基于代谢组学和肠道菌群探讨栀子改善类风湿关节炎的作用机制北大核心CSCD

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以持续性关节炎症为特征的自身免疫性疾病,RA的发生与内源性代谢产物及肠道菌群的紊乱密切相关。栀子是我国最常用的药食同源资源之一,常用于防治黄疸、炎症、疼痛、发热等,但栀子改善RA的作用机制尚不明确。该研究采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)血清非靶向代谢组学和16S rDNA高通量基因测序法关联分析,以阐释栀子改善弗氏完全佐剂诱导的RA的作用机制。药效学结果表明,栀子能显著改善佐剂关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠症状,且栀子低、高剂量能显著降低大鼠血清中炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和IL-1β水平以及前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)水平(P<0.05,P<0.01)。代谢组学涉及的通路主要为α-亚麻酸代谢和甘油磷脂代谢。16S rDNA测序结果显示,链球菌属、费克蓝姆菌属、克雷伯菌属、肠球菌属和科萨克菌属可能是栀子改善AA大鼠的关键肠道微生物。Spearman相关性分析显示,PE-NMe[18:1(9Z)/20:0]、PC[20:1(11Z)/18:3(6Z,9Z,12Z)]和PC[20:0/18:4(6Z,9Z,12Z,15Z)]等差异代谢物与差异代谢菌具有显著相关性。综上,栀子可能通过调控肠道微生物组成和α-亚麻酸代谢、甘油磷脂代谢等相关代谢通路,从而间接发挥改善RA的作用,研究结果为从多组学角度阐释栀子改善RA的作用机制提供了新的思路与依据。     

阳虚质肠道菌群与宿主代谢共变化机制研究

阳虚质是一种常见的偏颇体质,以畏寒怕冷、手足不温等虚寒表现为主要特征,与消化系统疾病、内分泌和代谢疾病的发生密切相关。前期研究发现,阳虚质存在肠道菌群失衡,及代谢、免疫功能紊乱。现代医学研究证实肠道菌群参与宿主代谢,二者有着共变化特征。提出"阳虚质肠道菌群结构的变化影响其代谢功能,并存在与代谢相关的特征功能菌群"这一假说,并对研究思路进行了阐述。对于开展基于肠道菌群的个体化诊疗与预防具有重要意义。     

基于肠道菌群和代谢组学研究化滞柔肝颗粒治疗非酒精性脂肪肝的作用机制

目的 探讨化滞柔肝颗粒治疗非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）的作用机制。方法 高脂饮食饲养8周构建大鼠NAFLD模型,化滞柔肝颗粒ig给药4周。半自动生化分析仪测定大鼠血脂相关指标;油红O染色观察肝脏组织病理变化;Illumina Miseq测序平台对V3～V4可变区进行扩增和测序,超高效液相色谱串联质谱（UPLCMS/MS）开展血浆代谢组学研究,并结合Spearman进行肠道菌群与代谢组学之间的关联分析。结果 与模型组相比,化滞柔肝颗粒中、高剂量组可显著降低大鼠体质量（P<0.05、0.01）和血清总胆固醇（totalcholesterol,TC）、三酰甘油（triacylglycerol,TG）水平（P<0.01）,升高高密度脂蛋白（high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）水平（P<0.05、0.01）。此外,化滞柔肝颗粒高剂量组还可显著降低大鼠低密度脂蛋白（low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）水平（P<0...     

基于肠道菌群-宿主代谢相关性的大枣降低十枣汤有毒药味肠道损伤作用研究

十枣汤中有毒药味甘遂、大戟、芫花对肠道有明显毒性,组方时虽采用大枣降低上述有毒药味的毒性,但其机制尚欠清晰。为探索大枣对十枣汤组方有毒药味肠道毒性的减毒作用机制,选择正常SD大鼠40只,分为空白组,十枣汤高、低剂量组,十枣汤有毒药味高、低剂量组共5组,分别灌胃给予加枣汤和不加枣汤的方药,采用体质量变化、脾脏指数表征体质状态;苏木精-伊红(HE)染色法观察肠组织病理学变化,测定小肠组织中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活力以评价肠道损伤;收集新鲜粪便采用16S核糖体RNA基因(16S rDNA)测序技术检测肠道菌群结构变化;气相色谱质谱联用仪(GC-MS)定量分析粪便短链脂肪酸的含量;快速液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UFLC-Q-TOF-MS)技术测定粪便代谢物,并用Spearman关联网络分析差异性菌属和差异代谢产物。结果显示,与空白组相比,十枣汤有毒药味高、低2个剂量组大鼠小肠组织中MDA含量显著增加,GSH含量和SOD活力显著降低,各肠段肠绒毛显著缩短(P<0.05);肠道菌群多样性和丰富度降低,菌群结构改变;短链脂肪酸含量显著降低(P...     

