基于IRS1/PI3K/Akt通路探究黄蜀葵花总黄酮改善糖尿病肾脏疾病胰岛素抵抗和足细胞转分化的作用和机制

为了探究传统治肾中药黄蜀葵花的提取物——黄蜀葵花总黄酮(total flavones of Abelmoschus manihot,TFA)在体内改善糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease, DKD)胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)和足细胞转分化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的作用和机制,并进一步揭示其科学内涵,将32只大鼠随机分为正常组、模型组、TFA组和罗格列酮(rosiglitazone, ROS)组。通过“高脂饲料饲养、单肾切除以及STZ腹腔注射”等综合措施联合诱导改良型DKD大鼠模型。成模后,对于4组大鼠,每天经灌胃分别给予其双蒸水、TFA混悬液以及ROS混悬液。在中、西药物干预的第8周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液以及肾组织等标本,进而针对DKD模型鼠IR和足细胞EMT相关的各项参数和指标进行检测和观察,包括大鼠一般情况,体质量(body weight, BW)及肾脏质量(kidney weight, KW),生化参数和IR指标,肾组织胰岛素受体底物(insulin rec...     

黄蜀葵花总黄酮抑制糖尿病肾脏疾病足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化的作用和机制北大核心CSCD

研究表明,高血糖介导的“慢性微炎症”可以导致糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者出现“炎症性足细胞损伤”。其中,“坏死性凋亡”是新的足细胞死亡形式,与肾脏纤维化密切相关。为了探究传统治肾中药黄蜀葵花的提取物——黄蜀葵花总黄酮(total flavones of Abelmoschus manihot,TFA)在体内改善DKD足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化的作用和机制,并进一步揭示其“多途径、多靶点”的科学内涵,笔者将全部大鼠随机分为4组,即正常组、模型组、TFA组以及雷帕霉素(rapamycin,RAP)组。在改良型DKD大鼠模型成功建立后,每天经灌胃分别给予4组大鼠双蒸水、TFA混悬液以及RAP混悬液。在药物干预的第4周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液以及肾组织等标本,进而针对模型鼠足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化各项指标进行观察、检测和分析。结果显示,对于改良型DKD模型鼠,TFA和RAP改善了一般情况、体质量、血清肌酐、尿白蛋白以及肾脏肥大指数;改善了肾脏纤维化指标,包括肾小球组织形态特征、肾小球内纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,collagenⅠ)染色程度以及肾组织FN、collagenⅠ、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和Smad2/3蛋白表达水平;改善了足细胞损伤,包括足突形态以及肾组织中podocin、CD2AP蛋白表达水平;改善了肾脏中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)介导的足细胞坏死性凋亡,包括足细胞坏死性凋亡形态特征以及肾组织中TNF-α、磷酸化底物混合谱系激酶样蛋白(phosphorylated mixed lineage kinase domain like pseudokinase,p-MLKL)表达程度和蛋白表达水平,其中,对于p-MLKL,RAP的作用更强;改善了肾脏中受体相互作用蛋白激酶(receptor interacting serine/threonine protein kinase,RIPK)1/RIPK3/MLKL信号轴活性,包括其关键信号分子蛋白表达水平,如磷酸化受体相互作用蛋白激酶(phosphorylated receptor interacting serine/threonine protein kinase,p-RIPK)1、p-RIPK3、p-MLKL和半胱氨酸蛋白水解酶-8(cysteinyl aspartate specific proteinase-8,caspase-8),其中,对于p-RIPK1,TFA的作用更强。总之,该研究阐明:TFA通过抑制TNF-α介导的RIPK1/RIPK3/MLKL信号轴活性而减轻DKD足细胞坏死性凋亡和肾脏纤维化。笔者的发现为深入揭示TFA治疗DKD肾脏纤维化的科学内涵提供了新的药理学证据。     

