基于Med12/Wnt/β-Catenin信号通路的气血双补方治疗子宫肌瘤的作用机制

目的:基于Med12/Wnt/β-Catenin信号通路探讨气血双补方治疗子宫肌瘤作用机制。方法:通过慢病毒转染构建Med12基因敲低的人子宫肌瘤细胞株;制备气血双补方含药血清,进一步展开Med12基因下游信号通路的Western blot及PCR检测。结果:与对照组比较,含药血清能够显著降低Control-shRNA组细胞中Wnt1、β-catenin、TCF1/TCP7、C-myc、Cyclin D1基因和蛋白的表达水平;与Control-shRNA组比较,Med12-shRNA组细胞中Wnt1、β-catenin、TCF1/TCP7、C-myc、Cyclin D1基因和蛋白的表达同样降低,但无显著影响。结论:气血双补方含药血清可以通过影响Med12/Wnt1/β-catenin信号通路发挥治疗子宫肌瘤作用。     

基于网络药理学预测和验证当归芪枣精“一方多效”的 作用机制

摘 要 目的：采用网络药理学方法，探索当归芪枣精“一方多效”的作用机制，并对该方改善气血双虚证候的相关靶点蛋白进行验证。方法：在数据库检索的基础上，构建了蛋白-蛋白相互作用网络和成分-靶点-疾病网络，并对靶点进行基因本体（GO）富集分析和京都基因组百科全书（KEGG）通路分析。同时，采用放血和环磷酰胺并用建立气血双虚小鼠模型，以当归芪枣精低剂量组（4.0 g·kg-1）和高剂量组（8.0 g·kg-1）连续干预7 d，采用蛋白质免疫印迹（Western blot）法，检测骨髓中表皮生长因子受体（EGFR）、信号转导和转录激活因子1（STAT1）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）及其磷酸化蛋白的表达。结果：筛选出53种活性成分，作用于110个潜在靶点，包括RB1、EGFR、ESR1等中枢蛋白，参与细胞增殖与凋亡、转录翻译和应激反应等生物过程，调控信号转导、免疫炎症以及癌症等信号通路，与变应性鼻炎、阿尔茨海默病、帕金森病、哮喘等307种疾病相关，尤以各类癌症为多。实验结果显示，与正常组相比，模型组小鼠骨髓组织EGFR、STAT1表达和p-MAPK/MAPK比值均显著降低（P ＜ 0.05）；与模型组相比，当归芪枣精低剂量组、高剂量组小鼠骨髓组织EGFR、STAT1表达和p-MAPK/MAPK比值均显著升高（P ＜ 0.05）；但两者在升高p-MAPK/MAPK比值上有显著差异（P ＜ 0.05）。结论：当归芪枣精具有治疗神经系统、呼吸系统疾病，癌症等“一方多效”的治疗价值，EGFR、MAPK、STAT1等关键靶点共同参与调节气血双虚证候，可能是当归芪枣精气血双补的主要作用机制。     

基于“增效-减毒”的附子盐制辅料的比较研究

目的:比较生附子及其5种盐制炮制品中6种酯型生物碱成分的含量,为优化附子盐制工艺提供参考。方法:分别以胆巴、氯化镁、氯化钠、氯化钙、氯化钾为辅料炮制生附子,并采用高效液相色谱法测定生附子及上述5种盐制炮制品中6种酯型生物碱的含量;采用效/毒比、毒性成分指数评价生附子及其5种盐制炮制品的效果和毒性。结果:苯甲酰新乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰乌头碱、新乌头碱、乌头碱、次乌头碱检测质量浓度的线性范围分别为2.440～24.40、2.240～22.40、2.020～20.20、2.780～27.80、2.240～22.40、2.240～22.40μg/m L(r≥0.999 0);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2%;加样回收率分别为102.13%～104.87%(RSD=0.98%,n=6)、100.00%～105.00%(RSD=2.02%,n=6)、95.00%～99.29%(RSD=1.77%,n=6)、100.41%～104.58%(RSD=1.78%,n=6)、98.87%～99.90%(RSD=0.41%,n=6)、100.20%～104.00%(RSD=1.55%,n...