Apoptin基因活化caspase-3诱导人黑素瘤细胞A375凋亡

为研究肿瘤细胞凋亡基因（apoptingene）诱导人黑素瘤细胞系A375凋亡时是否通过活化easpase-3发挥作用，用含有apoptin基因的真核表达载体短时转染体外培养的人黑素瘤细胞A375；采用RT-PER、DNA凝胶电泳、流式细胞术检测A375细胞的凋亡；以比色法检测easpase-3的相对活性。结果表明，apoptin基因短时转染的A375细胞可出现典型的细胞凋亡所具有的DNA梯状带；流式细胞术显示实验组细胞凋亡率明显高于其它各组（P〈0．01）；转染后24h实验组caspase-3的活性开始升高，72h达高峰，明显高于其它各组（P〈0．01）。结论：apoptin基因可活化caspase-3诱导人黑素瘤细胞A375凋亡。     

青蒿琥酯对黑素瘤A875细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

目的观察青蒿琥酯对人皮肤恶性黑素瘤A875细胞增殖和凋亡的影响,并探讨相关机制。方法体外培养A875细胞,分别给予不同浓度的青蒿琥酯(10~80μg/ml)作用细胞48 h,MTT法检测抑制率,流式细胞术检测凋亡率,Western blot法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的蛋白表达水平变化。结果青蒿琥酯对A875细胞有明显的生长抑制和诱导凋亡的作用(P<0.01),呈剂量依赖性;随药物浓度的增高,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的蛋白表达量逐渐升高(P<0.05)。结论青蒿琥酯可以通过死亡受体途径和线粒体途径诱导A875细胞的凋亡,从而抑制细胞增殖。     

皮肤恶性黑素瘤A375细胞中MMP-2,7,9基因表达的研究

目的研究皮肤恶性黑素瘤A375细胞株中基质金属蛋白酶-2、7、9(MMP-2、7、9)基因的表达情况,探讨S-腺苷甲硫氨酸(SAM)干预前后基因表达水平的差异。方法 A375细胞按不接受和接受SAM干预设立对照组和处理组。采用RT-PCR法比较两组细胞MMP-2、7、9 mRNA转录水平的差异。结果 A375细胞中MMP-2和MMP-7基因不表达;对照组MMP-9显著表达,处理组MMP-9表达不同程度降低,且表达的降低呈剂量和时间依赖性。结论 SAM干预后能抑制MMP-9基因表达的表达水平。     

玛卡多糖抗非小细胞肺癌作用及其机制

目的:探讨玛卡多糖抗非小细胞肺癌作用及其机制.方法:采用一定浓度的玛卡多糖处理非小细胞肺癌A549细胞,CCK-8法、划痕实验和Transwell小室检测玛卡多糖对A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响;流式细胞术检测玛卡多糖对A549细胞周期和凋亡的影响;实时荧光定量PCR和Western Blot法检测细胞周期和凋亡相...     

羊栖菜多糖抗肿瘤作用及其作用机制的研究

目的观察羊栖菜多糖对6种不同组织肿瘤的抑瘤作用，并对其作用机制进行了讨论。方法通过对S180、H22荷瘤小鼠瘤重和生存时间的研究，观察了羊栖菜多糖的体内抗肿瘤作用，采用MTT法和集落形成实验法观察羊栖菜多糖的体外抗肿瘤作用。采用流式细胞仪观察羊栖菜多糖对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响。结果羊栖菜多糖对人胃癌细胞SGC-7901和人直肠癌COLO-205有较好的疗效。羊栖菜多糖可阻滞SGC-7901人胃癌细胞内Go／G，期进入S期，升高细胞凋亡指数(APO％)。结论羊栖菜多糖对人胃癌细胞和直肠癌细胞效果较好，这一作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡达到的。     

羟喜树碱对黑素瘤B16F10细胞侵袭和凋亡的影响及作用机制

目的:观察羟喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)对黑素瘤B16F10细胞侵袭能力以及凋亡相关蛋白p53和Bcl-2表达的影响,并探讨其抑制黑素瘤细胞的作用机制.方法:分别用5、10、20、50μmol/L的HCPT处理B16F10细胞24 h及48 h,采用Transwell实验评价细胞的侵袭能力...     