葛根芩连汤加味方改善糖尿病肾病模型鼠足细胞焦亡和胰岛素抵抗的作用和机制

为了探究现代经方——葛根芩连汤加味方(Supplemented Gegen Qinlian Decoction Formula, SGDF)在体内改善糖尿病肾病(diabetic kidney disease, DKD)的作用和机制,将60只大鼠随机分为正常组、模型组、SGDF组和罗格列酮(rosiglitazone, ROS)组。通过"高脂饲料喂养+单侧肾切除+链脲佐菌素(streptozocin, STZ)腹腔注射"等3种措施建立改良型大鼠DKD模型。成模后,对于4组大鼠,每天经灌胃分别给予其双蒸水、SGDF混悬液以及ROS混悬液。在药物干预第6周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液以及肾组织,进而,针对DKD足细胞焦亡和胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)相关的各项指标进行检测和观察。这些指标包括各组大鼠一般情况,尿液、血液生化指标,肾小球硬化相关指标,足细胞焦亡标志分子,IR相关指标以及肾组织胰岛素受体底物(insulin receptor substrate, IRS)1/磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3-kinase, PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(serine-threonine kinase, Akt)信号通路关键信号分子等。结果显示,对于DKD模型鼠,SGDF和ROS尽管对血糖(blood glucose, BG)无影响,但是都能改善其一般状况、部分肾功能指标以及肾小球硬化;都能改善其足细胞焦亡标志分子的表达特征和表达水平;此外,还能改善其肾组织IR,并不同程度地上调其肾组织IRS1/PI3K/Akt信号通路关键信号分子蛋白表达水平。总之,SGDF与ROS相似,在体内能多靶点地改善DKD,其机制与减轻足细胞焦亡和IR有关;该研究为现代经方——SGDF治疗DKD新药研究与开发提供了初步的药理学证据。     

基于SIRT1/p53/Drp1轴探讨加味芪黄饮减轻糖尿病肾病线粒体损伤及胰岛素抵抗的机制

目的 研究加味芪黄饮减轻糖尿病肾病(diabetic kidney disease, DKD)线粒体损伤及胰岛素抵抗的沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/上游信号抑癌基因(p53)/分子发动相关蛋白1(Drp1)轴的影响及机制。方法 40只SPF级C57BL/6小鼠,其中30只小鼠用于建立糖尿病肾病模型设为DKD组,10只不建立糖尿病肾病模型设作为对照组;建模成功后再将DKD组中小鼠随机分为模型组、低剂量组、高剂量组,每组各10只;低剂量组、高剂量组分别给予加味芪黄饮400、800 mg/(kg·d),对照组、模型组小鼠给予等体积生理盐水,均为灌胃给药12周后处死,留取小鼠血、尿标本测定尿白蛋白肌酐比值(UACR);尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、β2微球蛋白(β2-MG)、胱抑素C(Cys-C);血糖仪检测空腹血糖(FBG),放射免疫法检测空腹胰岛素(FIns)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等指标,采用DCFH-DA探针检测肾脏细胞中活性氧(ROS)水平、MitoSOXtmRed探针检测肾脏细胞线粒体中超氧化物歧化酶(SOD)、荧光检测ATP,HE染色观察大鼠肾...     

黄蜀葵总黄酮对脑缺血损伤的保护作用

目的 :研究黄蜀葵总黄酮 (TFA)对大鼠脑缺血损伤的保护作用。方法 :采用大鼠大脑中动脉缺血 (MCAO)模型。结果 :TFA可明显降低脑梗塞重量 ,2 5、10 0mg·kg-1剂量组可明显提高脑组织中LDH和NO含量 ,各剂量组对自由基膜脂质过氧化产物———MDA均无明显影响。结论 :TFA对脑缺血损伤具有一定的保护作用。     

