对三硝基甲苯染毒小鼠睾丸流式细胞DNA分析

对三硝基甲苯染毒小鼠睾丸流式细胞ＤＮＡ分析邯郸医学高等专科学校卫生组（邯郸０５６００２）李建秀三硝基甲苯（ｔｒｉｎｉｔｒｏｔｏｌｕｅｎｅ，ＴＮＴ）是生产炸药的重要原料，可能具有雄性生殖毒性［１，２］．已知ＴＮＴ可影响雄性小鼠生精细胞超微结构的改变［３...     

氯化镉染毒小鼠肝、肾、睾丸的病理组织学观察

镉及其化合物对生产环境和生活环境的污染以及对人类健康的危害 ,早已引起人们的重视。现将我们对氯化镉毒性的观察报告如下。1　材料与方法1 1　半数致死量的测定选用体重为 17～ 30 ｇ 的健康昆明种小鼠 6 0只 ,雌雄各半 ,随机分为 6组 ,每组 10只。以氯化镉溶液灌胃染毒 ,灌胃量为 10ｍｌ/ｋｇ体重。染毒剂量分别为 :37 5 ,75 ,15 0 ,30 0 ,6 0 0 ,12 0 0ｍｇ/ｋｇ。计算 3ｄ的ＬＤ50 。1 2　小鼠肾、睾丸重量及肝肾睾丸病理组织学观察选用体重为 18～ 2 5 ｇ的健康昆明种雄性小鼠4 0只 ,随机分为 4组 :3 5 ,7 0 ,14 0ｍｇ/ｋｇ氯化镉组…     

镉染毒小鼠网织红细胞微核流式细胞术研究

目的通过流式细胞术(FCM)检测外周血微核方法，研究氯化镉(CdCl2)染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率，评价流式细胞术在微核检测中的应用价值及探讨氯化镉的致突变作用。方法采用转铁蛋白受体CD71荧光抗体和碘化丙啶(PI)染色，并以疟原虫感染小鼠外周血红细胞为微核模式生物调校流式细肛仪．检测10～60mg／kg环磷酰胺染毒和50～400μg／kg氯化镉染毒对小鼠的外周血含微核网织红细胞率的变化。结果不同剂量环磷酰胺染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率和骨髓含微核网织红细胞率均明显高于对照组小鼠，且二者之间相关性良好(r=0．955)；不同剂量氯化镉染毒小鼠外周血含微核网织红细胞率未见明显升高。结论FCM测定外周血含微核网织红细胞率可替代传统显微镜检查骨髓含微核网织红细胞率用于遗传毒性评价；在本研究条件下未观察到氯化镉有明显的诱导小鼠外周血含微核网织红细胞形成的作用。     

氯化镉染毒小鼠器官中微量元素分析

氯化镉染毒小鼠器官中微量元素分析王晓梅李建秀（河北省邯郸医学高等专科学校邯郸０５６００２）镉对人的多种器官具有危害，而锌能对抗镉，具有保护作用。本实验通过分析氯化镉染毒小鼠肝、肾及睾丸中的微量元素以探讨锌对于镉损伤的保护作用。材料和方法选用体重为１８...     

镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤作用研究

目的 研究氯化镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA的损伤作用.方法 用不同浓度氯化镉分别对小鼠睾丸细胞进行处理,分为阴性对照组(生理盐水)、微剂量组(0.04mmol\LCdCI2)、低剂量组(0.2mmol\L CdCI2)、中剂量组(1mmol\LCdCI2)、高剂量组(5mmol\L CdCI2),用单细胞凝胶电泳法分别计数各组400个细胞,按照不同的损伤程度进行分类;并分别测量各组50个彗星细胞尾长并计算均方值.结果 各组小鼠睾丸生殖细胞损伤率和尾长均方分别为阴性对照组8.0%、8.543±2.131,微剂量组48.5%、24.761±3.595,低剂量组65.0%、39.246±5.894,中剂量组71.5%、42.745±5.231,高剂量组87.5%、49.374±4.543;4个剂量组小鼠睾丸细胞DNA损伤率显著高于阴性对照组(P＜0.001),四个剂量组小鼠睾丸细胞DNA损伤的彗星细胞尾长均方值显著高于阴性对照组(P＜0.001),并且DNA损伤率和彗星细胞尾长均方值随着剂量增加而增加.结论 微量氯化镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA即已存在明确损伤作用,且损伤程度与氯化镉剂量成正比.     

