放射性核素反义治疗在恶性肿瘤中的应用

放射性核素反义治疗是指将释放α、β或俄歇电子的放射性核素采用一定的连接方法，标记于癌基因或其ｍＲＮＡ的互补或反义寡核苷酸链上，通过特定的载体定向运送到靶细胞或靶组织，利用反义寡核苷酸与癌基因或其ｍＲＮＡ的特异性结合，抑制癌基因的过度表达，从而抑制癌细胞的增殖，利用放射性核素的电离辐射生物效应，破坏癌细胞，达到反义治疗和内照射治疗的双重目的。本文对放射性核素反义治疗的几个技术问题及其临床应用作了前瞻性探讨。     

反义显像技术在肿瘤诊断中的应用

反义显像技术以放射性核素标记的人工合成的寡核苷酸为显像剂，通过体内核酸杂交而显示特异性癌基因过度表达的癌组织。肿瘤癌基因的特异性、放射性核素的选择以及标记化合物的稳定性、比放射性等诸参数均影响显像效果。成功的反义显像要求寡核苷酸探针具有容易大量合成、体内稳定、能与靶序列结合并且不发生非序列性特异性结合等特点。反义显像以癌基因为基础，使肿瘤显像进入基因水平     

放射性核素反义治疗

放射性核素反义治疗将反义寡核苷酸阻断癌基因表达作用及放射性核素杀伤癌细胞作用结合在一起，是一项新兴的治疗技术。这项研究目前仍处于初步阶段，只有少量放射性寡核苷酸细胞毒性、动物体内药代动力学及组织学分布的报道。简要综述了目标基因的选择和反义寡核苷酸的标记、导入细胞及其毒副作用等几个放射性核素反义治疗有关的重要环节及其最新进展。     

放射性核素反义治疗

放射性核素反义治疗将反义寡核苷酸阻断癌基因表达作用及放射性核素杀伤癌细胞作用结合在一起,是一项新兴的治疗技术。这项研究目前仍处于初步阶段,只有少量放射性寡核苷酸细胞毒性、动物体内药代动力学及组织学分布的报道。简要综述了目标基因的选择和反义寡核苷酸的标记、导入细胞及其毒副作用等几个放射性核素反义治疗有关的重要环节及其最新进展。     

肿瘤反义显像技术中的若干问题

反义显像是用放射性核素标记人工合成的反义寡核苷酸、经体内核酸杂交而显示特异基因表达或过度表达的组织。反义显像具有不引起免疫反应、探针分子小，易进入瘤细胞等优点。反义是要求标记的反义核酸易于透过细胞膜、在细胞内稳定、不易分解、并能特异性聚集于靶组织。因此，须对反义寡核苷酸进行化学修饰，增强其通透性和膜内稳定性；利用受体或脂质体介导使反义寡核苷酸定向导入靶细胞；选择合适的放射性核素采用标记简单、标记率     

肿瘤反义显像技术中的若干问题

反义显像是用放射性核素标记人工合成的反义寡核苷酸，经体内核酸杂交而显示特异基因表达或过度表达的组织。反义显像具有不引起免疫反应、探针分子小、易进入瘤组织等优点。反义显像要求标记的反义核酸易于透过细胞膜、在细胞内稳定、不易分解、并能特异性聚集于靶组织。因此，须对反义寡核苷酸进行化学修饰，增强其细胞通透性和膜内稳定性；利用受体或脂质体介导使反义寡核苷酸定向导入靶细胞；选择合适的放射性核素采用标记简单、标记率高、非特异性结合低且不影响反义寡核苷酸生物活性的标记方法，使其合乎显像要求。成功的反义显像对肿瘤的诊断具有重要意义。     

反义技术特异抗人肝癌细胞生长的研究

反义技术在癌基因治疗研究中的应用越来越广泛。我们在前期研究的基础上〔１～３〕，用互补于ｐｏｌαｍＲＮＡ的特异寡核苷酸作用于体外培养的人肝癌细胞，研究其特异抗癌细胞生长效应。１材料与方法１．１细胞系人肝癌细胞ＨＣＣ－９２０４和ＳＭＭＣ－７７２１由第四军...     