肿瘤特异性凋亡基因对人黑素瘤细胞凋亡诱导作用的机制研究

为研究肿瘤特异性凋亡基因(apoptin gene)在诱导人黑素瘤细胞A375发生凋亡时，c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在细胞发生凋亡中的作用，用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑素瘤细胞A375；采用流式细胞仪、蛋白印迹法(Western blot)、锥虫蓝染色法及RT-PCR等方法研究其在不同时间对人黑素瘤细胞A375诱导凋亡的作用。结果表明，apoptin基因瞬间转染的人黑素瘤细胞A375可出现明显的细胞凋亡；而且凋亡细胞的数量与apoptin的转染时间有关；凋亡细胞内磷酸化型JNK蛋白随凋亡细胞数量的增加而增多，而非磷酸化型JNK蛋白表达无明显变化。结论：JNK信号通路的活化可能在apoptin诱导肿瘤细胞凋亡过程中发挥作用。     

黄芪多糖对子宫内膜癌KLE细胞抑制作用的研究

目的 探讨黄芪多糖(APS)及其联合顺铂对人子宫内膜癌KLE细胞生长的影响.方法 DMEM培养液溶解APS,将不同浓度APS加入到KLE细胞中分别培养12 h、24 h、48 h,通过中性红比色法检测细胞增殖,应用流式细胞仪检测细胞凋亡与细胞周期.结果 APS能抑制KLE细胞增殖,并呈剂量-时间依赖性(F=2.530,P＜0.01);两药联合应用时生长抑制率显著增高(P＜0.01);流式细胞仪检测显示APS能使KLE细胞发生GI期阻滞,并诱导细胞凋亡,其凋亡率与剂量-时间有依赖性(P＜0.01).结论 APS对KLE细胞具有杀伤作用,且与顺铂联合应用有协同作用.     

红花多糖对人结肠癌loVo细胞凋亡抑制作用机制研究

目的:红花多糖对人结肠癌 LoVo 细胞凋亡作用机制研究.方法:体外培养人结肠癌 LoVo 细胞,不同浓度(0.5mg/ml、1.0mg/ml、1.5mg/ml、1.8mg/ml)红花多糖处理后,分别在干预24、48、72h采用 MTT 比色法测定红花多糖对细胞的增殖抑制作用,利用倒置显微镜观察细胞的形态,采用PI单标流式细胞仪测定细胞周期分布,Annexin V-FITC /PI 双标法检测细胞凋亡率; 采用RT-PCR检测Bax、Bcl-2mRNA表达水平及检测caspase-3活性,Western-blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达情况;应用Transwell细胞侵袭试验检测红花多糖对结肠癌LoVo细胞侵袭能力的影响.结果: MTT 检测显示红花多糖能显著抑制人结肠癌 LoVo 细胞的生长、増殖,呈现浓度和时间效应关系;倒置显微镜显示红花多糖能使结肠癌LoVo 细胞发生典型凋亡特征;流式细胞仪分析示红花多糖能调节细胞周期.RT-PCR实验和Western-blot显示红花多糖可促进细胞中Bax、Caspase-3 mRNA表达,抑制 Bcl-2 mRNA表达.Transwell侵袭实验显示随着红花多糖浓度增加,LoVo 细胞侵袭能力降低.结论:红花多糖能显著抑制人结肠癌 LoVo 细胞凋亡,可使结肠癌LoVo 细胞增殖受到抑制,侵袭能力减弱,调节细胞周期,这种生物学效应可能与Bax、Bacl-2、Caspase-3 的信号通路有关。     

小刺猴头多糖联合5-氟尿嘧啶对Hela细胞的抑制作用

目的研究体外单独应用小刺猴头菌多糖及联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用。方法水提醇沉法得到小刺猴头液体深层发酵浸膏多个糖组分,经MTT筛选获得小刺猴头菌多糖最优组分Hep2。设置空白、Hep2、Hep2+5-Fu、5-Fu组进行MTT实验及细胞周期检测。结果 Hep2单独给药及联合给药都能抑制Hela细胞增殖;Hep2组出现G1期阻滞现象;联合给药组发生了S期和G2/M期阻滞。结论 Hep2可以明显抑制Hela细胞的增殖,并且与5-Fu联合使用对Hela细胞产生协同抑制作用。     