镉对小鼠睾丸生殖细胞的遗传毒性

目的探讨镉的雄性小鼠生殖遗传毒性。方法应用单细胞凝胶电泳试验(SCGE)研究镉对离体小鼠睾丸生殖细胞DNA的损伤作用。结果氯化镉各染毒组尾部DNA百分率及尾矩均明显高于对照组(P0.01)。随着染毒剂量的增加,小鼠睾丸细胞DNA损伤程度也逐渐增加,存在着明显的剂量-效应关系。结论氯化镉可引起离体小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤,对雄性小鼠生殖细胞具有生殖毒性。     

低剂量氯化镉对大鼠睾丸组织酶活性的影响

镉对雄性生殖系统的影响被认为是影响人类生育的重要因素,已受到普遍关注.有报道显示,亚慢性镉染毒可使睾丸体积变小,重量减轻,肉眼观察出现睾丸病理改变,镜检发现曲细精管呈不同程度的萎缩、变性,管内生精细胞数少或缺如,无精子形成或极少,管腔内可见坏死的细胞碎片[1,2],说明镉可以严重干扰破坏大鼠睾丸曲细精管上皮的生精过程,对大鼠的生殖功能产生影响.     

三种方式染毒丙烯酰胺对雄性小鼠睾丸细胞DNA损伤的影响

目的 研究腹腔注射、灌胃、皮肤染毒丙烯酰胺(AA)对小鼠睾丸细胞DNA损伤的影响.方法 将24只清洁级健康雄性昆明小鼠随机分为4组,分别为空白对照组、腹腔染毒组、灌胃染毒组和皮肤染毒组,每组6只.染毒剂量为25mg/kg,每天1次,连续染毒5 d.首次染毒后第6天称体重和睾丸重,计算睾丸系数.采用单细胞凝胶电泳实验对彗星细胞的尾长、尾部DNA%、尾矩(tail moment,TM)、Olive尾矩(olive tail moment,OTM)进行检测.结果 染毒后腹腔染毒组和灌胃染毒组小鼠体重均低于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).与空白对照组比较,腹腔染毒组、灌胃染毒组和皮肤染毒组小鼠的睾丸重量及其脏器系数均较低,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与空白对照组比较,腹腔染毒组、灌胃染毒组和皮肤染毒组小鼠睾丸细胞DNA的尾长、尾部DNA%、尾矩、Olive尾矩均较高,差别有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).各染毒组两两比较发现,睾丸细胞DNA的尾长、尾部DNA%、尾矩、Olive尾矩间差异均有统计学意义(P＜0.05),均以灌胃染毒组最高,腹腔染毒组次之,皮肤染毒组最低.结论 丙烯酰胺可致雄性小鼠睾丸细胞产生DNA损伤,且以灌胃染毒方式产生的毒性作用最为敏感.     

绞股蓝总皂甙对氯化镉所致睾丸生殖细胞毒性的影响

目的：观察绞股蓝总皂甙（GPS）对雄性小鼠染镉后对睾丸生殖细胞的保护作用。方法：预先灌服GPS200mg/kg／d，连续16d后，腹腔注入氯化镉（Cd)3mg/kg/d 5d，观察睾丸病理切片和精子畸形率。结果：预服GPS的小鼠染镉后，其精子畸形率 比单纯染镉组下降53．01％（P＜0．01）。睾丸病理切片单纯染镉组出现病理改变，与预服GPS组相比未见明显差别。表明GPS对Cd所致小鼠精子畸形率有较好的抑制作用。结论：GPS可用于防治Cd对生殖系统的损害作用。     

氯化镉对雄性生殖系统生理机能的影响

目的 探讨氯化镉对雄性生殖系统生理机能的影响。方法 采用职业流行病学调查与动物实验相结合的方法分析镉作业男工精液中的微量元素；40只小鼠随机分为4组：氯化镉3．5，7．0，14、0mg／kg实验组和蒸馏水对照组，灌胃染毒。观察睾丸的病理组织学改变，测定睾丸细胞DNA含量和睾丸中微量元素含量。结果 接触组作业男工精液中镉含量明显高于对照组(P＜0．01)。实验组小鼠睾丸中铜含量增高(P＜0．05)。睾丸的超微结构出现改变，单倍体细胞DNA含量下降(P＜0．01)。结论 氯化镉可影响雄性生殖系统的生理机能，导致生育力下降。     