基于NADPH/ROS/ERK信号通路探讨肾康降酸颗粒对高尿酸血症大鼠肾小管上皮细胞损伤的作用机制

目的观察肾康降酸颗粒对高尿酸血症大鼠肾小管上皮细胞损伤及NADPH/ROS/ERK信号通路的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分成空白组、模型组、别嘌呤醇组及肾康降酸颗粒组,每组10只。除空白组外,其余组均给予腺嘌呤联合酵母粉连续灌胃14 d制备高尿酸血症模型。造模结束后第2天起,别嘌呤醇组给予27 mg/(kg·d)的别嘌呤醇水混液灌胃,肾康降酸颗粒组给予3.24 g/(kg·d)的肾康降酸颗粒溶液灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃,均持续灌胃6周。灌胃结束后采用ELISA法检测大鼠血尿酸、肌酐、尿素氮水平,计算肾小管上皮细胞损伤评分,采用Annexin-V-PI双染法流式细胞技术检测肾小管上皮细胞凋亡率,分别采用比色法和ELISA法检测肾小管上皮细胞中NADPH氧化酶活性和活性氧(ROS)水平,采用免疫组化和Western blot法检测组织中ERK1及其磷酸化水平。结果干预结束后,模型组大鼠血尿酸、肌酐、尿素氮水平,肾小管上皮细胞损伤评分,肾小管上皮细胞凋亡率,肾组织中NADPH氧化酶活性、ROS水平和ERK1磷酸化水平均显著高于空白组(P均<0.05),别嘌呤醇组和肾康降酸颗粒组上述指标均明显低于模型组(P均<0.05),且肾康降酸颗粒组上述指标均明显低于别嘌呤醇组(P均<0.05)。结论肾康降酸颗粒可通过抑制NADPH/ROS/ERK信号的活化,进而降低高尿酸血症大鼠尿酸,减轻肾组织损伤,起到保护肾小管上皮细胞的作用。     

中药黄蜀葵花对肾病大鼠尿中透明质酸的影响

探讨黄蜀葵花对肾病综合征大鼠尿中透明质酸（ＨＡ）的影响。复制阿霉素诱导大鼠肾病模型,观察尿中ＨＡ的变化。结果：黄蜀葵花可使肾病大鼠的尿ＨＡ水平明显增加;尿Ｎ－乙酰－Ｂ氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）水平明显降低;内生肌酐清除率（Ｃｃｒ）显著改善。结论：黄蜀葵花对尿排泄 ＨＡ有明显改善作用,这对于防止肾小管病变、肾纤维化的发生均有益处。     

中药黄蜀葵花肾病大鼠尿中透明质酸的影响

探讨黄蜀葵花对肾病综合征大鼠尿中透明质酸（ＨＡ）的影响。复制阿霉素诱导大鼠肾病模型,观察尿中ＨＡ的变化。结果：黄蜀葵花可使肾病大鼠的尿ＨＡ水平明显增加;尿Ｎ－乙酰－Ｂ氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）水平明显降低;内生肌酐清除率（Ｃｃｒ）显著改善。结论：黄蜀葵花对尿排泄ＨＡ有明显改善作用,,这对于防止肾小管病变、肾纤维化的发生均有益处。     

基于16srDNA蒙药蜀葵花醇提物对水负荷模型大鼠利尿作用机制分析

目的：评价蒙药蜀葵花醇提物对水负荷模型大鼠利尿作用及机制。方法：将大鼠分为正常组,阳性组和蜀葵花高、中、低剂量给药组,每组10只。利用代谢笼法收集各组大鼠0～1、1～2、2～4、4～6、6～24 h及总24 h时间段的尿液并记录;利用比色法和微板法检测尿液中Na⁺、K⁺及Cl^-的含量;利用16srDNA测序技术观测蜀葵花对肠道菌群多样性及物种组成的影响,寻找差异菌属,探讨肠道菌群对利尿作用机制。结果：利尿实验结果显示,与正常组比较,蜀葵花低剂量组在给药2 h后尿量开始增加,在4～6 h时间段有显著差异(P<0.05);蜀葵花中剂量组在4 h后尿量开始增加,但无显著差异;蜀葵花高剂量组在给药1 h后尿量开始增加,在4～6、6～24 h及总24 h时间段有显著差异(P<0.05)。24 h尿液中各指标含量结果：各给药组Na⁺、K⁺及Cl^-含量均显著增加。16srDNA测序结果显示,蜀葵花低剂量组能显著上调梭状芽孢杆菌属丰度;中剂量组能显著上调疣微菌...     

