脂多糖和肿瘤坏死因子α对人牙髓干细胞增殖和成骨分化的影响

目的 探讨脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人牙髓干细胞(hDPSCs)增殖和分化的影响。方法 体外分离培养hDPSCs,分别用不同浓度LPS(0,0.1,1,10μg/mL)和TNF-α(0,1,10,100 ng/mL)培养细胞。培养24,48,72 h,应用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测hDPSCs增殖活性变化;培养7,14,21 d应用茜素红(AR)染色试剂盒和5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)碱性磷酸酯酶(ALP)显色试剂盒检测hDPSCs肉眼观AR染色变化、钙结节定量、ALP染色和ALP活性等成骨分化指标。结果 (1)CCK-8实验显示1,10,100 ng/mL TNF-α作用于hDPSCs 24,48,72 h后细胞增殖活力降低(P<0.05)。AR成骨诱导染色结果显示培养7,14 d, TNF-α各浓度组肉眼观AR染色无明显差异;培养21 d, 10 ng/mL和100 ng/mL TNF-α组矿化程度相比0 ng/mL组低(P<0.05)。ALP染色和ALP活性试剂盒分析显示诱导培养7,14,21...     

原花青素对人牙髓干细胞的增殖及成骨分化作用的研究

目的 探讨原花青素(PAC)对人牙髓干细胞(hDP-SCs)增殖及成骨分化能力的影响.方法 改良组织块消化法分离培养hDPSCs,流式细胞术鉴定细胞表型,诱导染色鉴定分化潜能.不同浓度的PAC(0、4、8、16、32 μmol/L)刺激hDPSCs后,通过CCK-8法检测hDPSCs的增殖,细胞骨架染色检测hDPSCs的细胞形态,碱性磷酸酶(ALP)活性检测hDPSCs的ALP活性,荧光定量PCR(q-PCR)检测成骨相关基因核心转录因子2 (Runx-2)、骨形成蛋白2(Bmp-2)和Ⅰ型胶原(Col-1)的mRNA表达水平.结果 体外成功培养hDPSCs并进行鉴定;CCK-8检测和细胞骨架染色结果显示,0～16 μmol/L PAC对hDPSCs形态和增殖没有影响,32μmol/L PAC对hDPSCs增殖有抑制作用;ALP染色和定量检测均显示8 μmol/L PAC组ALP活性较对照组(PAC 0μmol/L)高;q-PCR结果显示,与对照组相比,8μmol/L PAC诱导7d后,成骨相关基因Runx-2、Bmp-2、Col-1的表达均升高.结论 PAC对hDPSCs的成骨分化有促进作用.     

Toll样受体4及其配体脂多糖对骨髓间充质干细胞增殖的影响

目的:观察不同浓度脂多糖(1ipopolysaccharides,LeS)对离体小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖功能的影响.方法:分别采取野生型和Toll样受体4(toll like receptor4,TLR4)基因缺失小鼠骨髓以贴壁分离法培养骨髓间充质干细胞,取第3～6代的MSCs,通过流式细胞术检测MSCs表面标志显示CD34、CD45阴性;CD105、CD29、CD44阳性.以不同浓度LPS(0.1、1.0、5.0、10.0、20.0 μg/mL)分别与野生型小鼠MSCs共培养24 h和48 h,采用Cell Count Kit-8比色法观察LPS对MSCs增殖功能的影响,此外采用TLR4基因缺失小鼠MSCs与LPS1.0μg/ml共培养,探讨LPS促进MSCs增殖的可能机制.结果:LPS(0.1～5.0μg/ml)能显著提高离体野生型小鼠MSCs的增殖能力(P<0.05),LPS浓度在5.0μg/ml时对MSCs增殖功能影响最大,随着LPS浓度的继续增大,MSCs的增殖功能反呈下降趋势,但LPS 20.0μg/ml组增殖能力仍高于对照组(P>0.05);LPS对LR 4基冈缺失小鼠MSCs增殖能力无显著影响.结论:适量的LPS能增加MSCs的增殖能力,机制可能是通过激活Toll样受体信号通路实现的.     