氯化镉对小鼠脏器系数及睾丸生殖细胞线粒体D-Loop基因突变的影响

[目的]研究氯化镉对发育中的小鼠睾丸、肾、肝等脏器系数及对睾丸生殖细胞线粒体DNA控制区（D-Loop）基因突变的影响,探索氯化镉对睾丸影响的机制。[方法]取7周龄雄性ICR小鼠40只[体重（19.5±2.5）g],随机分为低（1μmol/kg）、中（5μmol/kg）、高（10μmol/kg）剂量氯化镉腹腔注射染毒组和阴性对照组共4组,每组10只,隔天染毒,共10次,对照组腹腔注射等体积的生理盐水。第21天取小鼠双侧睾丸、肾和肝,测定脏器系数;提取睾丸生殖细胞基因组DNA,聚合酶链反应（PCR）扩增线粒体D-Loop基因,纯化后测序分析基因突变。[结果]高剂量组睾丸脏器系数明显低于对照组（P〈0.001）,但肝脏器系数明显高于对照组（P〈0.05）;低剂量组肾脏脏器系数明显高于对照组（P〈0.001）。测序结果显示各组小鼠睾丸生殖细胞线粒体D-Loop基因未检测到突变。[结论]高剂量的氯化镉对小鼠睾丸和肝脏脏器系数产生影响,低剂量的氯化镉对小鼠肾脏脏器系数产生影响。氯化镉处理小鼠21d,未检测到睾丸生殖细胞线粒体D-Loop基因突变。     

氟对小鼠睾丸细胞DNA损伤与修复的研究

目的 :探讨氟的生殖遗传毒性。方法 :应用单细胞凝胶电泳试验 (SCGE)研究了氟化钠对离体小鼠睾丸细胞的DNA损伤与修复效应。结果 :氟化钠在 (0 .6 2～ 5 ) mm ol/ L 之间可引起小鼠睾丸细胞 DNA单链断裂 ,出现拖尾的彗星细胞。无论是拖尾细胞百分率 ,还是 DNA迁移长度都随氟化钠浓度的增加而增加 ,表现出明显的计量反应关系。此外 ,氟化钠所致的睾丸细胞 DNA损伤基本在 2 h内完全修复。结论 :在一定浓度下 ,氟化钠可引起离体小鼠睾丸细胞的 DNA损伤 ,可能是一种潜在的雄性生殖毒物。     

流式细胞术检测职业铅接触工人的DNA损伤

目的 用γH2AX识别抗体流式细胞术(FCM)研究铅暴露对人体外周血淋巴细胞DNA的损伤作用.方法 淋巴细胞采自41例铅作业工人和50例对照人群,应用FCM检测淋巴细胞DNA损伤情况.结果 不同铅接触水平工人外周血淋巴细胞DNA损伤率和几何平均荧光强度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不同工龄组工人DNA损伤率和几何平均荧光强度差异无统计学意义(P>O.05);DNA损伤率与血铅、尿铅、8-氨基乙酰丙酸(ALA)相关性分析无统计学意义(P>0.05),几何平均荧光强度与血铅、尿铅、δ-ALA相关性分析无统计学意义(P>0.05);高浓度组血铅、d-ALA与DNA损伤率呈正相关(r值分别为0.681、0.684),高浓度组血铅与几何平均荧光强度呈正相关(r值为0.795),差异有统计学意义(P<0.05 o结论 职业性铅接触可引起人体外周血淋巴细胞DNA损伤,FCM是一种检测外周血淋巴细胞DNA损伤的有效方法 .     

微波照射小鼠睾丸对精子形态和DNA含量的影响

微波照射小鼠睾丸对精子形态和ＤＮＡ含量的影响郭国祯，郭鹞近年来，微波的应用日益广泛，微波辐射已被联合国人类环境会议列为造成公害的主要污染物之一。由于生精细胞对微波具有高度的敏感性，且精子又是父方遗传物质和遗传信息的传递者，因此，若生殖细胞尤其精原细胞...     

氯化镉对脾淋巴细胞DNA链损伤和修复的体外实验研究

镉 (Ｃａｄｍｉｕｍ ,Ｃｄ)具有遗传毒性 ,1994年被国际癌症研究会 (ＩＡＲＣ)定为Ⅰ级致癌物 ,即人类致癌物。镉的致癌作用与其损伤ＤＮＡ和影响ＤＮＡ的修复有关[1] 。已知无机镉 (Ｃｄ Ｃｌ2 )可损害机体的免疫系统 ,可能是ＤＮＡ的损伤导致淋巴细胞功能下降。因此 ,应用脾淋巴细胞进行ＤＮＡ损伤和修复能力的检测 ,对探讨镉免疫毒性作用的分子生物学机制具有重要意义。一、材料和方法1.实验动物 :ＢＡＬＢ/Ｃ小鼠 ,体重 (2 0± 5 )ｇ ,二级动物 ,中山医科大学实验动物中心提供。2 .脾淋巴细胞ＤＮＡ链损伤 (ＳＳＢｓ)和修复检测 :(1)脾…     