车前子多糖对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制

目的:研究车前子多糖对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并初步探究其作用机制.方法:以人乳腺癌细胞MDA-MB-231为对象,采用MTT法检测不同质量浓度车前子多糖(8、16、32、64 mg/L)对细胞增殖能力的影响并计算细胞存活率;采用划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测不同质量浓度车前子多糖(8、16 m...     

金银花多糖对脾淋巴细胞的增殖作用

目的研究金银花多糖对脾淋巴细胞的增殖作用。方法用MTT法体外观察金银花多糖在不同浓度对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果金银花多糖在浓度10～250μg／ml时可显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖,以浓度100μg／ml时作用最为明显。结论金银花多糖体外具有免疫促进作用。     

唐古特大黄多糖促进IEC-6细胞增殖、移行作用及其可能的机制研究

目的观察唐古特大黄多糖组分之一(RTP1)对大鼠小肠隐窝上皮细胞株(IEC-6)细胞增殖、移行及其对细胞内鸟氨酸脱羧酶(ODC)活性和ODC蛋白表达的影响,观察其对胃肠黏膜的修复作用并探讨可能的机制。方法采用MTT法和体外肠上皮细胞移行模型,观察不同剂量的RTP1(10、30、100mg·L-1)处理IEC-6细胞24h后,细胞增殖和移行情况;Western blot检测ODC蛋白表达;通过测定L-[1-14C]鸟氨酸释放14CO2的量来检测ODC活性变化。结果RTP1在10、30、100mg·L-1时均可明显促进IEC-6细胞的增殖和移行,可增加ODC蛋白表达和ODC活性,并具有剂量依赖性,与空白对照组相比差异具有显著性(P<0·05或0·01)。结论RTP1可促进肠上皮细胞的增殖和移行,提示RTP1可能对肠黏膜的损伤修复具有直接作用。其作用机制可能与鸟氨酸脱羧酶表达增加和(或)活性增大有关。     

唐古特大黄多糖对过氧化氢诱导的肠上皮细胞凋亡的保护作用及其可能机制

目的探讨唐古特大黄多糖(Rheum tanguticumpoly-saccharide,RTP)组分1(RTP1)对过氧化氢(H2O2)诱导的肠上皮细胞IEC-6凋亡的保护作用及其可能的机制。方法以不同浓度的RTP1(10、30、100 mg.L-1)预处理体外培养的IEC-6细胞后,加入H2O2诱导IEC-6细胞凋亡,MTT法检测细胞活力,激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生,DNA琼脂糖凝胶电泳、吖啶橙染色及流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,Western blot测定Caspase-3酶活性。结果 100μmol.L-1H2O2处理细胞2 h明显降低细胞存活率并诱导细胞凋亡,凋亡率为31.3%,细胞内活性氧水平及Caspase-3的活性明显升高,不同浓度(10、30、100 mg.L-1)RTP1预处理细胞24 h,可明显提高细胞存活率,有效抑制DNAladder的发生,流式细胞仪检测凋亡率(30、100 mg.L-1)分别降低至24.4%和21.5%,Caspase-3酶活性降低,并呈现一定的剂量依赖性。结论 RTP1可明显抑制H2O2诱导的IEC-6细胞凋亡,其细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水平和抑制Caspase-3活性相关。     

中药多糖对免疫细胞的作用及其机制研究进展

<正>中药多糖是一类来自天然植物,经过提取分离得到的由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物,在自然界中的含量丰富,具有免疫促进活性。中药多糖药理作用的发挥与免疫调节息息相关,甚至其抗肿瘤等药理作用也通过增强机体免疫功能而实现。无论是固有免疫细胞还是适应免疫细胞,中药多糖都会对其发挥一系列的调节作用。一方面,中药多糖作用使巨噬细胞吞噬活性增强以及使自然杀伤细胞的杀伤活性增强,促进这些细胞对外来"非己"物质的吞噬杀伤作用,从而增强机体的免疫功能。另一方面,中药多糖     

