免疫球蛋白超家族受体在肿瘤免疫治疗中的研究进展

近年来免疫检查点阻断在癌症治疗中的应用引起广泛关注。靶向PD-1、PD-L1或CTLA-4的药物在临床试验中仅有部分患者受益。确定新的免疫检查点,探索其作用机制将进一步发展肿瘤免疫疗法。TIGIT、CD226、CD112R和CD96是免疫细胞表达的一组免疫球蛋白超家族受体,与肿瘤细胞表达的Nectin/Necl家族配体（CD155、CD112）相互结合,在肿瘤免疫反应中发挥巨大作用,是新一代的免疫检查点。本文将对CD155、CD112、TIGIT、CD226、CD112R及CD96的分子结构与在肿瘤免疫反应中的作用进行阐述,探讨在癌症免疫治疗中的潜在应用。      

CD80 CD86和CD137L基因联合表达对小鼠肝癌种植模型肿瘤免疫原性的影响

目的探讨CD80、CD86和CD137L基因联合表达对肿瘤免疫原性的影响。方法按接种变异瘤株不同,将BALB／C小鼠随机分成A组（H22．Wt细胞）、B组（H22-neo细胞）、C组（H22-CD80／CD86^＋细胞）、D组（H22．CD137L^＋细胞）、E组（H22-CD80／CD86／CD137L^＋细胞）5组,建立H22．BALB／C小鼠荷肝癌模型,A、B组为对照组。观察小鼠成瘤率、成瘤潜伏期、荷瘤鼠存活率及肿瘤增殖情况。通过复种试验观察转基因对H22变异株免疫原性和机体免疫保护作用的影响。结果E组首次接种成瘤率仅有50．0％,显著低于其余4组（P〈0．01）。首次接种后,C组荷瘤鼠肿瘤生长受到明显抑制,有2只荷瘤鼠肿瘤完全消退。E组肿瘤生长所受抑制较C组更为明显,肿瘤峰值体积显著小于C组,且有3只荷瘤鼠肿瘤完全消退。其余3组荷瘤鼠未见肿瘤完全消退。与A、B、D组相比,C、E组荷瘤鼠生存率显著改善（P〈0．01）,而C、E两组荷瘤鼠生存率差异无统计学意义（P〉0．05）。复种试验表明,C、E组荷瘤鼠再次成瘤率低于对照组,E组与C组差异也有统计学意义（P〈0．01）;第3次接种后,E组成瘤率显著低于C组（P〈0．01）。E组中5只首次接种未成瘤的小鼠,于第21天重复接种H22-Wt细胞,小鼠100％排斥肿瘤,于第56天第3次接种H22／Wt细胞,小鼠仍然100％排斥肿瘤。结论CD80＋CD86和CD137L单独或者联合表达均可显著降低野生型H22细胞株致瘤性,CD80、CD86和CD137L基因联合表达显著改善了野生型H22细胞的免疫原性。     

霍奇金病的病理及免疫组织化学研究

为探讨ＨＤ中Ｒｅｅｄ－Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ细胞的组织学起源，应用免疫组织化学方法检测４８例ＨＤ中ＣＤ３、ＣＤ２０、ＣＤ１５、ＣＤ３０和ＭＩβ１的表达。结果显示：９例ＬＰＨＤ中６例Ｒｅｅｄ－Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ细胞表达ＣＤ２０，１６例ＮＳＨＤ中３例表达ＣＤ２０，所有的Ｒｅｅｄ－Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ细胞不表达ＣＤ３，大部分Ｒｅｅｄ－Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ细胞表达ＣＤ１５，所有的ＲＳ细胞表达ＣＤ３０和ＭＩＢ１，提     

CD3+CD56+NKT细胞及CD3-CD56+NK细胞在恶性肿瘤患者的临床意义研究

背景与目的细胞毒性淋巴细胞在抗肿瘤免疫效应中发挥着重要作用,CD3 CD56 NKT细胞作为一类新的具有细胞毒性的效应细胞,目前关于其抗肿瘤意义的探讨主要集中于血液系统恶性疾病,而在实体肿瘤中的应用和临床价值研究尚少。本研究旨在初步探讨抗肿瘤细胞CD3 CD56 NKT细胞及CD3-CD56 NK细胞在恶性肿瘤患者外周血的表达状态及其临床意义。方法采用流式细胞术分析118例恶性肿瘤患者(55例肺癌患者和63例乳腺癌患者)及46例健康对照组外周血中的T细胞亚群及CD3 CD56 NKT细胞、CD3-CD56 NK细胞表达。结果恶性肿瘤患者组CD3 CD8 T细胞、CD3 CD56 NKT细胞以及CD3-CD56 NK细胞表达率均明显高于健康对照组(P<0.01)。肺癌患者中以CD3 CD8 T细胞和CD3 CD56 NKT细胞明显增加为主;乳腺癌患者中以CD3 CD56 NKT细胞和CD3-CD56 NK细胞明显增加为主。结论CD3 CD56 NKT细胞在肺癌和乳腺癌患者的抗肿瘤效应中占据重要地位,而CD3 CD8 CTL和CD3-CD56 NK细胞在不同类型肿瘤患者中具有不同的重要性。     

