豆奶蛋白组分和胰蛋白酶抑制剂活性的热变化

目的 :　研究热处理对豆奶蛋白组分、巯基含量及胰蛋白酶抑制剂活性的影响。方法 :　以 95℃、1 2 0℃、1 40℃处理鲜豆奶 ,用 SDS- PAGE(十二烷基磺酸钠 -聚丙烯酰胺薄板凝胶电泳 )分析经热处理和 β-巯基乙醇处理后豆奶蛋白组分的变化 ;研究豆奶胰蛋白酶抑制剂活性的热变化 ;用 Ellman试剂法测定巯基含量。结果 :　鲜豆奶中 7,8,1 1 ,1 2 ,1 3,1 4,1 5,1 6号蛋白组分经热处理后逐步消失 ,出现分子量为 1 0 4 62 0的 1 7号蛋白质新组分 ,β-巯基乙醇处理证明此蛋白组分的出现与 1 2 ,1 3,1 4,1 5,1 6号蛋白组分的消失具有相关性 ,这些组分的次级结构主要靠二硫键结合 ;热处理使豆奶巯基含量急剧下降 ;热处理失活 90 %的胰蛋白酶抑制剂 ,95℃处理需要 35min,1 2 0℃需 7min,而 1 40℃只需 60 s左右。结论 :　热处理导致豆奶蛋白巯基的变化从而引起蛋白组分的变化 ;胰蛋白酶抑制剂的热致死时间曲线表明 ,在 95～ 1 40℃范围内 ,温度增加 30℃ ,钝化90 %胰蛋白酶抑制剂的热处理时间缩短为原来的 1 /1 0     

脊髓灰质炎病毒与大肠杆菌热抗力的比较及有机物对热抗力影响的研究

目的:比较脊髓灰质炎病毒和大肠杆菌的热抗力及有机物对热抗力的影响。方法:采用干热和湿热条件下不同温度和不同时间灭活的方法进行试验。结果:湿热条件下50℃、60℃和70℃分别作用20 min、10 min和5 min,干热条件下60℃、80℃和100℃分别作用20 min、10 min和5 min可使脊髓灰质炎病毒全部灭活。湿热条件下60℃、70℃和80℃分别作用90 min、10 min和3 min,干热条件下100℃、120℃和140℃分别作用60 min、15 min和10 min可使大肠杆菌全部灭活。湿热条件下有机物对大肠杆菌的热抗力无影响,干热低温条件下TSB对大肠杆菌的热抗力有一定影响。结论:大肠杆菌的热抗力明显强于脊髓灰质炎病毒,有机物TSB对大肠杆菌的热抗力有一定影响。     

蒸汽热处理对全脂大豆中主要抗原蛋白免疫原性的影响

目的:研究120℃,7.5min蒸汽热处理对大豆中主要抗原蛋白免疫原性的影响。方法:12头初生公犊牛,随机分为A、B、C三组。分别饲喂含生大豆粉、熟大豆粉的人工乳和全乳。以提纯的大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白及其相邻峰值收集物(7S二峰、11S二峰)为抗原,采用ELISA法测定血清中特异性抗体滴度。结果:(1)三组犊牛增重情况依次为A相似文献   

