心力衰竭患者血浆外泌体microRNA检测及其功能分析

目的明确心力衰竭(心衰)患者血浆外泌体microRNA(miRNA)表达谱的差别,寻找其在心衰早期诊断和预后评估中的价值。方法应用外泌体提取试剂盒抽提10例心衰患者及10例非心衰对照者外周血浆外泌体,对血浆外泌体miRNA进行高通量测序,初步筛选差异表达miRNA,并通过实时荧光定量PCR方法验证,分析差异表达miRNA的功能及其与NT-proBNP的相关性。结果 miRNA高通量测序共筛选出24条显著差异表达的血浆外泌体miRNA。其中14条miRNA表达显著上调,10条miRNA表达明显下调。定量PCR验证和高通量测序筛选结果一致。差异表达miRNA的功能涉及炎性反应、细胞凋亡、增值、自噬等。相关性分析提示miR-122-5p与NT-proBNP具有相关性(r=0.537,P=0.015)。结论血浆外泌体来源miRNA可能成为潜在的辅助诊断心力衰竭和评估预后的一类新型生物标志物。     

再灌注治疗对急性心肌梗死患者血浆外泌体微小RNA差异表达的影响

目的 观察冠状动脉再灌注治疗对急性心肌梗死(AMI)患者血浆外泌体微小RNA(miRNA,miR)差异表达的影响。方法 选取2022年10月至11月于深圳市龙岗区第三人民医院确诊的3例老年男性AMI患者,进行冠状动脉再灌注治疗,留取患者入院时、术后2 h和术后24 h静脉血,应用miRNA测序技术筛选3例患者血浆外泌体中共同差异表达miRNA后,对其靶基因进行生信分析,利用定量聚合酶链反应验证其中差异表达的miR-499a-5p。结果 与入院时比较,术后2 h血浆外泌体miRNA有418个上调和406个下调,术后24 h血浆外泌体miRNA有320个上调和225个下调(P<0.05);与术后2 h比较,术后24 h血浆外泌体miRNA有344个上调和350个下调(P<0.05)。Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes富集分析显示,差异表达的miRNA富集在磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B、缺氧诱导因子1和血管平滑肌收缩等通路。Gene Ontology富集分析显示,差异表达的miRNA靶基因分子功能方面主要富集于蛋白结合和DNA结合;...     

慢加急性肝衰竭不同预后患者血浆外泌体差异蛋白的生物信息学分析

目的筛选不同预后慢加急性肝衰竭(ACLF)患者血浆外泌体中的差异蛋白,分析其功能及生物学过程,为患者临床诊断提供参考依据。方法前瞻性选取2019年7月—10月于首都医科大学附属北京佑安医院住院确诊的ACLF患者10例,随访90 d,患者死亡或肝移植归入肝移植/死亡组(n=5),患者存活归入生存组(n=5),两组一般资料指标比较采用Mann-Whitney U秩和检验。采用非标记(Label-free)定量蛋白质组学技术对血浆外泌体蛋白进行鉴定和定量分析,筛选差异蛋白并进行功能富集分析,使用R-3.5.1软件对差异蛋白进行层次聚类分析,分析其参与的生物学过程。结果外泌体蛋白质组学分析共鉴定出860种蛋白,以倍数上调>1.2倍或下调>1.2倍且P<0.05的标准筛选出差异表达蛋白116种,与肝移植/死亡组相比,生存组上调蛋白62种、下调蛋白54种。生物信息学分析结果显示,这些蛋白主要参与了免疫反应、信号转导、囊泡介导的转运、细胞死亡和增殖等生物学过程,并与炎症反应、糖类和氨基酸代谢、肝细胞损伤及再生等信号通路密切相关。结论非标记定量蛋白质组学技术筛选出的差异蛋白可能作为ACLF早期诊断及预后判断的血清学标志物。     