流式细胞术在DNA检测中的应用

目前流式细胞术在生物医学中的应用日益广泛,尤其是DNA分析在临床和基础研究的各个学科中应用非常广泛。通过流式细胞仪进行DNA检测,可以了解细胞周期、DNA倍体分析和细胞凋亡测定。现阐述流式细胞仪工作原理和流式细胞术在DNA检测中应用。     

氯化镉对小鼠精子的影响

４０只小鼠随机分为４组：对照组，氯化镉３．５ｍｇ／ｋｇ，氯化镉７．０ｍｇ／ｋｇ，氯化镉１４．０ｍｇ／ｋｇ。灌胃染毒，灌胃量为０．１ｍｌ／１０ｇ体重。３天后处死动物，检测精子活动率及精子密度。结果表明，氯化镉７．０ｍｇ／ｋｇ和氯化镉１４．０ｍｇ／ｋｇ组精子活动率比对照组降低（Ｐ〈０．０５），氯化镉７．０ｍｇ／ｋｇ和氯化镉１４．０ｍｇ／ｋｇ组精子密度比对照组降低有非常显著意义（Ｐ〈０．０１）。     

流式细胞术检测家具企业混苯接触工人DNA损伤

目的:研究家具企业混苯作业工人外周血DNA损伤。方法:应用流式细胞术对32名混苯接触组和30名餐饮业对照组人员外周血淋巴细胞DNA损伤进行检测。结果:混苯接触组工人外周血淋巴细胞DNA损伤率和几何平均荧光强度均高于对照组(P<0.01),而不同工龄组工人DNA损伤率和几何平均荧光强度差别无统计学意义(P>0.05)。结论:职业性混苯接触可引起人外周血淋巴细胞DNA损伤,流式细胞术γH2AX分析法是一种有应用前景的检测外周血淋巴细胞DNA损伤的方法。     

氯化镉所致DNA损伤及锌的拮抗效应的研究

目的通过体外实验,了解氯化镉(CdCl2)对中国仓鼠肺成纤维细胞(V79细胞)的直接DNA损伤作用及锌的拮抗作用,初步探讨镉的遗传毒性机制及预防措施。方法采用甲基四唑法(MTT法)了解CdCl2对于V79细胞的毒性,通过碱性单细胞凝胶电泳常用的几个评价指标,研究CdCl2体外对于V79细胞DNA的断裂损伤,并采用生理浓度ZnCl2(10μmol/L)加以拮抗。结果MTT试验中,CdCl2对于V79细胞的毒性随染毒剂量增加而增高,呈线性关系,线性方程为:y=-0.009 4x 94.472;在碱性单细胞凝胶电泳中,CdCl2单独染毒,随着染毒剂量增加,DNA损伤加重,而锌具有明显的拮抗作用。结论本实验条件下,CdCl2能造成V79细胞DNA损伤,生理浓度的锌可以拮抗镉的DNA损伤效应。     

极低频电磁场对小鼠睾丸细胞DNA以及精子染色质结构的影响

目的研究50Hz电磁场暴露对小鼠睾丸细胞DNA以及精子染色质结构的影响。方法将昆明种雄性小鼠暴露于0.2mT或6.4mT、50Hz电磁场中,持续4周,分别采用单细胞凝胶电泳法和精子染色质结构检测法分析睾丸细胞DNA断裂情况以及精子染色质结构。结果经电磁场暴露后,0.2、6.4mT组睾丸细胞彗星的相对尾长、彗尾相对DNA含量分别为17.86%±14.60%、2.32%±4.26%及17.88%±13.71%、2.35%±3.87%,与对照组(13.06%±12.38%、1.52%±3.25%)相比,均有明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)。0.2、6.4mT组发生DNA迁移的细胞百分率分别为37.83%、39.38%,对照组为25.64%。流式细胞术对精子染色质结构检测的结果表明,S.D.αT(αT分布标准偏差)、XαT(αT均值)没有发生明显变化,但COMPαT(主群以外的精子占总精子的百分数)与对照组相比,有上升的趋势。结论极低频电磁场可引发睾丸细胞DNA链断裂增加,可能引起精子核染色质浓缩异常。