蛋白质补充品的研究——Ⅱ.不同加热处理法制备的黄豆粉和花生蛋白粉的营养效用

用理化和生物学的方法对湿热处理黄豆粉、远红外线烘干黄豆粉、膨化黄豆粕粉和用碱液提取后浓缩喷干花生蛋白粉进行了检测,对其蛋白质营养价值进行了综合评定。 2.三种黄豆粉的尿酶和胰蛋白酶活力均为阴性,说明三种加热方法均可使抗营养因子失活。三种豆粉中蛋白质含量在39—49％,每100g粗蛋白质中赖氨酸总量高达6g左右,其中可利用赖氨酸含量湿热处理豆粉为6.05g,远红外烘干豆粉为4.82g,膨化豆粉为5.18g。食膨化豆粉的大鼠的肝、肾,甲状腺、胰腺病理组织学检查未见异常。湿热处理豆粉,远红外线烘干豆粉和膨化豆粉的校正蛋白质功效比值(EPR)(以标准酪蛋白为2.40)分别为2.06、1.86、和1.91,真消化率(TD)分别为91.9、87.2和86.2％,生理价值(BV)分别为67.8、58.8和59.4％,净蛋白质利用率(NPU)分别为62.4、51.3、51.3％,湿热处理豆粉与酪蛋白的校正PER(2.40)、BV(69.9％)和NPU(67.9％)无显著差异,但均显著高于远红外线烘干豆粉和膨化豆粉,这些结果说明这三种加热方法中以湿热处理豆粉的方法较好。 3.花生蛋白粉的蛋白质含量高达70.2％,但氨基酸模式不平衡,缺少赖、苏、蛋、色氨酸。每100g粗蛋白中可利用赖氨酸仅2.89g。校正蛋白质功效比值(PER)为1.32。真消化率(TD)虽高于其他各组,但生理价值(BV)和净蛋白质?     

丝光绿蝇抗菌肽针刺诱导及初步电泳分离

目的探讨丝光绿蝇抗菌肽的诱导及电泳分离方法。方法丝光绿蝇3龄幼虫针刺体壁诱导后，第48小时提取其血淋巴，设置3、5、7、10μl不同的加样量和pH值60、6．5、7．0的琼脂平板，观察对溶壁微球菌的抑菌效果。置于100、80℃水浴30s、1、3和5min后，观察不同温度处理不同时间后的去杂蛋白效果和对溶壁微球菌的抑菌效果，并对各样品进行电泳分离。结果随加样量增加抑菌环直径增大，10μl环太大易变形，不易测量，以加7μl血淋巴对溶壁微球菌的抑菌效果最佳。平板pH值6．0时，对溶壁微球菌的抑菌环直径最大，随pH值增加而抑菌环直径减小。血淋巴100℃水浴30s、1min仍有抑菌活性，处理3和5min无抑菌活性；80℃水浴30s至5min均有抑菌活性，电泳显示100℃处理3和5min的样品与其他相比缺少2条蛋白区带。结论针刺诱导的丝光绿蝇抗菌肽在酸性条件下抑菌活性更强，分离时血淋巴预处理采用80℃水浴1—3min去杂蛋白效果较好，诱导的血淋巴100℃处理3和5min即丧失抗菌活性，电泳显示缺少2条区带，此2条差异区带可能为抗菌肽组分。     

免疫球蛋白预防创伤患者机械通气相关性肺炎的实验研究

目的了解静脉应用免疫球蛋白对创伤患者机械通气相关性肺炎的发生率的影响. 方法选择37例严重创伤后机械通气患者,分为静脉应用免疫球蛋白组(IVIG)和对照组(输注人血白蛋白);在1、4、7 d取血标本作血清杀菌活性(SBA)分析,同时定量分析IgG,测量补体C3;记录每个患者在ICU住院时间、感染相关的死亡率及分离培养的病菌、第4天以后使用抗生素的时间. 结果 IVIG与对照组比较,机械通气相关肺部感染发生率明显降低(P<0.05);抗生素使用天数及入住ICU天数前者比后者短,但差异无统计学意义;IVIG组IgG明显增加,而对照组无明显差别,C3在两组间差异无显著性;SBA分析:两组间比较,37℃下孵化30 min及120 min,SBA第1天差异均无显著性,在第4天及第7天均相差显著;组内比较,每组患者第1天与第4天比较,SBA在30 min和120 min,对照组差异无显著性,而实验组差异均有非常显著性. 结论静脉应用免疫球蛋白能提高血清杀菌活性,降低机械通气相关性肺炎的发生率,血清杀菌活性可作为创伤患者对感染易感性的一个敏感指标.     