非酒精性脂肪性肝病患者血浆外泌体差异蛋白分析*

目的 筛选非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血浆外泌体差异蛋白,分析其功能及其生物学过程,为NAFLD患者临床诊断提供参考依据。方法 2020年7月～10月我院诊治的NAFLD患者3例和健康体检者3例,采用串联质谱标签(TMT)标记定量蛋白质组学技术对血浆外泌体蛋白进行鉴定和定量分析,筛选差异蛋白并进行功能富集分析,了解其参与的生物学过程。结果 经外泌体蛋白质组学分析,共鉴定出蛋白质387种,以倍数上调＞1.2倍或下调＞1.2倍,且P＜0.05为标准筛选出差异表达蛋白34种;健康人比,NAFLD患者上调蛋白25种,下调蛋白9种;生物信息学分析结果显示,这些蛋白主要参与了脂质的储存和代谢、免疫反应、纤维素形成等生物学过程,并与胰岛素抵抗、炎症反应、细胞损伤等信号通路密切相关。结论 采用TMT标记定量蛋白质组学技术筛选NAFLD患者差异蛋白可能为其诊治提供指引。     

急性心肌梗死患者血浆外泌体mRNA表达谱分析

目的 比较分析急性心肌梗死(AMI)患者和非心源性胸痛(NCCP)患者血浆外泌体中mRNA的表达差异,并探讨差异表达mRNA对AMI发生发展可能的影响。方法 入选北京朝阳医院和内蒙古包头市中心医院NCCP患者和AMI患者各15例。提取入选者血浆外泌体及外泌体总RNA,高通量测序技术检测AMI患者和NCCP患者血浆中外泌体信使RNA(mRNA)的表达谱,筛选出AMI患者中差异表达的mRNA。对差异表达mRNA进行基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析。结果 提取的外泌体为粒径在30~200 nm之间的双层膜小囊泡,表达外泌体标志分子分化簇63(CD63)和热休克蛋白70(HSP70),而不表达甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH),符合外泌体的特征。对入选AMI患者和NCCP患者血浆外泌体中的mRNA表达量进行检测,AMI患者血浆中外泌体转录本数量为64 258条,NCCP患者血浆中外泌体转录本数量为64 374条。其中差异表达的mRNA共1 800条(上调951条,下调849条)。GO和KEGG分析表明上述差异表达的mRNA参与了AMI的生物学调节功能和通路。结论 AMI患者血浆外泌体中mRNA的表达水平与NCCP组比较存在明显的差异,这些差异表达的外泌体mRNA可能在AMI的发生发展过程中发挥重要的作用。     

酒精性肝病患者血浆外泌体差异蛋白的分析

目的筛选酒精性肝病(alcoholic liver disease, ALD)患者血浆外泌体中的差异蛋白,分析其功能及生物学过程,为ALD患者的治疗和诊断提供参考依据。方法选取2021年5月至2021年10月在首都医科大学附属北京佑安医院住院并确诊为ALD的患者和健康体检者各3例,超速离心分离提纯外泌体,提取蛋白,串联质谱标签(tandem mass tag, TMT)标记后,采用定量蛋白组学技术对两者血浆中的外泌体蛋白进行鉴定和定量分析,筛选出差异蛋白,并用生物信息学分析差异蛋白的功能及其参与的生物学过程。结果共鉴定到可定量蛋白质387种,以倍数上调>1.2倍或下调>1.2倍且P<0.05为标准筛选出差异蛋白27种,与健康对照组相比,ALD组上调蛋白15种、下调蛋白12种,生物信息学分析结果显示,这些蛋白主要参与了脂质的代谢、免疫反应和细胞的死亡等生物学过程,并与炎症反应、细胞的损伤和补体级联反应等信号通路密切相关。结论 TMT标记定量蛋白质组学技术筛选出的差异蛋白可能作为ALD早期诊断的血清学标志物及治疗靶点。     

exoRBase数据库外泌体基因在冠心病中的差异表达及意义

目的通过对exoRBase外泌体数据库中筛选出的冠心病(CHD)患者外周血外泌体差异表达基因的分析和CeRNA网络的构建,挖掘导致冠心病发病和疾病进展中的关键基因和调控机制,通过对差异表达mRNA关键基因的GO和KEGG富集分析,研究冠心病差异表达mRNA参与的分子功能和生物学过程。方法应用R语言筛选出在exoRBase外泌体数据库冠心病患者外周血中差异表达的外泌体基因,通过在线数据库和Cytoscape软件构建CeRNA网络,对关键基因进行可视化分析,并对差异表达的mRNA关键基因进行GO和KEGG富集分析。结果筛选出冠心病患者外周血中差异表达的外泌体mRNA 312个,lncRNA 43个,circRNA 85个;通过构建CeRNA网络,发现mRNA、lncRNA和circRNA竞争性地结合miRNA,且与miRNA相结合的lncRNA表达均显著上调,而mRNA和circRNA的表达则大多数呈现显著下调的趋势;差异表达mRNA关键基因的GO和KEGG富集分析结果显示,这些关键基因主要与"磷酸酶激活活动"和"磷酸酶调节活动"功能相关。结论由exoRBase数据库筛选出的冠心病患者外周...     