整合代谢组学与肠道菌群分析酸枣仁汤改善失眠大鼠的作用机制

为探讨酸枣仁汤(SZRD)改善对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠大鼠模型的作用机制,通过腹腔注射PCPA溶液(400 mg·kg^-1)制备失眠大鼠模型。利用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对大鼠海马样本进行代谢产物轮廓分析,并结合多元统计分析结合筛选差异代谢物,借助MetaboAnalyst 5.0构建相关代谢通路。利用16S rRNA基因V3～V4区高通量测序,通过LEfSe、OPLS-DA、PICRUSt2预测功能分析肠道菌群的结构及相对丰度变化。在海马中共鉴定出22个差异代谢物,包括氨基酸类、脂肪酸类、核苷类、有机酸类、维生素类、其他类等;共涉及8条代谢通路,主要为丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,精氨酸生物合成等。16S rRNA基因测序显示,瘤胃球菌属Ruminococcus、真杆菌属Eubacterium是SZRD组与模型组的差异菌群;PICRUSt2与LEfSe整合分析表明瘤胃球菌属Ruminococcus可能是SZRD改善PCPA失眠大鼠的标志性菌属。进一步采用Spearman相关性分析,...     

肠道菌群对中药有效成分代谢机制研究进展

通过对中药有效成分在肠道菌群作用下的代谢机制研究,为开展中药代谢研究提供参考。查阅国内外文献,本文主要针对黄酮类化合物,木脂素类化合物,萜类化合物,蒽醌类化合物,甾体类化合物和生物碱类化合物在肠道菌群作用下的代谢研究进行分析归纳总结。通过对中药有效化学成分在肠道菌群代谢的研究,有利于了解中药的作用机理及作用物质基础,并对加快中药现在化的发展起到一定的促进作用。     

基于血浆非靶向代谢组学和肠道菌群16S rRNA测序技术探讨养心通脉方干预冠心病血瘀证大鼠的作用机制（英文）

目的 探讨肠道菌群和血浆代谢物与冠心病血瘀证的关联性,及养心通脉方干预冠心病血瘀证的作用机制。方法 18只SPF级雄性SD大鼠建立冠心病血瘀证模型后,随机分为模型组、养心通脉方组和阿托伐他汀钙组,每组各6只,灌胃干预2周。另取6只一直正常饮食的大鼠作为正常对照组。苏木精-伊红染色法（HE）染色观察大鼠冠状动脉病理变化及检测心电图、血流变和血脂生化指标,液相色谱-串联质谱联用技术（LCMS/MS）技术分析大鼠血浆非靶向代谢组学,16S r RNA测序技术分析回肠黏膜菌群以及对两者代谢组学进行相关性分析。结果 与正常组相比,模型组大鼠全血黏度、总胆固醇酯和低密度脂蛋白胆固醇酯均显著升高（P <0.05）;模型组冠状动脉内皮细胞增生破坏,内皮下有大量空泡状改变,药物组冠状动脉内皮病变程度减轻。LCMS/MS结果共筛选鉴定出血清33种潜在内源性代谢物,其中1-甲基组氨酸、N-乙酰组胺、黄体酮和脱氧皮质酮可能成为冠心病血瘀证疾病模型的差异性代谢物,16S r RNA结果显示养心通脉方组肠道菌群的多样性和丰富度有所改善,通过相关性分析,与冠心病血瘀证高度相关的变形杆菌门Hydrogenoph...     

脉络舒通丸治疗下肢血栓性浅静脉炎组方特点及作用机制

血栓性浅静脉炎是由于肢体浅静脉发生血栓性、炎症病变,以浅静脉出现条索状突起,形如蚯蚓、色赤,疼痛而硬等为主要表现特征,是临床上较为常见的血管疾病,多累及下肢。脉络舒通丸是国医大师唐祖宣治疗该病的经验方,由黄芪、金银花、黄柏、苍术、薏苡仁、玄参、当归、白芍、水蛭、蜈蚣、全蝎、甘草组成,具有清热解毒、化瘀通络的作用,临床疗效显著。现运用中医学思维分析下肢血栓性浅静脉炎的病因病机,从方剂学角度探析脉络舒通丸的组方配伍特点及其药物的作用机制,为其临床应用提供参考。     

