CD4+CD25+调节性T细胞的研究进展

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）具有维持自身免疫耐受和调节免疫应答的功能,其功能紊乱或数目下降是导致自身免疫性疾病的重要原因之一。近年来,研究发现Foxp3在调控CD4^＋CD25^＋Treg细胞的发育和功能上起着重要作用。本文就CD4^＋CD25^＋Treg细胞的免疫抑制机制、Foxp3在其发育和功能上的作用、IL-2和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）等对其产生、维持及活化的作用等方面作一综述。     

CD4+CD25+和CD8+调节性T细胞的作用机制

调节性T细胞（Treg）主要在机体免疫系统中发挥负向调节作用,既能抑制不恰当的免疫反应,又能限定免疫应答的范围、程度及作用时间,对CD4^＋和CD8^＋效应性T淋巴细胞的增殖起抑制作用,因此在移植物抗宿主病、自身免疫病、过敏性疾病等的发病机制和临床治疗中有潜在的应用价值.本文重点介绍CD4^＋CD25^＋Treg和CD8^＋Treg的作用机制,并简述调节性T细胞研究面临的挑战与展望.     

CD4+CD25+调节性T细胞在肿瘤中的表达

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）是新近发现的T淋巴细胞亚群,发挥免疫抑制功能,可通过多种途径抑制效应细胞的抗肿瘤免疫,在多种肿瘤中特异性增高。     

急性白血病儿童外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和NK细胞的变化及其在白血病免疫中的意义

本研究观察急性白血病患儿外周血CD4^＋CCD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）及自然杀伤细胞（nature killer cell,NK）在不同病程阶段的变化,了解白血病患儿的免疫状态,以探讨CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞在急性白血病肿瘤免疫中的意义。建立流式细胞术检测外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞和NK细胞的方法：检测急性白血病初诊患儿25例、完全缓解患儿28例及20例正常健康对照者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞的数量及比例。结果表明：初诊组、完全缓解组及对照组外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋占CD4^＋T细胞的比例分别为（9．55±2．41）％,（8．54±2．51）％和（6．25±0．85）％,在初诊患儿组和缓解患儿组高于正常对照组,且在初诊患儿组高于完全缓解组（P〈0．05）;同时,与正常对照组比较,急性白血病患儿的NK细胞数量减少,完全缓解后患儿组NK细胞数量仍低于正常对照（4．11±3．87％和10．41±7．20％w14．06±5．95％,P〈0．05）。结论：联合应用CD4、CD25及cDl27检测Treg细胞简便可行、重复性好、检测结果可靠、准确,CD4^＋CD25^＋CD127^＋T细胞可较好地反映CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例。急性白血病患儿外周血中Treg细胞数量升高,NK细胞数量降低,表明急性白血病患儿NK细胞免疫功能处于抑制状态。Treg细胞可能在白血病的发生、发展中起一定作用,参与NK细胞的调节可能是Treg细胞在白血病免疫中的一个环节。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与肿瘤免疫治疗

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tregs）于1995年由Sakaguehi等首次报道，将去除了CD25^＋细胞的CD4^＋单阳细胞过继转移给裸鼠，则裸鼠发生多种自身免疫疾病；而将CD4^＋CD25^＋T细胞CD4^＋T细胞共同转移，则不发生自身免疫疾病。此研究揭示CD4^＋CD25^＋T细胞具有维持自身免疫耐受的功能。肿瘤的形成和进展与机体的免疫功能密切相关，CD4^＋CD25^＋T细胞在肿瘤免疫逃逸中起重要作用。本文就调节性T细胞在肿瘤免疫调节中的研究进展进行综述。     

沙利度胺对多发性骨髓瘤患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞作用的临床研究

本研究探讨沙利度胺治疗前后多发性骨髓瘤（MM）患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的比例及变化规律，为有效的免疫治疗提供理论依据。采用流式细胞术检测MM患者外周血CD3、CD4、CD8、NK及CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例；采用成组设计的两样本均数比较的t检验进行统计学分析，以P〈0．05为检验水准。结果表明：MM患者治疗前CD4^＋CD25^＋highT比例较正常人明显升高（P〉0．01），沙利度胺治疗有效患者的CD4^＋CD25^＋highT比例较治疗前明显降低（P〈0．01），治疗无效者Treg比例无显著变化（P〉0．05）。16例经化疗完全缓解，CD4^＋CD25^＋highT比例为6．91±1．12％，较治疗前升高，但无显著性差异（P〉0．05）。沙利度胺治疗有效者CD3^＋T、CD4^＋T、NK细胞比例及CD4／CD8比值较治疗前明显升高（P〉0．05或0．01），CD8^＋T治疗前后无显著变化（P〉0．05）。结论：CD4^＋CD25^＋Treg细胞的免疫抑制作用可能是MM免疫逃逸的重要机制，下调MM患者CD4^＋CD25^＋Treg可能是沙利度胺治疗MM有效的机制之一。     