异甘草酸镁治疗慢性乙型肝炎前后血浆外泌体差异蛋白质组学筛选

目的:筛选慢性乙型肝炎患者经异甘草酸镁（MgIG）治疗前后血浆外泌体的差异蛋白质组。方法:分别采集36例MgIG治疗慢性乙型肝炎患者前后的血浆标本（2 ml/例）,利用超速离心方法提取血浆外泌体,利用Nanosight NS300颗粒粒度分析仪检测外泌体颗粒的浓度和内径。随机各抽取3例MgIG治疗前后组的血浆外泌体,裂...     

外泌体来源微小RNA在心血管疾病中作用研究进展

在不同的病理生理状态下,细胞可分泌包含有特定内含物的外泌体至细胞外环境中。其中,来源于外泌体的微小RNA(miRNA)能够参与细胞间的物质传递和信号转导。近年来,人们逐渐认识到外泌体及其相关的miRNA在心血管疾病发病过程中的重要作用。本文介绍了外泌体的基本特征及外泌体来源的miRNA的生物学特性,讨论了外泌体来源的miRNA在不同心血管疾病中的表达情况。     

血浆微RNA在骨关节炎患者中的表达谱特征及生物信息学分析

目的 探讨OA患者血浆微RNA(miRNA)表达谱特征,并对差异表达的miRNA进行生物信息学分析,寻找与OA相关的血浆生物标记物.方法 收集20例OA患者及15名健康体检者静脉血,通过Agilent miRNA芯片表达谱检测OA血浆miRNA的表达谱.对差异表达的miRNA进行靶基因预测,聚类分析(GO)功能分析及KEEG通路聚类分析等生物信息学分析.最后选取独立验证样本采用方差分析对差异表达miRNA进行实时荧光定量-PCR验证,并评估效能.组间差异采用t检验分析.结果 ①与健康对照组相比,OA组筛选获得74个差异表达血浆miRNA,其中45个表达上调,29个表达下调.②预测差异性表达miRNA潜在靶基因2 731个,参与到462个KEGG通路条目中,主要富集于环磷酸腺苷(cAMP)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、破骨细胞分化等通路,主要功能集中在细胞间黏附作用、胶原合成作用、细胞内信号转导等生物学功能上.③RT-PCR显示OA患者血浆miR-20a-5p、miR-320c表达水平明显升高(t=-6.142,P<0.05;t=-3.854,P<0.05),而miR-940表达明显下调(t=2.767,P<0.05),变化趋势与芯片结果一致.受试者工作特征曲线(ROC)显示这3个miRNA的曲线下面积(AUC)分别为0.864,0.851和0.818.结论 OA患者有着独特的血浆miRNA表达谱,差异性表达的miRNA可能是OA诊断的生物标志物和潜在治疗靶点.     

肝泡型包虫病侵及胆道患者胆汁外泌体microRNA的检测及生物信息学分析

目的检测肝泡型包虫病侵及胆道患者胆汁中外泌体microRNA(miRNA)的表达情况,探索差异miRNA对靶基因的调控机制。方法收集自2017年8月-2018年10月就诊于青海大学附属医院的12例肝泡型包虫病患者胆汁样本,观察组(有胆道受侵表现)与对照组(无胆道受侵表现)各6例。经超速离心法提取、Western Blot鉴定两组胆汁中的外泌体结构,采用Trizol法提取外泌体总RNA,再经miRNA表达谱芯片实验检测并寻找差异表达的miRNA。根据差异miRNA预测胆道侵犯靶基因,并进行通路富集分析。结果观察组与对照组比较,共有74个差异表达的miRNAs,其中9个表达上调,65个表达下调(|Fold Change| 2)。经Pathway分析,靶基因主要富集在肿瘤发生、磷脂酰肌醇信号系统、PTEN等通路中(FDR 0.05)。经GO注释及富集分析,靶基因主要富集在基因抑制的正向调控、调控细胞分化等生物过程(FDR 0.05)。结论建立肝泡型包虫病合并胆道侵犯胆汁中外泌体差异miRNA表达谱,可作为泡型包虫病侵及胆道的生物学标志物,初步阐释了肝泡型包虫病侵及胆道后差异miRNA对靶基因的调控机制。     