黄蜀葵花治疗2型糖尿病肾病早期蛋白尿40例临床观察

目的:探讨黄蜀葵花干预2型糖尿病肾病(T2DKD)早期蛋白尿的临床疗效.方法:将80例T2DKD早期患者随机分为治疗组和对照组,每组各40例.对照组给予西医常规治疗,治疗组在对照组的基础上加用黄蜀葵花片治疗.2组疗程均为6个月.观察2组治疗前后血糖、血脂、肝肾功能、肾小球滤过率(eGFR)、尿白蛋白与尿肌酐比值(UAC...     

基于病证结合探讨血瘀证糖尿病肾病大鼠肾损害与内质网应激的关系

目的:观察血瘀证对糖尿病肾病(DKD)大鼠的肾损害以及对内质网应激(ERS)的影响,探讨DKD血瘀证大鼠肾损害与ERS之间的关系。方法:选用50只SPF级雄性SD大鼠,用高脂高糖饲料联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)方法建立DKD大鼠模型。随机分为正常组、糖尿病组、糖尿病+血瘀证组,其中糖尿病+血瘀证组(0.05 mg·kg-1)采用右旋糖酐法制备。观察各组大鼠一般情况、血液流变学指标,24 h尿蛋白含量、肌酐、肾脏病理学变化;免疫组化、蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾组织ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78),活化转录因子6(ATF6)和肾脏纤维化指标纤维连接蛋白(FN),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,糖尿病组大鼠出现多饮多食多尿、体质量减轻,血液流变学指标全血黏度和血浆黏度均明显升高(P0.05,P0.01),24 h尿蛋白含量、肌酐、尿素氮显著上升(P0.01),肾脏病理加重,肾组织的GRP78,ATF6,FN和α-SMA的mRAN及蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01);经过右旋糖酐法制备血瘀证模型后,糖尿病+血瘀证组大鼠死亡率增加,体征变化较糖尿病组更加明显,全血黏度、血浆黏度,24 h尿蛋白含量、肌酐、尿素氮等较糖尿病组显著升高(P0.01),同时病理改变较糖尿病组加重,肾组织的GRP78,ATF6,FN,α-SMA的mRNA及蛋白表达较糖尿病组明显升高(P0.05,P0.01)。结论:在病证结合模型下,血瘀证可能明显加重糖尿病肾病大鼠肾脏病理损害,且与增强糖尿病肾病大鼠肾脏组织的ERS有关。     

早期糖尿病肾脏疾病患者尿KIM-1、β2-MG含量变化与湿热兼夹证关系的研究

目的探讨早期糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者尿肾损伤因子-1(KIM-1)及β_2-微球蛋白(β_2-MG)含量变化与湿热兼夹证的关系,为早期DKD肾小管损伤的诊断及湿热兼夹证的判定提供客观依据。方法选择60例糖尿病患者,其中30例为单纯糖尿病患者(DM组)、30例为DKDⅢ期患者(DKD组),并对DKD组按中医辨证分为湿热兼夹证组、非湿热兼夹证组。选取体检中心30例同期体检健康人群为对照组(NC组)。采用酶免法检测各组尿KIM-1、β_2-MG含量。结果 DKD组患者尿KIM-1、β_2-MG含量均高于DM组及NC组(P0.05);湿热兼夹证组患者尿KIM-1、β_2-MG含量较非湿热兼夹证组升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论早期DKD患者存在肾小管损伤,尿KIM-1和β_2-MG含量升高可作为早期DKD肾小管损伤的标志和湿热兼夹证的客观指标。     