基于真实世界的脉络舒通丸对肝功能指标影响的研究

目的 应用医院信息医疗系统电子数据开展真实世界脉络舒通丸对肝功能指标影响的安全性临床研究。方法 基于全国14家大型三级甲等医院的医疗电子数据库，将服用脉络舒通丸患者作为脉络舒通丸组，未服用脉络舒通丸者作为对照组，以性别相同、年龄±5岁为匹配条件，按照1∶1比例分组后2组均为2387例，以用药后肝功能指标[碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、丙氨酸氨基转移酶（alanine transaminase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase,AST）、谷氨酞转移酶（gamma-glutamyl transferase,GGT）、总胆红素（total bilirubin,TBIL）]作为结局评价指标，通过倾向性评分方法控制研究中存在的混杂因素，采用3种统计学方法进行安全性分析。结果 筛选出12个影响程度较高的混杂因素，加权平衡了全部的混杂因素，3种统计学方法得到的结果均为P>0.05，两组差异不具有统计学意义。结论 不能认为脉络舒通丸导致肝功能指标异常变化，但鉴于倾向性评分法仅能控制已知潜在混杂因素，无法实现对未知混杂因素...     

脉络舒通丸治疗精索静脉曲张的组方机制

精索静脉曲张是泌尿男科临床常见疾病,主要表现为睾丸坠胀不适、阴囊潮湿、少弱精等症状,现代医学和中医学在临床治疗尚无特效药物。脉络舒通丸为国医大师唐祖宣为治疗湿热瘀阻型血栓性浅静脉炎等血管疾病所创,在临床应用中发现对于治疗精索静脉曲张所导致的症状也有较好的临床疗效。现分别从中西医角度探析脉络舒通丸治疗精索静脉曲张的组方机制,为临床应用提供理论依据。     

基于肠道菌群测序和粪便代谢组学的荆防颗粒保护急性肺损伤机制研究

为了阐明荆防颗粒治疗急性肺损伤的效果及作用机制,并考察荆防颗粒对急性肺损伤粪便内源性代谢物代谢紊乱和肠道菌群稳态的调控作用,将小鼠随机分为假手术组、模型组、荆防颗粒组,造模后持续给药6 d。利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用仪(UHPLC-HESI-QE-Orbitrap-MS/MS)代谢组学技术和16S rRNA高通量测序技术,测定小鼠肠道中内源性小分子物质和肠道菌群的变化,并寻找出潜在的生物标志物。结果显示,荆防颗粒可以对11个生物标志物L-谷氨酸、琥珀酸、花生四烯酸、亚油酸、亚麻酸、苯丙氨酸、鞘氨醇、丁酸、丙酮酸、色氨酸、棕榈酸进行调控。对这11个生物标志物通过在线软件MetaboAnalyst进行代谢通路分析,得到潜在的主要代谢通路,其中共有10条代谢通路与荆防颗粒治疗急性肺损伤密切相关,包括丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢,氨基酰基tRNA生物合成,三羧酸循环,乙醛酸及二羧酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,亚油酸和亚麻酸代谢,氮代谢,谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢。肠道菌群结果显示显著性差异菌主要有Bacteroides...     

麻杏石甘汤对肺损伤大鼠肠道菌群及代谢产物影响的关联分析研究

目的 探索肠道菌群在麻杏石甘汤治疗肺炎中的作用机制。方法 采用脂多糖雾化吸入法制备大鼠肺炎损伤模型,通过高通量测序和代谢组学检测动物肠内容物,分析麻杏石甘汤干预后动物肠道菌群和代谢产物的变化;以组学和高通量映射的KEGG通路为核心,联合分析代谢组和高通量测序结果。结果 经麻杏石甘汤治疗后,动物肺组织肺损伤情况显著好转。在肠道内容物中,优势菌种有Staphylococcaceae、Gemellaceae、Lactobacillaceae等,含量显著上调的代谢产物有芥酸、琥珀酸半醛、二十碳二烯酸等。其中Veilonella、Aerococcus等菌与磷酸氨基甲酸、琥珀酸半醛、维生素D2、棕榈酸、马来酸等相关性较为显著。结论 麻杏石甘汤可以缓解肺组织炎症损伤,其作用机制与通过肠道菌群调节棕榈油酸、马来酸、磷酸、1-甲基组氨酸、3-脱氢莽草酸等代谢产物有关。     

