肾小球诊断样品由光镜的冰冻切片补做电镜制样的方法

现代肾脏病学已普遍将光镜、电镜诊断作为肾小球疾病诊断的常规 ,尤其电镜检查配合临床以明确诊断十分重要。然而 ,有时因为各种原因在电镜制备的肾组织穿刺 (肾穿 )标本中找不到肾小球 ,但临床又非常需要电镜的观察结果。目前普遍采用光镜常规石蜡包埋的肾小球组织经脱蜡后改做电镜制样进行补救 ,但标本因固定和脱蜡等因素 ,效果并不太理想。我们通过摸索和比较几种补救措施 ,现介绍一种用冰冻切片的肾小球经光镜检测后再进行电镜制样的方法。1　材料和方法标本取自临床肾穿活体组织。先取一块干净纱布 ,用0 .9%生理盐水浸湿 ,穿刺的肾脏样…     

电镜检查在肾活检标本病理诊断中的作用

目的客观评估电镜检查在肾活检标本病理诊断中的作用。方法对北京医科大学第一医院肾内科１９９５年１月～１９９７年６月的７７７例肾活检病例进行光镜和免疫荧光和电镜检查,并将光镜和免疫荧光检查的初步诊断与电镜检查最终诊断结果进行分析比较,从电镜检查在病理诊断中起决定性诊断作用、重要参考作用或与光镜检查相互补作用三方面进行了总结研究。结果７７７例肾活检病例中,电镜检查起决定性或修正诊断作用的病例占１８．５％,起重要参考作用或部分修正作用的病例占１３．５％。结论电镜检查对约１／３的肾活检病例的病理诊断提供了有价值的依据     

微波技术在超微结构病理诊断标本制备中的应用

电镜作为某些疾病的病理检查的一种工具,已为广大医务工作者所熟知。但电镜样品常规制备的方法周期较长,影响及时诊断。近几年来,我们将微波照射作为常规技术应用于电镜标本制备。结果表明,该方法不仅缩短了样品制备时间,同时,还可以满足电镜诊断要求。现已成为本室制备超微结构病理诊断标本的常规技术,介绍如下。1　材料和方法1.1　标本固定　选用NationalNN-680型微波炉,分HI,DEF,MEDHI,MED档,样品包括各种肿瘤组织、肝、肾、肺、软骨及游离细胞(血细胞,培养细胞)。固定液用4%多聚甲醛或3%戊二醛,加0.1%单宁酸。组织块尽可能的小,…     

自制924液对人肾热缺血损伤的保护作用：超微结构观察

应用９２４液灌洗新鲜人肾组织然后造成热缺血条件２ｈ、３ｈ后经电镜标本程序处理，光镜、电镜下观察，结果表明经９２４液灌洗后并热缺血２ｈ的肾脏，光镜表现出正常结构，电镜下可见肾小管，特别是最易受缺血损伤的近端小管上皮细胞微绒毛结构清晰，线粒体嵴排列整齐，细胞膜三层结构完整。缺血３ｈ的肾小管虽然光镜下表现正常，电镜下却表现出细胞膜三层结构模糊，说明９２４液保护人肾组织免除２ｈ的热缺血损伤     

肾穿标本的超薄切片制备方法改进

光镜下进行肾小球疾病诊断,很难精确地反映其病变的部位和性质.因此,常常需要通过超微病理学等方法才能确诊,送检的电镜标本应是新鲜标本.但有时因种种原因,只将肾穿组织送光镜做临床病理诊断,当发现光镜标本不能确切定位诊断,已为时过晚.为了弥补此缺憾,我们参考其它光镜标本转制技术[1],将已用石蜡包埋、光镜切片后剩余肾穿组织经脱腊,再制备电镜样品.为了准确找到肾小球病变部位,我们应用振荡切片机切取肾组织,用切片包埋方法,在光镜下确认肾小球后,定位切片,取得了较好的效果.现将这种综合方法报告如下:     

