用PCR-SSCP-银染法检测苯丙酮尿症PAH基因外显子11的点突变

目的：研究内蒙古地区经典型苯丙酮尿症(PKU)苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变的特点和频率，以提高该地区苯丙酮尿症(PKU)的基因诊断率。方法：应用PCR-SSCP-银染法和DNA直接测序的方法，对22例内蒙古地区PKU患者苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因外显子11进行了检测。结果：检出一种已知突变Y356X(TAC-TAA)，突变频率为13．6％。结论：内蒙古地区PKU患者PAH基因外显子11的突变频率均高于我国的其它北方人群，也高于云南PKU患者的突变频率，这为内蒙古地区PKU患者PAH基因分析和产前诊断提供了科学依据。     

内蒙古经典型苯丙酮尿症PAH基因外显子7突变的检测及一种新突变的鉴定

目的：探讨内蒙古地区经典型苯丙酮尿症(PKU)基因突变特征，为基因诊断提供依据。方法：应用PCR-单链构象多态性分析技术和DNA直接测序的方法，对22例内蒙古地区PKU病人苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因外显子7内突变进行了检测。结果：共检出4种错义突变；R243Q、R252Q、R261Q及G239D，1种剪接部位突变IVS7nt(2)，突变频率分别为：8／44、1／44、1／44、1／44、1／44。经与国际PAH基因突变数据库比较，确认G239D(G→A)为国际上首次发现的新突变。结论：内蒙古地区PKU病人PAH基因外显子7的突变位点、突变频率和中国东北人群相类似。但与中国南方人群PAH基因突变特点不同，这对提高内蒙古地区基因诊断率有其理论及实用价值。     

哈萨克族苯丙酮尿症F161S/EX6-96A→G双重突变基因杂合子鉴定

目的鉴定新疆哈萨克族苯丙酮尿症（PKU）F161S和EX6-96A→G双重突变基因杂合子。方法应用PCR及单链构象多态性（SSCP）分析技术结合基因序列测定方法确定突变类型。结果对患者PAH基因第3、5、6、7、11、12外显子分别进行SSCP实验筛检，在外显子5和外显子6中，均发现患者的SSCP电泳条带位置与正常对照不同，遂对患者的这两个外显子基因区域分别测序，结果显示：在外显子5中cDNA第482位发生了T→C突变，是F161S型基因突变，而外显子6则在cDNA第611位发生了A→G突变。是EX6-96A→G型基因突变，即患者为F161S／EX6-96A→G型双重突变基因杂合子。结论在新疆哈萨克族中检出的PKU F161S／EX6-96A→G型双重突变基因杂合子，为本民族首次报道。     

吉林和辽宁地区80例苯丙酮尿症患儿苯丙氨酸羟化酶基因突变分析

背景 苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)是一种常染色体隐性遗传的氨基酸代谢病,由苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)活性的部分或完全缺失引起,会使苯丙氨酸在体内蓄积,导致患儿出现神经系统等损害.PAH基因突变种类和频率存在明显的地域和种族差异.目的 分析吉林和辽宁地区苯丙酮尿症80例患儿苯丙氨酸羟化酶PAH基因的突变特征.方法 对2016 - 2018年吉林辽宁两省医院80例PKU患儿PAH基因的13个外显子及其侧翼序列,包含5'和3'端非编码区,进行一代测序点突变分析.结果 80例患儿共检出161个突变位点,占292个突变等位基因的55.14％.其中,R243Q占比最高(15.75％),IVS11-3 A>T、R413P、IVS4-1 G>A和EX6-96A>G次之,占比依次为4.11％、3.42％、3.08％和3.08％.另外5个低频突变位点Y356*、R111*、R241C、R53H a和IVS2 + 19 T>C突变频率为1％～3％.此次,我们发现PAH基因1个新的突变点F294S,位于8号外显子.结论 依据此次吉林辽宁地区80例PKU患儿PAH基因的突变特点,为该地区预防PKU出生缺陷提供理论依据.     