瑶药小钻乙醇提取物对4种肿瘤细胞增殖的影响

目的探讨瑶药小钻乙醇提取物对4种肿瘤细胞增殖的影响,评价其体外抗肿瘤活性。方法制备不同终浓度(200μg/mL、150μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL)小钻80%乙醇提取物及顺铂。取对数生长期人乳腺癌细胞MCF-7、人结直肠癌细胞LOVO、人肝癌细胞HepG2、小鼠黑色素瘤细胞B16,采用四甲基噻唑蓝法检测不同浓度小钻乙醇提取物及顺铂作用48 h后4种肿瘤细胞的增殖情况,计算增殖抑制率及半数抑制浓度(IC₅₀)。结果各浓度小钻乙醇提取物对4种肿瘤细胞增殖均有一定抑制作用,抑制率随浓度的增加而升高(均P<0.05),但终浓度最高为200μg/mL时抑制率<80%。小钻乙醇提取物对4种细胞的IC₅₀值均>20μg/mL,而顺铂的IC₅₀值均<10μg/mL,小钻乙醇提取物对4种细胞的抑制作用均低于顺铂(均P<0.05)。结论小钻乙醇提取物对4种肿瘤细胞的体外增殖有一定的抑制作用,但其致死作用不明显,活性低于顺铂。     

模拟炎症微环境下紫草素对人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的影响

目的 探究紫草素在牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的炎症微环境下对人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的影响。方法 从健康人牙周膜组织中分离培养人牙周膜干细胞,采用流式细胞术鉴定细胞表面标志物CD29、CD105、CD34、CD45。CCK-8法检测不同浓度紫草素对正常及模拟炎症微环境下人牙周膜干细胞增殖活性的影响：首先筛选出紫草素促进增殖人牙周膜干细胞作用的适宜浓度范围,再取牙周膜干细胞进行后续实验分组：空白组(单纯培养基)、紫草素组(实验药物浓度紫草素)、LPS组(牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g-LPS,10μg/mL)、紫草素+LPS组(实验药物浓度紫草素+P.g-LPS)。3 d时采用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中IL-6、IL-18水平;7 d时进行碱性磷酸酶染色及碱性磷酸酶活性测试、21 d时进行茜素红染色检测成骨的分化能力;168 h时进行RT-PCR检测骨钙素、RUNT相关转录因子2、碱性磷酸酶等成骨基因的表达。结果 分离培养的人牙周膜干细胞主要呈束状长梭形,流式鉴定结果表面标志物CD29(99.9...     

多西他赛对人视网膜色素上皮细胞增殖的抑制作用

目的 研究多西他赛（docetaxel, DTX）对体外培养的人视网膜色素上皮（human retinal pigment epithelium, hRPE）细胞增殖的抑制和凋亡。方法 选择不同浓度（0、10、20、40、80μg/mL）的DTX作用于hRPE细胞一定时间,MTT法检测DTX对hRPE细胞的生长抑制,荧光染色显微镜观察凋亡细胞,流式细胞术检测DTX对hRPE细胞周期的影响。结果 DTX对人hRPE细胞有生长抑制作用,随着DTX浓度的增加,对hRPE细胞的增殖抑制作用明显增强（P<0.05）,当DTX浓度为80μg/mL作用于hRPE细胞48 h时,细胞增殖抑制达93%。20μg/mL DTX作用的hRPE细胞中细胞核或细胞质内出现致密浓染的颗粒状或条索状荧光的凋亡细胞,随着浓度的增加,凋亡细胞数亦增加。流式细胞仪检测显示,加入DTX的hRPE细胞各周期比例发生改变,G₀/G₁期、S期细胞比例逐渐减少,G₂/M期细胞增加,不同浓度组与阴性对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）,80μg/mL...     