脉络舒通丸对精索静脉曲张模型大鼠线粒体介导内源性细胞凋亡的影响

目的 探讨脉络舒通丸对精索静脉曲张模型大鼠线粒体介导的内源性细胞凋亡的影响。方法 36只雄性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组和脉络舒通丸低、中、高剂量（0.162、0.324、0.648 g/kg）组,精索静脉曲张模型制备成功7 d后,连续ig给药4周。苏木素-伊红（HE）染色法检测各组大鼠睾丸及附睾组织病理变化;透射电镜观察各组大鼠生精细胞线粒体超微结构;免疫荧光检测各组大鼠睾丸组织中线粒体动力相关蛋白1（dynamin-related protein 1,Drp1）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（B-cell lymphoma-2 associated X protein,Bax）和细胞色素C氧化酶IV（cytochrome C oxidase Ⅳ,COX Ⅳ）的表达;免疫组化检测各组大鼠睾丸组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9（cystein-asparate protease-9,Caspase-9）和Caspase-3的表达。结果 假手术组与空白组大鼠睾丸及附睾组织病理染色结果相似,睾丸及附睾组织结构完整;与假手术组比较,模型组大鼠睾丸及附睾组织出现明显的病理性损伤;药物治疗后大鼠睾丸及附睾的病理性损伤得到不同程度的改善。假手术组与空白组大鼠睾丸线粒体形态结构相似,均可见大量线粒体广泛分布;与假手术组比较,模型组睾丸组织线粒体结构遭到严重破坏;药物治疗后线粒体仍可见不同程度的损伤,但较模型组明显改善。免疫荧光结果显示,Drp1与Bax在假手术组与空白组中荧光表达微弱,模型组较假手术组二者的荧光表达水平显著升高;Drp1与Bax在各治疗组的荧光表达趋势相似,经药物治疗后二者的荧光强度较模型组均降低。免疫组化结果显示,Caspase-9与Caspase-3在细胞间质及生精小管管壁周围分别呈褐色及棕色表达;假手术组与空白组二者均零星分布;与假手术组比较,模型组Caspase-9、Caspase-3表达增加（P<0.01）;与模型组比较,各治疗组中Caspase-9、Caspase-3的表达水平明显降低（P<0.05、0.01）。结论 精索静脉曲张模型大鼠睾丸及附睾组织结构损伤明显,线粒体结构遭到明显破坏,睾丸中Drp1、Bax、Caspase-9及Caspase-3表达显著升高。脉络舒通丸可能是通过对睾丸中线粒体结构的保护作用,抑制生精细胞中Caspase级联反应,从而调控线粒体介导的内源性细胞凋亡。     

基于微生物-代谢组学研究尿毒清颗粒改善大鼠慢性肾病的作用及机制

采用微生物组学结合代谢组学的方法,研究尿毒清颗粒干预SD大鼠慢性肾脏疾病的作用,并初步探究其作用机制。采用腺嘌呤诱导的方法制备SD大鼠慢性肾脏疾病模型,模型构建成功后,将动物随机分为阴性对照组和尿毒清颗粒处理组,同时设立正常对照组,每组8只。给药4周后,分别收取动物粪便及血清,采用16S rDNA测序分析肠道微生物丰度、多样性以及功能预测;采用LC-MS进行高通量测序检测动物血清代谢物;利用MetPA数据库筛选出慢性肾脏疾病大鼠潜在的生物学标志物,并进行代谢通路的富集分析。Spearman法分析2个组学之间的相关性。结果显示,尿毒清颗粒可有效改善慢性肾脏疾病大鼠体质量减轻、肾脏功能相关生化及外观指标。16S rDNA测序结果表明,尿毒清颗粒可调节慢性肾脏疾病大鼠肠道菌群的多样性和组成;肠道微菌群的改变,影响了氨基酸生物合成和代谢、脂类代谢、碳水化合物代谢等功能代谢途径。LC-MS检测结果显示,相对于阴性对照组,尿毒清颗粒处理组动物有15种代谢物发生逆转,其中有11种潜在标志代谢物显著上调,有4种潜在标志代谢物显著下调;主要涉及5条氨基酸代谢通路,且与肠道菌群的改变具有显著相关性。尿毒清...     

寒凝血瘀证大鼠的肠道菌群变化与粪便代谢特征分析

目的:探讨寒凝血瘀状态下大鼠肠道菌群多样性及粪便中内源性代谢物的变化,并考察与寒凝血瘀证密切相关的肠道菌群、代谢物、代谢通路。方法:采用冰水浴诱导的大鼠寒凝血瘀证模型,利用16S rRNA基因测序技术联合UPLC-TOFMS的粪便代谢组学技术,将扰动的肠道菌群与内源性生物标记物进行关联分析。结果:基于Illumina Mi Seq平台,发现与空白组大鼠相比,寒凝血瘀证模型组大鼠中Firmicutes显著上调(P0.05),Bacteroidetes显著下调(P0.01),显著差异的属有23个。确定了7个与寒凝血瘀证相关的粪便代谢物,涉及到的3个相关性最强的代谢通路,分别为缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成,泛酸和辅酶A生物合成,组氨酸代谢。另外,肠道菌群的属与粪便代谢物有强相关性。结论:16S rRNA的高通量基因测序技术与代谢组学技术的联用可用于评价寒凝血瘀证的病理机制。     