miR-223-3p在乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭患者中的表达及其与预后的关系

目的探讨miR-223-3p在乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者血浆中的表达及其与预后的关系。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测50例HBV-ACLF、50例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者和30名正常对照者的血浆miR-223-3p相对表达量,分析血浆miR-223-3p表达量与丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)、凝血酶原活动度(PTA)、MELD评分的相关性,采用方差分析或t检验和Pearson相关性分析。结果 HBV-ACLF组与CHB组、HC组比较,血浆中miR-223-3p表达量均显著升高(t=11.935、17.053,P均0.001);miR-223-3p的表达量与HBV-ACLF患者的ALT、TBil、MELD评分呈正相关(r=0.610、0.808、0.702,P均0.001),与PTA水平呈负相关(r=-0.846,P0.001)。多因素Cox模型分析结果显示,与HBV-ACLF患者死亡相关的影响因素依次为血浆miR-223-3p表达量(P=0.023)、PTA(P=0.044)和MELD评分(P=0.049)。结论血浆miR-223-3p在HBV-ACLF患者中表达水平升高与HBV-ACLF发生及预后密切相关,在HBV-ACLF诊断和预后评价中具有应用价值。     

血清外泌体来源的microRNA-221-3p在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者血清外泌体来源microRNA(miRNA)-221-3p的表达水平及分析其临床意义。方法选取2010年2月-2014年12月南京大学医学院附属南京鼓楼医院经手术治疗后诊断为HCC的66例患者作为HCC组,选取25例同期在本院接受健康检查的体检者作为对照组。通过外泌体提取试剂盒分离HCC组和对照组血清中的外泌体,采用蛋白免疫印迹检测外泌体标记蛋白分子,透射电镜鉴定血清外泌体形态;实时荧光定量PCR方法检测两组血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平。计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U检验,计数资料两组间比较采用χ~2检验。采用Kaplan-Meier方法及logrank检验分析血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达与预后关系,采用Cox比例风险回归模型分析预后影响因素。结果血清来源的外泌体是直径为40～100 nm囊泡体,表达HSP70、Alix及CD63。HCC组血清来源外泌体中miRNA-221-3p较对照组表达水平升高,差异具有统计学意义(U=354.00,P0.001)。HCC患者血清外泌体miRNA-221-3p高表达与肿瘤大小(χ~2=6.016,P=0.014)、包膜侵犯(χ~2=7.580,P=0.006)和TNM分期(χ~2=6.340,P=0.012)有关。此外,血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平较高的HCC患者总体生存率较低,差异具有统计学意义(χ~2=17.105,P0.001)。多因素分析结果表明血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平(风险比=2.434,95%可信区间:1.178～5.027,P=0.016)及肿瘤分期(风险比=2.653,95%可信区间:1.222～5.760,P=0.014)是影响HCC患者预后的独立危险因素。结论 HCC患者血清外泌体来源的miRNA-221-3p表达水平明显升高,对HCC诊断及预后判断具有参考价值。     

达格列净对2型糖尿病早期糖尿病肾病患者尿外泌体微RNA的影响

目的探讨达格列净对2型糖尿病(T2DM)早期糖尿病肾病(DKD)患者尿外泌体微RNA(miRNA)的影响。方法选取2018年9月至2019年9月于徐州医科大学附属淮安医院内分泌科住院的T2DM早期DKD患者60例。将纳入的患者按照尿微量白蛋白与尿肌酐比值(UACR)进行分组,其中30 mg/g1c)及血脂等生化指标。计算体质指数(BMI)。运用实时聚合酶链反应、芯片法测定尿外泌体miRNA水平。组间比较采用t检验、单因素方差分析、χ²检验、Wilcoxon秩和检验或Mann-Whitney U检验。结果DAP组患者治疗后与治疗前相比,体重、BMI、FPG及餐后2 h血糖水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。DKD组患者治疗后与治疗前相比,体重、BMI、HbA_1c、FPG、餐后2 h血糖及UACR水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,传统药物治疗组中5种miRNA(miR-let-7b-5p、miR-21-5p、miR-182-5p、miR-200c-3p和miR-423-5p)表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05);DKD组与传统药物治疗组相比,上述5种miRNA表达亦上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。DKD组治疗后上述5种miRNA的表达较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论T2DM早期DKD患者存在多种尿外泌体miRNA表达的失调,达格列净可下调细胞外泌体miRNA的表达。     