CD28、CD40通路共刺激对淋巴细胞增殖反应的影响及CsA的抑制作用

目的：探讨CD28、CD40通路共刺激后淋巴细胞增殖反应的变化及免疫抑制剂环孢素A(CsA)、抗CTLA4单克隆抗体对共刺激通路激活后淋巴细胞增殖反应的影响。方法：采用单克隆抗体与淋巴细胞表面CD3、CD28及CD40L分子结合产生相应刺激信号,根据刺激条件不同设组为：①抗CD3单抗单刺激(A组)(剂量为10μg／L、100μg／L、1000μg,／L);②抗CD3单抗 抗CD28单抗(B组);③抗CD3单抗 抗CD40L单抗(C组);④抗CD3单抗 抗CTLA4单抗(D组)共刺激(A、B、C、D组中抗CD3单抗剂量固定为100μg／L,其余3种单抗各设10μg／L、100μg／L、1000μg／L3种剂量);⑤抗CD3单抗 抗CD28单抗 抗CD40L单抗(E组);⑥抗CD3单抗 抗CD28单抗 抗CTLA4单抗(F组)共刺激(E、F组中抗CD3单抗和抗CD28单抗的剂量固定为100μg／L,抗CD40L单抗和抗CTLA4单抗的剂量各设10μg／L、100μg／L、1000μg／L);⑦CsA干预组：抗CD3单抗 CsA(G组);⑧抗CD3单抗 抗CD28单抗 CsA(H组);⑨抗CD3单抗 抗CD28单抗 抗CD40L单抗 CsA(I组),G、H、I组中所有单抗浓度均固定为100μg／L,CsA浓度设为10μg／L、100μg／L、1000μg／L。采用[^3H]-TdR同位素掺人法测定淋巴细胞增殖水平,液体闪烁计数仪测定放射性计数值。结果：用抗CD3单抗 抗CD28单抗共刺激后,淋巴细胞增殖反应明显高于抗CD3单刺激,而在抗CD3单抗 抗CD40L单抗刺激组,淋巴细胞增殖反应低于抗CD3单刺激组。抗CTLA4单抗所提供的刺激信号可抑制抗CD3单刺激及抗CD3 抗CD28共刺激导致的淋巴细胞增殖反应,并且随着抗CTLA4单抗剂量的增加,抑制作用增强。CsA对共刺激后的淋巴细胞增殖反应有抑制作用,且随着剂量增大其抑制作用也增强,但对单刺激后增殖反应的抑制作用更为明显。结论：CD28共刺激通路在淋巴细胞活化中起着关键作用。抗CD40L单抗的刺激作用可能被其对T细胞与抗原递呈细胞(APC,包括B细胞等)间的阻断效应所掩盖。抗CTLA4单抗及CsA对共刺激后淋巴细胞的增殖反应均有抑制作用。     

脐带间充质干细胞源外泌体通过自噬对肾小管上皮细胞凋亡的抑制作用研究

目的 研究间充质干细胞源外泌体(Exo)对衣霉素(TM)诱导肾小管上皮细胞(HKC)的凋亡作用。方法 以不同浓度(0、1、2、4μg/mL)TM诱导HKC产生凋亡。采用CCK-8法检测细胞增殖活性。采用蛋白印迹法及流式细胞术检测细胞凋亡情况;检测自噬蛋白LC3B、Atg5和Beclin1的基因及蛋白表达水平。分离脐带间充质干细胞Exo,并进行流式细胞术表面标志物鉴定,研究不同浓度Exo(0、50、75、100、150、200μg/mL)与TM共处理对细胞活性的影响。通过流式细胞术及细胞免疫荧光检测LC3B的表达情况。分析Exo与TM共处理对细胞凋亡水平的影响。结果 1、2、4μg/mL TM均能抑制HKC增殖活性并呈浓度依赖性;不同浓度TM均能诱导HKC凋亡,并激活细胞自噬信号通路。与TM组(1μg/mL TM处理)比较,TM处理中分别加入75、100、150、200μg/mL Exo后细胞增殖活性明显增强;免疫荧光和流式检测发现,TM+Exo组自噬标志性蛋白LC3B表达水平上调。TM组细胞凋亡率为(13.36±1.47)%,TM+Exo组细胞凋亡率为(7.75±0.62)%,差异有统...     

大肠杆菌脂多糖对皮肤成纤维细胞数量及增殖周期的影响

目的:观察大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激后,皮肤成纤维细胞数量和增殖周期的变化规律。方法:体外培养正常人皮肤成纤维细胞,加入不同浓度(0.005~1.0μg/m l)的大肠杆菌LPS(E.coli055:B5),通过细胞计数法连续观察1~9 d细胞数量的变化;于LPS加入后第6天细胞处于对数生长期时,采用流式细胞术观察细胞增殖周期。结果:LPS刺激浓度在0.005~0.1μg/m l时,细胞数量和S期细胞比例随着刺激浓度增加而增高,且呈浓度依赖性;当LPS浓度为0.5μg/m l时,上述作用开始降低,但仍高于对照组;当浓度达到1.0μg/m l时,细胞数量和S期细胞比例均低于对照组。结论:在一定浓度范围内LPS促进皮肤成纤维细胞增殖,而过高浓度LPS则呈现抑制效应。     

