）、稳态流量（J）、渗透系数（KP）。结果：含2%和5%月桂氮艹（上）卓（下）酮的乳膏的稳态流量（J）分别比空白乳膏增加14.9%和6.6%。结论：含不同浓度的月桂氮艹（上）卓（下）酮均可促进阿司匹林的透过，药物从乳剂型基质向皮肤的渗透符合Higuchi方程。     

藿芝降压滴丸与片剂的体外溶出比较研究

目的：测定藿芝降压滴丸及其片剂中淫羊藿苷的溶出曲线,并比较两者的溶出的差异。方法：采用紫外分光光度法在270nm处测定藿芝降压滴丸、藿芝降压片中的淫羊藿苷的体外溶出量和溶出速率。结果：藿芝降压滴丸中的淫羊藿苷溶出速度明显高于其片剂。结论：淫羊藿苷在滴丸剂中的溶出速率优于片剂,本处方选择滴丸剂型较好。     

御寒暖胃膏对胃癌前病变大鼠胃黏膜的影响

目的:观察御寒暖胃膏对胃癌前病变大鼠胃黏膜的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、御寒暖胃膏贴敷胃经穴组、御寒暖胃膏贴敷对照点组和药物对照组,每组各10只。采用综合干预方法复制慢性萎缩性胃炎癌前病变大鼠模型,正常组喂饲标准饲料,不予任何处理。模型组自第21周开始,每天捆绑1 h,并予胶布贴敷腹部及双下肢,每只每天按0.001 m L·g~(-1)的剂量经口灌服纯净水。御寒暖胃膏贴敷胃经穴组、对照点组自第21周开始,每天将各组大鼠捆缚于鼠板,将膏药涂于所选部位上,每日1 h。每只每天按0.001 m L·g-1的剂量经口灌服纯净水。药物对照组给予维酶素溶液,按21.6 mg·kg~(-1)的药量给药,每日1次,每天捆绑1 h,并予胶布贴敷腹部皮肤及双下肢。肉眼下观察大鼠胃黏膜损伤指数,光镜下观察胃黏膜组织的病理变化,彩色多普勒观察胃黏膜的血流量。结果:与模型组比较,御寒暖胃膏贴敷胃经穴组和药物对照组大鼠胃黏膜损伤指数值均显著降低,差异具有统计学意义(P0.005);胃黏膜组织的病理损伤得到明显的修复、胃黏膜血流量均显著升高,差异具有统计学意义(P0.005)。御寒暖胃膏贴敷对照点组大鼠胃黏膜损伤指数值未见明显降低,差异无统计学意义(P0.005);胃黏膜组织的病理损伤未得到明显修复、胃黏膜血流量未见显著升高,差异无统计学意义(P0.005)。结论:御寒暖胃膏贴敷胃经穴可以促进慢性萎缩性胃炎癌前病变大鼠胃黏膜损伤的修复,增加胃黏膜的血流量,并且存在经脉—脏腑特异相关性。     

黄芪多糖对大鼠慢性难愈合创面的作用及其对PTEN、AKT和VEGF蛋白表达的影响

目的:观察黄芪多糖对慢性难愈合创面的促进愈合作用及其对同源性磷酸酶-张力蛋白(phos-phatase and tension homology deleted on chromosome ten,PTEN)、丝-苏氨酸蛋白激酶(serine-threonine ki-nase,AKT)和血管内皮生长因子(vascul...     

苦参软膏对小鼠湿疹模型的治疗作用及免疫机制分析

目的观察苦参软膏对小鼠湿疹模型的治疗作用并探讨其免疫机制。方法BALB/cJ小鼠80只,随机分成4组:对照组、模型组、地塞米松组、苦参软膏组,每组20只,雌雄各半。模型组、地塞米松组、苦参软膏组建立湿疹模型,建模成功后地塞米松组、苦参软膏组给予相应药物外敷,对照组、模型组不予以任何处理,持续4周。试验结束后,实时荧光逆转录法及Western blotting法测定的小鼠湿疹皮肤组织Notch1、转化生长因子-β1(TGF-β1)m RNA、蛋白水平;酶联免疫吸附法测定白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组湿疹皮肤组织炎症细胞计数水平、Notch1、TGF-β1 mRNA、蛋白水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,地塞米松组、苦参软膏组湿疹皮肤组织炎症细胞计数水平、Notch1、TGF-β1 mRNA、蛋白水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平明显下降(P<0.05);地塞米松组、苦参软膏组湿疹皮肤组织炎症细胞计数水平、Notch1、TGF-β1 m RNA、蛋白水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平相近(P>0.05)。对照组皮肤结构正常,见复层鳞状上皮,有角化物,真皮层无炎细胞浸润;模型组表皮坏死,见瘢痕组织颗粒层、棘层增厚,真皮层血管充血扩张、水肿伴大量炎细胞浸润;地塞米松组、苦参软膏组仍可见中性粒细胞及嗜酸性细胞浸润,但数量明显较模型组减少,表皮结构清晰趋于正常。结论苦参软膏能抑制小鼠湿疹模型皮肤炎症反应,其机制与苦参软膏抑制Notch1、TGF-β1mRNA、蛋白的表达进而抑制IL-2、IL-6、TNF-α的表达有关。     

冰黄肤乐软膏抗皮肤癣菌活性及止痒作用研究

目的：研究冰黄肤乐软膏抗皮肤癣菌活性及止痒作用。方法：使用体外抑菌法及豚鼠止痒模型。结果：冰黄肤乐软膏对皮肤癣菌三个属（毛癣菌属、表皮癣菌属、小孢子菌属）的代表株及临床株均有较强的抑菌和杀菌作用,并且对磷酸组胺豚鼠痒阈值具显著提高作用。结论：冰黄肤乐软膏为一具有较好的抗癣止痒作用的天然药物复方制剂。     

发泡膏灸法治疗慢性踝关节扭伤37例疗效观察

目的：探讨石氏发泡膏治疗慢性踝关节扭伤的临床疗效及其治疗机理，方法：将67例患者随机分为发泡组和药物注射组进行对照治疗观察。结果：发泡组有效率为100．0％，药物注射组有效率为86．7％，两组有效率之间差异无显著性意义（P＞0．05），但两组治愈率之间差异有显著性意义（P＜0．05），结论：发泡组治愈率优于药物注射组，且无不良反应。     

HPLC法测定三黄痔疮软膏中大黄素的含量

为建立三黄痔疮膏中大黄素的质控标准。采用HPLC的方法进行含量测定,以乙醇为溶剂提取有效成分,却除基质。以甲醇－0．1％磷酸（9：1）为流动相,C18柱测定了大黄素的含量。结果测得三黄痔疮膏中大黄素含量为0．0663mg/g,平均加样回收率96．5％。提示该法有效去除了栓剂基质对含量测定的影响,方法简便、准确、灵敏。