丝光绿蝇抗菌肽的热稳定性研究

目的探讨高温处理对丝光绿蝇抗菌肽抗菌活性的影响。方法丝光绿蝇Ⅲ龄幼虫针刺体壁诱导后，48h后提取其血淋巴，分别于100、80和60℃水浴0、0．5、1、3、5min等不同时间后，观察不同温度处理不同时间后对溶壁微球菌的抑菌效果。结果丝光绿蝇幼虫经针刺诱导的抗菌肽100℃水浴1min仍有抗菌活性，100℃处理3min后活性丧失；80及60℃水浴5min后仍有抗菌活性。结论针刺诱导的丝光绿蝇抗菌肽的抑菌活性具有一定的热稳定性。     

家蝇抗菌物质诱导及高温处理后的抑菌活性

目的探讨家蝇幼虫经针刺诱导产生的抗菌物质经不同温度处理不同时间后的抑菌活性。方法室内饲养的家蝇3龄幼虫,经针刺诱导48h后提取血淋巴,100℃处理10s和30s及1、3、5min,80℃和60℃处理30s、1、3、5、10min后,采用磷酸盐缓冲液制备离心上清样品,分别观察记录其对溶壁微球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果。结果经100、80℃处理后,对溶壁微球菌的抑菌环随处理时间的延长而环直径减小,60℃处理不同时间对溶壁微球菌的抑菌环大小无明显影响。100℃处理1min后以及80℃处理3min后对金黄色葡萄球菌无明显的抑菌环产生,60℃处理不同时间对金黄色葡萄球菌的抑菌环直径无明显影响。结论家蝇幼虫经针刺诱导产生的抗菌物质,其抑菌活性对高温有一定的稳定性,80～100℃加热处理,抑菌活性随处理时间延长而减弱,60℃高温处理10s至10min对其抑菌活性无明显影响。     

锌在血管紧张素转化酶中的作用—干预酶的机制

<正> 锌在血管紧张素转化酶的催化活性方面是必需的。该酶每摩尔蛋白质含锌一个 g 一原子。螯合剂通过夺取该金属离子,使酶变成无活性的、无金属的酶朊,酶活性消失。锌并不能稳定蛋白质结构,因为天然的金属酶和去金属的酶朊对加热变性都同样敏感。无论是把 Zn~(2+)、Co~(2+)或 Mn~(2+)哪一种金属和酶朊加在一起都可使之形成有活性的金属酶,     

代乳品的研究——Ⅻ大豆在加热处理时其中抗胰蛋白酶因子的去除与豆中含水量的关系

大豆合有抗胰蛋白酶因子,它能防碍蛋白质的消化。干大豆经加热,不能将这种因子去除,但经过用水浸泡后再加热则能去除。 本实验观察了大豆在加热处理时,其中抗胰蛋白酶因子的去除与豆中含水量的关系。实验结果表明:大豆在水中浸泡,其含水量达45—55％时,经汽蒸处理,对去除抗胰蛋白酶因子的效果最佳。由于汽蒸后样品的合水量略有增高,所以互在浸泡后的含水量能达50％时,经汽蒸和烘烤两次加热处理便可得到最高效果。大豆含水量的高低与水的温度和浸泡时间有关。水温过高和过低,或浸泡时间过久,对去除抗胰蛋白酶因子无益。在实际应用中,水温在20℃左右,浸泡时间介于三个半至五小时之间,是最适宜的条件。     

大豆脂肪氧化酶活性的测定

大豆脂肪氧化酶严重影响大豆制品的质量，必须使其失活，为了监测酶的失活情况，我们建立了大豆脂肪氧化酶活性的测定方法。测定时取大豆脂肪氧化酶粗提液０．２ｍｌ、底物２．８ｍｌ，混合后立即在紫外光２３４ｎｍ处测定，测定的光密度值代入公式中，计算出酶的活性单位。实验证明：大豆脂肪氧化酶粗提液在８℃下贮存可稳定１２小时；在ｐＨ９、温度２０～４０℃时测定能得到较好的结果。在总体为３ｍｌ的反应中，提取物所含蛋白质在０．０７～１６ｍｇ范围内，测定结果符合比耳定律。本方法操作简便，重现性好，变异系数为６．９９％。在本文中我们着重对影响酶活性的诸因素和特性做了详细观察，并选定了酶活性测定的最适条件，这些内容国内均未见报导。     