载TGF-β3甲基丙烯酰化肝素对牙髓干细胞成骨分化能力的影响及其机制

目的:探讨载转化生长因子β3 (TGF-β3)甲基丙烯酰化肝素(HepMA)对牙髓干细胞(DPSCs)成骨分化能力的促进作用,阐明其可能的作用机制。方法:体外分离培养人牙髓干细胞(hDPSCs)并通过流式细胞术进行细胞鉴定。合成光固化HepMA水凝胶,利用扫描电子显微镜观察材料表面形态特征。合成载不同浓度(20、40、60、80和100μg·L^-1) TGF-β3的HepMA (TGF-β3-HepMA),采用其浸提液分别培养hDPSCs 1、 3和5 d,同时设对照组,采用CCK-8法筛选出载TGF-β3的最适浓度。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各时间点TGF-β3-HepMA中TGF-β3的累积释放量并绘制药物释放曲线。hDPSCs分为对照组、 HepMA组和载最适浓度TGF-β3的HepMA (TGF-β3-HepMA)组,加入含有相对应浸提液的培养基培养24 h,配制成骨诱导液分别诱导hDPSCs 7、14和21 d,采用碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色法检测各组细胞ALP染色及钙结节形成情况,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组...     

体外条件下蜕皮甾酮对大鼠脐带间充质干细胞增殖的实验研究

目的:研究体外条件下蜕皮甾酮(ecdysterone,EDS)对于大鼠脐带间充质干细胞增值活性的影响。方法：采用胶原酶消化法分离培养大鼠脐带间充质干细胞,并通过动态观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面抗原加以鉴定;取第3代脐带间充质干细胞分别在基础培养基(DMEM-LG培养基、10%的胎牛血清、100U/ml青/链霉素、2mmol/L L-谷氨酰胺)中加入不同浓度（0、25、50、100、150、200μg/ml）EDS予以干预,分别于第1、3、5、7天MTT法检测细胞增殖活性;另外,设置相同分组EDS干预培养大鼠脐带间充质干细胞7天,绘制细胞生长曲线。结果：采用酶消化法能有效分离纯化大鼠脐带间充质干细胞。细胞细胞流式仪鉴定显示,第3代细胞阳性表达CD44、CD90,阴性表达CD34、CD45。实验采用MTT法检测大鼠脐带间充质干细胞活力,结果显示经EDS干预培养的大鼠脐带间充质干细胞生长状态良好,在细胞活力方面较空白对照组有明显差异(P<0.05),EDS 100μg/ml、150μg/ml及200μg/ml三组细胞活性比较无显著差异(P>0.05),其他实验组之间无统计学意义(P>0.05)。细胞生长曲线同样显示EDS实验组可有效促进干细胞的增殖,缩短细胞倍增时间,此作用在EDS浓度为100μg/ml时达到最佳。结论：体外条件下,EDS对大鼠脐带间充质干细胞具有促增殖作用,该作用在EDS浓度为100μg/ml时较为显著,不再随浓度的增加而增强。这有望成为促进脐带间充质干细胞增殖的新方法。     

不同组分的稀有人参皂苷对牙髓细胞增殖作用的实验研究

目的探讨稀有人参皂苷不同组分对牙髓细胞增殖的影响,为稀有人参皂苷应用于牙髓病临床治疗提供理论依据。方法改良组织块法培养人牙髓细胞并鉴定。取3～5代牙髓细胞,采用不同浓度稀有人参皂苷Rd、Rh1,浓度分别为0.125μg/m L,0.25μg/m L,0.5μg/m L,1μg/m L进行干预培养。采用CCK8检测稀有人参皂苷不同组分(Rd,Rh1)对人牙髓细胞增殖的影响。结果通过组织块培养法,于原代培养后5 d见细胞从组织块周围爬出,免疫荧光显示细胞表面波形丝蛋白阳性表达。CCK8检测结果显示0.125μg/m L稀有人参皂苷Rd,Rh1组OD值与对照组相比,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 0.125μg/m L的稀有人参皂苷Rd、Rh1对牙髓细胞的增殖无明显的抑制作用。     

胆红素对新生儿脐血单核细胞表面分子的影响

目的 探讨胆红素对脐血单核细胞(CBMC)表面分子CD14CD86和HLA-DR表达的影响.方法 经含有不同浓度胆红素[0μmol/L(0mg/dl)、102.6μmol/L(6mg/dl)、153.9μmol/L(9mg/dl)、220.6μmol/L(12.9ms/dl)和307.8μmol/L(18mg/dl)]的牛血清白蛋白溶液中孵育1h,再给予脂多糖(LPS,1μg/ml)刺激48h,收集细胞.采用双色免疫荧光抗体标记-流式细胞仪技术检测细胞表面分子的表达.结果 胆红素可抑制CBMC共刺激分子CD14CD86和HLA-DR分子的表达,这种抑制作用在胆红素浓度为102.6μmol/L、153.9μmol/L、220.6μmol/L和307.8μmol/L时均很明显.随胆红素浓度的升高,对CBMC共刺激分子CD14CD86和HLA-DR分子表达的抑制作用越强.结论 胆红素抑制细胞表面分子的表达可能与胆红素破坏细胞膜结构,导致细胞坏死和凋亡的增多有关.     