骨髓间充质干细胞表面分子CD166和CD271在胃组织中的表达

目的:探讨骨髓间充质干细胞表面分子CD166和CD271在正常胃黏膜、腺瘤及胃腺癌中的表达,初步探讨二者是否可以作为胃癌干细胞的标志物。方法:采用免疫组化染色SP法,对60例胃腺癌、10例正常胃组织标本和20例腺瘤的胃黏膜组织进行了骨髓间充质干细胞表面分子CD166和CD271的检测。结果:CD166在正常胃黏膜、不典型增生和胃癌中的表达逐渐降低,CD166在胃腺癌中的表达强度与胃癌的分化程度呈正相关（r=0.597,P<0.01）,与浸润深度有关（P<0.01）。CD271在正常胃黏膜、不典型增生中几乎不表达,在胃癌中呈低表达,CD271在胃腺癌中的表达强度与浸润深度（P<0.01）、淋巴结转移有关（P<0.01）,与患者的年龄、性别、肿瘤分化程度无关。结论:正常胃黏膜、腺瘤和腺癌的组织中存在着骨髓间充质干细胞表面分子CD166的表达,阳性细胞的位置分布没有规律性,不是胃癌肿瘤干细胞的特异性标记物,CD271在正常胃黏膜、腺瘤中几乎不表达,在胃癌中呈低表达,阳性细胞的位置分布没有规律性,不能作为胃癌肿瘤干细胞的标记物。     

胃癌组织中CD105和CD31的表达及其生物学行为的关系

 目的 探讨CD105，CD31在胃癌组织中的表达情况及其与胃癌生物学行为之间的关系。方法 采用免疫组化S-P单染法检测63例胃癌组织及20例慢性胃炎组织中CD105，CD31所标染的微血管密度值（MVD）。结果 （1）胃癌组织中CD105-MVD平均值为40.97±15.67，高于CD31-MVD平均值25.87±10.54（P<0.01），而二者均明显高于慢性胃炎组织中测得的相应值，分别为（19.55±7.55，20.65±7.44）（P <0.01）。（2）CD105的表达与胃癌的浸润深度、分期、淋巴结转移呈正相关（P <0.01），而与肿瘤大小、分级无关（P >0.05）。结论 （1）CD105在胃癌组织微血管中高表达，在标染胃癌组织MVD方面，CD105比CD31具有明显优越性。（2）CD105的表达与胃癌的生物学行为密切相关；其检测对更准确地确定肿瘤的临床分期、指导治疗、判断预后具有积极的临床意义。     

癌基因CD44及抑癌基因p16在头颈部肿瘤中的表达及意义

综述癌基因CD     

CD34抗原、bcl-2蛋白表达与急性髓性白血病化疗耐药

目的检测急性髓性白血病(AML)中CD34,bcl-2的表达,并评价其临床意义及CD34,bcl-2间可能存在的关系.方法免疫细胞化学APAAP法.结果CD34、bcl-2表达与AML外周血WBC数.骨髓原始细胞比例、CUF-L等临床特征无关;而继发性AMLCD34水平显著高于原发性AML患者(P＜0.05);但bcl-2水平在原发,继发AML中无差别.原发性AML中CD34水平与化疗疗效无关(P＞0.05);无论原发AML或AML中,bcl-2表达均与化疗耐药有关.结论CD34并非一个能独立耐药相关的因素,而bcl-2可以独立决定化疗反应;CD34和bcl-2无相关性.     