槐杞黄颗粒对糖尿病肾病大鼠及高糖环境下肾细胞的保护机制

观察槐杞黄颗粒对糖尿病肾病（DKD）大鼠及高糖环境下肾细胞的保护机制。【方法】（1）体内实验：采用高脂肪 饲料喂养结合链脲佐菌素（STZ）腹腔注射法构建DKD大鼠模型。实验设正常组,模型组,槐杞黄颗粒低、中、高剂量组及氯 沙坦组,每组10只大鼠。给予对应处理后,测定尿微量白蛋白、空腹血糖、血清肌酐、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇等 主要生化指标,分别采用苏木素-伊红（HE）染色、高碘酸希夫（PAS）染色和马松（Masson）染色观察肾组织病理改变。（2）体外 实验：构建高糖诱导肾小管上皮细胞HK2模型。实验分为正常糖组、高糖组和槐杞黄颗粒组及甘露醇组。给予对应处理后, MTT法检测细胞增殖情况,采用2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）法和MitoSOX/Hoechst 33342染色法分别检测细 胞内、线粒体活性氧簇（ROS）的生成,蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测炎症小体相关蛋白 NOD 样受体蛋白 3（NLRP3）、 裂解型半胱天冬酶 3（cleaved-Caspase-3）和白细胞介素 1β（IL-1β）及肾纤维化相关蛋白纤维连接蛋白（FN）和Ⅳ型胶原蛋 白（Col Ⅳ）的表达。【结果】（1）在体内实验中,槐杞黄颗粒可显著改善DKD大鼠尿微量白蛋白排泄、血清肌酐异常,高血糖 和脂质代谢紊乱,减轻肾脏组织病理损害;（2）在体外实验中,槐杞黄颗粒可显著抑制高糖诱导HK2细胞增殖和ROS的过量 产生,降低高糖诱导HK2细胞NLRP3炎症小体的激活和肾纤维化相关蛋白FN和Col Ⅳ的表达。【结论】 槐杞黄颗粒可有效改 善DKD大鼠,其对高糖环境下肾细胞的保护机制可能与抑制ROS生成、NLRP3炎症小体活化及纤维化蛋白高表达有关。     

银杏叶提取物 EGB761 对糖尿病肾病小鼠肾小管损伤及内质网应激的影响

目的探讨银杏叶提取物EGB761对糖尿病肾病(DKD)小鼠肾小管损伤及内质网应激的影响。方法将50只C57BL/6N小鼠随机分为正常组、DKD模型组、DKD+EGB761组(36 mg·kg~(-1))以及DKD+4-苯基丁酸(4-PBA)组(1 g·kg~(-1))。通过高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病小鼠模型,糖尿病模型复制成功并继续高脂饲料喂养8周后检测各组尿蛋白,阳性者给药8周,给药期间观察各组小鼠一般情况。给药8周后检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白(24 h Pro)、空腹血糖(FBG)、肾脏肥大指数;HE染色、Masson染色、PAS染色观察各组小鼠肾脏病理改变;透射电镜观察肾小球及肾小管超微结构;ELLSA法检测各组小鼠肾小管损伤标志物尿β_2-微球蛋白(β_2-MG)、视黄醇结合蛋白4(RBP4)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的表达;以免疫组化、蛋白免疫印迹法(Western blot)、实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime-PCR)检测肾组织内质网应激标志物GRP78、ATF6的表达。结果与正常组比,DKD模型组精神状态较差、反应迟钝、多饮多食多尿症状明显,Scr、BUN、24 h Pro、FBG、肾脏肥大指数均明显升高(P0.01),肾脏病理损伤加重,尿β_2-MG、RBP4、NGAL明显升高(P0.01),肾组织GRP78、ATF6的表达明显升高(P0.01)。与DKD模型组相比,DKD+EGB761组精神状态、反应情况及多饮多食多尿症状好转,Scr、BUN、24 h Pro、FBG水平均明显降低(P0.01),肾脏肥大指数明显降低(P0.05),肾脏病理损伤明显改善,尿β_2-MG、RBP4、NGAL表达降低(P0.05,P0.01),肾组织GRP78、ATF6蛋白的表达降低(P0.05,P0.01)。结论银杏叶提取物EGB761可以改善DKD小鼠肾功能,减少蛋白尿,减轻肾小管损伤,其作用机制可能与抑制内质网应激相关。     