血浆外泌体miR-452作为胃癌诊断的生物标志物

目的筛选胃癌血浆外泌体中差异表达的miRNA,分析其对胃癌诊断的敏感性与特异性及与胃癌患者的疾病特点之间的相关性。方法收集南京医科大学第一附属医院消化内科病理确诊为胃癌的住院患者与消化内科及体检中心的无癌健康对照人群的血液样本,离心后试剂盒抽提血浆外泌体及其RNA,通过透射电子显微镜观察、蛋白质印迹分析(Western blotting)鉴定标志蛋白及纳米粒径分析(nanoparticle tracking analysis, NTA)对血浆外泌体进行鉴定,定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)鉴定与胃癌发病相关的miRNA。结果共纳入胃癌患者80例和健康对照80名。成功对2例血浆外泌体(GC1和NC1)进行鉴定以证实其相关特性。在初始筛选阶段,对12例胃癌和12名健康对照者的血浆外泌体RNA进行qRT-PCR验证并依据其各自的2~(-△Ct)值,分析受试者的诊断ROC曲线下面积(AUC)。与健康对照者相比,胃癌的血浆外泌体miR-452-5p表达量显著升高(P=0.002),miR-452-5p的AUC值为0.798(95%CI:0.552～0.883)。而后纳入新的68对样本对筛选结果进一步验证,miR-452-5p的表达趋势与初始筛选一致,且诊断AUC值为0.733(95%CI:0.647～0.818)。分析已验证的miR-452-5p表达水平与胃癌病理特征无相关性(P0.05)。结论血浆外泌miR-452-5p可能为检测胃癌的新型潜在生物标志物,然而其对疾病的病理特性的影响仍需更大样本量的实验进一步研究。     

外泌体MicroRNA在部分肺部疾病中的研究进展

外泌体(Exosomes)是由细胞产生的具有生物活性的纳米级载体,普遍存在于大多数体液中。外泌体中富含的微小RNA(microRNA,miRNA)称为外泌体miRNA,它是一种多功能非编码RNA,对基因调节至关重要。外泌体miRNA在细胞间物质和信号转递中至关重要,参与炎症、细胞增殖、分化和凋亡等多种生物学过程,从而可能调节多种病理过程。外泌体已被视为当前研究的热点。最近的研究发现,外泌体miRNA在肺部疾病的发病机理中具有重要意义。本文旨在综述有关外泌体miRNA在慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)、哮喘、特发性肺纤维化(IPF)和肺结核等常见肺部疾病中的研究进展。     

基于microRNA调控的轻度慢性乙型肝炎发生的分子机制

目的从microRNA(miRNA)调控角度揭示轻度慢性乙型肝炎发病的分子机制。方法收集2013年7月-2014年2月成都市传染病医院门诊就诊的患者共16例,分为轻度慢性乙型肝炎组与正常组,借助Agilent Human miRNA 8×60 k微阵列芯片检测血浆中miRNA表达谱,求得两组间差异表达的miRNA谱,借助miRNA生物信息学分析软件预测其靶基因并对靶基因进行GO功能富集分析和pathway分析。两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析。结果两组间的差异表达miRNAs共54条(P值均0.05),30条上调,24条下调;其功能主要涉及细胞增殖、转录正/负调控、生物合成过程的正/负调控、蛋白质定位、Wnt受体信号通路、转录正/负调控、基因表达的正/负调控、酶联受体蛋白信号通路、蛋白氨基酸的磷酸化等生命过程。Pathway分析得到其主要涉及Wnt信号通路、Notch信号传导途径、Hedgehog信号通路、p53信号通路、B淋巴细胞受体信号通路等。结论轻度慢性乙型肝炎发生受到特异性miRNA调控,涉及多个生命过程及通路。     