乙肝临床诊断与病理诊断的比较(附10例病理资料)

对转氨酶正常或轻度异常10例乙型病毒性肝炎(以下简称乙肝)的临床表现、实验室检查结果、肝活检组织的组织学病理、超微病理进行了观察。结果:在10例中临床诊断与光镜和电镜诊断符合者仅有3例,光镜与电镜诊断符合者高达9例。为此,对肝活检组织的光镜和电镜检查的重要性进行了探讨。     

肾活检电镜制样方法的改进

经皮肾穿刺活检了解肾疾病的发生机制、病变进展,对优化治疗方法和判断预后具有重要意义[1]。早在60年代,肾活检电镜检查已成为肾病研究和诊断的常规检查方法之一,尤其对原发性肾小球疾病的分类起着不可替代的作用[2]。但由于临床肾穿刺取材常有失误,以及将穿刺物盲目制样等原因,故常在电镜下找不到肾小球结构而无法进行诊断。作者采用光镜预选临床医检的穿刺物和将组织条斜向包埋的方法成功地解决了这一难题。1　方　　法11　光镜预选肾穿刺物　将已固定的肾穿刺组织移至干净载玻片上,置于具有灯光源的显微镜下,选用25倍的物镜,并将聚光镜旋到最高位以判断标本是否为肾组织。再用双面刀片切取有肾小球的肾组织两小段(2～4     

GPC-Ⅱ-3液的长效多器官保护作用

目的 探索长效多器官保存新技术，拓宽移植器官的来源。方法 用改良的GPC-Ⅱ-3液以IHP法，将从同一动物（兔）同时获取的心、肾、肝、肺各分别保存24，48，72，96，120，144h，观察它们组织结构受保护的情况。结果 保存24～96h心、肾、肝、肺的组织结构与相应正常对照组的无明显区别。心肌细胞、心内膜、心外膜清晰，无明显水肿。心肌细胞核染色质分布均匀，双层核膜清晰，线粒体嵴清楚。肌原纤维清楚，排列整齐，明带、暗带分明。肾小球和肾小管的结构清楚。肾小管上皮细胞排列整齐，胞核染色质分布均匀，核仁清楚，核膜清晰，线粒体嵴清楚。肾小球毛细血管、肾小囊壁细胞清楚。小球毛细血管内皮清楚，其窗孔无明显改变，内皮基膜完整，足细胞的突起排列整齐。肝小叶结构完整，肝细胞索清楚，胞核染色质分布均匀，核膜清晰，内质网颗粒清楚。肺泡和各级支气管结构清楚、完整；支气管上皮胞核清晰，染色质分布均匀；尘细胞及其吞噬的粉尘颗粒清楚。光镜下保存120h心、肾、肝、肺的组织结构无明显改变，但在电镜下已有明显改变。保存144h心、肾、肝、肺，在光镜、电镜下的结构都有明显改变。结论 用GPC-Ⅱ-3液以IHP法能够保存从同一动物（兔）同时获取的心、肾、肝、肺的组织结构96h，这种技术和方法具有较好的长效多器官保存作用。     

丁酸钠抑制人喉癌裸鼠皮下移植瘤的实验研究

目的 研究丁酸钠对人喉癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,探讨其作用机制.方法 将人喉癌细胞株Hep-2细胞接种于12只裸鼠皮下,建立喉癌移植瘤模型.分为实验组和对照组,每组6只,分别给予丁酸钠和磷酸盐缓冲液(PBS)治疗4周.治疗过程中定期测量肿瘤大小及裸鼠体质量,于治疗结束时取肿瘤组织切片进行HE染色、电镜观察、TUNEL标记及免疫组化S-P法检测Ki-67、survivin蛋白表达情况,取心、肝、肺、脾、肾等组织切片进行药物毒性评估.结果 治疗组肿瘤体积明显小于对照组,肿瘤组织内坏死面积增大,细胞凋亡率显著增高,Ki-67核抗原、survivin蛋白表达水平降低.治疗过程中裸鼠生长良好,无明显毒性反应.治疗结束时,心、肝、肺、脾、肾组织切片光镜下检查未见异常.结论 丁酸钠对人喉癌裸鼠皮下移植瘤有明显的生长抑制作用,其机制可能与抑制survivin表达而诱导细胞凋亡及抑制Ki-67表达有关.治疗剂量的丁酸钠对裸鼠心、肝、肺、脾、肾等组织无毒性.     