雷公藤多苷调节肾组织p38MAPK信号通路改善糖尿病肾病肾小球炎症性损伤的作用和机制

目的:探讨雷公藤多苷(multi-glycoside of Tripterygium wilfordii,GTW)在体内改善糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)模型鼠肾小球炎症性损伤的作用和机制。方法:采用单侧肾切除联合腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立DN模型。将大鼠随机分为3组:假手术组、对照组、GTW组,各5只。大鼠在造模成功后分别经灌胃给予蒸馏水(2 m L)或GTW悬浊液(50 mg·kg-1·d-1),每日1次,连续8周。各组大鼠自给药开始计时,第8周末处死。采集血液、尿液样本和肾组织,观察各组大鼠尿白蛋白、肾功能、肾小球形态特征、巨噬细胞(ED1+细胞)浸润以及肾组织肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,白介素(interleukin,IL)-1β,p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK),磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38,p-p38MAPK),转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1的蛋白表达水平。结果:GTW能改善DN模型鼠一般情况、体重,减少尿白蛋白,减轻肾小球硬化,抑制肾小球ED1+细胞浸润,下调肾组织TNF-α,IL-1β,p-p38MAPK,TGF-β1蛋白表达水平。结论:GTW在体内具有抑制炎症细胞浸润和炎症因子表达,减轻肾组织炎症性损伤的作用;GTW通过下调肾组织p38MAPK信号通路中关键信号分子——p-p38MAPK蛋白表达水平,抑制炎症信号通路活性,减少TGF-β1表达,从而,改善肾组织炎症性损伤。     

黄蜀葵花总黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的：探讨黄蜀葵花总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用犬鼠心肌缺血30min后再灌3．5h造成心肌缺血再灌注损伤模型，观察了黄蜀葵花总黄酮对损伤大鼠血清中CPK及心肌组织中MDA，SOD生成的影响；对培养的乳鼠心肌细胞采用缺糖缺氧和缺氧再给氧造成心肌细胞损伤观察黄蜀葵花总黄酮对LDH形成的影响；并采用TUNEL法分析细胞凋亡和采用免疫组化的方法观察药物对与心肌凋亡相关的蛋白Bcl-2表达的影响并阐述药物可能的作用机制。结果：黄蜀葵花总黄酮可以降低损伤心肌组织的MDA含量。提高SOD的活力，抑制血清中CPK的生成，也可以剂量依赖性抑制LDH的释放；减少心肌细胞凋亡的发生率，增强Bcl-2蛋白的表达。结论：黄蜀葵花总黄酮对心肌缺血再灌注损伤有保护作用，其作用机制部分可能与抗氧自由基的形成从而抑制细胞凋亡有关。     

解聚复肾宁对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用

目的 观察中药复方解聚复肾宁(JJFSN)对糖尿病(DM)大鼠肾小管OPN、CD68表达及肾脏的保护作用.方法 建立STZ诱导的糖尿病SD大鼠模型,将成模DM大鼠随机分成4组:模型组、JJFSN组、厄贝沙坦组以及JJFSN+厄贝沙坦组,同时设正常对照组.各组大鼠采用相应的干预措施处理12周.常规方法 检测各组大鼠肾指数、血糖、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿白蛋白排泄率(UAER),HE染色观察大鼠肾脏病理形态变化,免疫组化法检测肾小管OPN,CD68表达,Western Bloting检测OPN在肾脏中的蛋白表达.结果 模型组大鼠血糖、UAER、尿素氮、血肌酐、肾指数显著增高;肾组织中OPN,CD68表达显著增多,光镜下肾小管结构改变明显.JJFSN组、厄贝沙坦组和JJFSN+厄贝沙坦组上述指标均低于模型组(P<0.01),肾脏超微结构改变较模型组轻;JJFSN+厄贝沙坦组各项指标显著低于模型组、JJFSN组和厄贝沙坦组(P<0.01),但未达到正常对照组水平.结论 JJFSN对DN大鼠肾脏形态和功能有明显的保护作用,其机制可能与减少肾组织中OPN含量,下调CD68的表达,减轻肾组织炎症病变有关.     