鼻咽癌组织与外周血CD4+CD25+调节性T细胞检测及临床意义

目的 通过检测鼻咽癌患者肿瘤组织及外周血中CD4+T、CD8+T、CD4+CD25T、CD4+CD25+T细胞的频数,寻找客观、全面评价鼻咽癌患者免疫状态的临床指标.方法 采用流式细胞术检测40例初诊鼻咽癌患者及10例正常时照鼻咽部组织和外周血CD4+T、CD8+T、CD4+CD25-T、CD4+CD25+T细胞比例.结果 鼻咽癌患者CD4+T细胞比例及CD4+/CD8+T比值均低于对照组(P<0.05),而CD8+T细胞两组间差异无统计学意义(P>0.05),但是CD4+/CD8+T比值在鼻咽癌组织与外周血间差异无统计学意义(P>0.05).鼻咽癌组织及外周血中CD4+CD25+T细胞比例都高于对照组(P<0.05),同时癌组织中该细胞比例远远高于外周血(P<0.05).在鼻咽癌组织中CD4+CD25+T细胞与CD8+T细胞、CD4+CDQ5-T细胞呈负相关(r分别为-0.70、-0.675,P<0.05),而在外周血中没有相关关系(P>0.05).在不同T(原发肿瘤大小)组间,T4组的鼻咽癌组织中CD4+CD25+T细胞分别高于T1、T2、T3各组(P<0.05).而在T1、T2、T3各组间差异无统计学意义(P>0.05);鼻咽癌中CD4+CD25+T细胞比例与患者有无淋巴结转移并无关系(P>0.05);鼻咽癌组织中Ⅲ+Ⅳ期组CD4+CD25+T细胞比例高于Ⅰ+Ⅱ期组(P<0.05),而在外周血中两组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 CD4+CD25+T细胞与鼻咽癌病程进展无相关性,但是联合检测患者肿瘤组织及外周血中CD4+CD25+T细胞的频数并结合既往CD4+/CD8+T比值会全面反应患者免疫状态,为临床治疗提供依据.     

CD46 CD55 CD59在结肠癌组织中的表达及意义

目的:检测CD46、CD55、CD59在结肠癌组织中的表达情况,分析其与结肠癌临床病理参数间的相关性及意义。方法:选取有详细性别、年龄、组织分化、病理分期、肿瘤部位、组织类型资料的组织芯片标本,包括121 例结肠癌和121 例癌旁结肠组织,均为2004年10月至2006年6 月第四军医大学西京消化病医院胃肠外科手术切除标本。应用免疫组织化学改良二步法分别检测CD46、CD55、CD59的表达情况。结果:CD46、CD55及CD59在结肠癌组织中的阳性表达率均显著高于对应的癌旁组织（P < 0.001）。 CD46表达水平与性别、年龄、组织分化、TNM 病理分期、肿瘤位置、病理组织类型均无关（P > 0.05）。 CD55、CD59的表达水平与性别、年龄、肿瘤位置、病理类型无关（P > 0.05）,而与组织分化、TNM 病理分期有关（P < 0.05）。 其表达强度阳性率中低分化组明显高于高分化组（P < 0.05）。 TNM 分期中Ⅲ、Ⅳ期患者肿瘤病理组织强阳性表达率高于Ⅰ、Ⅱ期阳性表达率,两者比较有统计学意义（P < 0.05）。 结论:CD46、CD55及CD59在结肠癌组织中高表达,特别是CD55、CD59的表达与肿瘤分化、病理分期相关,提示三者表达水平与结肠癌生物学行为密切相关。      

外周血淋巴细胞亚群水平变化在鼻咽癌中的意义

目的 探究外周血淋巴细胞亚群水平变化在鼻咽癌(NPC)中的意义.方法 选取NPC患者60例为试验组,选取健康体检者30例为对照组.采用流式细胞仪检测试验组治疗前后和对照组的外周血中CD3+、CD4+、CD8+细胞亚群及自然杀伤细胞(NK)水平;采用免疫组化法和Western Blot检测试验组治疗前后肿瘤组织中白细胞介素-21(IL-21)蛋白表达水平.结果 治疗前,试验组外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK细胞水平明显低于对照组(P﹤0.01),CD8+细胞水平明显高于对照组(P﹤0.01);治疗后,试验组外周血中CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞水平均较本组治疗前明显上升(P﹤0.01),CD8+细胞水平较本组治疗前明显下降(P﹤0.01);治疗后,早期NPC患者的总缓解率高于晚期NPC患者(P﹤0.05);免疫组化法和Western Blot检测结果显示,治疗前,NPC患者肿瘤组织中IL-21蛋白的阳性表达率及表达水平均高于治疗后(P﹤0.05).结论 NPC患者外周血中淋巴细胞亚群及NK细胞的检测对鼻咽癌的早期诊断及疗效评判具有重要意义.     