炎症性肠病患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞的表达及意义

[目的]探讨CD4^＋CD25^＋Treg细胞在炎症性肠病（IBD）发病中的作用及其与疾病活动性的关系。[方法]采用三色流式细胞术检测40例IBD患者，其它肠病患者30例和健康对照者30例。IBD患者中活动期患者25例，缓解期患者15例，使用和未使用激素和／或免疫抑制剂活动期IBD患者分别为16例和9例。对以上各组外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞亚群的百分率进行测定。[结果]疾病活动期IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例明显低于其他肠病和正常对照组（P〈0．01），疾病活动期IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例明显低于疾病稳定期患者（P〈0．01）。活动期IBD患者中使用激素和／或免疫抑制剂与未使用激素和／或免疫抑制剂结果差异有统计学意义。IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达率与疾病活动指数评分呈负相关性。[结论]IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞异常表达，可能参与疾病的发生发展，与疾病的活动性密切相关。     

移植患者CD4+CD25+CD127low调节性T细胞、TGF-β1及IL-10的表达

目的观察肝肾移植患者外周血中调节性T细胞(Treg细胞)的百分比与转化生长因子β1(TGF-β1)及白细胞介素10(IL-10)水平的表达情况及其相关性。方法15例移植患者的外周静脉血,采用流式细胞术检测CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞的百分比,并以20例体检健康者为对照组;用酶联免疫吸附试验法检测移植患者血清中细胞因子TGF-β1、IL-10的水平,分析这2种细胞因子水平与CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比的关系及移植前后TGF-β1、IL-10水平的差异。结果与对照组比较,移植患者移植前CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);肝肾移植后CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比下降为0。肝肾移植前CD4^+CD25^+CD127^low Treg细胞百分比与TGF-β1、IL-10的水平呈正相关(P<0.05)。TGF-β1、IL-10的水平移植后低于移植前,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD4^+CD25^+CD127^low Treg的百分比与TGF-β1、IL-10的水平存在一定相关性;移植后CD4^+CD25^+CD127^low Tre细胞百分比下降为0,可能与应用大量免疫抑制剂有关。     

急性冠脉综合征患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其临床意义

目的 探讨急性冠脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）患者的外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）和CD4^＋CD25^＋曲T细胞（CD4^＋CD25^＋^high Treg）的水平及其临床意义。方法 采用流式细胞术检测15例急性心肌梗死患者、20例不稳定性心绞痛、11例稳定性心绞痛和16例健康体检者（对照组）的外周血CD4^＋CD25^＋Treg和CD4^＋CD25^＋^high Treg的水平。结果 ACS患者CD4^＋CD25^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例较稳定性心绞jjl;和对照组显著减少,CD4^＋CD25^＋high Treg占CD4^＋T细胞比例的差异无显著性。结论 ACS患者外周血具有免疫负调节作用的CD4^＋CD25^＋Treg水平减低,可能促进了动脉粥样硬化的进展。     

骨髓增生异常综合征患者CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞、调控基因FOXP3的表达及意义

目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞）和调控基因FOXP3的表达及意义。方法分离22例MDS患者[MDS组,根据MDS分型标准分为：难治性贫血组（RA组）6例、难治性血细胞减少伴有多系发育异常组（RCMD组）11例、难治性贫血伴原始细胞增多组（RAEB组）5例]和8例正常健康者骨髓单个核细胞,采用免疫荧光标记和流式细胞仪检测CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞占CD4^＋ T细胞比例;提取骨髓单个核细胞RNA,采用RT-PCR检测FOXP3基因的表达水平。结果MDS组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与正常对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;RA组、RAEB组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与正常对照组比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）;RCMD组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与正常对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;RCMD组、RAEB组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与RA组比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）;RA组、RCMD组CD4^＋ CD25^＋ Treg比例、FOXP3基因表达水平与RAEB组比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）。结论MDS患者CD4^＋ CD25^＋ Treg占CD4^＋ T细胞比例及FOXP3基因表达水平随预后危险级别的升高而升高,提示免疫异常是MDS疾病的发生、发展的一个促进因素。     

CD4+CD25+调节性T细胞及其与GVHD的关联性

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是一群表型和功能特异的T细胞亚群，具有免疫无能和免疫抑制两大特性，通过细胞直接接触或分泌抑制性细胞因子发挥对CD4^＋CD25^＋T细胞的抑制作用。GVHD是异基因造血干细胞移植最严重的并发症之一，近来有关CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与GVHD关联性的研究得出了两种截然相反的结论，即该类细胞可有效防治GVHD的发生及该类细胞与GVHD的发生率成正比。这一研究结果的明确将为GVHD的临床治疗提供新的思路。本文就CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及其免疫表型、特性、免疫调节作用机制及CD4^＋CD25^＋T细胞与GVHD的关联性的一些新的研究进展作一综述。     