迷迭香醇提取物对肺腺癌细胞增殖的影响及其机制

目的 研究迷迭香醇提取物 (RE) 对人肺腺癌细胞株 (AGZY) 增殖的影响及其机制.方法 采用改良MTT法、集落形成试验检测 RE 对 AGZY 生长增殖的影响;采用流式细胞术检测 RE 对 AGZY 细胞增殖周期的影响.结果 RE 为12.5、25、50 μg/mL和100μg/mL浓度作用5 d对AGZY的抑制率分别为47%、35%、86%和98%,半数抑制浓度IC50为17.8μg/mL;RE为25μg/mL作用AGZY 15 d,细胞集落形成明显减少,与溶媒对照比较差异有高度显著性;RE在50 μg/mL浓度作用细胞5 d,流式细胞仪检测到凋亡峰,100μg/mL有明显的凋亡峰出现.结论 RE体外明显抑制人肺腺癌细胞株(AGZY)的生长增殖,其财细胞增殖周期的阻滞可能是其抑制细胞增殖的机制之一.     

脂肪干细胞的急慢性炎症模型的建立

目的:在体外建立脂肪干细胞的急慢性炎症模型,为研究microRNAs在成体干细胞免疫功能中的调控作用及信号机制的研究提供实验模型。方法:对所分离的脂肪干细胞进行流式细胞仪表面抗原鉴定。加入3个浓度(1,10,100 mg/L)的脂多糖(LPS)于不同时间(2,6,12 h)刺激脂肪干细胞建立急性炎症模型,用LPS(1 mg/L)间断刺激脂肪干细4周建立慢性炎症模型,对照组加完全培养液。CCK8测定细胞增殖活性,ELISA法检测上清液中IL-6、TNF-α、IL-1β含量,Western Blot检测TLR2、TLR4蛋白表达,qPCR检测上述相关分子基因水平表达。结果:流式细胞仪分析脂肪干细胞的细胞表型:CD29、CD44、CD105阳性,CD34、CD45为阴性。与对照组比较,上述检测结果差异均具有统计学意义(P<0. 05)。结论:1 mg/L LPS刺激人脂肪干细胞6 h可以建立急性炎症模型,间断刺激4周人脂肪干细胞可以建立慢性炎症模型。     

莱菔硫烷抑制LPS诱导的小鼠星形胶质细胞增殖

目的 探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞(astrocyte,AST)增殖的影响及其机制.方法 体外培养小鼠原代星形胶质细胞,给予0.1 μg/mL LPS刺激星形胶质细胞活化增殖;同时分别给予不同浓度的莱菔硫烷(10、15、20 μmol/L)处理星形胶质细胞24 h后,CCK8法检测细胞增殖情况;选取20 μmoL/L作为干预剂量行GFAP、Ki67双标免疫荧光染色及流式细胞仪细胞周期检测,进一步验证莱菔硫烷对LPS诱导星形胶质增殖的作用;Western blot检测细胞周期相关蛋白P27kip1、CyclinD1、PCNA的表达情况.结果 CCK8法检测显示0.1μg/mL LPS能显著促进星形胶质细胞增殖(P＜0.01),而加入20μmol/L莱菔硫烷能显著抑制LPS诱导的星形胶质细胞增殖(P＜0.01),并能减少LPS刺激下的Ki67阳性细胞(P＜0.05);细胞周期分析提示20 μmol/L莱菔硫烷可减少LPS诱导下的星形胶质细胞S期比例,增加G1期细胞比例(P＜0.05);Western blot提示20 μmol/L莱菔硫烷能下调LPS刺激下PCNA、CyclinD1的表达,上调P27kip1表达(P＜0.05).结论 莱菔硫烷可以通过调控星形胶质细胞细胞周期,抑制体外LPS诱导的星形胶质细胞增殖.     