CD3AK细胞的体外诱导及生物学特征的研究

采用抗CD3单克隆抗体(anti-CD3McAb)和基因重组人白细胞介素2(rIL-2)、植物血凝素(PHA)共同诱导人外周血单个核细胞(PBMC)制备CD3AK细胞,应用APAAP法、吉姆萨染色法分析CD3AK细胞的表型、核型等免疫生物学特征.结果表明,微量的niti-CD3AK(终浓度30～50ng/ml)辅以少量的rIL-2(100 U/ml)和PHAS(100μg/ml)共同培养,就能诱导和扩增CD3AK细胞,细胞扩增倍数随着anti-CD3McAb的使用浓度增大而增高,当anti-CD3McAb的使用浓度提高到500ng/ml时,CD3AK细胞扩增倍数可达800倍以上,显著高于LAX细胞的扩增倍数,细胞常呈集落生长.CD3AK细胞的表型分析结果,CD3~ ,CD4~ ,CD8~ 的CD3AK细胞比率分别为(72 ±14)%,(29±4)%,(47±23)%,提示CD3AK细胞是一类以CD3~ ,CD4~ ,CD8~ 细胞为主的异质细胞群,并具     

CD40配体激活抑制肺癌细胞生长机制的实验研究

目的探讨CD40配体激活对肺癌细胞生长、增殖的影响。方法采用CCK-8法检测不同浓度sCD40L作用后A549肺癌细胞株存活率,选定最佳干预浓度;流式细胞术检测sCD40L最佳干预浓度作用后肺癌细胞株A549、SPC-A-1细胞周期变化。结果sCD40L的最佳干预浓度为2μg/ml,与肺癌细胞株A549、SPC-A-1共培养48 h,sCD40L可使高表达CD40的A549细胞生长抑制,细胞周期阻滞在G1期,而对CD40低表达的SPC-A-1细胞生长无明显影响。结论sCD40L通过阻滞细胞周期可明显抑制CD40高表达肺癌细胞的生长。     

CD8+CD28-Ts、CD3+CD56+NKT细胞在B细胞非霍奇金淋巴瘤患者外周血中分布的分析

背景及目的:目前认为B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)常伴随免疫抑制,CD8 CD28-Ts(Ts)细胞和CD3 CD56 NKT(NKT)是新鉴定的新型免疫抑制性调节细胞,在肿瘤的免疫抑制及免疫逃逸机制中起重要作用,但它们在B细胞淋巴瘤患者外周血的分布情况及其免疫抑制中的作用目前尚不清楚。本文通过分析两者在化疗前及化疗后B-NHL患者外周血中比例及变化规律,初步探讨它们在B-NHL的免疫抑制作用及其影响因素,为有效干预患者的免疫功能提供参考。方法:应用流式细胞仪检测79例治疗前的B-NHL患者、经4～6周期化疗后完全缓解(CR)的18例患者、30例健康志愿者外周静脉血中NKT及Ts细胞的比例。结果:在79例治疗前B-NHL患者的外周血中,Ts细胞比例为(18.19±5.03)%,较正常对照组(11.20±3.49)%明显增高(P<0.01);NKT的比例为(6.08±3.29)%,亦较正常对照组的(3.52±1.56)%明显增高(P<0.01)。Ts在不同临床分期的患者之间无显著性差异P>0.05;Ⅰ期为(17.56±4.10)%、Ⅱ期为(18.05±5.64)%、Ⅲ期为(18.14±5.58)%、Ⅳ期为(18.95±4.64)%;在不同恶性程度的患者之间亦无显著性差异P>0.05;低度恶性为(17.81±5.24)%、中度恶性为(18.37±4.83)%、高度恶性为(18.31±5.93)%;在治疗前(18.64±4.55)%和CR后(19.42±4.95)%患者之间亦无显著性差异(P=0     

CD+4 CD+25 调节性T细胞与急性髓细胞白血病关系的研究

 目的　探讨CD+4 CD+25 调节性T细胞（CD+4 CD+25 Treg细胞）在急性髓细胞白血病（AML）患者化疗前后外周血中的表达水平及其临床意义。方法　采用流式细胞术检测AML初发组（A组）、缓解3年内组（B组）、缓解3年以上组（C组）及正常对照组外周血中CD+4 CD+25 CDlow127 T细胞所占比例。结果　A组和B组外周血中CD+4 CD+25 Treg细胞比例均高于对照组（P＜0.05）;C组外周血CD+4 CD+25 Treg细胞比例与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）;B组外周血中CD+4 CD+25 Treg细胞比例高于C组（P＜0.05）;A组外周血中CD+4 CD+25 Treg细胞比例明显高于B、C两组（P＜0.05）。结论　CD+4 CD+25 Treg细胞与AML发生有关,尤其与3年内容易复发密切相关。     