基于医疗电子数据的脉络舒通丸对疑似胃肠道不良反应影响的真实世界研究

目的：旨在应用医院信息系统电子医疗数据开展真实世界脉络舒通丸对胃肠功能影响的临床安全性研究,为脉络舒通丸的临床安全应用提供参考。方法：提取我国14家三甲医院电子医疗数据,按照年龄±5岁、性别相同、入院病情相似的原则,匹配后得到共5086例数据,应用GBM倾向性评分法平衡混杂因素,使用2种Logistic回归方法对比分析真实世界中脉络舒通丸是否对患者胃肠功能具有显著影响。将使用脉络舒通丸后立即停药,并且在用药1～3 d后使用护胃药物,但排除联合使用有胃肠刺激性的药物、既往有慢性胃肠道疾病病史患者作为疑似发生胃肠道不良反应的患者。结果：运用倾向性评分平衡混杂因素后,使用Logistic回归的方法对处理后的数据进行分析,结果显示未观察到使用脉络舒通丸对胃肠功能产生显著影响。结论：该研究为脉络舒通丸的安全性研究提供了证据,但鉴于倾向性评分法有其局限性,无法实现对未知混杂因素的平衡,尚需多种安全性研究证据,为脉络舒通丸在临床安全应用方面提供证据。     

基于倾向性评分的脉络舒通丸治疗周围血管疾病疗效的真实世界研究

目的 基于真实世界医疗电子数据库,探索脉络舒通丸治疗周围血管疾病的疗效.方法 基于全国14家大型三级甲等医院的医疗电子数据库,以周围血管疾病的患者为研究对象,将服用脉络舒通丸患者作为脉络舒通丸组,未服用脉络舒通丸患者作为对照组,以性别、年龄±5岁且入院病情相同为匹配条件,按照1:1比例匹配,匹配后两组均为293例,以用...     

脉络舒通丸联合利伐沙班对髋部骨折术后血栓形成的预防作用及凝血功能的影响

目的探讨脉络舒通丸联合利伐沙班对髋部骨折术后血栓形成的预防作用及凝血功能的影响。方法将2017年1月—2018年10月在青岛阜外心血管病医院接受手术治疗的95例髋部骨折患者纳入研究,通过随机数表法分为观察组50例和对照组45例。对照组术后给予利伐沙班口服,观察组在对照组治疗基础上联合脉络舒通丸治疗,2组均治疗2周。比较2组部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)、患肢肿胀情况、不良反应、深静脉血栓(DVT)发生率。结果 2组不同时间点APTT、PT比较差异无统计学意义(P>0.05),对照组术后FIB水平明显升高(P<0.05),观察组无明显变化(P>0.05),2组不同时间点FIB比较差异具有统计学意义(P<0.05);2组术后血清D-D水平均出现升高(P均<0.05),观察组升高幅度小于对照组(P均<0.05);观察组术后3 d、7 d患肢肿胀情况均明显轻于对照组(P均<0.05);2组DVT发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论脉络舒通丸联合利伐沙班在髋部骨折术后应用效果显著,可有效改善凝血功能,预防DVT形成,安全性好。     

脉络舒通丸口服联合肛泰栓纳肛对混合痔切除术后患者的影响

目的:探讨脉络舒通丸口服联合肛泰栓纳肛对混合痔切除术后患者临床症状及创面愈合的影响.方法:将混合痔切除术后患者400例随机分为常规组及研究1、2、3组各100例.常规组予常规方法干预,研究组1、2、3组分别给予常规方法+肛泰栓纳肛、常规方法+脉络舒通丸口服、常规方法+脉络舒通丸口服+肛泰栓纳肛.观察干预前后患者肛门坠胀...     

基于中医痰湿理论探讨代谢综合征和肠道菌群的研究进展

代谢综合征是以血压、血糖、血脂、血尿酸诸项升高及体重异常肥胖等症合并出现为特点的症候群,被归为中医“湿阻”“肥满”等范畴,国内外研究结果表明,其与肠道菌群失调的发生存在着密不可分的关系。当前现代医学治疗代谢综合征仍多以对症治疗为首,故从中医角度分析代谢综合征的病因病机以及与肠道菌群的内在关联,发挥中医特色,提高对其与肠道菌群相互关系的认识,本文拟以中医痰湿角度探讨其内在关联,并为代谢综合征的防治与研究提供思路。