苯丙酮尿症患儿苯丙氨酸羟化酶基因外显子7突变特点及临床研究

目的:探究苯丙酮尿症(PKU)患儿苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因外显子7突变特点及其与临床的关系.方法:选取87例PKU患儿为研究对象.聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析PAH基因外显子7突变与基因测序,分析其与经典型、中间型及轻型PKU之间的关系.结果:87例患儿检出6种PAH基因外显子7位点突变,分别为R243Q、IVS7+2T-A、R241C、G247R、L255S、G247V,其基因频率分别为18.97％、4.02％、1.72％、1.15％、1.15％、0.57％;经典型PKU患儿检出6种突变,中间型PKU检出R243Q、IVS7+2T-A、R241C等3种突变,而轻型PKU仅检出R243Q突变;应用外显子7位点突变情况预测患儿PKU表型显示,经典型、中间型及轻型PKU预测与临床诊断一致性较高,Kappa值分别为0.818、0.781、0.935.结论:PKU患儿PAH外显子7突变主要以R243Q、IVS7+2T-A为主,其基因型与PKU表型存在相关性,有助于患儿PKU表型预测.     

苯丙氨酸羟化酶基因突变家系PCR-SSCP分析

目的探讨聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）检测方法对确定苯丙酮尿症（PKU）患者基因突变来源的应用价值,以便更好地应用于PKU基因诊断和产前诊断。方法对15例确诊的经典型PKU患者及其双亲的PAH基因的第3、5、6、7和11外显子及部分内含子行PCR扩增和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析;无PKU家族史的正常人作为正常对照。PCR-SSCP检测出异常外显子行PCR正、反向测序确定突变类型并分析患者的基因突变来源。结果5例患者的30个等位基因共检出16个突变,共14个突变等位基因来源均得到确定,1例患者（基因型为G247V/R243X）的突变来源未能确定。结论（1）PCR-SSCP检测方法可以确定PKU患者的基因突变来源（包括纯合突变和杂合突变）,但对于2个基因突变位于同一外显子的杂合子患者,该方法不能很好地确定基因突变来源。（2）PCR-SSCP方法能够区分基因突变纯合子与基因突变杂合子。     

苯丙氨酸羟化酶基因突变检测对苯丙酮尿症的诊断意义

目的探讨苯丙氨酸（PA）羟化酶（PAH）基因突变检测对苯丙酮尿症（PKU）的诊断意义及其对PKU患儿的影响。方法选取PKU患儿135例进行临床实验,所有受试者PAH基因突变情况均采用聚合酶链式反应技术进行扩增,采用Sanger测序方法检测其突变点,PAH基因是否存在大片缺失重复采用多重连接探针扩增技术（MLPA）检测,最后将各项检测数据纳入SPSS 21.0软件处理,分析PAH突变情况及比较其PAH突变对KPU患儿智商的影响。结果135例PKU患儿（270对PAH等位基因）中,共12例患儿有PAH基因突变,占比8.89%,突变位点共12个,其中R243Q、Y204C、R241C、IVS4-1、R413P、R111X、R261Q、W326X及Y356X等均有突变频率,各占总PAH等位基因的5.19%、5.19%、3.70%、2.96%、2.22%、1.48%和1.48%、0.74%、0.74%,而E56D、F161S、A345T等的突变频率则不明显。经SNaPShot、Sanger及MLPA检测12例PKU患儿的PAH基因突变情况发现,纯合突变占比16.67%,复合、杂合突变占比83.33%。12例PKU患儿干预后的PA低于干预前、全智商评分高于干预前,差异均具有统计学意义（P < 0.05）,而言语智商、操作智商干预前后差异均无统计学意义（P>0.05）。经Pearson分析发现12例PAH基因突变的PKU患儿治疗期的PHE平均控制浓度与1周岁时的IQ检测值呈负相关（r=-0.924,P < 0.01）。结论在PKU患儿的临床治疗过程中科学、合理地进行PAH基因突变检测并严格控制患儿的PHE血浓度有较好的临床应用与推广价值,也是改善患儿智商的关键因素之一。     

荧光MGB探针实时PCR检测经典型苯丙酮尿症的基因突变

[目的]探讨荧光MGB探针实时PCR技术检测经典型苯丙酮尿症的基因突变。[方法]运用荧光MGB探针实时PCR检测经典型苯丙酮尿症33例，一级亲属43例，正常对照30例。检出R243Q突变的PCR标本进行测序验证。[结果]发现11例PKU具有R243Q突变，突变频率为33％，其中突变纯合子4例，突变杂合子7例，一级亲属检出R243Q杂合子突变9例，正常人未发现R243Q突变。所有突变均经测序证实。[结论]PAH基因第7外显子的R243Q点突变在中国PKU患中有较高的突变率；荧光MGB探针实时PCR是PKU的基因诊断良好技术平台。     