一种简易石蜡包埋块改做电镜标本的方法

一种简易石蜡包埋块改做电镜标本的方法乔从进１王彤１张彰２彭希平１（１山西医学院组织胚胎学教研室太原０３０００１２山西医学院电镜室）关键词病理组织标本组织切片术显微镜检查，电子中图号Ｒ３６１．２当石蜡包埋的标本在光镜下看到有进一步进行电镜观察的必要时，...     

提高尸体解剖组织切片质量的体会

尸体解剖组织切片的制作是病理技术工作中不可缺少的一部分。为了适应教学、科研和诊断的需要 ,我们在实际工作中不断地改进方法 ,取得了较好的制片效果。1材料与方法1.1组织标本固定液选用20 %的福尔马林液。1.2固定方法尸体解剖时根据诊断的需要取下整个器官和大体标本 ,先将大标本切开后放入20 %福尔马林液进行浸泡 ,如心、肝、脾、肾等器官 ,脑除外。固定液的量要大于组织标本体积的10倍以上 ,大体标本固定时间1周 (脑组织应固定后再切开 ,否则软如豆腐 )从而达到有效的固定。将原有的状态和结构保存下来 ,同时又具有硬化组织的作用 ,便…     

银染组织的透射电镜样品制备

本文试图在银染的光镜标本上再经处理制备成透射电镜样品,以适用于电镜观察。其优点在于它既能利用银染后的光镜材料定位,组织和细胞基本无损伤及变形。较好地保持了组织细胞的超微结构,并增强了清晰度。     

自制MA-F液低温保存犬肾的加时研究(附5例光镜与电镜观察)

用自制MA—F肾保存液与HC—A肾保存液对5条犬10个肾脏分组进行低温灌洗保存,经光镜和电镜于保存24、60、64、72及100小时(以灌洗毕为零时)观察,结果证明MA—F液明显优于HC—A液。     

15例间叶组织恶性肿瘤超微结构分析

来源于间叶组织的恶性肿瘤称为肉瘤。在临床病理诊断中 ,有些肉瘤在光学显微镜下很难作出客观的诊断。其原因之一是瘤细胞分化差 ,要想达到完全确诊 ,必须借助于电镜技术 ,对瘤组织本身及其与周围组织的关系进行超微结构的分析 ,以判断瘤细胞的组织学来源。我们对 5年来 15例疑难间叶组织恶性肿瘤进行光、电镜观察并结合临床资料进行了探讨 ,报道如下。1　材料和方法1.1　材料来源　收集附属医院及邻区医院光镜下不能确诊的肉瘤标本 15例。1.2　方法　每例标本均做光镜、电镜常规处理。光镜标本经 10 %福尔马林液固定 ,脱水 ,石蜡包埋 ,切片…     

男性避孕药AF-2364对雄兔生殖细胞的影响

目的：观察男性避孕药AF-2364对雄兔生殖细胞的组织学和超微结构的影响。方法：将27只雄兔随机分为对照组、静脉给药组和灌胃给药组,静脉给药组和灌胃给药组分别给予AF-2364 25 mg/kg每周1次,连续4周;每隔2周,各组随机处死3只兔子,取睾丸、附睾等组织;睾丸电镜标本用2.5%戊二醛固定,制作成组织标本,用H-7500透射电镜观察;光镜标本用Bouin液固定,用OLYMPUS CX31电子显微镜观察。结果：光镜检查显示给药后生精细胞脱落,生精上皮变薄,附睾管内精子减少。电镜检查显示精子核头部溶解,尾部中段线粒体数目减少,生精细胞之间以及与支持细胞间的连接点破坏,间隙增大。结论：AF-2364能有效、可逆地抑制兔睾丸精子的发生。     