Stability and specificity of rice bran trypsin inhibitor

The stability and inhibitory specificity of rice bran trypsin inhibitor (RBTI) was investigated in an attempt to understand its nutritional significance. RBTI retained about 100% of its original activity over a pH range from 4 to 10 during 24-h incubation at 37 degrees C. In heat treatment, RBTI at acidic and neutral pH values still possessed about 50% of its initial activity after 30-min incubation at 100 degrees C, although it was completely inactivated during 15-min incubation at pH 10 and 100 degrees C. The effects of metal ions and some reagents on RBTI were examined and it was found that Hg ion reduced RBTI's inhibitory activity: The inhibitor lost 30-100% of its original activity upon incubation with a reducing, an oxidizing or a thiol reagent. Digestion tests on RBTI indicated that alpha-chymotrypsin did not affect the inhibitory activity and pepsin caused only a 30% loss of the initial inhibitory activity after 24-h digestion. To determine inhibitory specificity, bovine, hog, rat, and human trypsins were used as target enzymes bound to an immobilized RBTI column. Titrations of the purified enzymes with RBTI showed that bovine, hog, and rat trypsins were powerfully inhibited by the inhibitor, while human trypsin was only weakly inhibited.     

低水平大豆异黄酮对血清脂蛋白氧化修饰的影响

目的 :　评价低水平 (0 .5～ 1 0μmol/L)大豆异黄酮组分 (染料木素、大豆素和染料木甙 )对血清脂蛋白氧化修饰过程作用的效果及其特点。方法 :　采用 Cu2 +诱导全血清脂蛋白氧化修饰模型 ,通过检测体系中共轭双烯和硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)生成量变化反映异黄酮组分对脂蛋白氧化修饰过程和结局的影响。结果 :　启动氧化前向血清脂蛋白体系中加入 0 .5～1 0 μmol/L的染料木素、大豆素或染料木甙和 α-生育酚均显著减少共轭双烯和 TBARS的生成 ,并存在剂量相关关系。当血清脂蛋白氧化启动后 ,加入 1 0μmol/L异黄酮组分仍显示有较强的抑制作用 ,只是作用强度比启动前加入时减弱 ;而相同浓度的α-生育酚仅对共轭双烯生成显示有一定抑制作用 ,对 TBARS生成甚至呈现促进趋势。结论 :　低水平异黄酮组分即能对血清脂蛋白氧化修饰产生抑制作用 ,且在氧化启动后的效果优于 α-生育酚     

酶法制备大豆多肽的分子量分布和抑瘤实验观察

目的观察复合酶法制备的大豆多肽,其分子量分布和体内外的抑瘤作用。方法Flavourzyme、Alealase和中性蛋白酶,pH7.0,50～55℃酶解,经分离、离心、喷雾干燥等工艺制成多肽干粉;样品以0.1mol/L Tris-HCl缓冲液为洗脱液,流速0.5ml/min过SephadexG25凝胶柱,分别收集,紫外分光仪280nm波长测定各管的吸收值,并用高效液相排阻色谱法对比同样品测定,计算确定分子量分布;小鼠脑胶质瘤G422体内抑瘤实验,给药剂量1.25、2.50、5.00g/kgbw,人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞体外抑瘤实验,分5个样品浓度mg/ml。结果复合酶法生产制备大豆多肽3批,各批干基肽含量分别54.6%、51.9%、51.8%;Mr≤1000U占总量50%以上。小鼠脑胶质瘤G422体内实验,剂量5g/kgbw组与对照相比多肽有41.2%的抑瘤率(P<0.05),人喉癌Hep-2体外实验结果多肽无直接细胞毒作用。结论紫外分光法与高效液相色谱法测定大豆多肽分子量分布结果基本相同。小鼠G422实验在高剂量组观察到有抑瘤作用。     

葡多酚、大豆异黄酮和大豆皂苷对亚硝酸盐的清除作用

目的:研究葡多酚、大豆异黄酮、大豆皂苷对亚硝酸盐(NO2-)的清除作用,并观察PH、温度对NO2-的清除效果的影响。方法:在反应条件下,参照GB/T5009.33-2003方法,测定一定量的NO2-与葡多酚、大豆异黄酮、大豆皂苷反应后的残留量,计算清除率。结果:葡多酚、大豆异黄酮、大豆皂苷对NO2-均有清除作用。在一定范围内,随反应体系中葡多酚、大豆异黄酮浓度增加而清除能力提高。pH、温度对NO2-的清除效果有一定影响。结论:葡多酚、大豆异黄酮、大豆皂苷均具有清除NO2-的作用,在体外模拟人胃液条件下清除效果明显,提示对胃内NO2-的清除及肿瘤的防治具有较大意义。     