肺癌患者血小板粘附分子CD31和CD62的检测

癌细胞能诱导血小板的粘附与解离，在肿瘤细胞转移中起重要作用^[1]。血小板提高肿瘤转移的机制之一是通过调节、增强肿瘤细胞与血管内皮细胞及与内皮细胞膜的相互作用而实现的。我们采用流式细胞术测定肺癌患者血小板粘附分子CD31和CD62的表达情况，探讨血小板粘附分子与肿瘤进     

食管癌组织及其区域淋巴结中树突细胞CD1a、CD80、CD86的表达

背景与目的:树突细胞(dendriticcell,DC)是重要的抗原提呈细胞,参与抗肿瘤免疫。本研究通过检测人食管癌组织及其区域淋巴结中树突细胞CD1a(特异性标志)、CD80、CD86(共刺激分子)的表达,探讨食管癌发生及其免疫逃逸的机制。方法:采用流式细胞术检测58例食管癌病例(Ⅰ-Ⅱ期27例,Ⅲ-Ⅳ期31例;G1-237例,G321例;鳞癌49例,腺癌9例;有淋巴结癌转移者37例,无淋巴结癌转移者21例)的癌组织及癌旁组织、11例食管炎性组织、12例正常食管组织、31枚有癌转移的区域淋巴结、34枚无癌转移的区域淋巴结中树突细胞CD1a及CD80、CD86的表达。结果:(1)树突细胞CD1a、CD80、CD86的表达在食管癌组织中(6.18±1.47,5.37±1.13,37.35±7.42)明显低于正常食管组织(10.28±2.11,9.67±1.94,48.76±10.23)、食管炎性组织(11.89±2.65,10.46±1.79,51.55±10.60)及癌旁组织(11.79±2.41,10.49±1.89,9.78±12.31)中的表达(P<0.01);(2)树突细胞CD1a、CD80、CD86的表达在食管癌患者有癌转移的区域淋巴结中的表达(8.34±1.66,6.78±1.42,41.70±8.71)明显低于无癌转移的淋巴结中的表达(12.23±2.14,10.82±2.11,59.63±12.52)(P<0.01);(3)癌旁组织及食管炎性组织中树突细胞CD1a、CD80、CD86的表达与正常食管组织中的表达的差异无统计学     

CD44和CD8+T细胞在膀胱癌的表达及其临床病理意义

目的:探讨膀胱癌组织中CD44蛋白和CD8阳性T细胞表达与膀胱癌病理分级和临床分期的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测10例正常膀胱组织、10例炎症膀胱组织和67例不同级别膀胱癌组织中CD44蛋白和CD8阳性T细胞的表达。结果:CD44在正常黏膜的基底细胞层表达,强度中等,CD8在正常黏膜基底细胞层弱表达;CD44和CD8阳性T细胞在膀胱炎症中高表达,与正常组织差异明显(P<0.05)。在膀胱癌中,CD44和CD8的表达均与分化程度和肿瘤分期有关(P<0.05),CD8的表达与CD44的表达呈正相关(P<0.01)。结论:CD8与CD44在膀胱癌的发生发展、浸润转移中密切相关,同步检测二者在膀胱癌组织中的表达并综合分析两者之间的关系对评价膀胱癌的侵袭转移能力判断具有一定价值。     

CD44和CD8^＋T细胞在膀胱癌的表达及其临床病理意义

目的：探讨膀胱癌组织中CD44蛋白和CD8阳性T细胞表达与膀胱癌病理分级和临床分期的关系。方法：应用免疫组织化学sP法检测10例正常膀胱组织、10例炎症膀胱组织和67例不同级别膀胱癌组织中CIM4蛋白和CD8阳性T细胞的表达。结果：CD44在正常黏膜的基底细胞层表达,强度中等,CD8在正常黏膜基底细胞层弱表达;CD44和CD8阳性T细胞在膀胱炎症中高表达,与正常组织差异明显（P〈0．05）。在膀胱癌中,CD44和CD8的表达均与分化程度和肿瘤分期有关（P〈0．05）,CD8的表达与CD44的表达呈正相关（P〈0．01）。结论：CD8与CD44在膀胱癌的发生发展、浸润转移中密切相关,同步检测二者在膀胱癌组织中的表达并综合分析两者之间的关系对评价膀胱癌的侵袭转移能力判断具有一定价值。