新疆四个苯丙酮尿症家系的基因诊断

目的：研究新疆苯丙酮尿症（PKU）家系苯丙氨酸羧化酶（PAH）基因突变位点及其遗传标记,探索适合新疆各民族PKU基因诊断和产前基因诊断途径。方法：联合采用PCR－STR、APSCR和PCR－SSCP3种基因诊断方法进行分析。结果：（1）PCR－STR连锁分析表明：除家系4母亲为STR纯合型外,其余家系双亲皆为杂合子,对家系1（维吾尔族）1例风险胎儿（妊娠6周,流产）进行产前基因诊断和1例新生儿（出生1d）进行症前基因诊断,均为携带者,并经出生后证实。（2）采用ASPCR法在家系1、2和3均未检出R243Q和R413P两种常见突变。（3）应用PCR－SSCP分析发现,家系2（回族）患儿为外显子7突变纯合子,家系4（汉族）患儿为外显子7和外显子11突变复合体,其外显子11突变位于第399位点（GTA→GTT）,可能为一致病突变。结论：上述3种基因诊断方法联合使用简便、快捷,适合新疆地区的基因诊断和产前基因诊断。     

华北地区苯丙氨酸羟化酶基因的RFLP单体型与突变位点分析

本文分别分析华北地区28个苯丙酮尿症(PKU)家系苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因限制酶切片段长度多态性(RFLP),及42个PKU家系PAH基因外显子3(Arg~(111)→终止码)及外显子6(Tyr~(204)→Cys)突变位点。RFLP单体型分析表明,华北地区人群中约77％的正常染色体与79％的PKU突变基因染色体与单体型4相关,同时发现两种新的单体型——单体型49与单体型50;在群体中只有37％的个体为单体型杂合子,并可提供连锁分析所需的信息。应用聚合酶链反应(PCR)及寡核苷酸探针杂交法检测42个PKU家系PAH基因外显子3(Arg~(111)与外显子6(Tyr~(204)的突变位点,结果表明两者分别占华北地区PKU点突变的3.6％与9.5％。     

长沙地区12万人口1985,1986两年死亡调查报告

本文报告长沙地区12万人口中1985,1986两年30岁以上死亡者共1494人;其主要死因为心血管疾病,脑中风、肿瘤次之。心血管疾病中,以肺源性心脏病死亡率最高,冠状动脉性心脏病次之。猝死111人,60岁以上者猝死率明显增加。     

超声检查对妇产科某些出血性疾病的诊断价值

目的：探讨引起阴道不规则流血各种疾病的超声诊断价值。方法：71 例阴道不规则流血病人均采用B超诊断仪经腹部对子宫、输卵管、卵巢等盆腔脏器进行多方位的探查，以获得有诊断价值的声像图。结果：导致阴道流血的各种疾病均有不同特点 的声像图表现。结论：根据声像图的特征，可对疾病做出正确判断,协助临床做到早期发现，早期诊治。     

前降钙素在小儿肺炎诊断中的临床价值

目的：研究前降钙素在小儿肺炎诊断中的临床价值。方法：选取2011-09—2013—09于我院住院治疗的小儿肺炎患者为研究对象,共114例,根据患儿诊断将其分为细菌性肺炎组（进一步划分为普通感染组与重症感染组）和病毒性肺炎组,并选取同期于我院儿童保健科就诊的健康儿童为对照组。比较细菌性肺炎组、病毒性肺炎组、对照组三组患儿前降钙素检测结果的阳性率及细菌性肺炎普通感染组与重症感染组前降钙素水平。结果：细菌感染组患儿前降钙素检查阳性率为83．61％,病毒感染组为13．21％,对照组为0．00％。细菌感染组患儿前降钙素检查结果阳性率明显高于病毒感染组、对照组,组间存在显著性差异（P〈0．05）。细菌性肺炎普通感染组、重症感染组前降钙素水平明显高于对照组,组间存在显著性差异（P〈0．05）;重症感染组前降钙素水平明显高于普通感染组,组间亦存在显著性差异（P〈0．05）。结论：血清前降钙素含量的高低对于鉴别小儿细菌性肺炎和病毒性肺炎具有重要的临床价值,且患儿前降钙素检测结果越高,一般细菌感染程度就越重。     

早期干预治疗在婴儿髋臼发育不良中的临床意义

目的 探讨早期干预治疗措施对髋臼发育不良（dysplasia the acetabulum,DA）恢复的有效性.方法 40例DA患儿随机分为对照组和治疗组各20例,治疗组早期（出生4周后）给予干预手段（采取屈髋外展操训练结合宽尿布片法治疗）,对照组无干预措施,超声定期观察髋关节恢复情况.结果 治疗组中2个月内DA 患儿恢复17例（85.0%）,高于对照组11例（55.0%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;随访至病程3个月,治疗组恢复20例（100.0%）,对照组仅有14例（70.0%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;6个月时对照组仍有3例未恢复正常.治疗组恢复效果的散点回归方程斜率4.0大于对照组斜率2.9,表明治疗组的恢复速度快于对照组.结论 早期干预措施能够促进DA患儿的尽早恢复.     