CD4+CD25+CD127Low调节性T细胞在原发性肝癌患者外周血的表达及临床意义

目的观察原发性肝癌患者经治疗前、后外周血CD4+CD25+CD127(CD127Low)调节性T细胞(Treg)的数量变化。方法采用流式细胞术检测30例原发性肝癌患者外周血CD4^+CD25^+CD127^LowTreg在CD4+T细胞的比例,以180例体检健康者作为健康对照组,分析肝癌患者治疗前、后CD4^+CD25^+CD127^Low Treg细胞表达的变化。结果原发性肝癌治疗前CD4^+CD25^+CD127^LowTreg细胞百分比为(6.21±1.53)%(<50岁)和(6.68±1.53)%(≥50岁),均显著高于健康对照组(同年龄段),差异有统计学意义(P=0.001、0.000),原发性肝癌患者治疗1个月有效者CD4^+CD25^+CD127^LowTreg细胞比例显著下降,差异有统计学意义(P=0.001)。结论CD4^+CD25^+CD127^LowTreg水平异常增高可能与原发性肝癌免疫功能调节紊乱有关,且其变化水平与临床病情的进展存在一定的相关性。     

CD4+T细胞的研究进展

近年来,随着对CD4+T细胞研究的深入,对Th1和Th2细胞的免疫生物学活性及免疫调节也有了进一步的认识.CD4+T细胞新亚型CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及Th17细胞受到了人们广泛的关注,尤其是细胞的分化调节、功能及相关疾病的发病机制.本文就CD4+T细胞各亚群的生物学特征及分工、亚群间的相互调节、免疫应答与疾病的关系等作一综述.     

腔镜手术对直肠癌患者免疫平衡及CD4^＋CD45RA^＋T和CD4^＋CD45RO^＋T细胞的影响

目的 探讨腔镜手术对直肠癌患者免疫平衡及CD4^＋ CD45RA^＋T细胞和CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达的影响.方法 67例直肠癌患者中,33例拟进行腹腔镜手术,设为L组,34例拟进行开腹手术,设为O组.观察术前1d、术后2d、术后7d患者Th1、Th2、CD4^＋ CD45RA^＋T、CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达水平.结果 L组患者术前和术后Th1、Th2、CD4^＋ CD45RA^＋T、CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达无显著差异（P＞0.05）.O组术后2d、术后7d患者Th1细胞表达水平显著下降（P＜0.01）,Th2细胞表达显著升高（P＜ 0.01）;CD4^＋ CD45RA^＋T细胞的表达显著升高（P＜0.01）,CD4＋ CD45RO＋T细胞的表达显著降低（P＜0.05）.结论 腹腔镜手术较开腹手术对直肠癌患者的免疫平衡、CD4^＋ CD45RA^＋T细胞和CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达的影响小,对机体细胞免疫功能干扰较轻.     

RA患者外周血CD4/CD8 T细胞比值及CD4+ CD25+ T细胞的检测及其临床意义

目的 观察活动期类风湿性关节炎（RA）患者外周血T细胞CD4／CD8比值及CD4^＋ CD25^＋T细胞（Tn细胞）的数量,探讨其在RA诊治中的价值。方法 用流式细胞术检测CD4^＋ CD25^＋T细胞及TR细胞的数量。结果 49例急性期RA患者的CD4／CD8比值和TR细胞数量显著高于正常人群组。28例RA患者治疗后的TR细胞数量显著高于治疗前,而CD4／CD8比值的变化无统计学意义。结论 RA治疗后症状改善患者,TR细胞数量明显上升,RA的发病和发展与该细胞数量密切相关。     

CD4+CD25+调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜患者中的变化

目的探讨CD4^＋CD25^＋T细胞在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者发病机制中的作用。方法应用流式细胞术检测ITP患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞、CD4^＋CD25^highT细胞、CD4^＋FOXP3^＋T细胞、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞的数量；实时荧光定量PCR检测外周血FOXP3 mRNA的表达水平。将ITP患者和正常人CD4^＋CD25^highT细胞与自身CD4^＋CD25^-T细胞混合培养，检测CD4^＋CD25^high T细胞免疫抑制功能。结果ITP患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞约占CD4^＋T细胞的（15．64±5．82）％，明显高于正常对照组（9．30±3．95）％（P〈0．01），CD4^＋CD25^high T细胞比例为（1．53±0．66）％，与对照组[（1．36±0．55）％]比较差异无统计学意义（P〉0．05）；CD4^＋FOXP3^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞分别为（1．82±1．42）％和（1．25±0．94）％，均明显低于对照组[（3．90±1．37）％和（2．65±0．92）％]（P值均〈0．01）。ITP患者外周血FOXP3 mRNA表达水平较正常人明显下调（P〈0．01），CD4^＋CD25^high T细胞的抑制活性较正常人减弱（P〈0．01）。结论ITP患者中CD4^＋CD25^＋T细胞FOXP3表达水平降低，抑制活性减弱。     