碘标记c-myc反义寡核苷酸乳腺癌显像的实验研究

用反义核酸为示踪剂 ,靶组织必须具有特异的或高表达的靶分子 ,即ＤＮＡ/ＲＮＡ。在正常组织中 ,一般基因都是单拷贝的 ,而肿瘤组织中绝大部分细胞都有某种或几种癌基因的扩增和高表达。因此 ,利用反义核酸进行肿瘤显像在理论上是可行的。 1994年 ,Ｄｅｗａｎｊｅｅ等[1]首先报道利用111Ｉｎ标记的ｃ ｍｙｃ反义寡核苷酸探针进行ＢＡＬＢ/ｃ乳腺癌动物模型显像 ,实验结果证实了该方法的准确性和灵敏性。参照该实验和131Ｉ标记反义寡核苷酸的方法[2 ] ,我们研究了12 5Ｉ标记的反义和正义寡核苷酸在正常津白Ⅱ号小鼠和乳腺癌自发瘤模型中的分…     

反义显像技术在肿瘤诊断中的应用

反义显像技术以射性核素标记的人工合成的寡核苷酸为显像剂，通过体内核酸交而显示特异性癌基因过度表达的癌组织。     

反义核酸抑制荷瘤裸鼠乙肝病毒基因表达

应用２．２．１５细胞转种裸鼠，建立荷瘤裸鼠ＨＢＶ动物模型。受种裸鼠皮下可迅速长出移植瘤并分泌ＨＢＶ多项标志物至外周血液中。应用互补于ＨＢＶｍＲＮＡ ＳＰⅡ增强子区的１５聚反义硫代寡核苷酸以２０ｕｇ／ｇ鼠体重剂量连续治疗１０ｄ，结果治疗组荷瘤裸鼠血清中ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及ＨＢＶ－ＤＮＡ均受到明显抑制。证明该反义核酸在动物体内同样具有良好的抗病毒效应，为从基因水平研制新一代抗乙肝病毒药物奠定了基础     

反义核酸治疗恶性肿瘤的可能性

反义核核酸略被广泛用于研究白细胞的基因财控，证实多种基因与肿瘤的发生及增殖相关。某些癌基因的反义寡核苷酸能有效地抑制白血病细胞的增殖和肿瘤生长，基础及临床研究结果表明，反义寡核有可能成为恶性肿瘤基因治疗的一类新药。     

放射性核素反义技术在肿瘤治疗中的研究

放射性核素反义治疗是放射性核素产生辐射生物效应杀伤病变细胞与反义寡核苷酸链阻断基因表达相结合而达到治疗疾病的目的,具有特异性强、靶向性高和损伤性小等优点,为肿瘤的治疗提供了新方法。     

反义显像技术的研究进展

反义显像是利用放射性核素标记的反义寡核苷酸 ,通过体内核酸杂交而显示目的基因表达的一种显像方法 ,具有设计简便、合成简易、安全性高、免疫原性低等特点。成功的反义显像要求反义寡核苷酸易被细胞摄取、耐核酸酶、杂交稳定、标记简单。脂质体、受体等介导的反义 RNA转移 ,反义寡核苷酸的化学修饰以及标记方法的改进将大大加快反义显像的临床应用。     

反义显像技术的研究

反义显像是利用放射性核素标记的反义寡核苷酸,通过体内核酸杂交而显示目的基因表达的一种显像方法,具有设计简便,合成简易,安全性高,免疫原性低等特点,成功的反义显像要求反义寡核苷酸易被细胞摄取,耐酸酶,杂交稳定,标记简单,脂质体,受体等介导的反义RNA转移,反义寡核苷酸的化学修饰以及标记方法的改进将大大加快反义显像的临床应用。     

脂质体介导C-myc基因反义寡核苷酸对人膀胱癌细胞系Biu-87的生物学影响

目的 :探讨应用脂质体 (LR )介导C -myc基因反义寡核苷酸 (ASODN)对人膀胱癌细胞系Biu - 87的生物学影响。方法 :采用细胞计数、MTT比色法评价反义C -myc寡核苷酸对Biu - 87细胞体外增殖的影响 ,应用免疫组化 (SABC)、DAB显色检测C -myc反义寡核苷酸作用癌细胞后C -myc蛋白的表达情况。结果 :脂质体介导C -myc反义寡核苷酸组与对照组相比 ,Biu - 87细胞增殖活性受到明显抑制 (P <0 .0 5 ) ,12h后可抑制C -myc基因蛋白表达。结论 :脂质体介导C -myc反义寡核苷酸可抑制人膀胱癌细胞体外增殖活性。应用反义技术封闭C -myc癌基因表达 ,为膀胱癌的基因治疗提供了新的思路     

人肝细胞癌中整合素α5,β1亚基和纤维连接蛋白mRNA表达的生？…

用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交对１５份人肝细胞癌（ＨＣＣ）、５例癌旁肝硬变和３例正常肝组织标本中整合α５、β１亚基和纤维连接蛋白（ＦＮ）ｍＲＮＡ表达作杂交分析。结果：低分化ＨＣＣ癌组织中整合素α５、β１亚基和ＦＮ ｍＲＮＡ表达水平明显低于高分化ＨＣＣ及癌旁和正常肝组织（Ｐ〈０．０１）；ＨＣＣ伴肝内浸润和（或）转移组癌组织内３种ｍＲＮＡ水平较无浸润转移组低，差异有显著性意义（Ｐ〈０．０５）；５例伴肝内转     