山茱萸多糖对胃癌细胞增殖和凋亡的机制

目的探讨山茱萸多糖对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法用不同剂量山茱萸多糖灌胃接种AGS细胞的裸鼠,检测裸鼠体内肿瘤体积;TUNEL法检测细胞凋亡指数;胃癌细胞AGS分为对照组、山茱萸多糖低、中、高剂量组、si-NC组、si-ELF3-AS1组、山茱萸多糖+pcDNA组、山茱萸多糖+pcDNA-ELF3-AS1组。MTT检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡;RT-qPCR检测lncRNA ELF3-AS1表达水平。结果山茱萸多糖处理的裸鼠体内移植瘤体积减少,细胞凋亡指数升高(P<0.05)。山茱萸多糖处理胃癌细胞AGS后,细胞增殖抑制率升高,凋亡率升高,ELF3-AS1表达水平降低,且呈剂量依赖性(P<0.05)。胃癌细胞AGS中ELF3-AS1表达水平升高(P<0.05)。抑制ELF3-AS1表达后,细胞增殖抑制率升高,凋亡率升高(P<0.05)。ELF3-AS1过表达逆转了山茱萸多糖对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的作用。结论山茱萸多糖可能通过下调ELF3-AS1抑制胃癌AGS细胞增殖,促进AGS细胞凋亡。     

肿瘤特异性凋亡基因对人黑色素瘤细胞A375凋亡诱导作用

为观察肿瘤特异性凋亡基因(apoptingene)对人黑色素瘤细胞A375的凋亡诱导作用，用含有凋亡基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑色素瘤细胞A375，采用台盼蓝染色法、RT—PCR及DNA凝胶电泳等方法研究其在不同时间条件下对人黑色素瘤细胞A375诱导凋亡的作用。结果表明，凋亡基因瞬间转染的人黑色素瘤细胞A375可出现明显的细胞凋亡；而且滴亡细胞的数量与转染时间有关。结论：凋亡基因具有诱导人黑色素瘤细胞A375凋亡的作用。     

肿瘤特异性凋亡基因诱导A375细胞凋亡信号转导机制研究

为研究肿瘤特异性凋亡基因(apoptin)在诱导人黑素瘤细胞A375凋亡中的信号转导机制,用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑素瘤细胞A375;采用流式细胞术检测A375细胞的凋亡;以比色法检测caspase-8和caspase-3的相对活性;Western印迹检测凋亡细胞中细胞色素C的表达量。结果表明,Apoptin基因瞬间转染的A375细胞凋亡率明显高于其他各组(P<0·01);caspase-3的活性升高,但caspase-8活性没有明显变化;细胞色素C释放量明显增多。结论:Apoptin基因可能通过促进线粒体释放细胞色素C激活caspase-3,进而诱导人黑素瘤细胞A375凋亡。     

多糖的免疫调节作用及其作用机制研究进展

多糖具有肯定的调节机体免疫功能的作用,其作用是多途径、多环节、多靶点的,如促进免疫细胞增殖与分化,分泌各种淋巴因子,调节神经－内分泌－免疫调节网络（ＮＩＭ）的平衡等。在世界药物研究趋势由化学合成药物转向天然药物的今天,人们对中药多糖类药物的研究也正如火如荼。本文对近年来多糖的免疫调节作用及其作用机制的研究进展作一概述。     

刺糖多糖免疫活性的初步研究

目的研究刺糖多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法采用水提醇沉法得刺糖多糖。建立免疫抑制小鼠动物模型,小鼠灌胃刺糖多糖,利用碳粒廓清实验测定非特异性免疫功能;血清溶血素实验反映抗体生成水平;测定血清中细胞因子的生成水平来评价刺糖多糖的免疫活性。结果刺糖多糖可以增强免疫抑制小鼠的碳粒廓清能力和血清溶血素水平,能够提升由环磷酰胺造成的免疫抑制小鼠血清中IL-2、IL-10的含量。结论刺糖多糖对免疫抑制小鼠免疫功能有促进作用。