直肠癌组织中EB病毒的原位杂交检测

目的探讨EB病毒（EBV）感染与人直肠癌发生的关系。方法采用原位分子杂交技术,对100例人直肠癌组织标本中EBV编码小分子RNA（EBER）进行检测。结果100例直肠癌标本中癌细胞EBER均为阴性,有1例直肠癌组织间质中浸润的淋巴细胞EBER阳性。结论EBV感染与直肠癌的发生无明显相关性。     

应激大鼠室旁核神经元c-fos的表达

目的：为下丘脑室旁核参与应激反应提供形态学资料。方法：对铃声刺激大鼠为应激动物模型用免疫组织化学ABC法显示下丘脑室旁核神经元即早基因c-fos的表达。结果：铃声刺激使鼠室旁核神经元。尤其是小细胞亚核神经元c-fos表达显著增加。结论：下丘脑室旁核神经元在铃声刺激下处于活动状态。参与应激反应。     

环氧氯丙烷染毒大鼠肾上腺中儿茶酚胺含量的变化

应用反相离子对高效液相色谱(HPLC)法测定了大鼠环氧氯丙烷(EPI)染毒后肾上腺中儿茶酚胺:肾上腺素和去甲肾上腺素的含量变化,并观察了肾上腺重量的变化。随着EPI染毒剂量的增加,肾上腺中去甲肾上腺素含量变化不明显。肾上腺素在低剂量组增加,高剂量组与对照组比无明显增加。肾上腺重量则随EPI染毒剂量增加而明显增加。结果提示EPI染毒可致肾上腺增生肥大,使肾上腺素总的合成和分泌增加,并有一定的耗竭现象。     

L-DEPRENYL IN PREVENTION OF MPTP INDUCEDDEPLETION OF STRIATAL ENKEPHALINS IN MICE

Large dose MPTP treatment given to the mousecould bring about a reduction of methionine-enke-phalin (MEK) and leucineenkephalin (LEK) in themouse striatum. The average levels were reduced by7570 for MEK and 6670 for LEK as compared withthe controls. The monoamine oxidase B inhibitorLdeprenyl could prevent the MPTP-induced pepti-dergic neurotoxicity. Hence, MPTP-treated mousemay be a useful model to study peptides an.d Parkinson's disease.     

IN MEMORIAM OF

My memory of Dr. Chung dates back to the summer of 1932, when I first met him at a medical ward round in Peking Union Medical College Hospital. Dr. Chung was then the resi- dent physician of the Department of Medicine. Hc was shortish in stature, took big strides, looked serious and spoke mandarin with a sou- them accent and English with an American accent. Later I learned that he wasi from Mei- xian County, Guangdong Province. The peo- ple from this county had long been known to bc industrious, enterprising and adventurous. But Chung was not born in Meixian. His fa- ther, a poor peasant, was forced to leave his native land to seek a living abroad. He sailed to the eastern (Partugese) part of Timore Island in the East Indies. Chung was born there in the year 1901. Being poor, he had to do child labor and could not afford to go to school until he was in his teens. A few years later he return- cd to his native county, Meixian, to attend mid- dle school. Afterwards he was awarded a scholarship to study in the School of Sciencc, Shanghai College. After he graduated, he entered PUMC in 1922 and received an M.D. in 1929. Dr. Chung spent a 4-year residency in different branches of internal medicine in the same institute. He finally chose tropical medicine as his field of specialization. In 1933 he married Dr. Li Yi-zhen in Guangzhou; at their wedding I had the honor of being one of the bestmen.     

利培酮治疗儿童首发精神分裂疾病临床观察

目的探讨利培酮治疗儿童首发精神分裂症或分裂样精神病的临床疗效、安全性和药物剂量。方法62例年龄<14岁的首发精神分裂疾病的病儿采用利培酮治疗8周,采用简明精神病评定量表(BPRS)评定疗效,不良反应量表(TESS)及实验室相应检查评定安全性及不良反应。结果本组病儿治疗总有效率为85%;不良反应主要为锥体外系反应及失眠;平均治疗剂量(3.26±0.88)mg/d。结论利培酮对于首发精神分裂症或分裂样精神病病儿的治疗安全、可靠,不良反应轻,病儿依从性高。