131I-VIP-ASON在荷结肠腺癌裸鼠体内的抑瘤作用

目的探讨131I标记血管活性肠肽(VIP)受体介导的C-myc mRNA反义寡核苷酸复合物(131I-VIP-ASON)对荷瘤裸鼠结肠腺癌的抑制效果.方法以TlCl3为氧化剂,将131I标记于互补于C-mycmRNA的ASON.VIP与131 I-ASON通过多聚赖氨酸偶联形成放射性反义复合物(131 I-VIP-ASON);通过荷瘤裸鼠体内分布实验观察其在肿瘤中的浓集情况;以131I-ASON和131I标记的正义寡核苷酸(SON)、无义寡核苷酸(MON)为对照,观察131 I-VIP-ASON对活体肿瘤的治疗效果.组织切片观察肿瘤组织形态学变化,Envision免疫组织染色法观察反义治疗对C-myc癌蛋白表达的影响.结果注射后2 h,131I-VIP-ASON在肿瘤部位浓聚显著高于131 I-ASON(t=7.79,P＜0.01),肿瘤/肌肉放射性比值于4 h达到最高.7.4 MBq 131 I-VIP-ASON组能有效抑制肿瘤生长,肿瘤生长终点抑制时间为25.4 d,效果明显优于3.7 MBq组(q=42.61,P＜0.01),未见明显副作用.组织形态学和免疫组织化学染色观察示,注射131 I-VIP-ASON后,肿瘤出现大片坏死区和脂肪变性.131 I-VIP-ASON组C-myc蛋白表达得分值明显低于其他组(q=5.51,P＜0.01).结论131 I-VIP-ASON可明显抑制荷瘤裸鼠结肠腺癌肿瘤生长及癌蛋白表达,可望为肿瘤的诊断和治疗提供新的思路.     

端粒酶反义寡核苷酸对恶性脑胶质瘤细胞生长的抑制作用

为观察端粒酶反义寡核苷酸(ODN)对恶性脑胶质瘤细胞的生长抑制作用，采用手术切除的端粒酶活性呈阳性奉达的Ⅲ、Ⅳ级脑胶质瘤标本16例，提取细胞进行原代培养后，以5μmol/L端粒酶反义寡核苷酸与恶性胶质瘤细胞进行孵育，每隔24h取样，以流式细胞仪检测PCNA、TUNEL阳性细胞百分率及细胞周期时相。结果显示，反义寡核苷酸对端粒酶活性于48h出现抑制，72h完全抑制，72h后对胶质瘤细胞增殖出现显著抑制并对细胞凋亡有显著促进作用，96h后细胞多滞留于G2／M期，此期凋亡细胞百分率随时间延长而增加。提示端粒酶反义寡核苷酸对端粒酶活性具有抑制作用，并可引起细胞周期阻滞，抑制脑胶质瘤细胞增殖而促进其凋亡。     

VEGF反义寡核苷酸对C6胶质瘤细胞VEGF 表达抑制作用的定量和定性检测

为观察VEGF反义寡核苷酸对C6胶质瘤细胞VEGF表达抑制作用，应用免疫荧光流式细胞技术和免疫细胞化学定量和定性观察反义、正义、错义寡核苷酸对C6胶质瘤细胞VEGF表达的影响。结果显示，VEGF反义寡核苷酸对C6胶质瘤细胞VEGF的表达有明显抑制作用，而且抑制作用存在浓度依赖性。提示VEGF反义寡核苷酸能够有效地抑制C6胶质瘤细胞VEGF的表达。     

bcl-2反义寡核苷酸对HL-60细胞作用的研究

探讨ｂｃｌ－２反义寡核苷酸对ＨＬ－６０细胞的作用,将人工合成的ｂｃｌ－２反义寡核苷酸片段与ＨＬ－６０细胞共培养,在作用的第０、１、３、５天通过细胞计数和锥虫蓝染色法检测细胞的生长、存活情况,并通过免疫组化法（ＡＰＡＡＰ法）检测细胞内ｂｃｌ－２蛋白表达水平的变化,通过流式细胞仪分析细胞凋亡的情况。结果表明,ｂｃｌ－２反义寡核苷酸可显著地抑制ＨＬ－６０细胞增殖,而且可以调ＨＬ－６０细胞内ｂｃｌ－２蛋白