刺芒柄花素对单侧输尿管梗阻大鼠ASK1、JNK蛋白表达的影响

目的探讨刺芒柄花素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠凋亡信号调节激酶1(ASK1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白表达的影响。方法制备单侧输尿管梗阻诱导肾间质纤维化动物模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利组及刺芒柄花素高、中、低剂量(100、50、25 mg/kg)组;术后14 d处死大鼠并采集血清检测血清肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)水平;采用HE染色观察大鼠肾脏的病理改变及评定肾小管损伤指数;Masson染色观察肾间质胶原沉积的面积;采用Western blotting免疫印迹法检测肾组织ASK1、JNK蛋白表达水平;采用TUNEL法检测肾小管上皮细胞的凋亡。结果与模型组比较,各治疗组大鼠血清Scr、BUN水平均显著降低(P0.05、0.01);肾小管损伤指数、肾间质胶原分布相对面积均显著降低(P0.05、0.01);肾组织ASK1、JNK蛋白表达水平显著降低(P0.05、0.01);肾小管上皮细胞凋亡指数显著降低(P0.05、0.01)。刺芒柄花素高剂量组各项指标优于依那普利组。结论刺芒柄花素能够抑制UUO模型大鼠ASK1、JNK蛋白表达水平,阻止细胞凋亡,从而减缓梗阻性肾病病理进程的发生和发展。     

脂糖舒对糖尿病肾病大鼠肾功能的影响

目的：观察脂糖舒对糖尿病肾病大鼠肾功能的影响。方法：采用链脲霉素(60mg/kg)腹腔注射制备大鼠糖尿病肾病模型。实验大鼠分4组：对照组、模型组、脂糖舒1组、脂糖舒2组。测定各组存活大鼠血清、尿液和肾组织的相关生化指标，并计算体重指数(BMI)、24小时尿量和肾指数。结果：模型组大鼠血清丙二醛(MDA)、尿素和肌酐含量及体重指数显著升高，血白蛋白、超氧化物歧化酶(SOD)和BMI显著降低；尿量、尿糖和尿白蛋白显著增多；肾组织MDA和糖基化终产物(AGEs)明显升高，SOD明显降低。经二剂量脂糖舒处理后的大鼠上述指标逆转而趋向对照组水平。且二剂量组间降低血糖、尿糖、尿液白蛋白、血肌酐、血液和肾组织的MDA含量，以及升高血白蛋白和肾组织SOD活性呈量效依赖关系。结论：脂糖舒对糖尿病肾病大鼠肾功能有明显的改善作用。     

中药干预对糖尿病肾病大鼠蛋白尿及炎性细胞因子表达的影响

目的 通过建立糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)大鼠模型,观察中药复方对DKD大鼠蛋白尿及炎性细胞因子影响.方法 健康雄性SD大鼠49只,以随机数字表法分为正常组、模型组、中药组、对照组.采用左下腹腔一次性注射STZ诱导DKD模型.正常组和模型组给予等量0.5%羧甲基纤维素钠,中药组给予中药复方药液,对照组给予厄贝沙坦药液,给药容量为10ml/kg,1次/d,连续灌胃8周.观察大鼠肾指数(肾脏重量/大鼠体重)、FPG、IL-6、尿微量白蛋白(urinary albumin,mAlb)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、TGF-β等变化.结果 与模型组比较,中药组FPG[(9.96±3.73)mmol/L比(17.16±5.75)mmol/L]下降(P<0.05),mAlb[(11.73±4.01)mg/L比(19.57±8.38)mg/L]降低(P<0.05);IL-6水平[(58.87±14.69)ng/L比(85.22±12.16)ng/L]下降(P<0.05),MCP-1含量[(1.52±0.86)ng/L比(3.17±1.26)ng/L]下降(P<0.05).结论 中药可降低DKD模型大鼠的FPG、mAlb,清除血清炎性细胞因子,疗效与厄贝沙坦片相当.