加味青娥丸对糖皮质激素诱导骨质疏松小鼠骨组织外泌体miRNA表达谱的影响

目的 探讨青娥丸加味(Modified Qing’ E Formula, MQEF)对激素性骨质疏松(glucocorticoid induced osteoporosis, GIOP)小鼠骨髓液外泌体miRNA表达的影响。方法 选取48只SPF级C57BL/6雄性小鼠,随机选取6只作为正常对照组,其余42只造成GIOP模型,随机抽取6只采用Micro-CT检测模型。其他造模成功后小鼠随机分为模型组及MQEF治疗组,每组18只。治疗3个月后,两组小鼠分离出骨髓组织外泌体中miRNA,使用DNBSEQ平台测序,通过对数据过滤及质控得到高质量数据,对得到的miRNA进行差异性分析以及表达差异排序。测序完成后,通过qRT-PCR对测序所得miRNA进行验证。结果 在MQEF组和模型组小鼠骨髓液外泌体中获得miRNA 1 734个,差异性表达的miRNA22个：上调表达18个,下调表达4个;已知miRNA 18个,新miRNA 4个。最显著变化为miR-122-5p, qPCR验证结果显示miR-122-5p在MQEF组上调4.5倍,差异有统计学意义(P<0.05)。MQEF广泛靶向代谢...     

巨噬细胞外泌体抑制HBV DNA复制

目的探讨巨噬细胞(macrophage,M?)外泌体抑制HBV DNA复制的机制及与慢性乙型肝炎(chronic viral hepatitis B,CHB)肝损伤的相关性。方法体外分离鉴定M?外泌体,并将其与Hep G2.2.15细胞共培养,利用实时定量PCR检测共培养后HBV DNA复制的变化,分别分析M?及其上清外泌体中微小RNA(micro RNA,mi RNA)-638的表达;同时入组CHB免疫活化(immune activation,IA)期、低(非)复制(inactive carrier,IC)期患者,并以同期健康者作为对照组,通过实时定量PCR检测血清外泌体中mi RNA-638的表达,并与肝损伤、HBV DNA载量进行相关性分析。结果 M?外泌体可以抑制HBV DNA复制;M?及其上清外泌体中mi RNA-638高表达;CHB患者IA期mi RNA-638的表达水平低于IC期;CHB患者血清外泌体中mi RNA-638的表达水平与ALT、AST和HBV DNA水平呈负相关。结论 M?外泌体可以抑制HBV DNA复制,外泌体中mi RNA-638的表达水平与肝脏炎性损伤和病毒复制密切相关,M?外泌体相关mi RNA可能是潜在的抑制HBV复制、减轻肝脏炎症的靶点。     

冠心病患者血液外泌体mRNA、lncRNA及circRNA差异表达谱及竞争性内源RNA网络的构建

目的:通过生物信息学方法构建冠心病患者血液外泌体中的竞争性内源RNA(ceRNA)调控网络,探讨其发病机制。方法:在exoRbase数据库中下载冠心病患者和正常对照的血液外泌体测序数据,通过R语言分别对外泌体中mRNA、长链非编码RNA(lncRNA)、环状RNA(circRNA)的表达谱作差异表达分析,使用TargetScan和miRanda数据库共同预测和差异表达mRNA结合的微小RNA(miRNA),使用miRcode数据库预测与差异表达lncRNA结合的miRNA,使用starBase数据库预测与差异表达circRNA结合的miRNA。对3组miRNA两两取交集,保留与差异表达mRNA、lncRNA、circRNA两者及以上均结合的miRNA,构建ceRNA网络,使用Cytoscape软件可视化,并对差异表达基因进行GO富集和KEGG通路分析。结果:冠心病患者外周血外泌体中差异表达mRNA为569种,差异表达lncRNA为1408种,差异表达circRNA为282种。其中与差异表达mRNA相结合的miRNA有178种,与差异表达lncRNA结合的miRNA有207种,与差异表达circRNA结合的miRNA有328种,两两取交集,共保留120个共有的miRNA成功构建ceRNA网络,GO分析的结果主要富集在磷酸化、去磷酸化和脂质磷酸化等功能,KEGG分析的结果主要富集在甘油脂代谢和甘油磷脂代谢通路。结论:本研究成功构建冠心病患者血液外泌体中的ceRNA调控网络,为冠心病的诊断治疗提供新靶点。