慢性乙型肝炎肝组织内HBsAg的追踪观察

通过对17例慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B, CHB)两次以上肝穿标本的追踪观察,发现HBsAg在肝组织内的形态和分布与肝损伤有一定关系。报道如下: 材料和方法 从我院1983～1986年418例肝活检标本中,选出17例CHB经两次以上肝穿标本作研究。标本用10％福尔马林固定,石蜡包埋,连续切片,采用HE、糖原、网状,胶原及弹力纤维染色,另选两份作维多利亚篮-核固红染色,其中5例作了电镜观察。用双育法光镜观察肝组织内HBsAg的形态特点、分布状况及其与肝病变的关系,然后统计结果,再与常规切片对比分析。采用1BM计算机进行统计学处理。     

活体神经染色的光镜与电镜研究

采用雕白粉－亚甲蓝还原液对大白鼠和家兔的迷走神经和坐骨神经进行活体染色，并采用钼酸胺与四氧化锇固定，纯乙醇脱水的方法，制作组织切片和超薄切片，进行光镜和电镜研究。光镜标本显示，细神经均匀染色，而粗神经仅浅层染色，有髓神经纤维的轴突深染，但髓鞘不染色。电镜可见染色标本神经纤维内的微管和神经微丝，认为还原型亚甲蓝是以Ｈ２Ｂ＋形式穿透细胞膜（或轴膜），在轴突内氧化成亚甲蓝阳离子，与负电荷基团结合，使神经纤维显示蓝色。     

肾脏活体组织穿刺取材几点体会

自 1 998年 1月至 2 0 0 1年 9月 ,我们与临床肾脏内科协作 ,共获取 2 56例肾活检组织 ,其中各种检查里 (光镜、免疫荧光、电镜 )均含有肾小球的 2 36例 (92 2 % ) ;光镜组织中无肾小球 ,免疫荧光和电镜组织内有肾小球的 2 2例 ;免疫荧光组织内无肾小球 ,而光镜、电镜组织内有肾小球的 9例 ;电镜组织内无肾小球 ,而光镜、免疫荧光组织内有肾小球的 6例 ;所有 3份组织内均无肾小球的仅 4例 (1 6 % )。肾活检取材成功率为 92 2 %～ 98 4% ,现将体会介绍如下。1　成功的经验1 1　经皮肾脏活体组织检查 ,需要在Ｂ超的定位下进行 ,定位的准确…     

病理组织学诊断检材的制备技术

1 组织的固定 1.1 凡需要进行病理组织学检查的标本(器官或组织),离体(活体或尸体)后,应尽快置放(浸泡)于装有足够量固定液的容器中固定.固定液量应为被固定标本体积的5～10倍.置放标本的容器大小视标本和固定液的体积而定,应适当大一些.     

淋巴瘤的超微结构研究

目的 :运用透射电镜对淋巴瘤标本进行观察 ,同时结合临床资料及光镜、免疫组化标记进行对比研究 ,以探讨电镜技术在淋巴瘤诊断中的意义。　方法 :对 72例淋巴瘤标本进行光镜、电镜观察 ,4 9例进行免疫组化标记。　结果 :72例淋巴瘤中有 6 7例电镜肯定了光镜的诊断 ,有 5例电镜检查提供了新的病理形态改变信息。　结论 :通过淋巴瘤超微结构特征的观察 ,为淋巴瘤的病理诊断提供更加可靠的形态学依据。电镜技术具有补充光镜、免疫组化的观察及辅助诊断的作用