去甲斑蝥素对人未分化甲状腺癌FRO细胞增殖和凋亡的影响及机制

目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)对人未分化甲状腺癌FRO细胞增殖及凋亡的影响及其可能机制。方法取对数生长期的FRO细胞,分别加入终浓度为0μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL的NCTD,分别干预12 h、24 h、48 h后,检测细胞增殖情况,计算增殖抑制率。取对数生长期的FRO细胞,分为0μg/mL组、10μg/mL组、20μg/mL组、40μg/mL组,加入相应浓度的NCTD,干预24 h后检测细胞凋亡情况、B淋巴细胞肿瘤-2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)凋亡相关因子mRNA表达情况、线粒体膜电位;干预2周后克隆形成实验检测细胞克隆率。结果随着NCTD浓度增大、干预时间延长,FRO细胞增殖抑制率增加(P<0.05)。10μg/mL组、20μg/mL组、 40μg/mL组均出现细胞凋亡,且浓度越高凋亡现象越明显。0μg/mL组、10μg/mL组、20μg/mL组、 40μg/mL组细胞克隆形成率、细胞线粒体膜电位、Bcl-2 mRNA表达水平依次降低,Bax mRNA表达水平依次升高(均P<0.05)。结...     

基于NLRP3/Caspase-1通路探讨薏苡仁多糖对溃疡性结肠炎体外炎症模型的干预作用及机制

目的：从炎症理论角度出发,探讨薏苡仁多糖（Coixan）对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）体外炎症模型的干预作用及其机制。方法：体外培养NCM460细胞,采用不同剂量（0、2.5、5、10、20和40μg/mL）脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导NCM460细胞,筛选出最佳诱导剂量（20μg/mL）;用不同浓度（0、5、10、20、40和80μg/mL）的Coixan诱导NCM460,筛选出最佳促增殖浓度（10、20、40μg/mL）。实验随机设为空白组、模型组（LPS诱导）、LPS+Coixan低、中、高剂量（10、20、40μmol/L）组,LPS+柳氮磺吡啶（sulfasalazine,SASP）(200μg/mL)组,除空白组外用LPS(20μg/mL)刺激48 h建立UC体外细胞炎症模型后,分别以薏苡仁多糖及SASP进行48 h干预治疗后,ELISA法检测细胞上清液中炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;免疫荧光...     

牛大力多糖对小鼠T淋巴细胞增殖的双向调节作用

目的从牛大力(Millettia Speciosa Champ.)提取纯化多糖,流式细胞术检测多糖对刀豆蛋白A(Con A)刺激引起的小鼠T淋巴细胞增殖的影响,探讨牛大力多糖对免疫系统的调节作用机制,为临床用牛大力治疗多种慢性疾病提供理论和实验依据。方法提取、纯化牛大力多糖,利用CFDA-SE染色,流式细胞术检测多糖对Con A刺激引起的小鼠T淋巴细胞增殖的影响。结果终浓度为160μg/mL、800μg/mL、4 mg/mL、20 mg/mL的多糖对小鼠T淋巴细胞增殖呈剂量依赖性抑制,而终浓度为5、25、50、125μg/mL的多糖对小鼠T淋巴细胞增殖起促进作用,剂量依赖关系不明显。结论牛大力多糖对小鼠T淋巴细胞的增殖呈双向调节作用。     

白细胞介素-17对肝星状细胞增殖及细胞周期的影响

目的研究白细胞介素-17(IL-17)对肝星状细胞的增殖及其对细胞周期变化的影响。方法以体外培养的肝星状细胞为研究对象,分别以200、400、600、800、1 000μg/L(终质量浓度)的IL-17刺激,并设空白对照组,分别培养24、48、72 h。用细胞计数法观察细胞的生长情况,MTT法检测IL-17刺激后肝星状细胞的增殖,流式细胞术检测不同浓度的IL-17对肝星状细胞增殖周期的影响。结果 IL-17对细胞的刺激增殖作用在一定的程度和范围内呈现剂量和时间依赖性,200μg/L的IL-17对细胞无明显的刺激作用(P>0.05),800μg/L的IL-17在细胞培养72 h后对细胞的刺激增殖作用最明显(P<0.01),1 000μg/L的IL-17对细胞则有抑制作用(P<0.01)。IL-17刺激肝星状细胞后能促使细胞由G0/G1期进入S期,细胞增殖以S期细胞比例为主。在一定范围内,细胞增殖指数随着IL-17浓度的增长而增加,而1 000μg/L的IL-17则抑制细胞周期,使细胞周期停滞于G1期(P<0.01)。结论 IL-17能刺激肝星状细胞的增殖,在一定的程度和范围内呈现剂量和时间依赖性,IL-17能够促进肝星状细胞由G0/G1期进入S期。