Bestatin下调卵巢癌患者外周血Treg细胞的免疫抑制作用

目的探讨氨肽酶N抑制剂Bestatin对肿瘤患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg的生物学效应及机理。方法将Bestatin加入PHA刺激新鲜分离的卵巢癌患者外周血Treg细胞的体外培养体系,采用流式细胞术分析Foxp3和CTLA-4的表达。进而分析Bestatin对Treg细胞抑制CD4^＋CD25T细胞活化增殖的影响。结果Bestatin可抑制Treg胞表达Foxp3和CTLA-4,并促进Treg细胞和CD4^＋CD25^＋T细胞的体外共培养体系中T细胞的增殖。结论抑制氨肽酶N可下调Treg细胞的免疫抑制作用,对肿瘤治疗具有潜在应用价值。     

CD4+ CD25+调节性T细胞

机体的免疫系统维持着对感染性抗原的反应和自身耐受的平衡,而对自身抗原产生免疫耐受则是防止发生自身免疫病的关键。阴性选择中的克隆清除、免疫无能和克隆忽略被认为是控制自身反应性T细胞的主要机制。近些年随着研究的深入,CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞（Treg细胞）在维持自身耐受中的作用得到进一步的认识。     

手术前后肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的表达

目的：研究手术前后肺癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）的比例变化,探讨其与肿瘤免疫的关系。方法：采用流式细胞术检测38例手术前后肺癌患者和35例健康对照者外周血CD4＋CD25＋Treg占CD4＋T细胞的比例。结果：肺癌患者手术后外周血CD4＋CD25＋Treg占CD4＋T细胞的比例为（13．27±3．15）％,显著低于手术前的（19．76±3．42）％（P〈0．05）;手术前显著高于对照组（10．46±2．87）％（P〈0．05）,而手术后与对照组无明显差异（P〉0．05）。结论：肺癌患者手术切除肿瘤后,外周血CD4＋CD25＋Treg水平明显下调,有助于肺癌患者免疫功能的恢复,增强肿瘤的免疫应答和抗瘤作用。     

体外扩增CD4＋CD25＋Treg细胞的效果比较及体外免疫抑制功能鉴定

本研究比较3种不同细胞组分扩增CD4＋ CD25＋ Treg的效果并鉴定其免疫抑制功能.用免疫磁珠分选法从小鼠脾细胞中分选出CD4＋T细胞、CD4＋ CD25＋ Treg细胞和CD4＋ CD25-T细胞,负载CD3/CD28克隆抗体MACSiBead联合IL-2共同刺激,分别对CD4＋T细胞、CD4＋ CD25＋ Treg细胞和CD4＋ CD25-T细胞进行体外扩增培养,流式细胞术检测扩增后CD4＋ CD25＋ Treg细胞的比例及Foxp3基因的表达,用混合淋巴细胞反应（MLR）检测CD4＋ CD25＋ Treg对CD4＋ CD25-T细胞增殖的抑制作用,CCK-8方法检测细胞抑制率.结果表明：经过2周培养,3组细胞均有明显的扩增.CD4＋T细胞组扩增倍数为（77.8±5.32）倍,CD4＋ CD25＋ Treg细胞的比例由（6.61±1.00）％增加到（15.33±1.31）％.CD4＋ CD25-T细胞组扩增迅速,倍数为（95.20 ±7.67）倍,CD4＋ CD25＋ Treg细胞的比例由培养前（0.37±0.13）％增加到（9.84±0.98）％.磁珠分选后的CD4＋ CD25＋ Treg细胞的扩增倍数为（41.20±6.92）倍,细胞纯度由（86.75±1.25）％下降到（85.32±1.62）％,Foxp3表达由（76.92±1.13）％下降到（75.33±2.11）％,扩增前后的细胞纯度和Foxp3表达,差异无统计学意义（P＞0.05）.体外抑制实验显示体外扩增的CD4＋ CD25＋ Treg细胞对CD4＋ CD25-T细胞增殖有明显的抑制作用,对效应性T细胞增殖的抑制效能与其细胞数呈正相关.结论：本研究在体外成功扩增了小鼠CD4＋ CD25＋ Treg细胞,并且具有免疫抑制功能,其中CD4＋ CD25＋ Treg细胞组扩增的CD4＋ CD25＋ Treg细胞数量多,细胞纯度高.