用高效液相色谱(HPLC)法测定血清维生素C含量

目的 :　建立更简便、快速、准确、灵敏的测定血清维生素 C(VC)含量的方法 ,并对血清 VC稳定性进行研究。方法 :　血清样品经 1 0 %偏磷酸溶液提取 ,旋涡混匀 3 0 s,离心 1 0 min(4 0 0 0 r/min,4℃ )后 ,用带二极管阵列检测 (DAD)的高效液相色谱 (HPLC)仪对 VC进行定性定量分析。流动相为 1 0 0 mmol/L KH2 PO4 ,p H值为 3 .0 ,检测波长为 2 43 nm,流速为 1 1 ml/min。结果 :　在上述色谱条件下 ,血清中 VC能得到良好分离 ,该法的日内变异系数和日间变异系数分别为 0 .42 %和 2 .1 1 % ;回收率 82 %～ 88.5 % ;VC的最低检测限为 0 .0 5 μg/ml。在对血清 VC稳定性的研究中 ,发现血清 VC在放置过程中很容易被氧化降解 ,其偏磷酸提取液相对稳定 ,但在 5 d后含量也开始明显下降 ,到第 44d后血清和提取液中 VC含量均几乎完全消失。结论 :　建立了高速、高效、高灵敏度的测定血清 VC含量的 HPLC法。血清 VC应立即测定 ,或将样品用偏磷酸提取 ,保存在 -70℃ ,5 d以内分析完毕。     

Soil properties affecting the toxicity of CuC12 and NiC12 for soil microbial processes in freshly spiked soils

It generally is unknown to what extent the toxicity of Cu and Ni for soil microbial processes varies among different soils. A comparative study was made using three different microbial assays (nitrification potential, glucose-induced respiration, and C-mineralization of a plant residue) in 19 (for Cu) or 16 (for Ni) soils with contrasting soil properties. Each soil was spiked with CuCl2 or NiCl2 at seven different concentrations, and the bioassays were started after a 7-d equilibration period. The Cu and Ni toxicity thresholds varied 19- to 90-fold among soils. The differences in both Cu and Ni toxicity among soils were neither explained by soil solution metal concentrations nor by free ion activities calculated from soil solution composition. Copper toxicity thresholds (total concentrations) increased with increasing organic matter content or cation exchange capacity (CEC) and, surprisingly, decreased with increasing pH depending on the assay. Nickel toxicity thresholds consistently increased with increasing CEC, background Ni, and clay content for all three assays. Thresholds expressed as soil solution free ion activities all significantly decreased with increasing soil solution pH (r2 = 0.57-0.93), consistent with a decreased H+:M2+ competition at the biological membrane. That competition largely counteracts the H+:M2+ competition for sorption, effectively explaining the insignificant or weak effect of pH on total Ni or Cu toxicity thresholds. It is concluded that free metal-ion activity alone does not explain variation in metal toxicity among soils.     

反相液相色谱法(RPLC)测定食品中维生素B_6(呲哆胺、呲哆醛、吡哆醇)

应用HPLC反相色谱法对维生素B_6(VB_6)的三种不同同系物(吡哆醇、吡哆胺、吡哆醛)进行分离测定是一种新的VB_6测定法,经充分粉碎的样品,用0.1M硫酸溶液,在120℃下水解30分钟,冷却后经离心、过滤,用ODS-C_(18)反相柱、pH2.0～2.5的硫酸溶液作流动相,在1.0ml/min的流速下,能将吡哆胺、呲哆醛、吡哆醇完全分离,并在激发波长293nm,发射波长395nm时,应用外标法定量,其回收率在99～103％,变异系数在5.0％～5.3％。实验结果表明,HPLC反相色谱法测定VB_6(吡哆胺、吡哆醛、吡哆醇)是一种快速,简便、灵敏度高,重现性好的方法。